新冠病毒抗原/抗體檢測(cè)閉環(huán)管控體系構(gòu)建

溫天文，巫 軍，袁學(xué)軍，肖大偉，刁 勇，張旭雯

（1.江蘇科興諾生物技術(shù)有限公司，江蘇 泰州 225300；2.南京為綠生物科技有限公司，江蘇 南京 210032；3.南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)高新醫(yī)院醫(yī)學(xué)臨床中心，江蘇 南京 210032；4.華僑大學(xué)醫(yī)學(xué)院，福建 泉州 362021）

自2019 年新型冠狀病毒肺炎［COVID-19，簡(jiǎn)稱新冠肺炎（現(xiàn)已統(tǒng)稱新冠病毒感染，下文同）］疫情發(fā)生以來(lái)，全球累計(jì)確診病例超6 億例，累計(jì)死亡病例超650 萬(wàn)例。隨著各國(guó)多種新冠疫苗用于臨床，該病的重癥率和死亡率大幅降低［1］。然而，一方面，全球新冠病毒感染人群基數(shù)依然很大，尤其是境外感染人員的輸入及癥狀感染者的大量存在，給境內(nèi)新冠疫情防控帶來(lái)了極大隱患和挑戰(zhàn)；另一方面，在目前對(duì)新冠病毒變異情況、感染者病程潛在發(fā)展情況等不確定及無(wú)特效藥的情況下，新冠疫情防控工作仍不可松懈。同時(shí)，新冠病毒不斷變異［2-3］，尤其是Omicron 變種的傳播極快，傳染性極強(qiáng)，而各國(guó)防疫限制的不斷放開，加緊了我國(guó)新冠防控形勢(shì)，也大幅加重了新冠肺炎感染檢測(cè)任務(wù)。目前，核酸檢測(cè)仍是COVID-19 確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”［4］，但檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)儀器設(shè)備條件及人員要求較高，常不能滿足基數(shù)較大人群的檢測(cè)需求，也大量占據(jù)了醫(yī)務(wù)人員、醫(yī)療物資、醫(yī)療職能等資源?；谏鲜銮闆r，結(jié)合對(duì)新冠病毒、COVID-19、新冠病毒傳染流行病學(xué)的不斷深入研究及專家共識(shí)［5］，逐步推行抗原/抗體檢測(cè)方法是對(duì)目前檢測(cè)方法必要的輔助與補(bǔ)充。截至本文撰寫時(shí)，我國(guó)批準(zhǔn)的新冠病毒抗原/抗體檢測(cè)試劑產(chǎn)品廠家已有20 多家，但有關(guān)該檢測(cè)管控的防疫相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道較少。在此，嘗試構(gòu)建該領(lǐng)域全過(guò)程閉環(huán)管控體系，以確保新冠病毒抗原/ 抗體檢測(cè)工作高效、有序地開展。

1 核酸檢測(cè)與抗原/抗體檢測(cè)對(duì)比分析

1.1 檢測(cè)原理

核酸檢測(cè)：最常采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）法檢測(cè)新冠病毒特異序列［6-7］，可將新冠病毒核糖核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為脫氧核糖核酸（DNA）。在PCR 反應(yīng)體系中，包含1 對(duì)特異性引物及1 個(gè)Taqman探針（其為1 段特異性寡核苷酸序列，兩端分別標(biāo)記報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)）。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；當(dāng)存在靶序列時(shí)，探針與模板結(jié)合，DNA 聚合酶利用其外切酶活性沿模板將探針酶切降解，使報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離，發(fā)出熒光。每擴(kuò)增一條DNA 鏈，就有一個(gè)熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR 儀能監(jiān)測(cè)出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)（4～6 h出結(jié)果），病毒核酸濃度越高，該值越小。

抗原/抗體檢測(cè)原理：通常采用膠體金法/熒光免疫層析法。將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上，膠體金標(biāo)記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待檢樣本滴加到試紙條一端的樣本墊上后，通過(guò)毛細(xì)作用向前移動(dòng)，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑并相互反應(yīng)，再移動(dòng)至固定的抗原或抗體區(qū)域時(shí)，待檢物與膠體金標(biāo)記試劑的結(jié)合物又與之特異性結(jié)合而被截留，聚集在檢測(cè)帶上，一般約等待15 min 即可通過(guò)肉眼觀察到定性顯色結(jié)果或通過(guò)配套熒光免疫分析儀進(jìn)行定量檢測(cè)的結(jié)果。

可見，前者能將極微量的病毒經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行倍量擴(kuò)增，且為直接檢測(cè)病毒RNA，檢測(cè)結(jié)果特異性（陽(yáng)性檢出準(zhǔn)確率接近100%）、靈敏度、可靠性更高，為確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”；后者需抗原/ 抗體達(dá)一定濃度方可檢出，且為間接檢測(cè)病毒RNA 表面的抗原蛋白或相應(yīng)抗體，檢測(cè)結(jié)果受病毒濃度、試劑組成成分差異性、取樣、加樣、時(shí)間、環(huán)境等因素影響，存在一定的假陽(yáng)性/假陰性（發(fā)生率1%～5%），靈敏度較低，可作為病毒感染的輔助篩查措施。

1.2 流通與應(yīng)用

試劑流通與管控：核酸檢測(cè)產(chǎn)品的采購(gòu)與使用均在特定機(jī)構(gòu)或單位部門由專人完成處理，其采購(gòu)數(shù)量、使用數(shù)量、剩余量能得到有效監(jiān)控；新冠病毒抗原/抗體檢測(cè)產(chǎn)品本身涉及生物源性物質(zhì)，雖具有一定管控要求，但其流通涉及單位、團(tuán)隊(duì)、個(gè)人，其采購(gòu)數(shù)量、使用數(shù)量、剩余數(shù)量均不可控，不確定性較大。

檢測(cè)條件與環(huán)境：核酸檢測(cè)在PCR 實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)條件與環(huán)境內(nèi)完成；新冠病毒抗原/抗體檢測(cè)可在一般室溫環(huán)境（居家、交通卡口等）下完成，檢測(cè)產(chǎn)品本身對(duì)溫濕度有要求，而一般開放性環(huán)境下，不僅溫濕度差異較大，且開袋后時(shí)長(zhǎng)也對(duì)結(jié)果有一定影響。此外，兩者采樣操作是否規(guī)范也會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

適用人群：核酸檢測(cè)適用于所有人群；新冠病毒抗原/ 抗體產(chǎn)品應(yīng)先區(qū)分非檢測(cè)與檢測(cè)產(chǎn)品，并根據(jù)不同適用人群（密接者、次密接者）先用不同樣本類型進(jìn)行適配。

檢測(cè)及采樣：核酸檢測(cè)全過(guò)程由專業(yè)人員完成，較規(guī)范、統(tǒng)一；抗原/抗體檢測(cè)更多由非專業(yè)人員自行檢測(cè)完成，在檢測(cè)操作、采樣操作方面存在較大的個(gè)體差異及不確定因素［8-9］。

1.3 結(jié)果報(bào)告與管控

報(bào)告與判定：核酸檢測(cè)報(bào)告由檢測(cè)部門統(tǒng)一、規(guī)范、定時(shí)上報(bào)對(duì)接系統(tǒng)，且對(duì)報(bào)告的真實(shí)性有職業(yè)規(guī)范和責(zé)任感約束，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果報(bào)告與判定進(jìn)行簽字負(fù)責(zé)；抗原/抗體檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告與判定，則具有不確定性、隨意性、不及時(shí)性、分散性。

廢品處理：核酸檢測(cè)后廢棄物統(tǒng)一回收處理，抗原/抗體檢測(cè)廢棄物因分為陽(yáng)性結(jié)果、陰性結(jié)果、無(wú)效結(jié)果，以及失效產(chǎn)品的廢棄物，且分散到各場(chǎng)所及個(gè)人，為陽(yáng)性廢棄物的管控增加了不確定性和難度，同時(shí)，大量使用抗原/抗體檢測(cè)產(chǎn)品必然導(dǎo)致醫(yī)療廢棄垃圾大量產(chǎn)生。

數(shù)據(jù)結(jié)果管理：核酸檢測(cè)可實(shí)現(xiàn)各份檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)統(tǒng)一、及時(shí)、定期匯總對(duì)接相關(guān)部門系統(tǒng)管理［10］；抗原/ 抗體檢測(cè)結(jié)果分散到個(gè)人，結(jié)果管控存在不確定性，上傳存在不定時(shí)性。

2 抗原/抗體檢測(cè)閉環(huán)管控體系構(gòu)建

2.1 閉環(huán)管控體系構(gòu)建流程

針對(duì)以上兩種檢測(cè)方法的特點(diǎn)與區(qū)別，從產(chǎn)品、場(chǎng)所、人員、檢測(cè)、監(jiān)管等方面分析抗原/抗體檢測(cè)閉環(huán)管控的科學(xué)、合理、可行性措施，以此構(gòu)建抗原/抗體檢測(cè)產(chǎn)品閉環(huán)管控體系［11-14］，詳見圖1（UDI 為賦予的唯一識(shí)別碼）。

圖1 抗原/抗體檢測(cè)全過(guò)程閉環(huán)管控（PSURRDT）體系Fig.1 Schematic diagram of closed-loop overall process management and control（PSURRDT）system for antigen / antibody detection

2.2 具體措施

2.2.1 UDI 賦碼管理

試劑來(lái)源與管控，除生產(chǎn)廠家對(duì)原料來(lái)源按生物源性物質(zhì)相關(guān)規(guī)定管控外，生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的抗原/抗體檢測(cè)試劑產(chǎn)品應(yīng)按《醫(yī)療器械唯一標(biāo)識(shí)系統(tǒng)試點(diǎn)工作方案》管理規(guī)定實(shí)施生產(chǎn)［15］，對(duì)每一個(gè)最小單元抗原/抗體檢測(cè)試劑產(chǎn)品賦UDI后才可出廠銷售。使每個(gè)檢測(cè)試劑產(chǎn)品可追溯流通全過(guò)程，直至銷售到個(gè)人。同時(shí)，多個(gè)最小單元整體包裝均賦該包裝內(nèi)所有最小單元唯一識(shí)別碼，整箱包裝單元，以此類推。如為未賦碼銷售，可能導(dǎo)致檢測(cè)試劑流通及使用過(guò)程的不可控。

2.2.2 分情況逐步實(shí)施

可按不同風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)區(qū)、交通檢驗(yàn)口、出入境檢查口、人群密集或聚集場(chǎng)所實(shí)施開展。既可建立檢測(cè)數(shù)據(jù)，又可在先行實(shí)施區(qū)域積累經(jīng)驗(yàn)，不斷完善檢測(cè)過(guò)程（包括檢測(cè)方法、相關(guān)制度規(guī)定等），建立科學(xué)、可行的實(shí)踐基礎(chǔ)與提供依據(jù)，便于進(jìn)一步推廣。對(duì)于治療期間確診患者、定點(diǎn)隔離人員、居家隔離人員、特定崗位及區(qū)域人員、防疫人員、檢測(cè)人員等，新冠病毒感染、發(fā)病、治療、治愈過(guò)程中體內(nèi)病毒抗原/抗體不斷發(fā)生變化，不同時(shí)期不同階段人員檢測(cè)時(shí)增加抗原/抗體檢測(cè)作為補(bǔ)充，可及時(shí)便捷了解病程基本情況，尤其是定量檢測(cè)診斷試劑，更可較準(zhǔn)確了解情況，基本滿足在特定區(qū)域、特定時(shí)間范圍內(nèi)對(duì)檢測(cè)人員的監(jiān)測(cè)要求，也大幅減小了醫(yī)務(wù)人員工作量。同時(shí)，也為進(jìn)一步開放性推廣建立基礎(chǔ)和提供依據(jù)。

2.2.3 詳細(xì)簡(jiǎn)明編寫說(shuō)明書

說(shuō)明書文字需簡(jiǎn)明、通俗，步驟清晰，并配以操作流程與步驟示意圖，可增加二維碼安裝下載操作視頻。檢測(cè)產(chǎn)品說(shuō)明書的內(nèi)容、格式、語(yǔ)言文字等需區(qū)別于非檢測(cè)產(chǎn)品，適用于大眾閱讀與理解。注意事項(xiàng)部分，增加提示掃描與關(guān)聯(lián)及檢測(cè)注意細(xì)節(jié)（盡量保持室溫、確保開袋后多長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)使用等），警示結(jié)果一旦陽(yáng)性，主動(dòng)聯(lián)系社區(qū)報(bào)備，并將檢測(cè)廢棄物專門包裝、于指定點(diǎn)回收。明確適用樣本類型、明確適用不同人群對(duì)象和場(chǎng)所所應(yīng)注意事項(xiàng)和特定要求。提供專門的咨詢電話等聯(lián)系方式。

2.2.4 相關(guān)管控

規(guī)格設(shè)計(jì)：建議當(dāng)以家庭為單位時(shí)，單盒少則配2～3 人份，多則配10～12 人份；用于員工數(shù)超過(guò)10 人的企事業(yè)單位、集體，單盒配備數(shù)量不宜少于20 人份。以此避免過(guò)度浪費(fèi)，也便于產(chǎn)品使用跟蹤管理，以及增加購(gòu)買依從性。同時(shí)便于第1次檢測(cè)出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)再進(jìn)行1～2次檢測(cè)復(fù)核。

組分與材質(zhì)選擇：建議采用復(fù)合鋁膜包裝，保證產(chǎn)品儲(chǔ)存密封性，每個(gè)最小單元檢測(cè)試劑條和采樣棒（拭子）均單獨(dú)包裝；應(yīng)配套較齊全的輔助工具或器材，必要時(shí)對(duì)其賦予與檢測(cè)試劑產(chǎn)品一一對(duì)應(yīng)的UDI。

檢測(cè)與報(bào)告：基于檢測(cè)試劑UDI與個(gè)人身份證相關(guān)聯(lián)，檢測(cè)結(jié)果與衛(wèi)健委等相關(guān)部門對(duì)接，與相關(guān)防疫措施工具對(duì)接，跟蹤銷售流通的檢測(cè)試劑。建立檢測(cè)數(shù)據(jù)庫(kù)，對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)立檢測(cè)結(jié)果上報(bào)自動(dòng)警報(bào)功能，定期統(tǒng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果并分析，為疫情應(yīng)急防控監(jiān)測(cè)系統(tǒng)收集必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)［9-12］。

跟蹤回訪：基于報(bào)告數(shù)據(jù)，有關(guān)部門不定期對(duì)購(gòu)買及使用數(shù)量、檢測(cè)情況、報(bào)告情況、廢品處理情況進(jìn)行跟蹤流調(diào)。并收集存在的問(wèn)題或困難，以便不斷完善相關(guān)管控，以及設(shè)立對(duì)檢測(cè)過(guò)程中遇到問(wèn)題的答疑或咨詢相關(guān)平臺(tái)。

報(bào)廢回收：分區(qū)定點(diǎn)回收處可以小區(qū)、生產(chǎn)隊(duì)、街道、片區(qū)等為單位，由專人負(fù)責(zé)，根據(jù)報(bào)告數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行精準(zhǔn)跟蹤。對(duì)于在效期內(nèi)未使用檢測(cè)試劑建庫(kù)跟蹤［16］及過(guò)期檢測(cè)試劑自行失效，以日常垃圾處理，或定點(diǎn)回收?；虿捎?4消毒液等有效消毒劑集中處理，并上報(bào)處理結(jié)果。

流程宣講：根據(jù)產(chǎn)品應(yīng)用情況，分區(qū)域、街道、社區(qū)、單位，集中組織有關(guān)專業(yè)人員指導(dǎo)講解檢測(cè)程序、注意事項(xiàng)，并貫徹抗原/抗體檢測(cè)相關(guān)政策法規(guī)。

3 討論

根據(jù)國(guó)際疫情形勢(shì)與我國(guó)國(guó)情，目前完全放開管控為時(shí)尚早，有必要在產(chǎn)品生產(chǎn)、流通、使用、報(bào)告、回收處理、數(shù)據(jù)庫(kù)管理、跟蹤溯源等環(huán)節(jié)，構(gòu)建科學(xué)、有效、可行的抗原/抗體檢測(cè)長(zhǎng)效全過(guò)程閉環(huán)管控體系，分區(qū)、分類逐步推廣且實(shí)行［17］。進(jìn)一步促進(jìn)防疫抗疫長(zhǎng)效機(jī)制的建立與完善，以及產(chǎn)品創(chuàng)新研發(fā)與應(yīng)用。

國(guó)內(nèi)外新冠病毒檢測(cè)產(chǎn)品與技術(shù)存在一定差異［18］，就檢測(cè)方法而言，其過(guò)程控制對(duì)檢測(cè)十分關(guān)鍵［19-21］，抗原檢測(cè)與抗體檢測(cè)仍存在產(chǎn)品組成成分、樣本類型、檢測(cè)方法（乳膠法、膠體金法、熒光免疫層析法等）等方面的差異，比核酸檢測(cè)影響因素干擾更大。因此，應(yīng)用場(chǎng)景及適用人群也存在一定差異，在抗原/抗體檢測(cè)全過(guò)程閉環(huán)管控體系下，可研發(fā)更安全、有效、便捷的檢測(cè)產(chǎn)品。不同檢測(cè)方法、不同檢測(cè)樣本的檢測(cè)產(chǎn)品，應(yīng)有序、分區(qū)、分步推廣，尤其對(duì)于面向大眾的檢測(cè)產(chǎn)品，不宜在同一時(shí)間窗內(nèi)推行多種方法、多種檢測(cè)樣本的產(chǎn)品，抗體檢測(cè)相對(duì)抗原檢測(cè)受限因素更多。目前，抗原檢測(cè)比抗體檢測(cè)更適合先推行，并且檢測(cè)產(chǎn)品應(yīng)開展更廣泛、深入、全面的干擾因素試驗(yàn)，不斷提高檢測(cè)產(chǎn)品的質(zhì)量和可應(yīng)用性。

國(guó)外許多國(guó)家與地區(qū)抗原檢測(cè)完全放開，但未建立檢測(cè)閉環(huán)管控體系，而是自行、自由、自主檢測(cè)，存在數(shù)據(jù)結(jié)果混亂、感染與交叉感染風(fēng)險(xiǎn)增加等問(wèn)題。由于文化和體制差異，建立抗原/抗體檢測(cè)全過(guò)程閉環(huán)管控體系未必在這些國(guó)家和地區(qū)具有可行性。也有些通過(guò)唾液居家采樣，然后送樣到指定實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)［22］。

抗原/ 抗體檢測(cè)結(jié)果上報(bào)需基于構(gòu)建的抗原/ 抗體檢測(cè)閉環(huán)管控體系，尤其適用于抗原/ 抗體居家自測(cè)、特定場(chǎng)所檢測(cè)，可起到可追溯、預(yù)警、可控效果。與此同時(shí)，也需更多部門的協(xié)作，未來(lái)將會(huì)有更人性化、智能化配套的數(shù)據(jù)工具、計(jì)算機(jī)工具用于抗原/抗體檢測(cè)全過(guò)程閉環(huán)管控中，進(jìn)一步提升管控質(zhì)量及效果。