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    溶解氧傳感器—物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)在改進(jìn)種間關(guān)系實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用

    2023-09-13 10:51:45畢學(xué)友張淼管婷
    中國(guó)教育技術(shù)裝備 2023年11期
    關(guān)鍵詞:物聯(lián)網(wǎng)

    畢學(xué)友 張淼 管婷

    摘? 要? 高中生物生態(tài)學(xué)種間關(guān)系探究實(shí)驗(yàn)中,研究對(duì)象草履蟲(chóng)對(duì)水質(zhì)要求甚高,如果采用傳統(tǒng)的生態(tài)缸進(jìn)行養(yǎng)殖,無(wú)法保證其生存和繁殖,將溶解氧傳感器與物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)結(jié)合使用,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程監(jiān)控溶解氧含量和遠(yuǎn)程控制加氧裝置運(yùn)行,使水質(zhì)得到有效改善,保證草履蟲(chóng)的生存和繁殖,探究種間關(guān)系實(shí)驗(yàn)得以成功進(jìn)行。

    關(guān)鍵詞? 高斯假說(shuō);草履蟲(chóng)實(shí)驗(yàn);溶解氧傳感器;物聯(lián)網(wǎng)

    中圖分類(lèi)號(hào):G633.91? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B

    文章編號(hào):1671-489X(2023)11-0131-06

    1? 實(shí)驗(yàn)背景及問(wèn)題發(fā)現(xiàn)

    高中生物教材選修二關(guān)于生態(tài)的章節(jié),講述了

    種間關(guān)系中的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,選用的是俄羅斯生態(tài)學(xué)家高斯的大小草履蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)。高斯在1934—1935年提出高斯假說(shuō)(Gauses Hypothesis),即競(jìng)爭(zhēng)排斥原理:由于競(jìng)爭(zhēng)的結(jié)果,兩個(gè)類(lèi)似的物種不能占有類(lèi)似的生態(tài)位,而是以某種方式彼此取代,使每個(gè)物種具有食性或其他生活方式上的特點(diǎn),從而在生態(tài)位上產(chǎn)生分離的現(xiàn)象,這一假說(shuō)稱(chēng)為高斯假說(shuō)。高斯做了經(jīng)典的實(shí)驗(yàn),研究不同種的草履蟲(chóng)的競(jìng)爭(zhēng)問(wèn)題。A、B、C三種草履蟲(chóng)開(kāi)始都單獨(dú)培養(yǎng)在管中,捕食細(xì)菌和酵母菌[1]。

    實(shí)驗(yàn)1:把A和C放在1個(gè)培養(yǎng)管中,C總是偏向于消失。他發(fā)現(xiàn)A生長(zhǎng)速度是C的6倍,更加有益于利用有限的資源。他提出競(jìng)爭(zhēng)排擠:如果兩個(gè)物種競(jìng)爭(zhēng)有限的資源,利用資源更有益的物種將會(huì)排擠另外一個(gè),當(dāng)資源有限時(shí),沒(méi)有兩個(gè)物種在相同的生態(tài)位能共存。

    實(shí)驗(yàn)2:把上次被打敗了的草履蟲(chóng)C和另外的草履蟲(chóng)B放在一起,他假設(shè)這兩個(gè)物種也會(huì)競(jìng)爭(zhēng)有限的細(xì)菌食品,其中一個(gè)會(huì)勝出。但是,沒(méi)有產(chǎn)生預(yù)期假設(shè),B和C都存活下來(lái)了,它們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)方法分割食品資源。怎樣做的呢?培養(yǎng)管的上層氧氣濃度和細(xì)菌的密度都很高,C占據(jù)了這個(gè)位置,原因是它更加有能力捕食細(xì)菌;在底層,氧氣濃度低,適合酵母菌生活,B更有能力捕食酵母菌。由于這兩個(gè)物種的生態(tài)位重疊的不是太多,因此,都活了下來(lái)。但是,競(jìng)爭(zhēng)仍舊對(duì)參與者施加了負(fù)面效應(yīng):第三個(gè)實(shí)驗(yàn)是當(dāng)沒(méi)有競(jìng)爭(zhēng)的時(shí)候,二者的密度是有競(jìng)爭(zhēng)時(shí)候的3倍還要多。

    課題小組曾模仿過(guò)高斯假說(shuō)實(shí)驗(yàn),但由于草履蟲(chóng)是好氧生物,對(duì)水質(zhì)要求非常高,尤其是對(duì)于溶解氧含量特別敏感,當(dāng)溶解氧含量低于8 mg/l,草履蟲(chóng)就會(huì)出現(xiàn)游動(dòng)能力減弱,當(dāng)?shù)陀? mg/l甚至?xí)劳觯瑢?dǎo)致嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)。因此,怎樣保證水質(zhì)質(zhì)量保證草履蟲(chóng)生存,使得草履蟲(chóng)的數(shù)量變化只因種間關(guān)系而變化,而非因水質(zhì)缺氧死亡而減少,消除水質(zhì)這一無(wú)關(guān)變量問(wèn)題的影響是本實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯晒Φ年P(guān)鍵[2]。

    2? 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

    通過(guò)運(yùn)用溶解氧傳感器結(jié)合物聯(lián)網(wǎng)控制技術(shù),精確測(cè)得水中的溶解氧含量,并且發(fā)送數(shù)據(jù)至手機(jī)微信小程序,實(shí)現(xiàn)手機(jī)遙控,遠(yuǎn)程控制加氧器的電源,維持水中溶解氧含量較穩(wěn)定環(huán)境,創(chuàng)造觀察草履蟲(chóng)的種間關(guān)系的可能性。

    3? 實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)計(jì)組裝

    實(shí)驗(yàn)材料包括大小兩種草履蟲(chóng)A和B、溶解氧傳感器—單片機(jī)遠(yuǎn)程控制系統(tǒng)、磁力攪拌加氧器、3 L飼養(yǎng)缸、血球計(jì)數(shù)板、血蓋片、移液器、酵母、數(shù)碼顯微鏡、1%的NaCl溶液(見(jiàn)圖1)。

    4? 實(shí)驗(yàn)方法及過(guò)程

    4.1? 草履蟲(chóng)的培養(yǎng)及取樣檢測(cè)活性

    草履蟲(chóng)只由一個(gè)細(xì)胞構(gòu)成,是單細(xì)胞原生動(dòng)物,雌雄同體。屬于纖毛綱、膜口目、草履蟲(chóng)科,世界已知有二十多種。生活在有機(jī)質(zhì)較豐富的池塘,體長(zhǎng)只有180~280 μm。草履蟲(chóng)的壽命可達(dá)5晝夜以上。常見(jiàn)的有大草履蟲(chóng)(長(zhǎng)180~300 μm)、雙小核草履蟲(chóng)(長(zhǎng)80~170 μm,伸縮泡2個(gè),有兩個(gè)小核,很?。?、小草履蟲(chóng)(長(zhǎng)180~310 μm,有時(shí)有3個(gè)伸縮泡,小核泡型)、放毒型草履蟲(chóng)等。我們采購(gòu)了兩種草履蟲(chóng)為A和B,經(jīng)過(guò)鏡檢與草履蟲(chóng)的分類(lèi)檢索表比較,確認(rèn)A為大草履蟲(chóng),B為小草履蟲(chóng)。A和B分別飼養(yǎng)在3 L飼養(yǎng)缸中1號(hào)缸和2號(hào)缸,采用遠(yuǎn)程控制系統(tǒng)進(jìn)行水質(zhì)保證,分別飼養(yǎng)到接近K值,0.5 ml中大草履蟲(chóng)K值375左右,小草履蟲(chóng)K值1 000左右。為保證參與種間反應(yīng)的草履蟲(chóng)的活性,我們決定使用1%的NaCl溶液刺激其應(yīng)激性的方法(見(jiàn)圖2)確定活性后,用血球計(jì)數(shù)器測(cè)定密度,然后按照密度量取相同數(shù)量的草履蟲(chóng)A和B投入3號(hào)飼養(yǎng)缸中混合飼養(yǎng),每天隨機(jī)抽樣檢查,采用水面—水中—水底,取3次樣,顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)測(cè)得密度,觀察其種間關(guān)系。

    4.2? 血球計(jì)數(shù)板使用及密度換算的方法

    1)將血球計(jì)數(shù)板用擦鏡紙擦凈,務(wù)必保證沒(méi)有水,否則會(huì)稀釋液體影響計(jì)數(shù),在中央的計(jì)數(shù)室蓋上專(zhuān)用的蓋玻片。

    2)用移液器從草履蟲(chóng)飼養(yǎng)液中取樣10 μl,置于蓋玻片的邊緣,使液體緩緩滲入,多余的液體會(huì)流到凹槽中,并稍待片刻使?jié)嵋和耆M(jìn)入計(jì)數(shù)室中。

    3)將血球計(jì)數(shù)板移入顯微鏡下觀察。

    4)計(jì)數(shù)時(shí),隨機(jī)取樣,計(jì)算培養(yǎng)液中的草履蟲(chóng)個(gè)數(shù)。應(yīng)取左上、左下、右上、右下至少4個(gè)中方格和中央的一個(gè)中方格計(jì)算草履蟲(chóng)個(gè)數(shù)。

    5)當(dāng)遇到位于方格線上的草履蟲(chóng),采用樣方法

    中“計(jì)上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右”的計(jì)數(shù)原則。

    6)對(duì)每個(gè)樣品計(jì)數(shù)3次,取其平均值,再按公式計(jì)算每毫升培養(yǎng)液中所含的草履蟲(chóng)個(gè)數(shù)。

    公式:1個(gè)大方格有16個(gè)中方格,一個(gè)中方格有25個(gè)小方格,因此,為400個(gè)小方格,平均每個(gè)小方的草履蟲(chóng)數(shù)×400為一個(gè)大方格的草履蟲(chóng)數(shù)即0.1 ml的草履蟲(chóng)數(shù)。即:草履蟲(chóng)密度(個(gè)/ml):三次取樣平均數(shù)×400×10=1 ml中草履蟲(chóng)數(shù)[3]。

    4.3? 溶解氧傳感器—單片機(jī)—遠(yuǎn)程控制開(kāi)關(guān)的使用方法及數(shù)據(jù)采集方法

    溶解氧傳感器是一種用于測(cè)量氧氣在水中的溶解量的傳感設(shè)備,溶解氧(DO)是指溶解于水中的氧的含量,它以每升水中氧氣的毫克數(shù)表示(mg/L)。溶解氧以分子狀態(tài)存在于水中,水中溶解氧量是水質(zhì)重要指標(biāo)之一,當(dāng)水體溶解氧低于8 mg/L,魚(yú)類(lèi)就會(huì)浮頭,當(dāng)?shù)陀? mg/L就會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物死亡??紤]到草履蟲(chóng)是單細(xì)胞生物,不能使用常規(guī)的電泵水循環(huán)系統(tǒng),泵水的過(guò)程中激烈的水流會(huì)使草履蟲(chóng)破裂,我們采用磁力攪拌的方法來(lái)增加水與空氣的接觸面積,增加溶解氧含量。我們選用膜電極溶解氧傳感器、單片機(jī)和遠(yuǎn)程Wi-Fi控制電源組裝在一起,可以隨時(shí)使用微信小程序監(jiān)控水中溶解氧含量,設(shè)定每30分鐘測(cè)氧一次,報(bào)警設(shè)置為6 mg/L。當(dāng)溶解氧低于6 mg/L,手機(jī)就會(huì)接到報(bào)警信號(hào),既可手動(dòng)也可自動(dòng)遠(yuǎn)程打開(kāi)電源,使磁力加氧器運(yùn)行,增加溶解氧含量(見(jiàn)圖3)。

    5? 實(shí)驗(yàn)過(guò)程及數(shù)據(jù)結(jié)果分析

    5.1? 實(shí)驗(yàn)過(guò)程

    1)將A型大草履蟲(chóng)和B型小草履蟲(chóng)分別倒入2個(gè)培養(yǎng)缸中,食用酵母菌為飼料,放置室溫下培養(yǎng),使用溶解氧—物聯(lián)網(wǎng)遠(yuǎn)程控制系統(tǒng),保證草履蟲(chóng)的生長(zhǎng)和繁殖。每天進(jìn)行采樣,使用血球計(jì)數(shù)板詳細(xì)記錄2個(gè)培養(yǎng)缸上、中、下層草履蟲(chóng)密度,培養(yǎng)并持續(xù)觀察和記錄(見(jiàn)圖4)。

    2)第5天當(dāng)草履蟲(chóng)生長(zhǎng)到接近K值后,大草履蟲(chóng)A型接近375,小草履蟲(chóng)B型接近500。我們按照密度量取體積,保證投入數(shù)量相同的兩種草履蟲(chóng)在第3缸中混合飼養(yǎng)。投入充足的食物,給予溶解氧—物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)控制水環(huán)境,保證溶解氧和溫度不會(huì)劇烈變化。從不同的生態(tài)位(上、中、下)取樣,記錄3缸中A、B型草履蟲(chóng)分別在上層、中層、下層的生長(zhǎng)曲線,并進(jìn)行比較(見(jiàn)圖5、圖6)。

    5.2? 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果分析

    根據(jù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中記錄的數(shù)據(jù)可以看出不同生態(tài)位下,雖然起始濃度相同,但是A型大草履蟲(chóng)和B型小草履蟲(chóng)生長(zhǎng)狀況不同:

    1)上層培養(yǎng)液中,B型草履蟲(chóng)由于繁殖速度快,在數(shù)量和密度上占優(yōu)勢(shì),而A型草履蟲(chóng)由于在競(jìng)爭(zhēng)上失利,總數(shù)在不斷減少;

    2)中層與上層培養(yǎng)液密度相差不大;

    3)下層培養(yǎng)液中,A型草履蟲(chóng)相比上層數(shù)量略多。

    分析大概B型小草履蟲(chóng)對(duì)溶解氧更為敏感,喜歡溶解氧更為豐富的表層水面,而A型大草履蟲(chóng)在表層水面競(jìng)爭(zhēng)不過(guò)B型小草履蟲(chóng),但是在水底的環(huán)境下也能生存,因此,水底的A型大草履蟲(chóng)數(shù)目要多一些。

    根據(jù)如上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),我們得出結(jié)論:A型大草履蟲(chóng)和B型小草履蟲(chóng)在培養(yǎng)液上、中層生態(tài)位呈現(xiàn)明顯競(jìng)爭(zhēng)的種間關(guān)系,B型草履蟲(chóng)在競(jìng)爭(zhēng)中占優(yōu)勢(shì);在相對(duì)缺氧的培養(yǎng)液底層生態(tài)位,A型大草履蟲(chóng)占優(yōu)勢(shì)。

    6? 實(shí)驗(yàn)總結(jié)及展望

    本實(shí)驗(yàn)最初是青島市某校一個(gè)拓展型生態(tài)類(lèi)校本課程實(shí)驗(yàn),成功率極低,頭一天購(gòu)買(mǎi)的草履蟲(chóng),第二天下午做實(shí)驗(yàn)時(shí)基本找不到。為什么草履蟲(chóng)不見(jiàn)了?該課題小組正是在這種情況下成立的,課題小組曾頭腦風(fēng)暴猜測(cè)是不是購(gòu)買(mǎi)被欺騙、草履蟲(chóng)餓死、草履蟲(chóng)凍死,等等,之后課題小組成員進(jìn)行測(cè)試,終于發(fā)現(xiàn)草履蟲(chóng)對(duì)溶解氧的含量最為敏感。那么,怎樣增加和控制溶解氧含量呢?課題組試過(guò)很多方法,比如水循環(huán)泵,結(jié)果草履蟲(chóng)被激烈的水流沖死;放入水草進(jìn)行光合作用制造氧,也不成功,最后課題組覺(jué)得磁力攪拌器不錯(cuò),將攪拌速率調(diào)到低檔,對(duì)草履蟲(chóng)不構(gòu)成危害,又增加了水分子和空氣的接觸面積。隨之而來(lái)的問(wèn)題就是怎樣控制磁力攪拌器,課題組又嘗試了定時(shí)開(kāi)關(guān),Wi-Fi開(kāi)關(guān)等,最終有了現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)方案。

    課題組研究性學(xué)習(xí)小組找到北京綠刻度公司定制了這款設(shè)備,不但成功地證明高斯假說(shuō)成立,還創(chuàng)新性地在實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用了溶解氧傳感器—物聯(lián)網(wǎng)技術(shù),嚴(yán)格控制了培養(yǎng)液中溶解氧濃度,保證實(shí)驗(yàn)材料草履蟲(chóng)的生存條件,體現(xiàn)生物相同生態(tài)位間的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系,使實(shí)驗(yàn)結(jié)論更加科學(xué)和嚴(yán)謹(jǐn)。

    課題小組未來(lái)會(huì)繼續(xù)培養(yǎng)更多不同品種的草履蟲(chóng),并進(jìn)行種間關(guān)系實(shí)驗(yàn),也將得到更多草履蟲(chóng)之間競(jìng)爭(zhēng)的數(shù)據(jù),使得實(shí)驗(yàn)更為完善有說(shuō)服力。

    7? 參考文獻(xiàn)

    [1] 溫青,趙占良.普通高中教科書(shū)生物學(xué)選擇性必修2 生物與環(huán)境[M].北京:人民教育出版社,2020.

    [2] 楊革.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程[M]北京:科學(xué)出版社,2020.

    [3] 陳坤.關(guān)于草履蟲(chóng)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新設(shè)計(jì)[J].實(shí)驗(yàn)教學(xué)與儀器,2020,37(Z1):73-75.

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