乳鐵蛋白對(duì)Dex模型小鼠腸道菌群調(diào)控研究

邱金玲　成一新　劉小凡　鄧陽　郭麗萍　齡南　任廣旭

摘 要：目的：探索乳鐵蛋白是否能夠調(diào)節(jié)Dex模型小鼠腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)。方法：選取40只SPF級(jí)C57BL/6小鼠，將小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（10只）與造模組（30只），經(jīng)過4周模型構(gòu)建，將造模組隨機(jī)分成DEX組（模型組，10只）、LF組（乳鐵組，10只）和LF+WP組（乳鐵+乳清組，10只），通過乳鐵和乳清連續(xù)干預(yù)3周后采集樣品進(jìn)行腸道菌群分析。結(jié)果：乳鐵蛋白能改變Dex模型小鼠腸道菌群，與DEX組相比，梭菌綱（Clostridia）、毛螺菌目（Lachnospirales）、顫螺旋菌目（Oscillospirales）、毛螺菌科（Lachnospiraceae）、普雷沃氏菌科（Prevotellaceae）的相對(duì)豐度升高；芽孢桿菌綱（Bacilli）、乳桿菌目（Lactobacillales）、丹毒絲菌目（Erysipelotrichales）以及乳桿菌科（Lactobacillaceae）相對(duì)豐度下降。結(jié)論：大劑量乳鐵蛋白能夠改變Dex小鼠腸道微生物結(jié)構(gòu)。

關(guān)鍵詞：乳鐵蛋白；乳清蛋白；16s rDNA；腸道微生物

肌肉萎縮已成為世界上最普遍的健康問題之一，主要表現(xiàn)為肌肉質(zhì)量和力量的喪失[1]，其發(fā)生主要與蛋白質(zhì)合成、分解代謝障礙有關(guān)。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)降解的速度大于合成的速度時(shí)就會(huì)發(fā)生肌肉萎縮，該疾病除了對(duì)健康造成破壞性影響外，嚴(yán)重時(shí)可帶來生命危險(xiǎn)。其中，以地塞米松（Dex）為代表的糖皮質(zhì)激素所引發(fā)的肌肉萎縮較為迅速和嚴(yán)重[2]，此外，已有文獻(xiàn)報(bào)道，Dex能夠改善腸道微生物組成結(jié)構(gòu)。研究發(fā)現(xiàn)，腸道微生物在肌肉萎縮調(diào)控中發(fā)揮著重要作用[3]。因此，調(diào)整腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)能夠?yàn)楦纳艱ex型骨骼肌狀態(tài)提供可能。

牛奶作為優(yōu)質(zhì)的食物資源可為肌肉合成提供必需的原料供給。乳清蛋白作為牛奶中的主要蛋白質(zhì)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用在增肌領(lǐng)域，但是作為牛奶中的功能性成分乳鐵蛋白是否能夠有相應(yīng)的作用鮮有報(bào)道。目前，關(guān)于乳鐵蛋白的研究多集中在抗菌[4]、抗炎、免疫調(diào)節(jié)特性[5]、腸道屏障保護(hù)等方面。研究發(fā)現(xiàn)，乳鐵可以通過調(diào)節(jié)小鼠腸道微生物緩解脫氧雪腐鐮刀菌烯醇誘導(dǎo)的腸道功能障礙[6]。此外，口服乳鐵蛋白可以改善健康嬰兒[7]和壞死性小腸結(jié)腸嬰兒[8]的腸道微生物結(jié)構(gòu)，這些研究提示乳鐵蛋白可能改善腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)，但乳鐵蛋白是否可以改善Dex造成的菌群紊亂尚無研究報(bào)道。因此，為探究乳鐵蛋白是否能改善Dex造成的腸道微生態(tài)紊亂，本研究通過構(gòu)建Dex模型小鼠，以大劑量乳鐵蛋白進(jìn)行營養(yǎng)干預(yù)，并以乳清蛋白聯(lián)合灌胃處理作為陽性對(duì)照，評(píng)估其對(duì)Dex小鼠腸道組成結(jié)構(gòu)的影響，為未來功能性食品的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

Dex，購自索萊寶生物科技有限公司（規(guī)格為100 mg），將Dex粉末溶于2 mL二甲基亞砜（DMSO），用生理鹽水稀釋至所需濃度后腹腔注射。乳清蛋白（規(guī)格為250 g）、乳鐵蛋白（規(guī)格為10 g），購自源葉生物科技有限公司，一組為0.4 g乳鐵蛋白粉末用純水定容至10 mL進(jìn)行灌胃，另一組為0.2 g乳鐵和1.5 g乳清蛋白粉末混合用純水定容至10 mL灌胃。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

40只6周齡雄性C57BL/6、SPF級(jí)小鼠，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技有限公司，體重均一（19～22 g）。所有動(dòng)物均飼養(yǎng)于北京理工大學(xué)SPF級(jí)動(dòng)物房。小鼠飼養(yǎng)在通風(fēng)潔凈的動(dòng)物室內(nèi)，室溫18～23℃，相對(duì)濕度45%～55%，光照節(jié)律12 h/12 h，控制自然飲食。

1.3 方法

動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，控制自然飲食。適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后，隨機(jī)將小鼠分成2組：（1）對(duì)照組10只，間隔1天腹腔注射生理鹽水（0.9%）。（2）造模組30只，間隔1天腹腔注射地塞米松（25 mg/kg），共注射4周。造模成功之后，10只對(duì)照組小鼠仍正常喂養(yǎng)，將造模組30只小鼠分為3組：（1）DEX組；（2）LF組；（3）LF+WP組，分別給予地塞米松腹腔注射（25 mg/kg）、乳鐵蛋白灌胃（40 mg/mL）、乳鐵蛋白、乳清蛋白（0.17 g/mL）混合灌胃，每天1次，在持續(xù)灌胃3周后采集的所有糞便樣本，立即儲(chǔ)存 -80℃冰箱直至分析。

1.4 體重、抓力、采食量的測量

每周于同一時(shí)間進(jìn)行抓力、采食量和體重檢測，記錄至干預(yù)結(jié)束。用電子天平稱量體重和采食量。使用抓力儀測定小鼠的抓力，抓住小鼠尾巴，使其前肢能夠抓住金屬網(wǎng)，然后輕輕地把小鼠向后拉，直到它們松開網(wǎng)格，記錄數(shù)據(jù)。

1.5 腸道微生物多樣性檢測

干預(yù)結(jié)束后，對(duì)最后一批糞便采用16s rDNA測序技術(shù)對(duì)腸道微生物的多樣性進(jìn)行檢測。根據(jù)說明提取樣品中總DNA，完成基因組DNA抽提后，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，使用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測擴(kuò)增目的條帶大小，并用Agencourt AMPure XP核酸純化試劑盒純化。用上游引物序列：5-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3；下游引物序列：5-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3，對(duì)16S rDNA的V3 ～ V4可變區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增程序：94℃預(yù)變性5 min、94℃變性30 s、50℃退火30 s、72℃延伸60 s，30個(gè)循環(huán)后再72℃延伸7 min。所有測序均由北京奧維森基因科技有限公司完成。

1.6 測序數(shù)據(jù)處理與分析

原始數(shù)據(jù)下機(jī)結(jié)果以Fastq格式存儲(chǔ)，對(duì)測得的Fastq數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)控處理，利用Flash、Pear軟件對(duì)兩端序列進(jìn)行拼接處理，進(jìn)一步去除Fasta序列的嵌合體和不合要求短序列，獲得優(yōu)質(zhì)Fastq數(shù)據(jù)。然后去除barcode和primer并拼接后得到raw_tags，進(jìn)一步去除嵌合體、短序列后得到clean_tags。將clean_tags用uparse聚類生成操作分類單元（OTUs），對(duì)97%相似水平下的OTU進(jìn)行生物信息統(tǒng)計(jì)分析。通過分析稀釋曲線判斷測序深度和合理性。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，數(shù)據(jù)用（平均值±標(biāo)注差）表示，P<0.05表示差異顯著，P>0.05表示差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 干預(yù)完成后各組指標(biāo)的變化

小鼠在適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后，除對(duì)照組外，其余小鼠腹腔注射地塞米松進(jìn)行肌肉萎縮模型構(gòu)建，連續(xù)注射4周后，小鼠肌肉萎縮模型構(gòu)建成功。對(duì)其進(jìn)行不同的處理，分別用Dex、乳鐵蛋白、乳鐵蛋白+乳清蛋白進(jìn)行干預(yù)，連續(xù)3周。從表1看出，干預(yù)完成后LF組的采食量、體重、抓力均顯著低于對(duì)照組（P<0.05），與DEX組相比，LF+WP組的采食量、體重、抓力無顯著差異（P>0.05）。

2.2 各組有效數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及優(yōu)質(zhì)序列長度分布

利用高通量測序獲得對(duì)照組、DEX組、LF組、LF+WP組腸道微生物的序列，其中，LF+WP組樣品得到的clean_tags最少（705 834條），對(duì)照組最多（2 035 511條）。各組一共獲得4 753 212條raw_tags，經(jīng)拼接、過濾后產(chǎn)生4 586 412條clean_tags，有效序列所占比例為96.5%，由此看出樣品的測序準(zhǔn)確度較好（表2）。

如圖1所示，經(jīng)過數(shù)據(jù)預(yù)處理最終得到的優(yōu)質(zhì)序列大多集中在400 ～ 420和420 ～ 440之間，少量的集中在260 ～ 320、320 ～ 360、360 ～ 380、440 ～ 480、480 ～ 500，而0 ～ 200、200 ～ 260、520 ～ 540、540 ～ 560、560 ～ 600之間為0。

2.3 稀釋性曲線

不同測序數(shù)據(jù)量樣品的物種豐富度可以通過稀釋曲線得到，也可以用來解釋樣品測序數(shù)據(jù)是否合理。由圖2顯示，當(dāng)測序深度達(dá)到28 000 reads時(shí)，樣品的稀釋曲線趨于平滑，說明本實(shí)驗(yàn)的測序結(jié)果能較好地反映當(dāng)前所有樣本中所包含的多樣性且測序數(shù)據(jù)合理。

2.4 各組間綱、目水平下的腸道微生物組成

由圖3可知，在綱水平上，擬桿菌綱（Bacteroidia）、梭菌綱（Clostridia）、芽孢桿菌綱（Bacilli）是四組共有的優(yōu)勢菌，占比達(dá)到了90%。與對(duì)照組相比，DEX組、LF組、WP+LF組中的擬桿菌綱（Bacteroidia）相對(duì)豐度呈顯著下降的趨勢，由原來的62.9%下降至32.2%、38.4%、40.0%；而梭菌綱（Clostridia）在DEX組的相對(duì)豐度變化不大，但在LF組和LF+WP組中顯著上升；芽孢桿菌（Bacilli）在DEX組中呈顯著上升的趨勢，從10.6%（對(duì)照組）上升到30.9%（DEX組），經(jīng)過乳鐵和乳鐵+乳清蛋白干預(yù)后，與DEX組相比顯著下降，下降至10%（LF組）和14.5%（LF+WP組）。

在目水平上，DEX組、LF組和LF+WP組與對(duì)照組小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)組成無較大差異，由圖4可知，與對(duì)照組相比，在DEX組、LF組、LF+WP組中的擬桿菌目（Bacteroidales）相對(duì)豐度降低，所占比例從62.9%（對(duì)照組）下降到32.2%（DEX組）、38.4%（LF組）、43.1%（LF+WP組）；而Lachnospirales相對(duì)豐度增加，所占比例從13.6（對(duì)照組）上升到21.3%（DEX組）、32.3%（LF組）、28.4%（LF+WP組）。與對(duì)照組相比，乳桿菌目（Lactobacillales）在DEX組中顯著上升，經(jīng)過乳鐵蛋白干預(yù)后，在LF組和LF+WP組顯著下降。

2.5 各組間科、種水平下的腸道微生物組成

由圖5可知，在科水平上，對(duì)照組中相對(duì)豐度最高的是鼠桿狀菌科（Muribaculaceae），其次是毛螺菌科（Lachnospiraceae）。與對(duì)照組相比，鼠桿狀菌科（Muribaculaceae）的相對(duì)豐度顯著下降，各組所占比例從56.8%（對(duì)照組）下降至25.4%（DEX組）、25.1%（LF組）、30.7%（LF+WP組）；毛螺菌科（Lachnospiraceae）的相對(duì)豐度呈上升的趨勢，所占比例從13.6%（對(duì)照組）上升至21.3%（DEX組）、32.2%（LF組）、28.4%（LF+WP組）。與DEX組相比，毛螺菌科（Lachnospiraceae）在LF組和LF+WP組中的相對(duì)豐度呈上升的趨勢，而乳桿菌科（Lactobacillaceae）的相對(duì)表達(dá)豐度顯著下降。與對(duì)照組相比，乳鐵蛋白顯著提高了腸道中的普雷沃氏菌科（Prevotellaceae）相對(duì)豐度，顯著降低了丹毒絲菌科（Erysipelotrichaceae）的相對(duì)豐度。

各組小鼠腸道微生物組成在種水平上的相對(duì)豐度如圖6所示，各組中未分類的菌達(dá)到了67%～87%。與對(duì)照組相比，Lactobacillus_murinus_DSM_20452_NBRC_14221在DEX組呈顯著上升的趨勢，在LF組和LF+WP組中呈現(xiàn)顯著下降的趨勢。與對(duì)照組相比，DEX組中的Lactobacillus_acidophilus_CFH呈上升趨勢，經(jīng)過乳鐵蛋白干預(yù)后，在LF組和LF+WP組中下降。

3 討論

肌肉在全身代謝中起著核心作用，在許多慢性疾病的起源和預(yù)防中起關(guān)鍵作用。小鼠腸道是營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收和機(jī)體免疫的器官，越來越多的證據(jù)表明，腸道微生物在肌肉相關(guān)疾病的發(fā)展中起著重要作用。在本研究中，給C57BL/6小鼠腹腔注射地塞米松以誘導(dǎo)肌肉萎縮，用乳鐵蛋白進(jìn)行干預(yù)，通過從各個(gè)水平對(duì)各組間的腸道內(nèi)容物物種菌群的組成分析發(fā)現(xiàn)，乳鐵蛋白干預(yù)能夠改變小鼠腸道菌群，同時(shí)會(huì)增加部分有益菌。

在綱水平上，與DEX組相比，LF組梭菌綱（Clostridia）相對(duì)表達(dá)豐度上升，梭菌綱（Clostridia）中的許多細(xì)菌對(duì)人類和其他生物具有益處，可以幫助人體消化、保護(hù)免疫系統(tǒng)，同時(shí)產(chǎn)生有益物質(zhì)，是人體必需的微生物之一。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)地塞米松處理會(huì)導(dǎo)致擬桿菌綱（Bacteroidia）的相對(duì)豐度下降，而經(jīng)過乳鐵蛋白干預(yù)后，發(fā)現(xiàn)其豐度值呈上升趨勢。研究表明擬桿菌屬具有廣泛的糖解潛力，可以產(chǎn)生短鏈脂肪酸，促進(jìn)小鼠對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，能夠維持腸道穩(wěn)態(tài)，促進(jìn)宿主腸道健康[9]。在目水平上，乳鐵蛋白干預(yù)能夠提高小鼠菌群中擬桿菌目的相對(duì)豐度[10]，與趙方舟等對(duì)哺乳仔豬結(jié)果一致。在科水平上，與DEX組相比，乳鐵蛋白干預(yù)顯著提高了腸道中的普雷沃氏菌科（Prevotellaceae）和乳桿菌科（Lactobacillaceae）相對(duì)豐度，同時(shí)降低了丹毒絲菌科（Erysipelotrichaceae）的相對(duì)豐度。普雷沃氏菌科（Prevotellaceae）能夠產(chǎn)生一些有益的代謝產(chǎn)物如短鏈脂肪酸，對(duì)腸粘膜屏障起到保護(hù)作用[11]。Gopal等[12]研究發(fā)現(xiàn)，乳桿菌屬（Lactobacilli）作為益生菌，具有抑制致病菌株侵襲的能力，免受腸道病原體的侵害。

此外，還觀察到大劑量的乳鐵沖擊會(huì)造成小鼠體重、采食量顯著下降（P<0.05），小鼠糞便較少且堅(jiān)硬干結(jié)。乳鐵蛋白在牛奶中含量較少，在消化過程中少量主要發(fā)揮炎癥調(diào)控作用，大劑量的乳鐵蛋白干預(yù)產(chǎn)生的菌可能會(huì)引發(fā)便秘。研究發(fā)現(xiàn)顫螺菌屬（Oscillospira）能產(chǎn)生丁酸鹽等短鏈脂肪酸，被列為下一代益生菌的候選者[13]，其與肥胖、消瘦、膽結(jié)石和慢性便秘、炎癥性疾病等[14]相關(guān)。一項(xiàng)研究表明，較高豐度的顫螺菌屬（Oscillospira）與便秘呈正相關(guān)[15]。另一項(xiàng)針對(duì)歐洲成年人腸道微生物群和糞便軟硬度的研究表明，顫螺菌屬（Oscillospira）豐度值與較硬的糞便呈正相關(guān)，與稀便呈負(fù)相關(guān)[16]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。研究發(fā)現(xiàn)，雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）能夠產(chǎn)生乳酸和乙酸，降低結(jié)腸中的pH值，較低的pH可以刺激蠕動(dòng)并減少結(jié)腸轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間，從而有助于緩解便秘[17]。

4 結(jié)論

綜上所述，乳鐵蛋白能夠改變Dex模型小鼠的腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)，同時(shí)會(huì)增加部分有益菌，包括梭菌綱（Clostridia）、擬桿菌綱（Bacteroidia）、乳桿菌目（Lactobacillales）、乳桿菌科（Lactobacillaceae）、普雷沃氏菌科（Prevotellaceae）。

參考文獻(xiàn)

[1]Cruz-Jentoft A J，Bahat G，Bauer J，et al. Sarcopenia：revised European consensus on definition and diagnosis [J].Age Ageing，2019，48（1）：16-31.

[2]LI J X，Cummins C L. Fresh insights into glucocorticoid-induced diabetes mellitus and new therapeutic directions [J].Nat Rev Endocrinol，2022，18（9）：540-557.

[3]REN G，ZHANG J，LI M，et al. Gut microbiota composition influences outcomes of skeletal muscle nutritional intervention via blended protein supplementation in posttransplant patients with hematological malignancies [J].Clin Nutr，2021，40（1）：94-102.

[4]Valenti P，Antonini G. Lactoferrin：an important host defence against microbial and viral attack [J].Cell Mol Life Sci，2005，62（22）：2576-2587.

[5]YAO Q，LI H，F(xiàn)AN L，et al. The combination of lactoferrin and linolenic acid inhibits colorectal tumor growth through activating AMPK/JNK-related apoptosis pathway [J].PeerJ，2021，9：e11072.

[6]HU P，ZONG Q，ZHAO Y，et al. Lactoferrin Attenuates Intestinal Barrier Dysfunction and Inflammation by Modulating the MAPK Pathway and Gut Microbes in Mice [J].The Journal of Nutrition，2022，152（11）：2451-2460.

[7]Roberts A K，Chierici R，Sawatzki G，et al. Supplementation of an adapted formula with bovine lactoferrin：1. Effect on the infant faecal flora [J].Acta Paediatr，1992，81（2）：119-124.

[8]Vongbhavit K，Underwood M A. Prevention of Necrotizing Enterocolitis Through Manipulation of the Intestinal Microbiota of the Premature Infant [J].Clin Ther，2016，38（4）：716-732.

[9]HE J，GUO H，ZHENG W，et al. Heat stress affects fecal microbial and metabolic alterations of primiparous sows during late gestation [J].J Anim Sci Biotechnol，2019，10：84.

[10]趙方舟，胡平，汪晶，等. 早期乳鐵蛋白干預(yù)對(duì)哺乳仔豬盲腸菌群結(jié)構(gòu)、短鏈脂肪酸含量及黏膜炎癥因子水平的影響 [J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2021，44（1）：151-159.

[11]Yachida S，Mizutani S，Shiroma H，et al. Metagenomic and metabolomic analyses reveal distinct stage-specific phenotypes of the gut microbiota in colorectal cancer [J].Nat Med，2019，25（6）：968-976.

[12]Grigoryan S，Bazukyan I，Trchounian A. Aggregation and Adhesion Activity of Lactobacilli Isolated from Fermented Products In Vitro and In Vivo：a Potential Probiotic Strain [J].Probiotics Antimicrob Proteins，2018，10（2）：269-276.

[13]YANG J，LI Y，WEN Z，et al. Oscillospira - a candidate for the next-generation probiotics [J].Gut Microbes，2021，13（1）：1987783.

[14]Konikoff T，Gophna U. Oscillospira：a Central，Enigmatic Component of the Human Gut Microbiota [J].Trends Microbiol，2016，24（7）：523-524.

[15]Parthasarathy G，CHEN J，CHEN X，et al. Relationship Between Microbiota of the Colonic Mucosa vs Feces and Symptoms，Colonic Transit，and Methane Production in Female Patients With Chronic Constipation [J].Gastroenterology，2016，150（2）：367-79 e1.

[16]Tigchelaar E F，Bonder M J，Jankipersadsing S A，et al. Gut microbiota composition associated with stool consistency [J].Gut，2016，65（3）：540-542.

[17]LIU J，HUANG X E. Efficacy of Bifidobacterium tetragenous viable bacteria tablets for cancer patients with functional constipation [J].Asian Pac J Cancer Prev，2014，15（23）：10241-10244.

Study on The Regulation of Intestinal Flora in Dex Model Mice by Lactoferrin

QIU Jin-ling1，2，3，CHENG Yi-xin2，LIU Xiao-fan2，DENG Yang1，3，

GUO Li-ping1，3，LING Nan4，REN Guang-xu1，2

（1 College of Food Science and Engineering，Qingdao Agricultural University，Qingdao 266109，China;

2 Institute of Food and Nutrition Development，Ministry of Agriculture and Rural Affairs，Beijing 100081，China;

3 Qingdao Institute of Special Food，Qingdao 266109，China；4Nanjing Weigang Dairy Co.，Ltd.，Nanjing 211100，China）

Abstract：ObjectiveTo explore whether lactoferrin can regulate intestinal microecological structure in Dex model mice.MethodTotally 40 SPF C57BL/6 mice were selected and randomly divided into control group （10 mice） and modeling group （30 mice）. After 4-week model construction，the modeling group was randomly divided into DEX group （10 mice），LF group （10 mice） and LF+WP group （10 mice）. Samples were collected for intestinal flora analysis after 3 weeks of continuous intervention with milk iron and whey.ResultLactoferrin can change intestinal flora of Dex model mice，and compared with DEX group，The relative abundance of Clostridia，Lachnospirales，Oscillospirales，Lachnospiraceae and Prevotellaceae increased. The relative abundance of Bacilli，Lactobacillales，Erysipelotrichales and Lactobacillaceae declined.ConclusionLarge doses of lactoferrin could change the intestinal microbial structure of Dex mice.

Keywords：lactoferrin; whey protein; 16s rDNA; intestinal microbe

基金項(xiàng)目：北京自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：7192241）；國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃資助（項(xiàng)目編號(hào)：2022YFD1301005）。

作者簡介：邱金玲（1996— ），女，在讀碩士研究生，研究方向：食品加工與安全。

通信作者：任廣旭（1985— ），男，博士，副研究員，研究方向：食物營養(yǎng)與健康。