斷腸草提取物對(duì)三種獸醫(yī)常見(jiàn)病原菌的抑菌效果試驗(yàn)

楊道斌

摘要：斷腸草，閩西農(nóng)村稱之為“大蛇藥”，偶然發(fā)現(xiàn)有人用斷腸草治療鴨漿膜炎。根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)，斷腸草成分有抗菌作用。為了驗(yàn)證斷腸草對(duì)三種獸醫(yī)臨床病原菌的抑菌效果，我們用相當(dāng)于含斷腸草原生藥10%的藥液1和含斷腸草原生藥20%的藥液2和常規(guī)抗菌藥進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)斷腸草有一定的抑菌效果。

關(guān)鍵詞：斷腸草；病原菌；藥敏試驗(yàn)

斷腸草又名鉤吻（Gelsemium elegans），閩西農(nóng)村稱之為“大蛇藥”。斷腸草正如它的名字一樣，有劇毒，奇怪的是對(duì)人有劇毒，對(duì)豬、牛、羊和家禽卻沒(méi)表現(xiàn)出毒性。民間廣泛有將斷腸草應(yīng)用于畜牧生產(chǎn)的情況，也屢有發(fā)生人斷腸草中毒的事故。偶然發(fā)現(xiàn)有人用斷腸草治療鴨漿膜炎，經(jīng)查詢，斷腸草成分確有抗菌作用。為了了解斷腸草對(duì)的三種獸醫(yī)臨床病原菌的抑菌效果，特進(jìn)行本試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)菌種

（1）大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種。

（2）銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種。

（3）金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種。

以上均為菌種斜面，為第二代斜面，無(wú)需凍干粉菌株繁瑣的復(fù)蘇活化過(guò)程，拿到菌株后可直接使用。

1.2 藥敏紙片

1.2.1 外購(gòu)抗菌藥藥敏紙片

g林霉氨、環(huán)丙沙星、慶大霉素、青霉素紙片從淘寶店購(gòu)買成品，紙片含藥量見(jiàn)表1。

1.2.2 斷腸草藥敏紙片

（1）斷腸草藥液的制備

斷腸草提取物，由陜西斯諾特生物科技有限公司生產(chǎn)，濃縮比例為10：1。將10：1斷腸草提取物各1g分別加入滅菌水100ml和50ml，分別制成相當(dāng)于含斷腸草原生藥10%的藥液1和含斷腸草原生藥20%的藥液2。

（2）含斷腸草提取物紙片的制備

紙片5：在空白紙片瓶?jī)?nèi)加入適量藥液1，使各紙片能夠被藥液浸沒(méi)。紙片6：在空白紙片瓶?jī)?nèi)加入適量藥液2，使各紙片能夠被藥液浸沒(méi)。在瓶上記錄藥物名稱。放37℃恒溫箱內(nèi)過(guò)夜備用。

1.3 培養(yǎng)基

為市售平板普通瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基。

2 試驗(yàn)方法

（1）采取紙片擴(kuò)散法測(cè)定對(duì)試驗(yàn)藥物的敏感程度。按照藥敏試驗(yàn)操作要求，挑取病菌培養(yǎng)物，均勻涂布到培養(yǎng)皿培養(yǎng)基上。將紙片5和紙片1、紙片2、紙片3、紙片4平均五等分置于培養(yǎng)皿外周，紙片之間相距大于2.4cm，紙片距培養(yǎng)皿內(nèi)緣大于1.5cm，記錄每種藥敏片的名稱。將培養(yǎng)皿置于恒溫箱中37℃培養(yǎng)24h后，用量尺測(cè)量每個(gè)紙片的抑菌圈。分別測(cè)試藥敏試紙對(duì)5種試驗(yàn)菌種的抑菌效果。

（2）紙片6和紙片1、紙片2、紙片3、紙片4平均五等分置于培養(yǎng)皿外周，記錄每種藥敏片的名稱。將培養(yǎng)皿置于恒溫箱中37℃培養(yǎng)24h后，用量尺測(cè)量每個(gè)紙片的抑菌圈。分別測(cè)試藥敏試紙對(duì)3種試驗(yàn)菌種的抑菌效果。

3 試驗(yàn)結(jié)果

3.1 對(duì)大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種的抑菌試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示：紙片5（含較高劑量斷腸草提取物）和紙片2（含g林霉素）為高敏（抑菌直徑大于20mm）；紙片1（含環(huán)丙沙星）、紙片3（含慶大霉素）和紙片6（含較低劑量斷腸草提取物）為中敏（抑菌直徑15～20mm），紙片4（含青霉素）為低敏（抑菌直徑小于10mm）。具體抑菌圈數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

3.2 對(duì)銅綠假單胞菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種的抑菌試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示：紙片2（含g林霉素）為高敏（抑菌直徑大于20mm）；紙片1（含環(huán)丙沙星）、紙片3（慶大霉素）、紙片4（含青霉素）為中敏（抑菌直徑10～20mm）；紙片5（含較高劑量斷腸草提取物）和紙片6（含較低劑量斷腸草提取物）為低敏（抑菌直徑小于10mm）。具體抑菌圈數(shù)據(jù)見(jiàn)表3。

3.3 對(duì)金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種的抑菌試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果顯示：紙片4（含青霉素）和紙片2（含g林霉素）為高敏（抑菌直徑大于20mm）；紙片3（含慶大霉素）、紙片1、紙片5和紙片6（含較低劑量斷腸草提取物）為中敏（抑菌直徑16mm）。具體抑菌圈數(shù)據(jù)見(jiàn)表4。

4 討論

（1）大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌是獸醫(yī)臨床常見(jiàn)的病原菌，引起動(dòng)物感染相應(yīng)疾病。獸醫(yī)臨床一般使用抗菌素進(jìn)行預(yù)防和治療。但是由于藥物的濫用等原因，各種病原菌的抗藥性日漸增強(qiáng)，對(duì)很多抗菌素不再敏感。因此，出現(xiàn)了一些抗菌素聯(lián)用治療的“雞尾酒方案”。這些方案，容易造成藥殘，治療效果也不如人意。尋找對(duì)常見(jiàn)病菌敏感的中草藥十分必要。

（2）本試驗(yàn)表明，一定劑量的斷腸草提取物對(duì)的大腸埃希氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌菌種抑菌效果優(yōu)于青霉素、慶大霉素等常用抗菌藥物，這個(gè)和文獻(xiàn)記載、生產(chǎn)中的應(yīng)用情況相吻合。為細(xì)菌性疾病防治提供了新思路。在當(dāng)前禁抗的大背景下，發(fā)展中草藥防治畜禽傳染病，有著廣闊的應(yīng)用前景。由于植物藥本身存在“量效關(guān)系”不明確的特點(diǎn)，就是說(shuō)高劑量用藥并不意味著藥效好，還存在作用的不穩(wěn)定性、重復(fù)性差的特點(diǎn)。在本次試驗(yàn)中，高劑量斷腸草紙片并不表現(xiàn)出比低劑量斷腸草紙片有明顯的抑菌效果。

（3）提取植物藥中的有效成分開(kāi)發(fā)新藥是當(dāng)前研究的一個(gè)熱點(diǎn)，這方面有很多成功的安全，如從常山中提取的常山酮，有高效抗球蟲(chóng)作用；從青蒿中提取的青蒿素有抗瘧疾作用；從貫葉連翹中提取的金絲桃素，有廣譜的抗病毒功效；從土荊芥中提取的牛至，是很好的抗痢藥。在很多新藥專利都控制在西方制藥公司的當(dāng)下，挖掘中藥寶庫(kù)的資源，走一條開(kāi)發(fā)中藥新藥的路子，對(duì)于我國(guó)走自主可控的產(chǎn)業(yè)之路，十分重要。有很多關(guān)于大茶藥的文獻(xiàn)，但關(guān)于大茶藥抗菌作用的研究很少。本次試驗(yàn)為斷腸草的研究提供了新的思路。

（4）斷腸草在畜牧養(yǎng)殖有廣泛的用途。在民間，有很多人用斷腸草治療豬的氣喘病和驅(qū)蟲(chóng)，甚至有人用斷腸草治療人的癌癥。研究表明，斷腸草有著一定抗菌、抗病毒和抗癌的作用，隨著研究的深入，斷腸草會(huì)發(fā)揮更大的作用。

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