基于少陰樞機理論組方對膜性腎病小鼠腎組織HO-1 蛋白表達的影響*

李思雨，郝陽，劉納文

（1.天津中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，天津 301617；2.天津市第一中心醫(yī)院中醫(yī)科，天津 300192）

膜性腎?。∕N）的病理組織學(xué)特征是腎小球基底膜上皮細胞下的免疫復(fù)合物沉積伴基底膜彌漫增厚，是成人腎病綜合征（NS）中常見病理類型之一[1]。隨著病程的進展，最終發(fā)展成終末期腎病（ESRD）。這也是腎移植術(shù)后常復(fù)發(fā)的主要腎小球疾病之一，約占患者病例的40%[2]。研究表明，氧化應(yīng)激參與MN 形成，免疫復(fù)合物引起補體的異常激活，形成補體膜攻擊復(fù)合物（C5b-9），亞溶解量的C5b-9 刺激足細胞產(chǎn)生炎癥因子、活性氧（ROS）及蛋白分子，從而導(dǎo)致腎小球過濾屏障損傷出現(xiàn)蛋白尿[3-4]。ROS 可能通過啟動脂質(zhì)過氧化和腎小球基底膜（GBM）膠原Ⅳ型蛋白降解誘發(fā)腎組織損傷[5]。研究發(fā)現(xiàn)，Nrf2 作為氧化應(yīng)激重要信號通路影響著腎病的疾病進程[6-8]，血紅素氧合酶（HO-1）作為該通路的下游因子，在抑制細胞炎癥與抗氧化應(yīng)激中發(fā)揮重要作用。HO-1 通過催化血紅素，分解產(chǎn)生膽綠素[9]。膽綠素通過還原酶作用下轉(zhuǎn)換為膽紅素，膽綠素與膽紅素均有較強抗氧化作用，膽紅素還可以調(diào)節(jié)機體免疫，調(diào)控脂質(zhì)代謝[10]。

隨著MN 發(fā)病率及其并發(fā)癥病死率的逐年升高，對于社會和國家造成的公共負擔日益加重，探索新的治療靶點及治療方式有著重大意義。目前，西醫(yī)治療上主要采用糖皮質(zhì)激素或聯(lián)合免疫抑制劑，具有不良反應(yīng)明顯、治療效果不穩(wěn)定、患者依從性差等局限性。近年來研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)在治療MN 上取得了良好成效，具有治療效果明顯、療效穩(wěn)定、不良反應(yīng)小等優(yōu)勢特點。課題組通過前期臨床工作實踐及相關(guān)參考文獻，提出從少陰樞機論治MN 的學(xué)術(shù)觀點，臨床上常選用麻黃附子細辛湯合防己黃芪湯加減進行治療并取得了良好的療效[11]。本研究探索基于少陰樞機理論組方麻黃附子細辛湯合防己黃芪湯對MN 小鼠的腎保護作用以及對HO-1 蛋白表達水平的影響。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 50 只BALB/c 小鼠，6～8 周，健康雄性，SPF 級，體質(zhì)量（20±25）g，購自北京華阜康生物科技股份有限公司，許可證號：SCXK（京）2019-0008。

1.2 實驗藥品 中藥：麻黃附子細辛湯合防己黃芪湯由防己10 g，黃芪20 g，白術(shù)10 g，麻黃10 g，制附子10 g（先煎），細辛3 g，炙甘草3 g 組成，天津市第一中心醫(yī)院中醫(yī)科統(tǒng)一制備。西藥：環(huán)磷酰胺片，規(guī)格：50 mg/片，通化茂祥制藥有限公司生產(chǎn)，批準文號：國藥準字H22022673。

1.3 主要實驗試劑 陽離子化牛血清白蛋白（CBSA，美國Chondrex 公司，貨號：9058）；弗氏完全佐劑（美國Sigma 公司，貨號：F5581）；丙二醛（MDA）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所，貨號：A003-1）；HO-1 抗體（Proteintech，貨號：66743-1-lg）；Mouse Anti-β-tubulin（中杉金橋，貨號TA-10）；Goat Anti-Mouse IgG（二抗，中杉金橋，貨號：ZB-2305）；BCA 定量試劑盒（Biosharp，貨號：BL521A）；Goat anti-Mouse IgG-FITC（Absin，貨號：abs20012）；含DAPI 抗熒光衰減封片劑（上海Beyotime，貨號：P0131）；蘇木素染色液、伊紅染色液（中杉金橋，貨號：ZLI-9613、ZLI-9610）；中性樹膠（北京索萊寶科技有限公司，貨號：G8590）；基底膜六胺銀染色試劑盒（北京索萊寶科技有限公司，貨號：G1790）；OCT包埋劑（日本Sakura）。

1.4 主要實驗儀器 全自動化學(xué)/熒光/凝膠成像分析系統(tǒng)（北京賽智）；低溫高速離心機（北京北利）；高速低溫組織研磨儀（武漢塞維爾生物科技有限公司）；正置光學(xué)顯微鏡（OLYMPUS CKX43-LP）；正置熒光顯微鏡（Nikon）；載玻片及蓋玻片（江蘇世泰實驗器材有限公司）；病理脫水機、切片機（上海徠卡顯微系統(tǒng)有限公司）；凍臺（金華市華速科技有限公司）；電泳儀、電泳槽、轉(zhuǎn)膜槽（北京六一生物科技有限公司）。

2 實驗方法

2.1 造模與分組 參照文獻方法[12]制備MN 小鼠模型，50 只，BALB/c 雄性小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)2 周后，隨機分為正常組10 只，其余40 只進行造模。預(yù)免疫，將C-BSA，規(guī)格：2 mg/mL，10 mL 磷酸鹽緩沖溶液（PBS）與等體積的弗氏完全佐劑混勻，制備成乳白色懸濁液，在每只小鼠尾根部、腹股溝多點皮下注射乳濁液0.2 mL。正常組小鼠給予等體積弗氏完全佐劑注射。2 周后，正式免疫，造模組每只小鼠第1 次尾靜脈注射0.1 mg（C-BSA：0.1 mg/mL，體積1 mL），隔日注射，注射劑量增加至0.4 mg（C-BSA：0.4 mg/mL，體積1 mL），連續(xù)4 周。正常組注射等體積的生理鹽水。造模結(jié)束后，3 只造模小鼠死亡。隨機抽取2 只造模小鼠予腎小球免疫熒光IgG 檢測，驗證MN 小鼠模型是否成功，結(jié)果顯示，均出現(xiàn)IgG沿腎小球毛細血管壁呈綠色顆粒樣沉積，證明造模成功。將剩余的造模小鼠按照隨機數(shù)字表法分為4 組，模型組8 只、中藥組9 只、西藥組9 只、中藥加西藥組9 只。

2.2 給藥方法 根據(jù)小鼠灌胃容積為10 mL/kg，正常組與模型組分別給予蒸餾水10 mL/（kg·d），每日1 次，連續(xù)6 周。中藥組給予中藥湯劑9.83 g/（kg·d）（成人每日所需生藥總計量為65 g，按照成人60 kg體質(zhì)量計算，約1.08 g 生藥/kg，小鼠等效用量大約為成人用量的9.1 倍，得出小鼠的等效用量為9.83 g 生藥/kg）。將藥物配制為0.983 g/mL 的濃度，無菌瓶密封。西藥組：給予環(huán)磷酰胺片0.64 mg/（kg·d）（參照說明書用量方法，成人每日劑量4 mg，按上述方法折算小鼠用量）。將環(huán)磷酰胺片碾成細末溶于蒸餾水，按小鼠灌胃容積為10 mL/kg 計算，制備成濃度為0.064 mg/mL 的環(huán)磷酰胺混懸液備用，無菌瓶密封。連續(xù)灌胃2 周后，停2 周，再連續(xù)灌胃2 周。中藥加西藥組：給予上述同等劑量的中藥聯(lián)合西藥，給藥時間同上。

2.3 標本采集 給藥6 周后，麻醉小鼠，摘眼球取血，待靜置30 min 后離心取血清，分別裝于微型離心管內(nèi)，標號，置于-80 ℃冰箱保存。留待行血清總蛋白（TP）、三酰甘油（TG）、血肌酐（SCr）等生化指標檢測。采血結(jié)束后剖腹，取下一側(cè)腎臟組織，剝離包膜及非腎組織，生理鹽水反復(fù)沖洗，切大米粒樣腎皮質(zhì)放入瓶內(nèi)（為防止腎組織干燥，使用生理鹽水浸濕的紗布將組織輕輕包裹住），即刻行直接免疫熒光檢測，觀察小鼠腎組織免疫球蛋白G（IgG）沉積情況。剩余腎臟組織放入10%中性福爾馬林固定液中固定，行蘇木素-伊紅（HE）染色，過碘酸-六胺銀（PASM）染色；取另一側(cè)腎臟組織，放入凍存管中，置于-80 ℃冰箱保存，進行MDA 含量及蛋白免疫印跡法（Western blot）檢測。

2.4 檢測方法

2.4.1 血清生化檢測 全自動生化分析儀測定小鼠血清TP、TG、SCr 等水平。

2.4.2 小鼠腎臟組織的病理形態(tài)檢測

2.4.2.1 HE 染色、PASM 染色 小鼠腎臟組織經(jīng)10%中性福爾馬林固定后，不同濃度乙醇溶液進行梯度脫水，二甲苯透明，浸蠟，包埋，切片4 μm 厚度，分別進行HE 染色、PASM 染色，在光鏡下觀察腎小球組織形態(tài)變化情況。

2.4.2.2 免疫熒光檢測小鼠腎臟IgG 沉積 采取直接免疫熒光法檢測腎小球IgG 沉積，取新鮮腎皮質(zhì)，用OCT 包埋劑包埋，冷凍切片機切片，經(jīng)冷丙酮固定10 min；PBS 浸洗3 次，每次5 min；滴加5%BSA封閉非特異性染色，室溫1 h；滴加FITC-山羊抗小鼠IgG，置濕盒內(nèi)孵育，4 ℃過夜。次日復(fù)溫30 min，避光操作，PBS 清洗3 次，每次5 min；用含DAPI 的封片劑封片；熒光顯微鏡觀察，拍照記錄。

2.4.3 檢測小鼠腎組織丙二醛（MDA）含量 根據(jù)MDA 試劑盒說明，檢測小鼠腎組織MDA 含量。

2.4.4 Western blot 檢測小鼠腎組織HO-1 蛋白表達水平 取出小鼠腎組織，剪取50 mg，放入離心管中，加入500 μ RIPA 裂解液，冰上操作，裂解20 min后，設(shè)置12 000 r/min，離心20 min，離心半徑8 cm。BCA 法檢測組織上清液中蛋白濃度。加入相應(yīng)體積的總蛋白樣品與5×蛋白質(zhì)凝膠電泳上樣緩沖液，混勻，進行95 ℃變性處理10 min，放置于2～8 ℃?zhèn)溆?。制?0%分離膠，4%濃縮膠，上樣，將蛋白maker 及各組蛋白分別注入相應(yīng)泳道，電泳，采用濕轉(zhuǎn)膜，封閉，4 ℃孵育一抗（稀釋比例為1∶1 000）過夜，1×TBST 洗膜3 次，每次10 min，滴加二抗（稀釋比例為1∶5 000），室溫、避光緩慢搖動作用1 h，1×TBST洗膜3 次，每次10 min，使用特超敏ECL 發(fā)光液，避光，顯影，采集并保存圖像。

2.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS21.0 軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，應(yīng)用Graph Pad Prism9 作圖，計量資料采用均數(shù)±標準差（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（one-wayANOVA），TP、TG、SCr 及MDA 檢測結(jié)果選用Scheffe 檢驗，HO-1 結(jié)果選用組間兩兩比較LSD 檢驗，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 實驗結(jié)果

3.1 小鼠血清TP、TG、SCr 水平 與正常組比較，模型組及各給藥組小鼠血清TP 水平均顯著降低，TG 水平均顯著升高（P<0.01）；與模型組比較，TP 水平均升高，TG 水平均降低（P<0.01，P<0.05）。各給藥組之間，中藥組與西藥組比較，TP、TG 水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與中藥組及西藥組比較，中藥加西藥組TP 水平升高（P<0.01，P<0.05），TG 水平降低（P<0.05）。與正常組比較，模型組小鼠血清SCr水平顯著升高（P<0.01）；與模型組比較，中藥組及西藥組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），中藥加西藥組SCr 水平降低（P<0.05）。見表1。

表1 給藥后各組小鼠血清TP，TG，SCr 水平（±s）Tab.1 Serum TP，TG and SCr levels of mice in each group after drug administration（±s）

表1 給藥后各組小鼠血清TP，TG，SCr 水平（±s）Tab.1 Serum TP，TG and SCr levels of mice in each group after drug administration（±s）

注：與正常組對比，**P＜0.01；與模型組對比，#P＜0.05，##P＜0.01；與中藥組對比，△P＜0.05，△△P＜0.01；與西藥組對比，▲P<0.05。

組別動物數(shù)TP（g/L）TG（mmol/L） SCr（μmol/L）正常組10 56.09±3.061.03±0.2812.20±1.75模型組8 43.03±2.12**2.18±0.14**16.63±1.30**中藥組9 47.14±2.13**#1.84±0.20**#15.11±1.54**西藥組9 48.14±1.41**##1.80±0.16**#14.89±1.17**中藥加西藥組9 51.66±2.29**##△△▲1.46±0.25**##△▲14.33±1.32#

3.2 小鼠腎臟病理形態(tài)變化

3.2.1 HE 染色、PASM 染色 光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)正常組小鼠腎小球體積正常，腎小球毛細血管基底膜及系膜區(qū)未見增厚，腎小球結(jié)構(gòu)完整，腎小管及腎間質(zhì)未見明顯異常；HE 染色顯示模型組小鼠腎小球體積增大，細胞核增多，腎小球毛細血管腔狹窄，充血。PASM 染色顯示腎小球毛細血管基底膜增厚，系膜增厚。與模型組比較，各給藥組治療后上述情況均有改善。見圖1。

圖1 各組小鼠腎組織HE 染色（正置光學(xué)顯微鏡，×400）和PASM 染色（正置光學(xué)顯微鏡，×200）Fig.1 Renal tissue of mice in each group stained with HE（orthomicroscope，×400）and PASM（orthomicroscope，×200）

3.2.2 免疫熒光染色 熒光顯微鏡下觀察，IgG 沿腎小球毛細血管壁呈綠色熒光沉積，正常組小鼠腎小球幾乎未見綠色熒光沉積；模型組小鼠腎小球熒光表達較強；與模型組比較，各給藥組治療后，熒光強度呈不同程度減弱。中藥組與西藥組對比，熒光表達未見明顯差異，中藥加西藥組熒光表達最弱。見圖2。

圖2 各組小鼠腎組織IgG 沉積結(jié)果（正置熒光顯微鏡，×400）Fig.2 Results of IgG deposition in renal tissue of mice in each group（positive fluorescence microscope，×400）

3.3 小鼠腎組織MDA 含量結(jié)果 與正常組比較，模型組及各給藥組小鼠腎組織MDA 含量顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，各給藥組小鼠腎組織MDA含量均降低（P＜0.01，P＜0.05）；各給藥組之間，中藥組與西藥組比較，小鼠腎組織MDA 含量差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與中藥組及西藥組比較，中藥加西藥組小鼠腎組織MDA 含量降低（P＜0.05）。見表2。

表2 給藥后各組小鼠腎組織MDA 水平（±s）Tab.2 MDA levels in renal tissues of mice in each group after administration（±s）

表2 給藥后各組小鼠腎組織MDA 水平（±s）Tab.2 MDA levels in renal tissues of mice in each group after administration（±s）

注：與正常組對比，**P＜0.01；與模型組對比，#P＜0.05，##P＜0.01；與中藥組對比，△P＜0.05；與西藥組對比，▲P<0.05。

組別動物數(shù)MDA（mmol/mg prot）正常組107.63±1.44模型組815.25±1.32**中藥組912.66±1.04**#西藥組912.75±1.07**#中藥加西藥組910.24±1.76**##△▲

3.4 對小鼠腎組織HO-1 蛋白表達的影響 與正常組比較，模型組小鼠腎組織HO-1 蛋白表達量有升高（P＜0.05）；與模型組比較，各給藥組小鼠腎組織HO-1 蛋白表達量均升高（P＜0.05，P＜0.01）；各給藥組之間，中藥組與西藥組比較，小鼠腎組織HO-1 蛋白表達量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），與中藥組比較，中藥加西藥組小鼠腎組織中HO-1 蛋白表達量升高（P＜0.05）。見圖3。

圖3 各組小鼠腎組織HO-1 蛋白表達條帶圖及柱狀圖（±s）Fig.3 Bands and bars of HO-1 protein expression in renal tissue of mice in each group（±s）

4 討論

中醫(yī)典籍中沒有與“膜性腎病”相對應(yīng)的名稱，根據(jù)其臨床表現(xiàn)及特點，多將其歸屬于中醫(yī)學(xué)“水腫”“尿濁”“膏淋”“虛勞”等范疇?！端貑枴ぶ琳嬉笳摗分小爸T濕腫滿，皆屬于脾”，《靈樞·口問》中言“中氣不足，溲便為之變”，《黃帝內(nèi)經(jīng)》認為水腫的病機與脾土相關(guān)，脾氣運化無力，水濕停聚體內(nèi)，則發(fā)為水腫，脾氣虛，運化升清失司，且無力統(tǒng)攝，谷氣下流，精微下注則發(fā)為尿濁。張從正《儒門事親》中提到：“夫濕者，為太陰濕土之主也。”“腎以水為之主”，充分肯定了脾腎二臟在水腫病發(fā)病中的重要地位?！毒霸廊珪つ[脹》指出：“凡水腫等證，乃肺脾腎三臟相干之病，蓋水為至陰，故其本在腎；水化于氣，故其標在肺；水唯畏土，故其制在脾?！闭J為水腫與肺脾腎三臟密切聯(lián)系。腎為人體先天之本，主水，司開闔，與膀胱相表里，調(diào)控身體水液代謝，若腎陽不足，溫煦氣化功能降低，則致體內(nèi)水液潴留。肺主宣發(fā)肅降，推動體內(nèi)氣機運行，水液代謝有賴于氣的推動作用，肺氣失司則水液停滯體內(nèi)易發(fā)為水腫；腎水依靠脾土制約，若脾弱運化無力，則腎水泛溢。

綜合歷代醫(yī)家觀點及前期臨床工作實踐，筆者認為少陰樞機不利是MN 發(fā)病的病機關(guān)鍵，陰陽失調(diào)，寒熱失衡，氣機升降失常，水道不利是MN 發(fā)病的基本病理變化[11]，邪越三陽入少陰，陽氣已虛，治則上當以溫陽散邪。麻黃附子細辛湯中，君用附子以溫脾腎陽氣，祛風(fēng)散寒除濕；麻黃味辛微苦性溫，歸肺和膀胱經(jīng)，解表宣肺，使邪從表路出；以細辛辛溫發(fā)散之性，通達表里，內(nèi)可佐附子以溫經(jīng)，外可助麻黃以解表，全方共建開太陽散邪、守脾陽健運、固腎陽氣化之功。在臨床發(fā)現(xiàn)MN 的患者多因病程漫長，邪實而正虛，衛(wèi)陽不振，水濕留滯，因此合用防己黃芪湯，防己祛風(fēng)除濕，給邪以出路，黃芪振衛(wèi)表之陽，兩方合用，以少陰為樞，衛(wèi)陽得健，脾土得溫，水濕得散，共奏陰陽和調(diào)，寒熱均衡，水道通利之功。

現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，麻黃水提物有抗氧化作用，通過清除氧自由基，減輕脂質(zhì)過氧化等方面減輕腎臟損傷[13-14]。附子含有100 多種化學(xué)成分，具有生物活性的成分主要為二萜生物堿類、黃酮類、甾體皂苷類等，藥理研究發(fā)現(xiàn)其具有抗炎、抗氧化作用[15]。細辛具有抗炎，解熱鎮(zhèn)痛作用[16]。研究表明防己生物堿化合物具有抗炎鎮(zhèn)痛、解熱、利尿、抑制腫瘤細胞生長等作用[17]。黃芪中富含黃芪多糖類、黃芪皂苷、黃酮類、蛋白質(zhì)等多種有效成分，研究表明，黃芪具有抗氧化應(yīng)激、抗炎、抑制足細胞凋亡、調(diào)節(jié)血脂及減少蛋白尿等作用，減少腎小球肥大、腎小球硬化、腎小球基底膜及系膜增厚等病理變化，具有腎臟保護作用[18-19]。白術(shù)主要化學(xué)成分是揮發(fā)油、白術(shù)內(nèi)酯及內(nèi)酯類化合物等，現(xiàn)代藥理學(xué)發(fā)現(xiàn)具有抗炎、抗腫瘤、利尿及增強免疫等作用[20]。甘草屬于豆科植物，18β-甘草次酸（GA）是甘草中的主要有效成分，具有抗炎、抗氧化、降血脂、祛痰、抗腫瘤、抗病毒及免疫調(diào)節(jié)等作用。研究發(fā)現(xiàn)GA 可以通過促進尿肌酐的排泄、減少尿蛋白、抑制腎臟細胞的凋亡以及抑制ERK 信號通路發(fā)揮腎臟保護作用，從而延緩糖尿病腎病的進展[21]。

MN 臨床表現(xiàn)為大量蛋白尿、水腫、高脂血癥、低蛋白血癥等，發(fā)病時由于腎小球過濾屏障受損，血清中蛋白質(zhì)從尿中大量丟失，TP 水平下降，導(dǎo)致蛋白尿，進而引發(fā)低蛋白血癥。同時，由于血清中蛋白流失會刺激肝臟發(fā)揮蛋白合成代償性機制，但合成的蛋白質(zhì)不能完全彌補丟失的蛋白質(zhì)，導(dǎo)致膠體滲透壓下降，引發(fā)液體從血管內(nèi)向組織間隙移動，產(chǎn)生水腫。同時影響血液的黏稠度，TG 水平升高，引發(fā)高脂、高黏血癥。血肌酐SCr 是檢測腎功能的重要指標，當MN 伴有腎功能受損時會出現(xiàn)相應(yīng)下降。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中藥干預(yù)后，MN 小鼠血清TP 升高，TG 降低，腎組織病理形態(tài)改善，說明麻黃附子細辛湯聯(lián)合防己黃芪湯有利于改善MN 小鼠臨床表現(xiàn)，減輕腎臟病理損害，對MN 小鼠具有腎保護作用。有研究表明，氧化應(yīng)激在MN 的發(fā)病中有著重要作用。在機體的氧化應(yīng)激過程中，過量的ROS會攻擊脂質(zhì)分子，導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生大量的MDA，MDA 含量通常被用來評估氧化應(yīng)激程度的嚴重程度。本研究結(jié)果顯示，MN 小鼠腎組織MDA 含量較正常組升高，提示MN 小鼠有氧化應(yīng)激損傷，各給藥組治療后MDA 含量不同程度下降。HO-1 蛋白表達量結(jié)果顯示，正常組處于低水平狀態(tài)，模型組有所升高，考慮可能是MN 小鼠處于氧化應(yīng)激狀態(tài)下機體啟動的自我保護反應(yīng)。各給藥組治療后HO-1 蛋白表達量均升高，由此筆者推測基于少陰樞機理論組方麻黃附子細辛湯合防己黃芪湯可能通過提高HO-1 蛋白表達，增強機體抗氧化應(yīng)激能力來改善腎臟組織損傷，保護腎組織，延緩MN 進展。

綜上所述，從中醫(yī)宏觀思維分析，兩方聯(lián)用治療MN 可以共奏和暢少陰樞機，調(diào)和陰陽，扶正固本，溫陽散邪之功，緩解MN 臨床表現(xiàn)。從西醫(yī)微觀思維角度分析，推測兩方聯(lián)用緩解MN 的內(nèi)在分子作用機制可能與其降低氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，激活HO-1 通路有關(guān)。

筆者認識到本課題研究存在的不足之處，僅對麻黃附子細辛湯合防己黃芪湯的整體治療作用進行了探討，仍需對方中各種藥物單體化學(xué)成分、藥理活性及其作用機制進行更深入研究，同時未來將進一步研究其量效關(guān)系、延長干預(yù)時間等，以期為中醫(yī)治療MN 提供科學(xué)依據(jù)和新思路。