氣相色譜法檢測(cè)糧食中4 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量

◎ 王 瑩

（黃山市黃山糧油產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)站，安徽 黃山 245700）

有機(jī)磷農(nóng)藥是一種最早出現(xiàn)于20 世紀(jì)40年代的廣譜性農(nóng)用殺蟲(chóng)劑，其具有殺蟲(chóng)高效、使用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，因此被迅速應(yīng)用開(kāi)來(lái)。我國(guó)不僅是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)大國(guó)，同時(shí)也是農(nóng)藥制造和使用大國(guó)，在日常的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，由于對(duì)農(nóng)藥的濫用現(xiàn)象較為普遍，從而導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留問(wèn)題較為突出[1]。站在人體健康的角度來(lái)看，長(zhǎng)期食用有機(jī)磷含量超標(biāo)的農(nóng)產(chǎn)品，不僅會(huì)對(duì)人們的神經(jīng)細(xì)胞和腦功能產(chǎn)生影響，還會(huì)對(duì)人體的肝臟和腎臟造成嚴(yán)重?fù)p傷。因此，針對(duì)農(nóng)產(chǎn)品有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于我國(guó)的農(nóng)產(chǎn)品食用安全來(lái)講至關(guān)重要。

對(duì)此，國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)界針對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的危害以及有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)也開(kāi)展了深入的研究。例如，Young（2005）研究 2月 的嬰兒的神經(jīng)發(fā)育與有機(jī)磷農(nóng)藥暴露的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥的暴露可能影響新生兒的神經(jīng)功能[2]。Efird（2010）對(duì) 7 個(gè)國(guó)家的 2 223 例患有腦瘤兒童進(jìn)行研究， 結(jié)果表明兒童患腦瘤與母體接觸農(nóng)藥之間存在正相關(guān)[3]。在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方面，黃寶美（2004）采用毛細(xì)管電泳法測(cè)定青菜中的敵百蟲(chóng)， 最低檢出限為 2×10-6mol/L，敵百蟲(chóng)濃度在 5×10-5～2×10-6mol/L 之間，呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，r=0.991 4， 樣品加標(biāo)回收率為 90～102[4]。趙建暉（2012）等人建立了液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中的敵百蟲(chóng)殘留量的方法， 當(dāng)線性范圍為 5～100 μg/kg 時(shí)， 線性相關(guān)系數(shù)為 0.998 7， 定性檢出限 1.7 μg/kg，定量檢出限 3.5 μg/kg[5]。李虹（2023）建立了氣相色譜法對(duì)蔬菜和水果 7 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行了檢測(cè)。7 種有機(jī)磷農(nóng)殘組分在 0.01～2.00 μg·mL-1線性良好， 方法檢出限為0.01～0.02 mg·kg-1，定量限為 0.03～0.10 mg·kg-1，加標(biāo)回收率為 80.93%～109.04%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 RSD 為0.92%～4.95%[6]。

由此可以看出，當(dāng)前針對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)常用的方法，主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜法、液質(zhì)聯(lián)用法以及免疫分析法等。在眾多的檢測(cè)方法中，高效液相色譜法雖然檢測(cè)精度較高，但有著樣品前處理過(guò)程較為復(fù)雜、實(shí)驗(yàn)成本投入較高的缺點(diǎn)；免疫分析法較適用于對(duì)樣品進(jìn)行定性分析，存在著精準(zhǔn)度不高的缺陷；氣相色譜法不僅具有較高的檢測(cè)精度，還具有分析速度快、樣品投入成本低的優(yōu)點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用在有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)之中[7]。本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜法對(duì)糧食中乙酰甲胺磷、馬拉硫磷、敵敵畏和樂(lè)果4 種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行了檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本次開(kāi)展實(shí)驗(yàn)的糧食樣品采用的是小麥；試劑主要為二氯甲烷、丙酮，均采購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司，敵敵畏（GSB05-2298-2016）、樂(lè)果（GSB05-2286-2016）、馬拉硫磷（GSB05-2293-2016）、乙酰甲胺磷（GSB05-2763-2016）。

1.2 儀器與設(shè)備

本次實(shí)驗(yàn)采用的主要儀器與設(shè)備信息如表1所示。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

將脫殼后的小麥用粉碎機(jī)粉碎之后，采用20 目篩網(wǎng)進(jìn)行過(guò)濾。然后，稱(chēng)取10.0 g 樣品置于三角瓶中，再加入0.2 g 活性炭、5 g 氧化鋁以及20 mL 二氯甲烷，充分混合均勻之后，使用中性濾紙對(duì)混合液進(jìn)行過(guò)濾，再采用0.22 μm 有機(jī)針式濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣，最后將過(guò)濾之后所得濾液使用35 ℃的氮?dú)獯蹈?，再使用二氯甲烷定容?.0 mL 備用。

1.3.2 配置標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液

本次實(shí)驗(yàn)所采用的乙酰甲胺磷、馬拉硫磷、敵敵畏和樂(lè)果4 種樣品的初始質(zhì)量濃度均為0.1 g/mL，采用丙酮將其稀釋為質(zhì)量濃度為0.01 g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，然后再使用二氯甲烷進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行稀釋?zhuān)玫綕M(mǎn)足實(shí)驗(yàn)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液[8]。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)工作液

結(jié)合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的要求，乙酰甲胺磷、馬拉硫磷、敵敵畏和樂(lè)果4 種農(nóng)藥在糧食中的限量范圍分別為：0.2-0.5、0.1-8、0.1-0.2、0.05-0.5。待確定了4 種有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)范圍濃度之后，采用二氯甲烷對(duì)其進(jìn)行稀釋?zhuān)耘渲脴?biāo)準(zhǔn)工作液。然后，依據(jù)色譜條件確定所要使用的標(biāo)準(zhǔn)液，先將4 種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)液，采用二氯甲烷分別稀釋成質(zhì)量濃度為0.1 μg/mL 的單標(biāo)溶液和質(zhì)量濃度為0.2 0.1 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，存儲(chǔ)于4℃庫(kù)之中備用。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

2.1 色譜條件

色譜柱HP-35 石英毛細(xì)管柱，大小規(guī)格為30 cm×0.32 mm×0.25 μm。適用氫氣和空氣的混合氣體作為載氣，氫氣流量55 mL/min，空氣流量55 mL/min，進(jìn)樣量為1μL,采用不分流進(jìn)樣。色譜柱溫度為70 ℃保持15 min，然后將柱溫升至150 ℃保持2 min，每分鐘的溫度變化控制在50 ℃左右；再將柱溫升至200 ℃保持2 min，每分鐘的溫度變化控制在20 ℃左右；再將柱溫升至270 ℃保持2 min，每分鐘溫度變化控制在20 ℃左右。

2.2 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線

將制備好的標(biāo)準(zhǔn)工作液按照濃度由低到高的順序，依照上述色譜條件采用氣相色譜儀進(jìn)行分析，并以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、以峰值面積為縱坐標(biāo)，建立4 種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線，具體結(jié)果如表2 所示。

表2 4 種有機(jī)磷農(nóng)藥線性方程及線性范圍表

由上表種數(shù)據(jù)可以看出，4 種有機(jī)磷農(nóng)藥分離度較好，其相關(guān)系數(shù)為0.999 2～0.999 7，呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

2.3 檢出限

分別配置5 種有機(jī)磷農(nóng)藥低濃度單標(biāo)，依照上述色譜條件來(lái)對(duì)其進(jìn)行采樣分析，以S/N=3 對(duì)應(yīng)4 種有機(jī)磷農(nóng)藥濃度作為檢出限，測(cè)定濃度結(jié)果顯示，乙酰甲胺磷、馬拉硫磷、敵敵畏、樂(lè)果4 種有機(jī)磷農(nóng)藥的檢出限分別為0.004 μg/mL，0.004 μg/mL、0.003 μg/mL、0.003 μg/mL，滿(mǎn)足低濃度農(nóng)藥殘留限量的要求。

2.4 回收率

結(jié)合糧食農(nóng)藥殘留量限量范圍，由低到高從中選取3 個(gè)不同的限量水平，在小麥空白樣品中加入4 種有機(jī)磷農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，依照色譜柱條件對(duì)每種有機(jī)磷農(nóng)藥的3 個(gè)不同水平濃度分別進(jìn)行5 次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，計(jì)算得出的回收率結(jié)果如表3 所示。在此基礎(chǔ)上，選擇1.0 μg/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液，計(jì)算得出的重復(fù)性測(cè)定結(jié)果如表4 所示。

表3 4 種有機(jī)磷農(nóng)藥回收率測(cè)定表

表4 重復(fù)性測(cè)定表

由表3 和表4 可以看出，4 種有機(jī)磷農(nóng)藥不同水平下的回收率為74.1%～107.4%，不同水平的4 種有機(jī)磷農(nóng)藥的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍為2.87%～4.84%。說(shuō)明采用該方法對(duì)糧食中的有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行監(jiān)測(cè)，具有良好的精準(zhǔn)度和可靠性，符合相關(guān)的檢測(cè)要求。

3 結(jié)語(yǔ)

本實(shí)驗(yàn)主要采用氣相色譜法對(duì)糧食中常見(jiàn)的4 種有機(jī)磷農(nóng)藥：乙酰甲胺磷、馬拉硫磷、敵敵畏、樂(lè)果殘留量檢測(cè)進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用該方法對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行檢測(cè)，具有操作流程簡(jiǎn)單、分析速度快、檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)度和可靠性較高的優(yōu)點(diǎn)，適用于對(duì)小麥、玉米、大米等稻谷類(lèi)糧食進(jìn)行檢測(cè)。