抗酸染色法、蛋白芯片法、MGIT液體培養(yǎng)法三種檢測(cè)技術(shù)在肺結(jié)核中的診斷效能分析

安慶震

聊城市傳染病醫(yī)院結(jié)核科，山東聊城 252000

肺結(jié)核是臨床上常見(jiàn)的呼吸道傳染疾病，由結(jié)核分枝桿菌引發(fā)，病灶主要是肺組織、氣管和支氣管。在我國(guó)傳染疾病中，肺結(jié)核具有高傳染率和高病死率的特點(diǎn)，并呈逐年上升的趨勢(shì)，也是全球范圍內(nèi)十大死亡病因之一[1-2]。肺結(jié)核的易感人群主要為糖尿病患者、免疫力低下的老年人、艾滋病患者、營(yíng)養(yǎng)不良者等，因此應(yīng)定期參加結(jié)核病篩查[3]。該疾病的主要傳播途徑是呼吸道飛沫傳播，當(dāng)肺結(jié)核患者咳嗽和談話(huà)時(shí)，會(huì)把結(jié)核分枝桿菌傳播到空中，吸入患者有被感染的風(fēng)險(xiǎn)。肺結(jié)核的主要病因是結(jié)核分枝桿菌，而是否發(fā)病還與人體的免疫能力和結(jié)核桿菌的數(shù)量相關(guān)[4-5]。肺結(jié)核的早期沒(méi)有明顯癥狀，部分患者會(huì)出現(xiàn)全身發(fā)熱、咳嗽、咳痰或痰中帶血的現(xiàn)象，嚴(yán)重患者可能會(huì)伴隨結(jié)節(jié)性紅斑或角膜炎等，影響其生活質(zhì)量和工作生活，因此快速診斷肺結(jié)核患者顯得極為重要[6]。本研究選取2019年11月—2021年12月聊城市傳染病醫(yī)院結(jié)核科收治的80例疑似肺結(jié)核患者，比較抗酸染色法、蛋白芯片法、分枝桿菌生長(zhǎng)指示管（mycobacteria growth indicator tube, MGIT）液體培養(yǎng)法的診斷效能，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的80例疑似肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象，男42例，女38例；年齡18～73歲，平均（44.78±8.42）歲；結(jié)核分枝桿菌潛伏感染者16例，活動(dòng)肺結(jié)核患者18例，非活動(dòng)性肺結(jié)核患者20例。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：患者及家屬知曉本研究，并簽署知情同意書(shū)；溝通交流未出現(xiàn)障礙患者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：依從性較低，不能完成此次研究中相關(guān)評(píng)估患者；合并惡性腫瘤疾病患者；中途退出研究或檔案缺失患者。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)本來(lái)源和要求 標(biāo)本來(lái)源：80例疑似肺結(jié)核患者的痰標(biāo)本由結(jié)核科提供。標(biāo)本要求：晨間采集痰標(biāo)本，樣本量為3～6 mL；2～8℃的環(huán)境下保存，存放時(shí)間≤48 h。

1.3.2 檢測(cè)方法 ①抗酸染色法：將干燥后的涂片放置于染色架，滴入石碳酸紅染液后完全覆蓋在痰膜上，出現(xiàn)蒸汽后脫離火焰，靜置5 min，染色時(shí)要保持痰膜完全被染液蓋住，若染液不足可繼續(xù)添加，勿將染液沸騰；染色時(shí)間到后用流水沖去染色液體，擦干標(biāo)本上的水；在痰膜上滴入脫色劑完全覆蓋在痰膜上進(jìn)行脫色，脫色時(shí)間為3 min，流水洗去脫色液后至無(wú)可視紅色為止，流水洗去脫色液并擦干剩余的水后，滴入亞甲藍(lán)復(fù)染液，染色30 s，用流水洗去復(fù)染液，瀝干玻璃片上剩余水，待玻璃片干后放入油鏡下檢測(cè)。②蛋白芯片法：在芯片上標(biāo)記血液樣本的標(biāo)號(hào)，在芯片盒內(nèi)滴入200 μl試劑A，將痰膜完全浸濕，將準(zhǔn)備好的100 μl血清樣本加入窗口中后等待完全浸濕，再加入300 μl試劑B，待試劑B浸濕后再加入500 μl試劑C；待試劑完全浸濕后再滴入300 μl試劑D，芯片反應(yīng)30 min以?xún)?nèi)，將芯片盒里的小光盤(pán)放入識(shí)別儀器等待分析結(jié)果。結(jié)核桿菌包括 核分枝桿菌細(xì)胞壁成分脂阿拉伯甘露聚糖（lipoar abino mannan, LAM）、16 KDa、38 KDa共3種特異性抗體，若其中一項(xiàng)抗體為陽(yáng)性，則結(jié)果為陽(yáng)性。③MGIT液體培養(yǎng)法：將檢測(cè)卡編號(hào)備用，將血清樣本加入加樣孔中，同時(shí)加入100 μl稀釋液，等待3～5 min顯示結(jié)果，結(jié)果在15 min內(nèi)有效。

1.4 觀(guān)察指標(biāo)

①統(tǒng)計(jì)所有患者抗酸染色法、蛋白芯片法及MGIT液體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果，以臨床癥狀綜合分析和影像學(xué)為金標(biāo)準(zhǔn)。②對(duì)比3種方法檢測(cè)結(jié)果對(duì)肺結(jié)核疾病的診斷效能，靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性例數(shù)+假陰性例數(shù)）×100%；特異性=真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%；準(zhǔn)確率=（真陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（n）和率表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗酸染色法檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

80例疑似肺結(jié)核患者經(jīng)金標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)后確診為肺結(jié)核73例?？顾崛旧ㄔ\斷肺結(jié)核的靈敏度為79.45%（58/73），特異性為57.14%（4/7），準(zhǔn)確率為77.50%（62/80）。見(jiàn)表1。

表1 抗酸染色法檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（n）

2.2 蛋白芯片法檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的靈敏度為98.63%（72/73），特異性為100.00%（7/7），準(zhǔn)確率為98.75%（79/80）。見(jiàn)表2。

表2 蛋白芯片法檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（n）

2.3 MGIT液體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

MGIT液體培養(yǎng)法診斷肺結(jié)核的靈敏度為97.26%（71/73），特異性為85.71%（6/7），準(zhǔn)確率為96.25%（77/80）。見(jiàn)表3。

表3 MGIT液體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)（n）

2.4 3種檢查方式診斷效能比較

MGIT液體培養(yǎng)法與蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的靈敏度、特異性與準(zhǔn)確率均高于抗酸染色法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表4 抗酸染色法、蛋白芯片法及MGIT液體培養(yǎng)法對(duì)肺結(jié)核疾病的診斷效能比較（%）

3 討論

結(jié)核病是一種慢性傳染疾病，隨著人口增加，人口移民、艾滋病患者增多等因素，結(jié)核病的防治工作十分嚴(yán)峻，老年肺結(jié)核呈高病死率[7-8]。根據(jù)疾病類(lèi)型和病理特征，可將其分為結(jié)核分枝桿菌潛伏感染者、活動(dòng)肺結(jié)核患者及非活動(dòng)性肺結(jié)核，分枝桿菌潛伏感染者和非活動(dòng)性肺結(jié)核傳染性較低，而活動(dòng)肺結(jié)核患者具有較高的傳染性[9-10]。該疾病主要傳染源為確診患者痰中攜帶結(jié)核分枝桿菌，但感染菌者不一定會(huì)傳染他人，一般情況下，機(jī)體的免疫系統(tǒng)可以將部分結(jié)核分枝桿菌消滅，但仍有少量結(jié)核分枝桿菌存在體內(nèi)且處于休眠狀態(tài)，當(dāng)機(jī)體免疫力下降時(shí)，結(jié)核菌可能會(huì)開(kāi)始活躍[11-12]，因此及時(shí)診斷結(jié)核病癥顯得尤為重要。隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，對(duì)肺結(jié)核的診斷方法也在不斷提高，為肺結(jié)核尋找更為科學(xué)合理的檢測(cè)方法是不容忽視的。

研究結(jié)果顯示，以臨床癥狀評(píng)估及影像學(xué)方法檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，抗酸染色法診斷肺結(jié)核的靈敏度為79.45%，特異性為57.14%，準(zhǔn)確率為77.50%；蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的靈敏度為98.63%，特異性為100.00%，準(zhǔn)確率為98.75%；MGIT液體培養(yǎng)法診斷肺結(jié)核的靈敏度為97.26%，特異性為85.71%，準(zhǔn)確率為96.25%。MGIT液體培養(yǎng)法與蛋白芯片法診斷肺結(jié)核的靈敏度、特異性與準(zhǔn)確率相似（P＞0.05）；兩項(xiàng)檢測(cè)方式的準(zhǔn)確率均高于抗酸染色法（P＜0.05）。丁海霞等[13]在研究中選擇了180例疑似肺結(jié)核患者分別采用蛋白芯片法與抗酸染色法進(jìn)行檢測(cè)，研究中蛋白芯片法診斷靈敏度（93.44%）、特異性（93.28%）及準(zhǔn)確率（93.33%）均高于抗酸染色法的80.33%、88.24%、85.56%（P＜0.05），與本研究結(jié)果相似。抗酸染色法是目前診斷較快的檢測(cè)方法，具有簡(jiǎn)單、快速等優(yōu)點(diǎn)，但是陽(yáng)性檢出率較低，存在一定的診斷問(wèn)題。當(dāng)人體感染結(jié)核分枝桿菌時(shí)，免疫系統(tǒng)會(huì)產(chǎn)生抗體來(lái)抵御感染，蛋白芯片法則是一種通過(guò)微型芯片檢測(cè)多種蛋白質(zhì)結(jié)合情況的方法，這種檢測(cè)方法可以檢測(cè)多種抗體和蛋白質(zhì)的結(jié)合情況，從而提高診斷的準(zhǔn)確性和可靠性[13]。MGIT液體培養(yǎng)法在結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)應(yīng)用中具有檢出率高、檢查快、操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)便捷等優(yōu)點(diǎn)，其檢測(cè)結(jié)果基本不會(huì)受外界因素所影響，因此最終診斷結(jié)果較為可靠[14]。

綜上所述，蛋白芯片檢測(cè)肺結(jié)核病相較于抗酸染色法具有更高的靈敏度、特異性與準(zhǔn)確率，在肺結(jié)核患者的診斷中采用MGIT液體培養(yǎng)法、抗酸染色法、蛋白芯片法聯(lián)合檢測(cè)，可以提高準(zhǔn)確性，值得臨床推廣。