用誘發(fā)法鑒定茄子死秧

李明遠

（北京市農林科學院植物保護研究所，北京 100097）

可引起茄子死秧的原因有多種，一般分生理原因和病理原因2類，生理原因包括：冷害、水害、藥害、肥害等；病理原因比較常見的是疫霉屬和鐮孢霉屬真菌引起的病害。由于這2類真菌病害防治用藥不同，首先需要認清是哪類病原引起的。這里準備用筆者的一次診斷茄子死秧的經(jīng)歷，說明如何區(qū)別這2類病害，再用藥防治。

病害發(fā)現(xiàn)的過程

2015年前后，筆者在京郊某蔬菜基地任技術顧問，4月份基地技術員反映日光溫室新定植的茄子不斷發(fā)生死秧，筆者應邀幫其進行病害鑒定。發(fā)現(xiàn)茄子植株生長不良，最后逐漸枯死（封三圖1）。筆者拔起幾株枯死的茄子，洗去泥土，發(fā)現(xiàn)茄子根頸部變褐、縊縮，認為可能是一種土傳病害引起。技術員表示，1周前曾使用霜霉威灌根，但效果不明顯。由于根部病害一般有2類，一類是疫霉菌引起的疫病，另一類是鏈孢霉引起的根腐病。筆者建議將藥劑更換為對根腐病有效的藥劑——多菌靈。然而，技術員用多菌靈防治1周后，茄子仍不斷死亡，但相比之前死亡量有所減少。筆者再次觀察發(fā)現(xiàn)，溫室兩端的茄子病害嚴重程度不同，此時技術員表示，病害嚴重那端的茄子幼苗來源于農戶，可能幼苗攜帶病菌。

病害的初步診斷

由于病害持續(xù)發(fā)展，筆者收集了一些病株并進行實驗室鑒定。洗凈病株，發(fā)現(xiàn)病株各異，多數(shù)莖基變細，大部為灰褐色，病健交界處為紫黑色，土面以下，根部多數(shù)無癥狀，少數(shù)嚴重的出現(xiàn)水浸狀皮層腐爛癥狀（封三圖2），多數(shù)干枯。后按照這類病害一般的鑒定方法，先保濕，確認產(chǎn)生的菌類。具體做法是：將病樣分別用自來水、冷開水和無菌水各洗1遍，找來1個大培養(yǎng)皿，鋪上紗布，再倒進一些無菌水，放置洗干凈的病部，并在25 ℃的溫箱中保濕。1 d后發(fā)現(xiàn)每個植株的病根都有一些霉層，但茂密的程度不同，即有的霉層十分繁茂，而有的霉層比較稀疏，還有的像一些粉狀物（封三圖3）。

為了確認其病原，筆者利用顯微鏡觀察，結果發(fā)現(xiàn)：在霉層繁茂的病莖有2種病原菌，一種是比較粗大的有隔菌絲，分枝時會變細，疑似絲核菌，但還發(fā)現(xiàn)有不少的孢子囊，又像是疫霉菌，再看還有一些鐮刀形的孢子，而且不同的病莖上的鐮刀形孢子形態(tài)不同，甚至還見到一些線蟲在浮載劑里浮動。在這種情況下，更難確定引起茄子死秧的病原菌了。

按照柯赫法則，鑒定一個病害需要將它們經(jīng)過表面消毒，在無菌的條件下將其分離出來，然后回接到無病的茄子上，如果獲得了相同的癥狀，而且還可以再分離出相同的病原菌，才可以得出結論，但這樣耗時較長；而且如果待鑒定的是弱寄生菌，加之使用的幼苗比較健壯，其往往不會發(fā)病，這時就很難得出結論。

病原菌的誘發(fā)

據(jù)報道，通過黃瓜瓜條誘發(fā)的方法，可區(qū)分出果菜類根莖部病害是疫霉菌還是鐮孢霉菌引起。筆者按照此方法，取1根普通黃瓜，先用自來水和冷開水分別清洗1遍，再用無菌水洗2遍；待黃瓜表面上的水分蒸發(fā)后，用手術刀從發(fā)病茄秧的病健交界處取下幾小塊經(jīng)過無菌處理的表皮，再用消毒的手術刀刺傷黃瓜，將取下的病部的表皮塞到幾個刺傷的黃瓜的傷口里；然后找出1個比黃瓜大一些的塑料盒子，用同樣的方法洗凈，底部放幾層用開水煮過的紗布，上面橫2根試管，架上黃瓜，用1塊玻璃將塑料盒子蓋起來，在25 ℃的溫度下保濕培養(yǎng)（封三圖4）。

據(jù)文獻記載，黃瓜保濕后，如果在40 h后帶病組織的黃瓜傷口有些凹陷，就證明引起茄子死秧的病菌是疫病菌；如果傷口有些腫脹，引起死秧的就是鐮孢霉菌。當保濕到44 h時，筆者看到供試驗的黃瓜傷口開始凹陷（封三圖5），而到了55 h時見到黃瓜的幾個接種口附近長出了白粉狀的霉層（封三圖6）。

病原菌的鑒定

筆者利用顯微鏡和電腦觀察霉層，發(fā)現(xiàn)大量的孢子囊，繼續(xù)保濕后看到一些游動的孢子或靜子夾雜在孢子囊及其空殼間（封三圖7），其與文獻[1]中的辣椒疫病的孢子囊（封三圖8）十分相似。

具體描述為：該菌的菌絲絲狀，有分枝，無色，無橫膈膜；孢子囊長圓形至梭形，有明顯的乳突，具柄；孢子囊大小為（20～55）μm×（15～35）μm，靜子圓形，直徑為6～7 μm。由于培養(yǎng)時間短，沒能看到病原菌的藏卵器和雄器。以此與文獻[1]對照，確定該病原菌是辣椒疫霉菌（Phytophthora capsiciLeonian），說明茄子死秧就是由辣椒疫霉菌引起的。

病害的再防治

筆者確定引起茄子死秧的病原菌后，建議換用對辣椒疫霉菌有效的40%乙磷鋁可濕性粉劑200倍液或72%霜脲錳鋅1 000倍液，以每株100～200 mL的用量灌根。經(jīng)實踐，用72%霜脲錳鋅1 000倍液灌根2次，茄子死秧防治效果顯著。

討論

筆者認為，對于該病的診斷，開始時并無錯誤。開始使用霜霉威效果不好的原因有可能是防治不及時。許多植株已受害，但地上部癥狀表現(xiàn)出來需要的時間較長，而且起初茄子植株較小，需水量不多，在當時氣溫不高時，被害植株不易顯現(xiàn)出癥狀，后來氣溫升高后會引起植株繼續(xù)死亡，誤以為是初次使用的藥劑無效。另外還有一種可能是病菌會產(chǎn)生抗藥性，此前使用的農藥使病菌已產(chǎn)生抗藥性，防治效果也會下降，而換用新藥劑防治可能使防治的效果得到改善。

筆者還認為，使用這種誘發(fā)法，對鑒定一些根部病害，還是比較有效的。雖然用這種方法鑒別有可能在病原菌種名的確定上不十分準確，但是病害所屬的大類還是可信的，可用來指導死秧的防治。由于這種方法相對簡單，需要的時間短，對病害的及時防治十分有利。