早產(chǎn)兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)早發(fā)型敗血癥的預(yù)測(cè)價(jià)值

姚彥莉

早發(fā)型敗血癥(early onset sepsis,EOS)是指新生兒在出生后72 h內(nèi)發(fā)生敗血癥,其中早產(chǎn)兒自身機(jī)體免疫防御系統(tǒng)較弱,導(dǎo)致EOS發(fā)病率、預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)明顯高于足月兒,需給予重視[1,2]。目前,早產(chǎn)兒EOS早期診斷難度較大,細(xì)菌培養(yǎng)雖是金標(biāo)準(zhǔn),但耗時(shí)較長(zhǎng),不利于早期診斷,而臍血是新生兒最早可獲取的血液樣本,故積極探索可靠且敏感的臍血標(biāo)志物至關(guān)重要[3]。α1-酸性糖蛋白(α 1-acid glycoprotein,AAG)是血清中類黏蛋白的主要成分,在細(xì)菌感染引發(fā)炎癥反應(yīng)時(shí)可大量合成、釋放,并促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)展[4]。白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)均是炎癥反應(yīng)的產(chǎn)物,既往有研究表明,新生兒臍血中IL-6、TNF-α水平升高與其體內(nèi)炎癥免疫應(yīng)答密切相關(guān)[5,6]。但目前關(guān)于上述指標(biāo)對(duì)早產(chǎn)兒EOS的預(yù)測(cè)價(jià)值及對(duì)預(yù)后的影響仍尚未明確,故本研究對(duì)該課題進(jìn)行探討,旨在為臨床防治早產(chǎn)兒EOS提供臍血標(biāo)志物。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2019年1月至2022年1月46例早產(chǎn)兒EOS患兒作為發(fā)生組,另選取同期46例無EOS早產(chǎn)兒作為未發(fā)生組。納入標(biāo)準(zhǔn):孕周<37周,均為早產(chǎn)兒;EOS均符合新生兒敗血癥相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7],且發(fā)病時(shí)間在出生后72 h內(nèi);患兒監(jiān)護(hù)人均知情,簽訂知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):存在先天性畸形者;伴有嚴(yán)重新生兒溶血病者;合并自身免疫性疾病者;伴有其他感染性疾病者。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審批通過,批號(hào):。

1.2 方法

1.2.1 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平檢測(cè)方法:2組均于出生后留取臍血樣本,于胎兒娩出后,立即夾閉臍帶兩端,抽取2～3 ml臍動(dòng)脈血,在室溫條件下靜置30 min,離心處理,離心速率為3 000 r/min,離心時(shí)間為5 min,取上清液,保存于-80℃條件下,備用。采用免疫比濁法檢測(cè)臍血AAG水平,試劑盒及特定蛋白分析儀購(gòu)自德國(guó)西門子公司,采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)臍血IL-6、TNF-α水平,試劑盒購(gòu)自美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司,所有操作嚴(yán)格遵循試劑盒說明書。

1.2.2 EOS治療方法:首先給予積極抗感染處理,待病原菌明確后根據(jù)藥敏試驗(yàn)選擇合理抗生素,并采取適當(dāng)改善通氣、血流動(dòng)力學(xué)支持、營(yíng)養(yǎng)支持、保護(hù)臟器等對(duì)癥治療措施。

1.2.3 預(yù)后判定方法[8]:治愈且出院時(shí)不遺留后遺癥判定為預(yù)后良好;出院時(shí)臨床癥狀無好轉(zhuǎn);放棄治療自動(dòng)出院3 d內(nèi)死亡或住院期間死亡;住院期間發(fā)生需外科處理的并發(fā)癥,出現(xiàn)以上任何1種情況則判定為預(yù)后不良。

1.3 觀察指標(biāo) (1)2組臨床資料,包括胎齡、性別、分娩方式、母親妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓疾病、極低出生體重兒、呼吸功能低下等資料。(2)2組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平。(3)臍血AAG、IL-6、TNF-α水平與EOS發(fā)生的關(guān)系。(4)臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)EOS的預(yù)測(cè)價(jià)值。(5)不同預(yù)后患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平。(6)臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)預(yù)后的影響。

2 結(jié)果

2.1 2組臨床資料比較 2組性別比、分娩方式、母親妊娠期糖尿病、妊娠期高血壓疾病比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);發(fā)生組胎齡短于未發(fā)生組,極低出生體重兒、呼吸功能低下比例高于未發(fā)生組(P<0.05)。見表1。

表1 2組臨床資料比較 n=46,例(%)

2.2 2組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平 發(fā)生組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于未發(fā)生組(P<0.05)。見表2。

表2 2組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平比較 n=46,

2.3 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平與EOS發(fā)生的關(guān)系 Logistic回歸分析方法,校正胎齡、極低出生體重兒、呼吸功能低下等其他因素前后,結(jié)果顯示,臍血AAG、IL-6、TNF-α均與EOS發(fā)生獨(dú)立相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平與EOS發(fā)生的關(guān)系

2.4 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)EOS的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析,臍血AAG、IL-6、TNF-α預(yù)測(cè)EOS發(fā)生的AUC分別為0.765(95%CI:0.665～0.847)、0.718(95%CI:0.615～0.807)、0.818(95%CI:0.724～0.891),三者聯(lián)合預(yù)測(cè)EOS發(fā)生的AUC為0.925(95%CI:0.851～0.970),大于三者單獨(dú)預(yù)測(cè)。見圖1。

圖1 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)EOS的預(yù)測(cè)價(jià)值

2.5 不同預(yù)后患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平 隨訪至所有患兒出院,預(yù)后良好31例,預(yù)后不良15例。預(yù)后不良患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于預(yù)后良好患兒(P<0.05)。見表4。

表4 不同預(yù)后患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平比較

2.6 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)預(yù)后的影響 以發(fā)生組所有患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平平均值(2.26 g/L、30.21 pg/mL、3.72 μg/L)為界分為高水平與低水平患兒。危險(xiǎn)度分析,臍血AAG、IL-6、TNF-α高水平患兒預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)是低水平患兒的4.574倍(95%CI:1.165～17.967)、4.000倍(95%CI:1.298～12.326)、5.460倍(95%CI:1.386～21.509),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

表5 臍血AAG、IL-6、TNF-α水平對(duì)預(yù)后的影響

3 討論

早產(chǎn)兒EOS早期缺乏特異性表現(xiàn),與常見感染類似,但其病情進(jìn)展迅速,還極易并發(fā)血管內(nèi)凝血、休克、多器官衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥,對(duì)患兒生命安全造成極大威脅[9,10]。及早準(zhǔn)確有效診治能達(dá)到控制病情進(jìn)展、降低并發(fā)癥與死亡風(fēng)險(xiǎn)、改善預(yù)后的目的。已有的臨床實(shí)踐證實(shí),細(xì)菌培養(yǎng)作為EOS診斷的金標(biāo)準(zhǔn),在新生兒EOS早期診治中的應(yīng)用價(jià)值有限[11]。近年來,血清學(xué)診斷方式成為臨床早期診斷EOS的重要途徑,在此過程中,可靠的血清學(xué)指標(biāo)是確保診斷效能的關(guān)鍵所在。

AAG是臨床常見急性時(shí)相反應(yīng)蛋白之一,是血清中類黏蛋白的主要成分,在細(xì)菌感染引發(fā)炎癥反應(yīng)時(shí)可大量合成、釋放,并促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)展既往有研究證實(shí),急性感染期患者血液中AAG含量呈急劇增加趨勢(shì),隨著炎癥控制逐漸下降,可作為判斷炎癥反應(yīng)的有效指標(biāo)[12,13]。IL-6屬于典型的促炎因子,是啟動(dòng)細(xì)菌炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞因子,在正常生理狀態(tài)下,其在血液中的含量極低或監(jiān)測(cè)不到,一旦發(fā)生細(xì)菌感染則會(huì)迅速升高,在反映早期感染方面具有重要價(jià)值[14,15]。Ebenebe等[16]報(bào)道中顯示,IL-6不升高時(shí)新生兒敗血癥發(fā)病率約5%,IL-6升高時(shí)新生兒敗血癥發(fā)病率高達(dá)60%左右,說明其在新生兒敗血癥發(fā)生過程中扮演重要角色。TNF-α是一種內(nèi)源性調(diào)節(jié)因子,作為炎性應(yīng)答與感染的重要介質(zhì),能通過調(diào)節(jié)炎癥免疫反應(yīng)參與感染性疾病發(fā)生發(fā)展過程[17,18]。有文獻(xiàn)指出,敗血癥作為細(xì)菌感染性疾病,勢(shì)必會(huì)導(dǎo)致機(jī)體免疫功能亢進(jìn),引發(fā)一系列炎癥免疫生理過程,而TNF-α在此過程中發(fā)揮關(guān)鍵的調(diào)節(jié)作用[19]。在上述研究基礎(chǔ)上,本研究結(jié)果顯示,發(fā)生組臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于未發(fā)生組,且Logistic回歸分析,校正其他因素前后,臍血AAG、IL-6、TNF-α均與EOS發(fā)生獨(dú)立相關(guān),提示臍血AAG、IL-6、TNF-α水平異常升高參與早產(chǎn)兒EOS發(fā)生。分析原因,在于以下幾個(gè)方面:(1)炎癥反應(yīng)發(fā)生后,可激活肝巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞、T細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞,釋放大量的脂多聚糖,從而導(dǎo)致AAG過多合成、分泌,對(duì)機(jī)體免疫防御機(jī)制造成明顯破壞,進(jìn)而促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)展,加重病情,最終引發(fā)敗血癥[20];(2)IL-6同樣是由T淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、單核型巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,不僅會(huì)導(dǎo)致機(jī)體發(fā)熱,誘發(fā)炎癥反應(yīng),還能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞自身增殖分化,從而啟動(dòng)炎癥免疫應(yīng)答反應(yīng),為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的大量生成提供有利環(huán)境,進(jìn)而不斷加快機(jī)體內(nèi)炎癥反應(yīng)擴(kuò)散,促進(jìn)EOS發(fā)生[21];(3)TNF-α能通過介導(dǎo)白細(xì)胞黏附在血管內(nèi)皮細(xì)胞上,激活免疫T細(xì)胞及相關(guān)炎性細(xì)胞,刺激單核細(xì)胞產(chǎn)生大量炎性因子,同時(shí)誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,形成機(jī)體內(nèi)因炎癥引起的免疫亢進(jìn)反應(yīng),還可經(jīng)由與其受體特異性結(jié)合后調(diào)控相關(guān)靶細(xì)胞,在敗血癥發(fā)生過程中發(fā)揮相關(guān)作用[22]。因此,提示臨床可將臍血AAG、IL-6、TNF-α作為臨床早期預(yù)測(cè)診斷早產(chǎn)兒EOS發(fā)生的重要血清學(xué)指標(biāo)。

本研究數(shù)據(jù),表明,臍血AAG、IL-6、TNF-α單獨(dú)預(yù)測(cè)EOS發(fā)生的價(jià)值有限,不適宜單獨(dú)應(yīng)用于臨床早期預(yù)測(cè)中,故進(jìn)一步嘗試探討三者聯(lián)合預(yù)測(cè)價(jià)值,結(jié)果發(fā)現(xiàn),三者聯(lián)合預(yù)測(cè)EOS發(fā)生的AUC高達(dá)0.925,這為臨床早期預(yù)測(cè)提供了新的思路,有利于對(duì)EOS及早防治,改善預(yù)后。

此外,本研究隨訪至所有EOS患兒出院發(fā)現(xiàn)預(yù)后不良發(fā)生率高達(dá)32.61%,提示早產(chǎn)兒EOS患兒預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)較高,臨床應(yīng)給予重視。本研究還證實(shí),預(yù)后不良患兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平高于預(yù)后良好患兒,高水平的臍血AAG、IL-6、TNF-α?xí)黠@增加預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn),可見臍血AAG、IL-6、TNF-α還能為臨床判斷預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)提供有效信息,臨床應(yīng)用價(jià)值較大。不足之處:本研究未詳細(xì)探討臍血AAG、IL-6、TNF-α對(duì)早產(chǎn)兒EOS患兒預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)的具體預(yù)測(cè)價(jià)值,仍需進(jìn)一步分析,以獲取更全面的數(shù)據(jù)支持。

綜上可知,早產(chǎn)兒臍血AAG、IL-6、TNF-α水平聯(lián)合預(yù)測(cè)EOS的價(jià)值較為可靠,且三者異常升高表達(dá)均會(huì)顯著增加預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn),可為臨床防治、改善預(yù)后提供相關(guān)依據(jù)。