不同產(chǎn)地百香果黃果主要功能成分含量及抗氧化活性比較

徐青，楊江，李安定

（貴州科學(xué)院生物研究所，貴州貴陽(yáng) 550009）

百香果（Passiflora edulisSims.）系西番蓮科（Passifloraceae）西番蓮屬（Passiflora）的草質(zhì)藤本植物，易生于海拔180～1 900 m的熱帶和亞熱帶山谷叢林，原產(chǎn)地為巴西，在我國(guó)主要分布廣東、廣西、海南、福建、云南、臺(tái)灣等地。根據(jù)其形狀和質(zhì)量，市售百香果可分為百香果黃果（Passiflora edulisF.flavicarpa）、百香果紫果（Passiflora edulisF.edulis）及黃果和紫果的雜交種。百香果為果漿型水果，其果漿為黃色，含有多種功能成分，不僅營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，還具有多種藥用功效，有“果汁之王”的美稱，是典型的藥食同源的高品質(zhì)水果，在民間廣泛用于治療焦慮癥、哮喘、支氣管炎、尿路感染、糖尿病等，受到研究者們的廣泛關(guān)注[1]。

目前，國(guó)內(nèi)外有關(guān)百香果的研究主要集中在栽培技術(shù)、果汁營(yíng)養(yǎng)成分分析、果肉礦物質(zhì)、揮發(fā)性和香氣成分分析、功能性成分提取等方面，而對(duì)不同產(chǎn)地百香果功能性成分評(píng)價(jià)及藥理活性研究鮮有報(bào)道。研究表明：百香果的品質(zhì)受土壤、氣候等地域條件影響較為顯著[2-7]。貴州地處中國(guó)西南腹地，土壤和農(nóng)業(yè)氣候條件多樣，自2016年以來(lái)，貴州開(kāi)始了百香果的規(guī)模化、商品化種植，目前已達(dá)到近20萬(wàn)畝，但百香果種植的優(yōu)勢(shì)品種與產(chǎn)地選擇還未能得到合理統(tǒng)籌規(guī)劃，可能會(huì)帶來(lái)百香果種植泛濫的問(wèn)題，影響百香果資源下游中高端產(chǎn)品的研究與開(kāi)發(fā)。基于貴州百香果生長(zhǎng)環(huán)境多樣，品質(zhì)參差不齊，缺乏基于功能成分的綜合質(zhì)量評(píng)價(jià)[8]。本研究以貴州5個(gè)栽培產(chǎn)地的百香果黃果為研究對(duì)象，對(duì)百香果黃果果汁的主要功能成分（Vc、總黃酮、總多酚、總多糖和總花青苷）的含量和體外抗氧化活性（DPPH自由基、羥基自由基和ABTS+自由基的清除作用）進(jìn)行研究，以期明確百香果黃果在不同產(chǎn)地的主要活性成分含量和抗氧化性能的差異，為百香果的種植及產(chǎn)品開(kāi)發(fā)利用奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

百香果黃果分別采自貴州省東南部的榕江縣（RJ）、從江縣（CJ），貴州省南部的羅甸縣（LD）、平塘縣（PT）、望謨縣（WM），采摘時(shí)間均為同年9月上旬。品種均為芭樂(lè)黃金果，一年生植株、采用同一管理?xiàng)l件。5個(gè)產(chǎn)地的地理氣候特征如表1。

表1 百香果黃果采集產(chǎn)地地理氣候特征Table 1 Geographical and climatic characteristics of yellow passion fruit

化學(xué)試劑：L-抗壞血酸、沒(méi)食子酸、蘆丁對(duì)照品均購(gòu)自上海麥克林公司，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥99%；甲醇為Fisher色譜純；水為實(shí)驗(yàn)室自制蒸餾水；其余試劑均為分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

ME104/02分析天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；KQ3200DE型數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；Agilent1260高效液相色譜儀，德國(guó)安捷倫科技（中國(guó)）有限公司；UV-1760型紫外分光光度計(jì)，日本SHIMADZU公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品的制備

挑選無(wú)機(jī)械損傷、大小均勻且成熟度一致的百香果黃果鮮果，清潔晾干，除去果皮和果籽，對(duì)果肉進(jìn)行均漿，離心，過(guò)濾得果汁，稱重。每個(gè)平行10個(gè)百香果，果汁混合均勻后-20 ℃保存，備用。

1.3.2 功能成分測(cè)定

1.3.2.1 維生素C（Vc）含量測(cè)定

采用HPLC法，準(zhǔn)確稱取Vc對(duì)照品，加水制成0.013～0.21 mg/mL的系列質(zhì)量濃度的對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)溶液。取適量果汁樣品，稀釋一定倍數(shù)后得到供試品溶液，過(guò)0.45 μm微孔濾膜。色譜條件：色譜柱為Agilent SB-C18柱（250 mm×4.60 mm，5 μm），流動(dòng)相為甲醇-0.10%磷酸溶液（5:95），流速為1.00 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為242 nm，柱溫為30 ℃，進(jìn)樣量為1.00 μL。記錄Vc的色譜峰面積，以Vc色譜峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)Vc濃度作圖，繪制Vc標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：Y=2 157.784 33X-7.401 38，R2=0.999 44。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算百香果果汁中Vc的含量，結(jié)果表示為：（mg VcE/100 g）（VcE：Vitamin C equivalent，維生素C當(dāng)量）[9]。

1.3.2.2 總黃酮的含量測(cè)定

采用亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色法，準(zhǔn)確稱取蘆丁對(duì)照品，加水制成0.032～0.51 mg/mL的系列濃度對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取蘆丁對(duì)照品溶液及百香果果汁稀釋樣品6 mL，置于25 mL容量瓶中，加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%亞硝酸鈉溶液1 mL，搖勻，靜置6 min，加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%硝酸鋁溶液1 mL，搖勻，靜置6 min，再加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%氫氧化鈉溶液10 mL，用水稀釋至刻度，放置20 min，于499 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo)，蘆丁含量為縱坐標(biāo)繪制黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：Y=1.474 9X+0.000 9，R2=0.999 8。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品吸光度，計(jì)算百香果果汁中總黃酮含量，結(jié)果表示為：（mg RE/100 g）（RE：Rutin Equivalent，蘆丁當(dāng)量）[9]。

1.3.2.3 總多酚的含量測(cè)定

采用福林-酚比色法，準(zhǔn)確稱取沒(méi)食子酸對(duì)照品，加水制成0.006 3～0.20 mg/mL的系列濃度的對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液及百香果果汁稀釋樣品0.50 mL，分別置于10 mL量瓶中，加入稀釋10倍（體積比）的福林酚試劑2.50 mL，反應(yīng)5 min，加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10% Na2CO3溶液2 mL，加水定容，混勻，室溫避光反應(yīng)60 min，于760 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo)，沒(méi)食子酸含量為縱坐標(biāo)繪制多酚標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：Y=6.095 1X+0.014 2，R2=0.999 8。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品吸光度，計(jì)算百香果果汁中總多酚含量，結(jié)果表示為：（mg GAE/100 g）（GAE：Gallicacide Equivalent，沒(méi)食子酸當(dāng)量）[10]。

1.3.2.4 總多糖的含量測(cè)定

采用苯酚-硫酸法，準(zhǔn)確稱取葡萄糖對(duì)照品，加水制成0.010～0.080 mg/mL的系列濃度的對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)溶液。準(zhǔn)確吸取葡萄糖對(duì)照品溶液及百香果果汁稀釋樣品1 mL，分別依次加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6%的苯酚溶液1 mL和濃硫酸5 mL，靜置10 min，混勻，放置20 min后，測(cè)定490 nm波長(zhǎng)下的吸光度。以吸光度為橫坐標(biāo)，多糖含量為縱坐標(biāo)繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：Y=9.624 4X+0.052 6，R2=0.999 1。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品吸光度，計(jì)算百香果果汁中總多糖含量，結(jié)果表示為：（mg GE/g）（GE：Glucose Equivalent，葡萄糖當(dāng)量）[11]。

1.3.2.5 總花青苷的含量測(cè)定

采用pH示差法，取果汁樣品2 mL加pH值1.00 KCl緩沖液或pH值4.50的醋酸鈉緩沖液稀釋定容到10 mL容量瓶中，分別以520 nm和700 nm為吸收波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度，以矢車菊-3-葡萄糖苷表示總花青苷含量[12]。

式中：

TA——總花青苷含量（mg CyGE/100 g），表示100 g百香果果汁中花青苷總含量，（CyGE：Cy-3-Gluequivalent，矢車菊-3-葡萄糖苷當(dāng)量）；

A1.0——pH值1.0時(shí)花青苷的吸光度；

A4.5——pH值4.5時(shí)花青苷的吸光度；

V——提取液的總體積，mL；

N——稀釋倍數(shù)；

MW——矢車菊-3-葡萄糖苷（Cy-3-Glu）相對(duì)分子量（449.2）；

ε——Cy-3-Glu的消光系數(shù)（26 900）；

L——比色皿光路長(zhǎng)，cm；

m——樣品質(zhì)量，g。

1.3.3 抗氧化性能研究性能測(cè)定

1.3.3.1 DPPH自由基清除能力的測(cè)定

取0.10 mmol/L DPPH·-無(wú)水乙醇溶液，用無(wú)水乙醇做參比，掃波（200～700 nm），得到最大吸收波長(zhǎng)；用無(wú)水乙醇稀釋至Aλmax=1.20～1.30之間；將2 mL測(cè)試樣品溶液及2 mL DPPH·溶液加入到同一試管中，搖勻，室溫下黑暗處?kù)o置30 min后，以水為參比，測(cè)定其最大吸收波長(zhǎng)處吸光度As；同樣方法，測(cè)定空白對(duì)照的吸光度A0，樣品本底吸光度As0；以0.50 mg/mL抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照。利用下式（2）計(jì)算DPPH自由基清除率K（%）[11]。

式中：

K——DPPH自由基清除率，%；

As——樣品組最大吸收波長(zhǎng)處吸光度；

A0——空白對(duì)照的吸光度；

As0——樣品本底吸光度。

1.3.3.2 羥基自由基清除能力的測(cè)定

在比色管中依次加入1 mL 9 mmol/L的FeSO4溶液、1 mL 9 mmol/L的水楊酸溶液、1 mL樣液，充分混勻后，加入1 mL 8.80 mmol/L H2O2啟動(dòng)反應(yīng)，于37 ℃下反應(yīng)0.50 h，取上清液在510 nm處測(cè)得吸光值A(chǔ)s；同樣方法，測(cè)定空白對(duì)照的吸光度A0，樣品本底吸光度As0；以0.50 mg/mL抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照。按上式（2）計(jì)算羥基自由基的清除率K（%）[10]。

1.3.3.3 ABTS·清除能力的測(cè)定

首先，將7 mmol/L的ABTS+·的溶液和2.45 mmol/L過(guò)硫酸鉀溶液按1:1體積混合，4 ℃避光12 h后得藍(lán)綠色ABTS+·溶液，以水為參比，用蒸餾水稀釋至波長(zhǎng)734 nm下吸光值為0.70±0.020，得到7 mmol/L ABTS+·應(yīng)用液。之后，取4 mL ABTS+·應(yīng)用液，加入1 mL樣液，混勻后，室溫避光反應(yīng)10 min，以水為參比，于734 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度值A(chǔ)s；同樣方法，測(cè)定空白對(duì)照的吸光度A0，樣品本底吸光度As0；以1.00 mg/mL抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照。按上式（2）計(jì)算ABTS+自由基的清除率K（%）[9]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用外標(biāo)法，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算各指標(biāo)的含量。每個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行三個(gè)平行試驗(yàn)，每個(gè)平行試驗(yàn)進(jìn)行三個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)結(jié)果以均值±標(biāo)準(zhǔn)方差的方式表示，采用ANOVA進(jìn)行鄧肯式多重差異分析，以P＜0.05為顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同產(chǎn)地百香果黃果主要功能成分含量測(cè)定結(jié)果與分析

2.1.1 Vc含量

Vc是一種必需的水溶性微量營(yíng)養(yǎng)素，也是一種抗氧化劑。按照1.3.2.1的方法測(cè)得Vc對(duì)照品溶液及其標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1。

圖1 Vc標(biāo)準(zhǔn)品圖譜及其標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Spectrum of Vc standard and its standard curve

本研究共采集貴州5個(gè)產(chǎn)地百香果樣品5份，以相同方式處理，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，其色譜圖有一定的相似度，但色譜峰的強(qiáng)度有明顯差異，以各產(chǎn)地Vc的出峰面積為參量，利用Vc標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得不同產(chǎn)地百香果Vc含量如圖2所示。表明不同產(chǎn)地相同品種百香果Vc含量存在顯著差異，其中，黔東南從江（CJ）的百香果黃果果汁中Vc含量最高為192.79 mg/100 g，其次是黔南望謨（WM）為156.18 mg/100 g，而最低為羅甸（LD）果汁中Vc含量為74.85 mg/100 g。根據(jù)Ramful等[13]提出的分類標(biāo)準(zhǔn)，Vc含量大于50 mg/100 g為具有高Vc含量，而本文中Vc含量最低的羅甸（LD）樣品也要高于此標(biāo)準(zhǔn)，說(shuō)明貴州這5個(gè)地區(qū)產(chǎn)的百香果黃果具有高Vc含量。文獻(xiàn)報(bào)道，巴西卡里里地區(qū)的野生百香果（Passiflora glandulosaCav.）果肉中Vc最高含量為57.76 mg/100 g[14]，廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹(shù)研究所百香果種植基地種植的芭樂(lè)黃金果果汁中Vc的含量最高為25.40 mg/100 g[4]?？梢?jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道的Vc含量均小于貴州產(chǎn)的百香果果汁Vc含量（74.85～192.79 mg/100 g）。研究表明，Vc含量受氣候因素和植物種類的影響很大。相比生長(zhǎng)在黑暗中的植物，生長(zhǎng)在光照下的植物的Vc含量會(huì)增加。例如RGB LED燈照明的甘藍(lán)芽Vc含量最高[15]，紫外線照射可以使蠶豆芽的Vc含量增加78.3%等[16]。除了和光照有關(guān)，Vc含量還可能與氣溫、降雨量等有關(guān)。如表1所示，黔東南從江屬中亞熱帶溫暖類型氣候，靠近赤道，年均溫度適中，年降雨量較低，這種氣候、地理環(huán)境使得種植在該地的百香果具有高的Vc含量。

圖2 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中Vc含量Fig.2 Vc content in yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou

2.1.2 總黃酮含量

黃酮類化合物廣泛存在于各種植物中，具有豐富的生物活性。成熟果實(shí)中黃酮類化合物的最終濃度取決于黃酮類化合物合成、膜轉(zhuǎn)運(yùn)和降解或利用的平衡[17]。對(duì)貴州5個(gè)產(chǎn)地的5份百香果果汁總黃酮進(jìn)行了測(cè)定。

由圖3可知，不同產(chǎn)地百香果黃果總黃酮含量具有一定差異（P＜0.05），含量由高到低依次是榕江（RJ）＞從江（CJ）＞羅甸（LD）＞平塘（PT）＞望謨（WM）?？梢钥闯銮瓥|南地區(qū)從江（CJ）、榕江（RJ）產(chǎn)的百香果總黃酮含量（49.30～51.85 mg/100 g）要高于黔南地區(qū)羅甸（LD）、平塘（PT）、望謨（WM）產(chǎn)的百香果總黃酮含量（16.06～22.97 mg/100 g）。研究表明，植物中的黃酮含量受環(huán)境影響很大。例如Su等[18]研究發(fā)現(xiàn)低溫對(duì)葉片總黃酮的積累有顯著的積極影響，Sun等[19]報(bào)道大豆種子中的黃酮類化合物與降水量呈負(fù)相關(guān)，與日照時(shí)數(shù)呈正相關(guān)，Nascimento等[20]發(fā)現(xiàn)UV-B輻射可提高落地生根（Kalanchoe pinnata）葉提取物的總黃酮含量，而不影響提取物的抗氧化活性或產(chǎn)率。本研究結(jié)果（圖3）與這些研究一致，即較低的溫度、較少的降水、更多的日照時(shí)間和更多的UV-B輻射將增加總黃酮含量。

圖3 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中總黃酮含量Fig.3 Contents of total flavonoids in yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou

2.1.3 總多酚含量

對(duì)貴州5個(gè)產(chǎn)地的5份百香果果汁總多酚進(jìn)行測(cè)定，如圖4所示，不同產(chǎn)地百香果黃果總多酚含量存在一定差異（P＜0.05），其中，黔東南從江縣（CJ）的百香果黃果中總多酚含量最高為86.92 mg/100 g，其次是其鄰縣榕江縣（RJ）的為83.38 mg/100 g，接下來(lái)是黔南地區(qū)依次為望謨縣（WM）、平塘縣（PT）、羅甸縣（LD）。說(shuō)明黔東南地區(qū)產(chǎn)的百香果總多酚含量約85.15 mg/100 g總體高于黔南地區(qū)的（61.32～81.33 mg/100 g）。

圖4 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中總多酚含量Fig.4 Contents of total polyphenols in yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou

酚類化合物具有抗氧化性能，能夠清除活性氧中間體而不引發(fā)進(jìn)一步的氧化反應(yīng)，對(duì)人體健康有益。然而，每種植物的酚類化合物含量會(huì)受多種因素的影響，如季節(jié)、氣候條件、物種等。研究發(fā)現(xiàn)，這些因素可以在植物中以不同的方式表達(dá)，例如，在不同氣候條件下采集的同一植物中，觀察到酚含量存在差異[21]；在來(lái)自不同物種的同一植物中，觀察到酚含量存在差異[22]。本研究的5個(gè)產(chǎn)地百香果黃果果汁中多酚的含量在61.32～86.92 mg/100 g范圍內(nèi)（圖4），比來(lái)自巴西卡里里地區(qū)的野生百香果（Passiflora glandulosaCav.）的多酚含量（20.55 mg/100 g果肉）高兩倍以上[13]。5個(gè)產(chǎn)地百香果果汁中多酚的含量總體變化趨勢(shì)與黃酮含量變化趨勢(shì)一致，即黔東南地區(qū)產(chǎn)的百香果多酚含量約85.15 mg/100 g總體高于黔南地區(qū)的，但也存在一定的差異。對(duì)比圖3和圖4，可知黃酮和多酚在百香果果汁里的積累受環(huán)境影響的因素還不完全一樣。例如，黔南地區(qū)的望謨比羅甸的年均溫度稍低、年降雨量更少、年日照更長(zhǎng)、紫外線更強(qiáng)（表1），望謨百香果的多酚含量比羅甸的高1.3倍。

2.1.4 總多糖含量

百香果的香味濃郁，不同品種的百香果甜味存在明顯差異，決定一個(gè)品種甜味和風(fēng)味的主要因素是它的含糖量。利用苯酚-硫酸反應(yīng)，測(cè)定了百香果中總多糖的含量在68.69～144.80 mg/g范圍內(nèi)（圖5）。

圖5 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中總多糖含量Fig.5 Polysaccharide content in yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou

由圖5可知，貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中總多糖含量總體較高，各地具有明顯差異（P＜0.05），其中，黔南羅甸縣（LD）的百香果黃果果汁中總多糖含量最高為144.80 mg/g，其次是黔東南從江縣（CJ）的為126.16 mg/g，而黔東南榕江縣（RJ）的百香果黃果果汁中總多糖含量最低為68.69 mg/g。Khan等[23]研究了不同甘蔗基因型的土壤養(yǎng)分和相關(guān)的根際細(xì)菌群落與糖含量的關(guān)系，結(jié)果表明，植物的糖含量受許多因素的影響，如土壤類型、植物營(yíng)養(yǎng)狀況、氣候因素和植物種類。本研究結(jié)果應(yīng)該是這些因素綜合影響的結(jié)果。對(duì)于土壤養(yǎng)分，Wu等[24]應(yīng)用水肥耦合措施，以氮肥劑量292 kg/hm2，鉀肥 146.55 kg/hm2和P2O5肥439.5 kg/hm2，水1 778.4 m3/hm2，可以獲得甘蔗的最大糖產(chǎn)量。

2.1.5 總花青苷含量

采用pH示差法測(cè)得貴州5個(gè)產(chǎn)地百香果果汁中總花青苷的含量如圖6所示，說(shuō)明貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中總花青苷含量總體相對(duì)較低，各地具有明顯差異（P＜0.05），其中，黔東南從江縣（CJ）的黃果果汁中總花青苷含量最高為1.23 mg/100 g，其次是黔東南榕江縣（RJ）的為1.09 mg/100 g，而黔南羅甸縣（LD）、望謨縣（WM）、平塘縣（PT）百香果果汁中總花青苷含量均較低。說(shuō)明黔東南地區(qū)產(chǎn)的百香果花青苷含量（1.09～1.23 mg/100 g）要顯著高于黔南地區(qū)的（0.12～0.31 mg/100 g）。這與上面總黃酮、總多酚含量趨勢(shì)相同。

圖6 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁中總花青苷含量Fig.6 Contents of total anthocyanins in yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou

花青苷廣泛存在于植物的花、果實(shí)、莖及葉中，具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎、改善糖尿病及保護(hù)心血管等功效[25]。研究表明，果實(shí)中花青苷的積累不僅受遺傳、品種、部位等因素的影響，還受環(huán)境因素的影響。例如，Shi等[26]研究得出，與百香果黃果果皮相比，百香果紫果果皮中的總花青苷含量豐富，在成熟后期可以達(dá)到1.00 mg/g。Mereles等[27]報(bào)道，在巴拉圭生長(zhǎng)的香蕉瓜（Sicana odorifera）果皮和果肉中的花青苷分別為19.70和2.64 mg/g。大量研究表明，花青苷的生物合成與溫度呈負(fù)相關(guān)[28,29]。本研究的5個(gè)地區(qū)百香果果汁中總花青苷的含量（圖6）存在顯著差異（P＜0.05），與溫度、降雨量、日照時(shí)間、紫外線強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)，應(yīng)該是這些因素共同作用的結(jié)果，還有待進(jìn)一步研究。

2.2 不同產(chǎn)地百香果黃果抗氧化性能測(cè)定結(jié)果與分析

2.2.1 對(duì)DPPH自由基的清除作用

按照1.3.3.1的方法測(cè)得百香果黃果果汁對(duì)DPPH自由基清除率如圖7所示。

圖7 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁對(duì)DPPH自由基的清除作用Fig.7 Scavenging effect of yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou on DPPH free radicals

由圖7可以看出，不同產(chǎn)地百香果黃果果汁對(duì)DPPH自由基的清除作用相差不大，除了黔南平塘縣（PT）百香果果汁對(duì)DPPH自由基的清除率為89.01%之外，其它產(chǎn)地的清除率在94.78%～97.03%之間，與0.50 mg/mL Vc清除DPPH自由基的能力（95.89%）相當(dāng)。由2.1測(cè)得的不同產(chǎn)地百香果主要功能成分含量結(jié)果可知，相比其它產(chǎn)地，平塘縣百香果果汁中的功能成分含量低，導(dǎo)致其DPPH自由基的清除率低。

2.2.2 對(duì)羥基自由基的清除作用

按照1.3.3.2的方法測(cè)得百香果黃果果汁對(duì)羥基自由基清除率如圖8所示。

圖8 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁對(duì)羥基自由基的清除作用Fig.8 Scavenging effect of yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou on OH free radicals

由圖8可見(jiàn)，不同產(chǎn)地百香果黃果果汁清除羥基自由基的能力相差不大，在96.30%～99.31%之間，與0.50 mg/mL Vc清除羥基自由基的能力（99.66%）接近。

2.2.3 對(duì)ABTS+自由基的清除作用

按照1.3.3.3的方法測(cè)得百香果黃果果汁對(duì)ABTS自由基清除率如圖9所示。

圖9 貴州不同產(chǎn)地百香果黃果果汁對(duì)ABTS+自由基的清除作用Fig.9 Scavenging effect of yellow passion fruit juice from different habitats in Guizhou on ABTS+ free radicals

由圖9可以看出，5個(gè)產(chǎn)地百香果黃果果汁對(duì)ABTS+自由基的清除能力相差不大，在89.14%～95.59%之間，與1.00 mg/mL Vc清除ABTS+自由基的能力（96.45%）相當(dāng)。

2.3 不同產(chǎn)地百香果黃果果汁功能成分與抗氧化活性相關(guān)性分析

采用SPSS 19.0軟件對(duì)百香果果汁在設(shè)計(jì)的3個(gè)抗氧化模型（DPPH·清除、·OH清除、ABTS+·清除）上表現(xiàn)出的抗氧化能力與5個(gè)功能成分（Vc、黃酮、多酚、多糖、花青苷）含量進(jìn)行了相關(guān)性分析，結(jié)果如表2所示。

表2 百香果黃果果汁功能成分與抗氧化活性相關(guān)性分析Table 2 Correlation analysis of functional components and antioxidant activity of yellow passion fruit juice

由表2可知，DPPH自由基清除效果與Vc含量、總黃酮含量和總花青苷含量相關(guān)性較大，而與總多酚含量和總多糖含量相關(guān)性較小。Lima-Neto等[14]發(fā)現(xiàn)，巴西卡里里地區(qū)的野生西番蓮果肉清除DPPH自由基的效率較低，且與多酚含量呈顯著負(fù)相關(guān)性（r=-0.74；P＜0.01）。OH自由基清除效果與Vc含量、總黃酮含量、總多酚含量和總花青苷含量相關(guān)性較大，而與總多糖含量呈負(fù)相關(guān)。ABTS自由基清除效果與總多糖含量相關(guān)性較大，而與其它功能成分呈負(fù)相關(guān)。

3 結(jié)論

通過(guò)對(duì)貴州不同栽培產(chǎn)地百香果黃果果汁中5種功能成分含量的測(cè)定分析，發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地百香果黃果功能成分含量存在較大的差異。黔東南從江縣（CJ）產(chǎn)的百香果黃果果汁中Vc、總多酚和總花青苷含量最高，黔東南榕江縣（RJ）產(chǎn)的百香果黃果果汁中總黃酮含量最高，黔南羅甸縣（LD）產(chǎn)的百香果黃果果汁中總多糖含量最高。總體來(lái)說(shuō)，黔東南地區(qū)（CJ、RJ）產(chǎn)的百香果果汁中總多酚、總黃酮、總花青苷含量比黔南地區(qū)（LD、PT、WM）的高，這可能與產(chǎn)地的氣候、年均氣溫、年降雨量、年日照情況、紫外線強(qiáng)度等有關(guān)，此外，可能還與土壤類型、植物營(yíng)養(yǎng)狀況等有關(guān)，有待進(jìn)一步分析研究。

不同產(chǎn)地同一品種的百香果黃果果汁具有不同的抗氧化活性，對(duì)DPPH自由基、羥基自由基、ABTS自由基都表現(xiàn)出強(qiáng)的清除能力，各產(chǎn)地差異不大。不同產(chǎn)地同一品種的百香果黃果果汁對(duì)DPPH自由基和羥基自由基的清除能力具有相同的趨勢(shì)，即黔東南地區(qū)（CJ、RJ）產(chǎn)的百香果黃果果汁對(duì)DPPH自由基和羥基自由基的清除能力比黔南地區(qū)（LD、PT、WM）的高，這可能與黔東南地區(qū)產(chǎn)的百香果黃果果汁中含有更高的功能成分（多酚、黃酮、花青苷）有關(guān)。相關(guān)性分析得出，百香果果汁的自由基清除性能不是本實(shí)驗(yàn)所測(cè)的某一種功能成分起作用，而是這些功能成分共同作用的結(jié)果。關(guān)于百香果黃果果汁中的其他功能成分還有待進(jìn)一步分析研究。

近年來(lái)，百香果因其功能成分豐富而深受消費(fèi)者喜愛(ài)，百香果產(chǎn)業(yè)在貴州也發(fā)展較快。本文首次對(duì)貴州百香果黃果主要功能成分及抗氧化活性進(jìn)行報(bào)道，可為優(yōu)良品種的選擇及大健康產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)、產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用提供參考，后續(xù)還將根據(jù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展需求進(jìn)一步深入研究。