食品檢驗檢測機構(gòu)農(nóng)藥殘留檢測能力驗證及注意事項探討

◎ 白佩玲

（甘肅省定西市食品檢驗檢測中心，甘肅 定西 743000）

近幾年，在經(jīng)濟高質(zhì)量發(fā)展的背景下，農(nóng)藥殘留所引起的食品安全問題越來越受到人們的關(guān)注，進而對農(nóng)藥殘留檢測的能力提出了更高的要求，監(jiān)管部門組織的能力驗證也越來越頻繁，且難度逐年遞增[1-2]。為從事農(nóng)藥殘留檢測的實驗室能夠順利通過能力驗證，本文就農(nóng)藥殘留能力驗證給出了一些建議。

1 考核前的準(zhǔn)備工作

1.1 人員的準(zhǔn)備

按照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）規(guī)定，農(nóng)藥殘留的檢測結(jié)果通常以mg·kg-1表示。目前，農(nóng)藥殘留的檢測儀器主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法，不管使用哪個儀器檢測，儀器初始測得的含量以質(zhì)量比體積表示，即儀器檢測結(jié)果顯示是ng·mL-1、μg·mL-1或者其他的質(zhì)量與體積比，最后檢測結(jié)果以mg·kg-1表示就需要進行簡單的計算，但部分檢測人員在樣品經(jīng)過一系列前處理后理不清換算關(guān)系，尤其在接到濃度比較大的盲樣考核后，要確保所測濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間點附近，就需要對樣品進行稀釋處理，這樣導(dǎo)致一部分檢驗人員無法正確對樣品進行稀釋。因此，檢驗機構(gòu)在接到盲樣考核后，應(yīng)選擇對相關(guān)項目操作熟練、理論知識扎實的檢驗員。因為樣品前處理及儀器設(shè)備操作的各環(huán)節(jié)都會影響到盲樣的檢測結(jié)果。例如，在乙酰甲胺磷的盲樣考核中，涉及氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法、液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法等，其中氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法樣品最后一步處理均需要經(jīng)過氮吹復(fù)溶，對于標(biāo)準(zhǔn)上描述的“氮吹近干”這一步有好多檢驗人員控制不當(dāng)，會影響檢驗結(jié)果。同時，在盲樣考核中應(yīng)至少安排兩個人搭檔進行，盲樣考核結(jié)果對于檢測機構(gòu)的聲譽很重要，因此，檢驗人員在檢驗過程中難免會出現(xiàn)緊張、思維混亂的現(xiàn)象，兩人配合能起到相互監(jiān)督和相互提醒的作用。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣的準(zhǔn)備

準(zhǔn)備能力驗證樣品處理所用到試劑耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣。檢驗機構(gòu)應(yīng)按需足量采購能力驗證樣品（以下簡稱盲樣）處理所用到試劑耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣。試劑耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣的采購應(yīng)嚴(yán)格按照本單位的體系文件規(guī)定實施。例如，供應(yīng)商是經(jīng)過合格判定且有資質(zhì)，標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)選擇能溯源到SI 測量單位或有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)供應(yīng)商。建議檢驗機構(gòu)所申請的標(biāo)準(zhǔn)品試劑耗材是之前經(jīng)過驗證符合標(biāo)準(zhǔn)要求的。這樣在盲樣檢測時間緊迫的情況下會減輕檢驗人員的壓力，檢驗人員不用再對標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材進行驗證。

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的準(zhǔn)備

對農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)品的采購，建議最好購買濃度為1 000 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品，這樣經(jīng)過一步稀釋到100 μg·mL-1，濃度相對大，不僅保存期限長而且后面盲樣檢測配制標(biāo)液過程中的選擇性也大。例如，某檢驗機構(gòu)所使用的氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀是賽默飛TSQ8000Evo，在盲樣的檢測中，檢驗人員在接到盲樣考核后，首先要對盲樣考核項目的儀器條件進行優(yōu)化，而賽默飛TSQ8000Evo 在儀器條件的優(yōu)化過程中通常使用3 ～8 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)品，如果檢驗機構(gòu)申請購買回來的原始標(biāo)準(zhǔn)品濃度為100 μg·mL-1，規(guī)格為1.2 mL/支，經(jīng)過一步稀釋到10 μg·mL-1，只有10 mL，通過幾步方法優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)溶液就被用完，嚴(yán)重制約了后續(xù)盲樣的檢測工作。

1.2.2 質(zhì)控樣的準(zhǔn)備

質(zhì)控樣作為內(nèi)部質(zhì)量控制的一種手段，是很多檢驗機構(gòu)在盲樣考核中的首選，所以選擇合適的質(zhì)控樣尤為關(guān)鍵。建議食品檢驗機構(gòu)在購買質(zhì)控樣時。至少購買兩個廠家的不同濃度的質(zhì)控樣，這樣就不會使檢驗人員出現(xiàn)因一個質(zhì)控樣做不到范圍內(nèi)而懷疑質(zhì)控樣有問題的僥幸心理。

1.3 確定檢測方法

檢驗機構(gòu)在接到能力驗證的通知后，依據(jù)自己所現(xiàn)有的資質(zhì)，選擇適宜的檢測方法。例如，某市場監(jiān)督管理部門組織的乙酰甲胺磷的能力驗證，某檢驗機構(gòu)同時具有《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018）、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中331 種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.121—2021）的資質(zhì)，氣相色譜法相較于氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)較弱，液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法相較于氣相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀法能夠消除襯管的吸附作用。建議檢驗機構(gòu)同時用3 種方法進行加標(biāo)回收和質(zhì)控樣的檢測對比分析，選擇結(jié)果良好的方法進行盲樣檢測。

1.4 儀器設(shè)備的準(zhǔn)備

盲樣檢測過程中，確保所使用的儀器設(shè)備處于良好狀態(tài)。例如，運用《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）測定乙酰甲胺磷，前處理過程中用到三角瓶、燒杯、刻度吸管等玻璃容器，應(yīng)當(dāng)保證玻璃容器清洗干凈，以水滴既不聚集成滴，也不成股流下為標(biāo)準(zhǔn)。對刻度吸管等對檢測結(jié)果計算有影響的應(yīng)當(dāng)提前進行校準(zhǔn)。檢驗機構(gòu)在接到能力驗證通知后，按照實驗室自身所具有的資質(zhì)，最好能夠啟動所具備資質(zhì)的所有儀器設(shè)備，以便對結(jié)果進行更好的對比。提前優(yōu)化儀器條件，使儀器達到良好的狀態(tài)，應(yīng)將儀器設(shè)備及相關(guān)參數(shù)和分析條件調(diào)至最優(yōu)，避免雜峰及拖尾現(xiàn)象，保證相應(yīng)參數(shù)的峰型滿足標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范的要求。

2 考核過程中的質(zhì)量控制

2.1 關(guān)鍵點把控

盲樣檢測的過程中，檢驗人員應(yīng)該對關(guān)鍵點進行控制。整個能力驗證實驗包括前處理過程和儀器分析過程。前處理過程要求操作人員細心、準(zhǔn)確[3-4]。例如，在稱樣過程中，應(yīng)當(dāng)清晰準(zhǔn)確地記錄稱樣量。一般在稱樣時，加標(biāo)回收、質(zhì)控樣、盲樣都會稱平行樣，有一少部分檢驗員會將兩個平行樣的稱樣量因馬虎大意而記反，導(dǎo)致檢驗結(jié)果計算出現(xiàn)誤差。再比如，在《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）測定乙酰甲胺磷時，在蔬菜水果樣品的提取過程中，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定稱取20 g 左右的樣品，加入40 mL 乙腈，用高速勻漿機15 000 r·min-1勻漿2 min，有些檢驗員會因單位自身設(shè)備不符合要求，隨意改變轉(zhuǎn)速或者縮短提取時間，導(dǎo)致最后結(jié)果異常。此外，在準(zhǔn)確吸取10 mL 在80 ℃水浴上氮吹蒸發(fā)近干的過程中，好多檢驗員因使用刻度吸管不當(dāng)而影響檢驗結(jié)果。因此，作為檢驗員，不管是在平時的檢驗過程中還是在盲樣檢測過程中，都應(yīng)當(dāng)對關(guān)鍵點進行控制，耐心細致地應(yīng)對檢驗過程中的每一個重要環(huán)節(jié)，保證檢驗結(jié)果的客觀準(zhǔn)確。

2.2 加強內(nèi)部質(zhì)量控制

檢驗機構(gòu)在接到能力驗證通知后，在試劑、耗材、標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控樣采購回來，儀器狀態(tài)正常后，應(yīng)進行內(nèi)部質(zhì)量控制活動。在能力驗證中，所用到的內(nèi)部質(zhì)量控制主要有質(zhì)控樣和加標(biāo)回收兩種。建議先用加標(biāo)回收的結(jié)果對樣品前處理過程進行評價，如果加標(biāo)回收結(jié)果良好，接下來就可以采取加標(biāo)回收和質(zhì)控樣同時進行，只有加標(biāo)回收和質(zhì)控樣的結(jié)果都在標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)的規(guī)定范圍內(nèi)，才可以對盲樣進行檢測。當(dāng)加標(biāo)回收和質(zhì)控樣兩者中有一方結(jié)果不符合標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)的規(guī)定時，操作人員需對其所有影響檢驗結(jié)果的因素進行分析，找出原因[5]。

2.3 能力驗證樣品（盲樣）的檢測

當(dāng)實驗室在接到盲樣后，如果不能立即進行測試，應(yīng)按照盲樣的要求對其進行妥善的儲存保管。如果加標(biāo)回收和質(zhì)控樣結(jié)果都在標(biāo)準(zhǔn)或相應(yīng)的規(guī)定范圍內(nèi)時，由于時間原因，實驗室應(yīng)盡快對盲樣進行測試，在盲樣測試過程中，由于盲樣的樣品量有限，建議實驗室先按之前成熟的前處理方法稱取一份樣品對其進行處理，上機大概確定盲樣的結(jié)果值，當(dāng)盲樣的結(jié)果大概確定后，考慮稱樣量、標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制，使盲樣的結(jié)果濃度最好落在標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間點附近。以上因素均無疑惑后，應(yīng)對盲樣盡快測試，在盲樣測試過程中，應(yīng)同時帶加標(biāo)回收和質(zhì)控樣對盲樣結(jié)果進行監(jiān)控和評價。

3 結(jié)果提交前的數(shù)據(jù)分析

盡管前處理過程和儀器設(shè)備對盲樣結(jié)果的影響很大，但也有一些檢驗機構(gòu)因數(shù)據(jù)處理出現(xiàn)問題導(dǎo)致結(jié)果不滿意。因此，在數(shù)據(jù)處理過程注意倍數(shù)關(guān)系以及單位換算，詳細地分析依據(jù)的標(biāo)準(zhǔn)給出的計算公式，再結(jié)合處理步驟，尤其是當(dāng)接到檢測結(jié)果比較大的盲樣（上機濃度大于標(biāo)準(zhǔn)曲線的最大點）時，為了確保上機濃度在配制標(biāo)準(zhǔn)曲線的中間點附近，需對樣品進行稀釋，這時結(jié)果的計算一定要把稀釋倍數(shù)帶進去。以《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90 種有機磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》（GB 23200.116—2019）測定乙酰甲胺磷為例，一檢驗機構(gòu)接到的盲樣是果蔬汁中的乙酰甲胺磷能力驗證，在樣品的處理過程中按照蔬菜水果、食用菌對樣品進行處理，其他處理步驟完全按照標(biāo)準(zhǔn)進行，只在后面將準(zhǔn)確吸取10 mL 在80 ℃水浴上氮吹蒸發(fā)近干后用丙酮洗滌最后定容到5 mL 改為準(zhǔn)確吸取2.5 mL在80 ℃水浴上氮吹蒸發(fā)近干后用丙酮洗滌最后定容到5 mL，這樣在結(jié)果的計算過程中應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)處理的基礎(chǔ)上給最終的結(jié)果乘以2 才是實際的結(jié)果。

4 結(jié)語

能力驗證作為評價實驗室內(nèi)部檢測/校準(zhǔn)能力的活動，是考察實驗室質(zhì)量管理體系是否運行良好、檢驗結(jié)果是否準(zhǔn)確有效的有效手段，所以參加實驗室應(yīng)慎重對待，同時鼓勵實驗室積極主動參與權(quán)威機構(gòu)的實驗室比對/能力驗證活動。