登革熱患者病情與高遷移率族蛋白1、可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1等炎癥因子的相關(guān)性研究

張揚(yáng)立，吳秋梅，許才萬(wàn)

（1.廣州市南沙區(qū)第六人民醫(yī)院感染性疾病科；2.廣州市南沙區(qū)第六人民醫(yī)院感染控制科；3.廣州市南沙區(qū)第六人民醫(yī)院內(nèi)科，廣東 廣州 511470）

登革熱是常見(jiàn)的蟲(chóng)媒病毒感染疾病，普通登革熱的特征是急性發(fā)熱，伴有頭痛、眼后痛、嚴(yán)重關(guān)節(jié)痛和肌痛。重癥登革熱可引起微血管改變和凝血功能障礙，導(dǎo)致登革出血熱和登革休克綜合征，會(huì)累及腸道、肝臟、腎臟及心臟等[1]。登革熱病毒與身體產(chǎn)生的抗登革熱病毒抗體形成免疫復(fù)合物，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，增加血管通透性，同時(shí)，該病毒可抑制骨髓，導(dǎo)致白細(xì)胞減少、血小板減少和出血傾向[2]。因此，如何降低患者的出血傾向，減少炎癥反應(yīng)，對(duì)登革熱的治療具有重要意義。高遷移率族蛋白1（HMGB1）是高遷移率族蛋白家族的一員，是一種炎癥誘導(dǎo)劑[3]。可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1（sVCAM-1）是臨床上常見(jiàn)的細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間的黏附因子，可促進(jìn)機(jī)體的炎癥反應(yīng)[4]。白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）均是炎癥因子，參與多種炎癥反應(yīng)過(guò)程，并促進(jìn)中性粒細(xì)胞趨化，誘導(dǎo)趨化因子和促炎因子的釋放[5]。目前關(guān)于登革熱感染后sVCAM-1、HMGB1及炎癥因子表達(dá)水平的研究較少。基于此，本研究探討不同病程階段登革熱患者HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10、TNF-α表達(dá)水平及其與登革熱病情的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021年10月至2022年6月廣州市南沙區(qū)第六人民醫(yī)院收治的80例登革熱患者為研究對(duì)象進(jìn)行回顧性分析，根據(jù)《登革熱診療指南（2014年第2版）》[6]分為普通登革熱組（75例，發(fā)病3～5 d時(shí)體溫恢復(fù)正常）和重癥登革熱組（5例，發(fā)病3～5 d時(shí)病情突然加重，出現(xiàn)嚴(yán)重出血現(xiàn)象）。普通登革熱組患者中男性42例，女性33例；年齡18～65歲，平均年齡（38.67±7.81）歲。重癥登革熱組患者中男性3例，女性2例；年齡19～64歲，平均年齡（38.16±7.93）歲。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)廣州市南沙區(qū)第六人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《登革熱診療指南（2014年第2版）》[6]中登革熱的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者發(fā)病前14 d到過(guò)登革熱流行區(qū)，或居住、工作場(chǎng)所周?chē)?個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)過(guò)登革熱患者；③近期無(wú)感染、外傷、手術(shù)史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并惡性腫瘤者；②合并嚴(yán)重心、腦、肝及腎等嚴(yán)重臟器功能不全者；③合并代謝和內(nèi)分泌疾病者；④合并精神疾病者。

1.2 研究方法 采集兩組患者入院后1 d、3 d、5 d時(shí)的清晨空腹肘靜脈血5 mL，采用離心機(jī)（濟(jì)南鑫卓實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司，型號(hào)：JJTSC0004156-11）以3 000 r/ min進(jìn)行15 min離心，取血清。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清HMGB1、sVCAM-1水平；采用全自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司，型號(hào)：UniCel DxI800）檢測(cè)IL-6、IL-10及TNF-α水平。兩組患者均進(jìn)行3次檢測(cè)后，取其平均值。

1.3 觀(guān)察指標(biāo) ①比較發(fā)病后不同時(shí)間兩組患者血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平。②分析血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平預(yù)測(cè)重癥登革熱的價(jià)值。③分析血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平與登革熱病情程度的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料以（）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，不同時(shí)間點(diǎn)結(jié)果比較采用重復(fù)測(cè)量方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；預(yù)測(cè)價(jià)值采用受試者操作特征（ROC）曲線(xiàn)分析，結(jié)果以曲線(xiàn)下面積（AUC）表示；采用Spearman相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)病后不同時(shí)間兩組患者血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平比較 兩組患者1 d、3 d時(shí)血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），重癥登革熱組患者5 d時(shí)血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平高于1 d、3 d時(shí)，且高于普通登革熱組；普通登革熱組患者3 d、5 d時(shí)血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平低于1 d時(shí)，5 d時(shí)低于3 d時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 發(fā)病后不同時(shí)間兩組患者血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平比較()

表1 發(fā)病后不同時(shí)間兩組患者血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平比較()

組別例數(shù)HMGB1(ng/mL)sVCAM-1(ng/mL)1 d時(shí)3 d時(shí)5 d時(shí)1 d時(shí)3 d時(shí)5 d時(shí)重癥登革熱組510.57±2.929.71±3.2115.94±3.78abc31 839.62±7 532.6929 739.35±7 624.0948 638.92±12 743.83abc普通登革熱組7510.16±2.338.57±2.03a7.63±1.76ab31 687.12±7 542.2425 641.62±6 739.78a19 647.53±5 752.63ab F時(shí)間，P時(shí)間9.254，＜0.0515.375，＜0.05 F組間，P組間15.629，＜0.0519.976，＜0.05 F交互，P交互8.737，＜0.0512.271，＜0.05

續(xù)表

2.2 血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平預(yù)測(cè)重癥登革熱的價(jià)值 ROC分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平可用于重癥登革熱的預(yù)測(cè)，AUC分別為0.840、0.968、0.965、0.833、0.933（P＜0.05），見(jiàn)表2、圖1。

圖1 血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平預(yù)測(cè)重癥登革熱的ROC曲線(xiàn)

表2 血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平預(yù)測(cè)重癥登革熱的價(jià)值

2.3 血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平與登革熱病情程度的相關(guān)性 相關(guān)性分析顯示，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平與登革熱病情程度呈正相關(guān)（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10、TNF-α水平與登革熱病情程度的相關(guān)性分析

3 討論

登革熱是由登革病毒感染所致，是一種通過(guò)蚊媒傳播的傳染病，輕癥者表現(xiàn)為高熱、皮疹及肌肉痛等癥狀，隨病情加重可能誘發(fā)嚴(yán)重的心、肝、肺等重要器官并發(fā)癥，出現(xiàn)出血、休克，甚至危及患者生命安全[7]。近年來(lái)，對(duì)于重癥登革熱預(yù)警指征的研究較多，但HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α在不同病程階段登革熱患者中水平表達(dá)及其病情之間的關(guān)系研究較少。因此，本研究分析不同病程階段登革熱患者HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平與病情程度的相關(guān)性。

本研究結(jié)果顯示，重癥登革熱組患者5 d時(shí)血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平高于1、3 d時(shí)，且高于普通登革熱組；普通登革熱組患者3 d、5 d時(shí)血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平低于1 d時(shí)，5 d時(shí)低于3 d時(shí)。這說(shuō)明重癥患者在3～5 d時(shí)病情加重時(shí)，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平也會(huì)隨之升高，而普通登革熱患者其水平仍保持下降趨勢(shì)。因此，在3～5 d時(shí)檢測(cè)這些指標(biāo)可評(píng)估患者病情是否出現(xiàn)加重情況，可以為評(píng)估登革熱患者病情發(fā)展提供依據(jù)。

本研究ROC分析顯示，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平可用于重癥登革熱的預(yù)測(cè)。原因?yàn)镠MGB1是一種炎癥介質(zhì)，在正常人體組織中，其具有與DNA結(jié)合蛋白的功能，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)炎癥或損傷時(shí)，免疫細(xì)胞則會(huì)釋放出大量HMGB1，加速機(jī)體出現(xiàn)炎癥狀態(tài)。另外，HMGB1可與晚期糖基化終末產(chǎn)物受體和Toll樣受體家族成員結(jié)合，激活核因子B，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞活化、肝細(xì)胞損傷和全身炎癥細(xì)胞活化[8]。sVCAM-1是炎癥細(xì)胞黏附因素之一，可通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞之間和細(xì)胞與基質(zhì)之間的黏附，參與炎癥反應(yīng)[9]。本研究結(jié)果提示，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平參與登革熱的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程。

另外，本研究相關(guān)性分析顯示，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平與登革熱病情程度呈正相關(guān)，這說(shuō)明血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α水平越高，登革熱患者病情越嚴(yán)重。相關(guān)研究顯示，sVCAM-1無(wú)法在機(jī)體中檢測(cè)出來(lái)，而當(dāng)機(jī)體受到登革病毒感染后，機(jī)體sVCAM-1水平快速升高，且普通登革熱與重癥登革熱患者sVCAM-1變化趨勢(shì)不同，說(shuō)明sVCAM-1可作為預(yù)測(cè)登革熱不同病程階段的指標(biāo)[10]。另一項(xiàng)研究顯示，HMGB1水平可作為病毒性疾病患者早期預(yù)警指標(biāo)，并與疾病嚴(yán)重程度相關(guān)[11]。當(dāng)HMGB1被大量分泌然后釋放到細(xì)胞間隙中，充當(dāng)炎癥因子、損傷信號(hào)因子和干細(xì)胞趨化吸附因子，可與IL-6、TNF-α等炎癥因子相互作用，加速I(mǎi)L-6、TNF-α等炎癥因子的釋放，并在多種疾病、組織器官的損傷中發(fā)揮重要作用。有研究表明，HMGB1可以活化相關(guān)細(xì)胞表達(dá)，并促進(jìn)IL-6、IL-10及TNF-α等炎癥因子的分泌，從而抑制登革熱病毒的復(fù)制和擴(kuò)散，是機(jī)體受到病毒損害的信號(hào)[12]。相關(guān)研究顯示，與健康人群比較，登革熱患者IL-6、IL-10及TNF-α水平明顯升高，這些細(xì)胞因子可能可作為登革熱診斷的輔助診斷指標(biāo)[13]，與本研究結(jié)果相似。

綜上所述，血清HMGB1、sVCAM-1、IL-6、IL-10及TNF-α在判斷登革熱感染情況、疾病發(fā)展情況具有重要的指導(dǎo)意義。