木醋魚蛋白對平菇菌絲生長及產量影響研究

樊玉萍 楊鳳仙 張 姣 杜 丹 林靜雅 程雪絨

（咸陽市農業(yè)科學研究院，陜西 咸陽 712034）

平菇Pleurotus ostreatus，又名北風菌、蠔菌、雜蘑，隸屬擔子菌亞門、傘菌綱、傘菌目、側耳科、側耳屬[1-2]。平菇不僅味道鮮美，而且蛋白質、氨基酸、維生素含量豐富，特別是人體必需的八種氨基酸含量高于其他動植物產品[3-5]；還有一定的保健作用，可降低膽固醇、降血壓，增強機體免疫力[6-8]。平菇廣泛分布于我國河北、吉林、遼寧、山西、湖南、四川、云南等省，是栽培最多的四種食用菌之一[9-10]。

“中醫(yī)農業(yè)”技術是把中草藥具備的某些性能以水平傳遞的方式，進入農作物的生命代謝過程，是一種高效的生態(tài)農業(yè)綠色種植模式[11]。木醋液是由木材干餾后導出的蒸汽，經冷凝分離后而得，富含氨基酸、黃酮類、多酚類等活性物質，為純天然物質。由木醋液添加魚蛋白、多肽酶、中草藥成分制成木醋魚蛋白，能有效促進植物的生長。

為探索木醋魚蛋白在食用菌生產中的效果，筆者以平菇615 菌株為材料，考察不同體積分數(shù)木醋魚蛋白對平菇菌絲生長及產量的影響，以期為“中醫(yī)農業(yè)”技術（添加木醋魚蛋白）在平菇生產中應用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

（1）供試菌株：平菇615，引自江蘇天達食用菌研究所，母種保存于咸陽市農業(yè)科學研究院食用菌中心。

（2）培養(yǎng)基

母種培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂粉14 g，磷酸二氫鉀1.0 g，硫酸鎂（MgSO4·7H2O）0.5 g，水1 000 mL，pH 7；原種培養(yǎng)基：小麥88%，麩皮10%，石灰1%，石膏1%；栽培種培養(yǎng)基：棉籽殼90%，麩皮8%，石灰2%。

栽培料配方：棉籽殼40%，木屑30%，麥草粉28%，石灰2%。

（3）木醋魚蛋白：購自陜西省中農厚樸農業(yè)科技有限公司。將木醋魚蛋白原液用無菌水分別稀釋到體積分數(shù)1%、2%、3%、4%和5%備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 平板培養(yǎng)基添加木醋魚蛋白培養(yǎng)平菇菌絲試驗

將冰箱4 ℃保藏的平菇615 菌株轉接PDA 平板培養(yǎng)基，然后置23 ℃生化培養(yǎng)箱內培養(yǎng)7 d活化。

將PDA 培養(yǎng)基分裝至250 mL 三角瓶內，每瓶100 mL，于121 ℃滅菌30 min，待溫度降至40 ℃左右，注入不同體積分數(shù)的木醋魚蛋白液，搖勻后快速倒入無菌培養(yǎng)皿（90 mm）內，每個處理5個重復。

然后用直徑5 mm 的無菌打孔器取活化的平菇615 菌餅，轉接至不同處理的培養(yǎng)皿中央，于23 ℃，空氣相對濕度70%～75%避光培養(yǎng)。

1.2.2 栽培料添加木醋魚蛋白栽培平菇試驗

1.2.2.1 建堆發(fā)酵

按照比例稱原料，在拌料前將棉籽殼、木屑混合攪拌2～3 次，石灰溶于水預濕原料。原料含水量為60%～65%，pH 8.5～9.0。建堆，堆高1.2 m，寬1.5 m，長度不限，從料堆頂部每隔40 cm打一個直徑80 mm 通氣孔至料堆底部。當料堆內部溫度升至65 ℃時，第一次翻堆，以后每隔1～2 d 翻堆一次，7～15 d料堆內出現(xiàn)大量白色放線菌時，即發(fā)酵完成。

1.2.2.2 裝袋、接種

待發(fā)酵料溫度降至28 ℃以下，將其分成6 等份，再分別添加1%、2%、3%、4%、5%體積分數(shù)的木醋魚蛋白液，以不添加木醋魚蛋白液（0%）為對照，然后拌勻，料含水量為65%。采用規(guī)格15 cm×30 cm，厚0.004 cm 低壓聚乙烯塑料袋裝料，每袋裝料折干500 g，每個處理50 袋。裝袋完成后，采用分層式接種，料袋兩頭必須接種。

1.2.2.3 培養(yǎng)、采收

接種后，將菌袋移入培養(yǎng)室，溫度為15～18 ℃，空氣相對濕度為50%～70%，CO2體積分數(shù)小于0.2%，黑暗或避光培養(yǎng)。菌絲滿袋后培養(yǎng)7～15 d，移入出菇大棚，光照強度為500～1 000 lx，空氣相對濕度為80%～90%，晝夜溫差8～10 ℃，CO2體積分數(shù)小于0.15%，待原基形成時揭去封口物。每天定時通風，遇到不良天氣少通風或不通風。

平菇子實體菌蓋邊緣由內卷轉向平展時為采收的最佳時期。采收時，一手壓住培養(yǎng)料，一手捏住菌柄輕輕轉動摘下子實體，采菇后應及時清理菇體表面殘留物。

1.3 考察項目及方法

測定平板菌絲長速、菌絲滿袋時間、平均袋產量，計算生物轉化率。

菌絲長速：采用十字劃線法[12]，測定菌絲長速S（mm/d）。每隔2 d 標記1 次菌落直徑，培養(yǎng)7 d 后，測定不同體積分數(shù)木醋魚蛋白平板培養(yǎng)基上平菇菌絲長速。每個處理重復3次，取平均值。

其中：D為菌落平均直徑（mm），T為培養(yǎng)天數(shù)（d）。

菌絲滿袋時間：接種到菌絲長滿料袋所需時間的平均值。

平均袋產量：稱量3潮鮮菇，計算每袋的平均產量，計算生物轉化率。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Graph prism8.0 和SPSS 22.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析。

2 結果與分析

2.1 平板培養(yǎng)基添加木醋魚蛋白對平菇615 菌絲生長的影響

由圖1 可知，隨著添加的木醋魚蛋白體積分數(shù)的上升，平菇菌絲生長速度加快，添加體積分數(shù)2%時，菌絲生長最快，為0.325 mm/d，之后隨著添加木醋魚蛋白體積分數(shù)上升，菌絲生長變慢，但均顯著快于對照。由圖2 可知，當添加木醋魚蛋白體積分數(shù)為2%時，與對照相比，平菇菌落潔白，氣生菌絲濃密，菌絲長勢較好。而添加木醋魚蛋白體積分數(shù)高于2%時，雖然平菇菌落仍潔白，但菌絲生長受到抑制，氣生菌絲較稀疏，長勢變差。

圖1 平板試驗不同處理平菇菌絲長速

圖2 平板試驗不同處理平菇菌絲生長狀態(tài)

以木醋魚蛋白體積分數(shù)與平菇菌絲生長關系進行模擬，擬合公式見式1，對公式1 進行顯著性分析，F(xiàn)=8.642＜F（0.05），說明公式1 能夠較好反映木醋魚蛋白體積分數(shù)與平菇菌絲生長的關系。由式1可知，隨著木醋魚蛋白體積分數(shù)的上升，平菇菌絲長速加快，對式1進行求極值，得出木醋魚蛋白體積分數(shù)為2.21%時，菌絲長速最快，為0.31 mm/d。因此，當添加木醋魚蛋白體積分數(shù)為2.21%時，其對平菇菌絲生長的促進作用最強。

2.2 栽培料添加木醋魚蛋白試驗結果

由表1 可知，添加體積分數(shù)為3%木醋魚蛋白時，平菇子實體單袋產量最高，為645 g，與對照相比，每袋增產95 g。當添加體積分數(shù)為2%木醋魚蛋白時，平菇子實體單袋產量為620 g，與對照相比，每袋增產70 g。添加體積分數(shù)為1%、4%、5%木醋魚蛋白時，與對照相比，均有一定增產作用，但沒有添加體積分數(shù)3%木醋魚蛋白作用顯著。添加不同體積分數(shù)木醋魚蛋白對平菇生物轉化率的影響同產量一致，即添加體積分數(shù)3%木醋魚蛋白效果最佳。由圖3 也能看出當添加木醋魚蛋白體積分數(shù)為3%時，平菇出菇較好。

表1 栽培料添加木醋魚蛋白栽培平菇試驗結果

圖3 栽培料添加木醋魚蛋白各處理平菇出菇狀態(tài)

3 小結

中醫(yī)農業(yè)技術體系，即利用中醫(yī)原理和方法來滿足植物健康生長的需求，應用中醫(yī)思想和中醫(yī)藥技術及產品，解決作物的健康生長問題[13-15]。木醋魚蛋白是一種中醫(yī)農業(yè)制劑，含魚蛋白、多肽酶、中草藥成分，能有效促進作物的生長[16-18]。以平菇615菌株為材料，探究PDA 及栽培料添加不同體積分數(shù)木醋魚蛋白對平菇菌絲生長和子實體產量的影響。結果表明，最初隨著木醋魚蛋白體積分數(shù)的上升，平菇菌絲長速加快，當木醋魚蛋白體積分數(shù)達2%時，平菇菌絲長速最快，之后隨著體積分數(shù)的上升，菌絲長速變緩，但顯著高于對照。從平菇菌落長勢來看，添加木醋魚蛋白體積分數(shù)為2%時，平菇菌落潔白，氣生菌絲濃密，菌絲長勢較好，隨著木醋魚蛋白體積分數(shù)的上升，菌絲生長受到抑制，氣生菌絲較稀疏，菌落長勢變差。因此，木醋魚蛋白體積分數(shù)為2%時，對平菇菌絲生長影響最顯著。栽培料添加木醋魚蛋白栽培平菇試驗結果表明，添加木醋魚蛋白能提高平菇產量及生物轉化率，添加木醋魚蛋白體積分數(shù)為3%時，效果最明顯，研究為“中醫(yī)農業(yè)”技術在平菇生產中應用提供了數(shù)據(jù)支撐。