犢牛產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌病的防治

張力國

摘要：致病性大腸埃希菌共有5種，其中產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌（Enterotoxigenic…Escherichia…coli，ETEC）是一種常見的消化道致病菌，可導(dǎo)致犢牛發(fā)熱、腹瀉，甚至造成死亡，對畜牧養(yǎng)殖造成很大損失。本文從該病菌的致病機制、臨床診斷、防治措施等方面進行簡要綜述。

關(guān)鍵詞：犢牛；產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌

1 ETEC簡介和致病機制

產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌是致病性大腸埃希菌的一種，革蘭氏染色呈短桿狀，兩端稍鈍圓，屬于革蘭氏陰性菌，無芽抱。ETEC培養(yǎng)的適宜溫度為37℃、pH為7.2～7.4。在LB培養(yǎng)基平板上呈現(xiàn)圓形、邊緣整齊、稍隆起的光滑菌落；在伊紅—美蘭培養(yǎng)基平板上呈現(xiàn)帶有金屬光澤的紫黑色光滑菌落；在麥康凱培養(yǎng)基平板上呈現(xiàn)粉紅色光滑菌落。

ETEC是導(dǎo)致犢牛腹瀉發(fā)生的重要病原體，能夠產(chǎn)生兩種類型的毒力因子，即低分子量的耐熱型腸毒素STa，以及產(chǎn)生細(xì)胞毒素的菌毛抗原（F4、F5、F6、F41等）。

ETEC導(dǎo)致新生犢牛發(fā)生分泌性腹瀉。研究表明，產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌經(jīng)消化道進入動物腸道內(nèi)，并通過菌毛附著于宿主腸細(xì)胞上，在腸道定植后進行大量繁殖，并釋放腸毒素，腸毒素激活鳥苷酸環(huán)化酶，引起腸細(xì)胞中環(huán)磷酸鳥苷水平升高，使粘膜細(xì)胞吸收功能下降，分泌功能增強，造成體液、碳酸鹽和其他離子成分的損失，最終引發(fā)動物腹瀉。一般來說，犢牛所攜帶的ETEC只產(chǎn)生STa。

使致病性產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌附著于腸細(xì)胞的Ⅰ型菌毛屬于蛋白質(zhì)，之前將之歸類為莢膜抗原，目前文獻中均稱為菌毛（F）抗原。菌毛抗原包括F4 （K88）、F5 （K99）、F6 （987P）、F18和F41等，具有其中一個或多類型的菌毛抗原均能引起犢牛腹瀉，但F5（K99）抗原是引起犢牛致病最常見的一種抗原，常用作制備診斷試劑和疫苗。由于腸毒素不具備免疫原性，通常利用研究菌毛抗原的抗體來防制犢牛的產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌病，然而，不同的菌毛抗原之間缺乏交叉保護性。所以，針對特異性產(chǎn)腸毒素性大腸埃希菌的菌毛抗原抗體來制作初乳，只能夠防止?fàn)倥０l(fā)生該菌毛抗原引起的大腸埃希菌病。

2 臨床癥狀與診斷

低于10日齡的犢牛易發(fā)生該病，主要癥狀為腹瀉。感染初期，體溫明顯升高，可達(dá)到39℃甚至41℃，通常會出現(xiàn)急性腸炎癥狀，脫水和肌肉無力，全身狀態(tài)下降，糞便的顏色、性狀變化很大，但通常為大量水樣腹瀉，腹瀉物呈黃色、白色或者綠色。病犢牛的體溫降低至正常水平之下，眼結(jié)膜充血，膿性分泌物將眼瞼粘連，出現(xiàn)代謝性酸中毒和低血糖，最急性病例可在4～12小時內(nèi)發(fā)生休克，急性病例得不到及時救治，會在表現(xiàn)出臨床癥狀3～4天之后因心衰而死。

剖檢可見真胃黏膜充血、水腫并且內(nèi)有大量凝乳塊、膠狀黏液；小腸有明顯的積液，腸黏膜充血，腸壁變??；腸系膜淋巴結(jié)腫脹、瘀血，顏色變黑；膽囊內(nèi)可見黏稠、暗綠色膽汁。多數(shù)病例的肝臟、腎臟等實質(zhì)器官及心內(nèi)膜有出血點。最急性感染可導(dǎo)致犢牛出現(xiàn)典型的代謝性酸中毒，血漿中重碳酸鹽濃度降低，pH值下降，產(chǎn)生低氯血和低鈉血，高鉀血和低血糖是特征性血液指標(biāo)。

一般可以結(jié)合犢牛的發(fā)病日齡、臨床癥狀，最終以實驗室檢測結(jié)果進行確診。糞便中可分離出ETEC，如有犢牛死亡病例，可采集空腸內(nèi)容物進行分離。經(jīng)麥康凱等鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)，革蘭氏染色、鏡檢后進行純培養(yǎng)，增菌后提取核酸，利用16S rRNA通用引物進行擴增，進行核酸比對，同源性大于99%鑒定為大腸桿菌。再利用PCR技術(shù)檢測腸毒素STa基因及菌毛抗原，最終確定為ETEC。

臨床上要對糞便進行病毒和原蟲檢測，因為ETEC經(jīng)常與冠狀病毒、輪狀病毒以及微細(xì)隱孢球蟲發(fā)生混合感染。同時也要對沙門氏菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的疾病進行鑒別診斷。其中，雖然沙門氏菌也可以導(dǎo)致犢牛腹瀉，但沙門氏菌患牛會出現(xiàn)發(fā)熱，中性白細(xì)胞減少以及核左移；產(chǎn)氣莢膜梭菌可引起患牛腹部高度膨脹而沒有明顯腹瀉，表現(xiàn)肌肉無力、脫水和休克，但很少出現(xiàn)嚴(yán)重的代謝性酸中毒。

3 治療措施

3.1……非藥物治療

癥狀較輕的犢?？梢钥诜a液鹽，原則上可自行康復(fù)。按照機體損失的電解質(zhì)和水分的量來口服補液鹽可以緩解腹瀉，但不會減少體液流失、糞便量或縮短病程?？诜娊赓|(zhì)溶液的作用十分重要，特別是靜脈輸液后的治療或用作感染不嚴(yán)重的犢牛唯一藥物時，因為腹瀉導(dǎo)致碳酸氫根（HCO3-）不斷丟失，必須使用含有重碳酸鹽的電解質(zhì)溶液進行治療。

臨床可根據(jù)以下原則進行補充電解質(zhì)。第一，躺臥病牛，脫水占體重的12%～15%，補充濃度為15～20毫摩爾/升；第二，肌肉無力病牛，脫水占體重的8%～12%，補充濃度為10～15毫摩爾/升；第三，能正常運動病牛，脫水占體重的5%～8%，補充濃度為5～10毫摩爾/升。當(dāng)然，上述原則也不是絕對的，還需臨床觀察，做出準(zhǔn)確判斷。

3.2……藥物治療

高毒力的ETEC往往對多種抗生素具有抗藥性，利用藥物治療不應(yīng)只是簡單的使用更好的抗生素，而是應(yīng)該從發(fā)病牛群采取多個樣本，送到有條件的實驗室鑒別產(chǎn)腸毒素大腸埃希菌及其抗原，同時進行抗生素敏感性實驗。由于脫水導(dǎo)致腎臟灌流減少，會引起腎前性氮血癥，所以，在臨床用藥時，要避免腎中毒。

腹瀉嚴(yán)重的犢牛應(yīng)連用3～5天廣譜抗生素（慶大霉素、丁胺卡那霉素、磺胺三甲氧芐胺嘧啶、恩諾沙星等均是合理的選擇）抗菌消炎，靜脈滴注林格氏液，以保持液體平衡，并治療酸中毒，補充葡萄糖維持機體所需能量。可以活動并有吸吮反應(yīng)的犢?？蓛?nèi)服腸黏膜保護劑和吸附劑，減少毒素吸收。停用抗生素后，內(nèi)服益生菌制劑及消化酶，每天2次以調(diào)整腸道微生態(tài)平衡。若腹瀉超過4天，要考慮有其他微生物并發(fā)感染。

4 預(yù)防措施

預(yù)防具有重要意義，尤其是在犢牛場發(fā)病率和死亡率較高時。防控牛源該疾病，牛舍溫度要保持在16～19℃，相對濕度保持在50%～70%，保持通風(fēng)良好，要減少環(huán)境中大腸埃希菌滋生繁殖及增強牛群對病原菌的免疫力。當(dāng)出現(xiàn)病牛時，要立即將其隔離并進行診治，避免其他牛接觸病牛的糞便、污水，防止疾病蔓延。另外，預(yù)防和減少該病還要隨著牛群結(jié)構(gòu)的不斷優(yōu)化、檢驗標(biāo)準(zhǔn)的更加嚴(yán)格來不斷的加強環(huán)境治理、盡早建立預(yù)警監(jiān)測技術(shù)以及建立完善的預(yù)防方法。更要從管理和預(yù)防方面控制輪狀病毒、微細(xì)隱孢球蟲、冠狀病毒等或其他腸道病原菌的混合感染。

在養(yǎng)殖過程中，對母畜進行疫苗接種，從而預(yù)防新生幼畜ETEC腹瀉的發(fā)生，被認(rèn)作是一種有高成本效益的健康管理方式。如果從多頭患牛糞便樣品中檢出攜帶有F抗原的ETEC，就應(yīng)立刻采取預(yù)防措施?？梢栽趹言心概．a(chǎn)前6周和3周使用具有F抗原的商品苗來免疫，同時給新生犢牛飼喂優(yōu)質(zhì)母乳即可解決問題。如果商品苗不能抑制疫病的發(fā)生，在確定致病菌為ETEC后，可以考慮使用自家菌苗。但必須注意，只有在完全確診ETEC感染且商品苗無效的情況下才可以使用自家菌苗。另外，雖然益生菌不是疫苗，但卻可以作為粘附抑制劑來預(yù)防ETEC。

5 小結(jié)

ETEC可導(dǎo)致犢牛高發(fā)病率和高死亡率，是一種危害較大的細(xì)菌性傳染病，目前，對它的致病機理以及相關(guān)毒力因子已經(jīng)有了比較全面的了解。但是，養(yǎng)殖戶經(jīng)常使用自購的藥物進行治療，缺乏科學(xué)依據(jù)，導(dǎo)致該菌的耐藥性顯著增強。因此，牛場的預(yù)防和治療相結(jié)合尤為重要，要加強養(yǎng)殖戶疫苗免疫接種意識，掌握更多精細(xì)化管理方式，整體提高牛群的抵抗力、降低該病發(fā)生率，對于不同牛舍實施針對性的科學(xué)防控方案，提高該病的治愈率，多種方案方法共同推進，才能為畜禽養(yǎng)殖業(yè)的蓬勃發(fā)展保駕護航。

項目編號：FSYC20224001