交感神經(jīng)β2腎上腺素受體基因多態(tài)性與前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)及預(yù)后的相關(guān)性分析

馬志遠(yuǎn)

黑龍江省佳木斯市中心醫(yī)院泌尿外科 154002

前列腺癌在泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤中的發(fā)病率比較高，是常見的惡性腫瘤之一[1]。前列腺癌的早期患者大多預(yù)后良好，但晚期患者的預(yù)后情況較差，5年生存率較低。近年來隨著國民生活水平的提高、前列腺癌篩查的普及與人口老齡化的廣泛開展，前列腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)上升趨勢。前列腺癌根治術(shù)是前列腺癌的主要手術(shù)方法，包括切除雙側(cè)精囊、前列腺、膀胱頸部、雙側(cè)輸精管壺腹段等，能提高患者的生存率，但是很多患者可出現(xiàn)復(fù)發(fā)情況，影響患者的預(yù)后[2-3]。調(diào)查顯示，在接受根治性手術(shù)治療的前列腺癌患者中，10年內(nèi)發(fā)生生化復(fù)發(fā)在30.0%左右，為此在術(shù)后每6個(gè)月檢測1次血清前列腺特異抗原(PSA)[4-5]。近年來基因調(diào)控在腫瘤治療中的運(yùn)用逐漸增多，隨著人們研究的進(jìn)一步深入，交感神經(jīng)β2腎上腺素受體(β2-adrenergic receptor，β2AR)在癌癥生物學(xué)機(jī)制的調(diào)控中所發(fā)揮的作用得到了重視。β2AR屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族，通過介導(dǎo)交感神經(jīng)兒茶酚胺發(fā)揮其正性肌力的作用，若其表達(dá)水平發(fā)生改變，可影響機(jī)體的健康狀態(tài)。β2AR位于10號(hào)染色體短臂q24.26，包括5’非翻譯區(qū)、開放閱讀框和3’非翻譯區(qū)組成。當(dāng)前研究顯示β2AR有2個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)，第一位點(diǎn)為Ser49Gly基因多態(tài)性，即在受體氨基末端的第49位絲氨酸被甘氨酸所代替。第二位點(diǎn)Arg389Gly基因多態(tài)性羧基末端附近的389位甘氨酸被精氨酸所代替[6]。本文具體探討與分析了交感神經(jīng)β2AR基因多態(tài)性與前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)及預(yù)后的相關(guān)性，以明確前列腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)分子生物學(xué)證據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年8月—2020年6月在本院行根治性前列腺切除術(shù)的88例前列腺癌患者作為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn)：手術(shù)病理確診為前列腺癌；手術(shù)前患者沒有給予任何治療；均無手術(shù)、麻醉禁忌證；患者簽署了知情同意書；患者臨床與隨訪資料完整；都為中國人；男性，年齡30～75歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：采用非手術(shù)治療的前列腺癌患者；臨床資料不完整的患者；失訪的患者；合并其他部位惡性腫瘤者；在手術(shù)期間死亡的患者。

1.2 β2AR基因多態(tài)性檢測 在根治性前列腺切除術(shù)前采集患者的空腹靜脈血2～3ml，4℃放置30min后，2 000r/min，離心10min，取上層血清，并儲(chǔ)存于-80℃冰箱。提取血清基因組DNA，對(duì)DNA濃度進(jìn)行測定，對(duì)其進(jìn)行稀釋溶解后用于PCR測定。采用羅氏公司試劑盒，將Arg389Gly-PCR的反應(yīng)條件設(shè)定為：94℃預(yù)變性30s，94℃變性45s，62℃退火45s，72℃延伸45s，循環(huán)40次，對(duì)PCR產(chǎn)物采用瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行進(jìn)一步處理和鑒定，然后進(jìn)行測序，明確基因多態(tài)性情況。

1.3 預(yù)后調(diào)查 所有患者隨訪到2021年11月1日，記錄患者的復(fù)發(fā)情況，患者術(shù)后PSA監(jiān)測頻率為每3個(gè)月1測，復(fù)發(fā)定義為術(shù)后血清PSA水平連續(xù)2次>0.2ng/ml。以手術(shù)日期作為隨訪的起始點(diǎn)，其中以出現(xiàn)復(fù)發(fā)作為隨訪終點(diǎn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS23.00統(tǒng)計(jì)軟件(SPSS Inc，美國)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05時(shí)差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有意義。計(jì)量數(shù)據(jù)與計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差、%等表示，對(duì)多基因多態(tài)性頻率進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)，對(duì)比為χ2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)分析等，相關(guān)性分析采用多因素Logistic回歸分析，預(yù)測價(jià)值分析采用ROC分析。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)發(fā)情況 在88例患者，隨訪到2021年11月1日，平均隨訪時(shí)間(28.17±2.81)個(gè)月，復(fù)發(fā)18例，復(fù)發(fā)率為20.5%。

2.2 一般資料 復(fù)發(fā)組的年齡、臨床分期、術(shù)前Gleason評(píng)分、術(shù)前PSA水平、體重指數(shù)、腫瘤直徑與非復(fù)發(fā)組對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料對(duì)比

2.3 β2AR Arg389Gly基因多態(tài)性 所有檢測結(jié)果符合Hardy-Weinberg平衡，復(fù)發(fā)組的β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G頻率高于非復(fù)發(fā)組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組β2AR Arg389Gly基因多態(tài)性對(duì)比[n(%)]

2.4 相關(guān)性分析 多因素Logistic回歸分析顯示，β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G為影響前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的重要因素(P<0.05)。見表3。

表3 交感神經(jīng)β2AR基因多態(tài)性與前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)及預(yù)后的相關(guān)性分析(n=88)

2.5 預(yù)測價(jià)值分析 ROC分析顯示，β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G預(yù)測前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的曲線下面積分別為0.750和0.861。見圖1。

GG基因型 等位基因G

3 討論

前列腺癌是世界上發(fā)病率最高的男性惡性腫瘤之一，在泌尿系腫瘤的臨床診治中十分常見，對(duì)中老年男性造成嚴(yán)重死亡威脅，在中國的發(fā)病率略低于西方國家，但死亡率卻逐年攀升[7]。前列腺癌患者一般在病程早期可以通過積極治療，達(dá)到良好的預(yù)后效果，5年生存率在80.0%。但在前列腺癌的病程晚期，預(yù)后效果普遍較差，5年生存率在40.0%以上[8]。目前對(duì)于前列腺癌患者最有效的治療方式是行根治性前列腺切除術(shù)，能提高患者的生存率，但是很多患者存在術(shù)后復(fù)發(fā)情況。當(dāng)前對(duì)于患者術(shù)后是否會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)的判斷大都基于臨床醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)，但是主觀性比較強(qiáng)[9]。88例患者，隨訪到2021年11月1日，平均隨訪時(shí)間(28.17±2.81)個(gè)月，復(fù)發(fā)18例，復(fù)發(fā)率為20.5%；復(fù)發(fā)組的年齡、臨床分期、術(shù)前Gleason評(píng)分、術(shù)前PSA水平、體重指數(shù)、腫瘤直徑與非復(fù)發(fā)組對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；復(fù)發(fā)組的β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G頻率高于非復(fù)發(fā)組(P<0.05)。從機(jī)制上分析，β2AR是Gs蛋白偶聯(lián)受體，存在幾個(gè)基因多態(tài)性，β2AR的基因多態(tài)性可激活蛋白激酶A，后者通過對(duì)鈣離子通道磷酸化作用使細(xì)胞膜對(duì)鈣離子的通透性增大，引起鈣離子內(nèi)流增加產(chǎn)生正性變力效應(yīng)。β2AR Arg389Gly的發(fā)生可提升腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的擴(kuò)散能力[10]。

準(zhǔn)確的預(yù)測前列腺癌術(shù)后患者復(fù)發(fā)可以為患者制定個(gè)性化的復(fù)查方案，對(duì)于高復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的患者可提高復(fù)查的頻率而對(duì)于低復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的患者，可以適當(dāng)延長復(fù)查的間隔，從而確?；颊叩玫阶顑?yōu)預(yù)測效果[11-12]。醫(yī)學(xué)界常用的前列腺癌篩查診斷指標(biāo)是血清PSA表達(dá)，但PSA存在許多缺陷，其特異性是針對(duì)整個(gè)前列腺組織，而不是單獨(dú)針對(duì)前列腺腫瘤組織，再加上炎癥等相關(guān)因素都會(huì)影響患者體內(nèi)的PSA濃度水平，因此將PSA作為前列腺癌術(shù)后患者的復(fù)發(fā)診斷指標(biāo)存在著不穩(wěn)定性，預(yù)測精準(zhǔn)度較低[13-14]。多因素Logistic回歸分析顯示，β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G為影響前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的重要因素(P<0.05)；ROC分析顯示，β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G預(yù)測前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的曲線下面積分別為0.750和0.861。從機(jī)制上分析，當(dāng)交感神經(jīng)興奮性過高時(shí)，心臟交感神經(jīng)末梢釋放的去甲腎上腺素作用于心肌細(xì)胞膜上的β2AR，從而激活腺苷酸環(huán)化酶，使細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷腺苷的濃度升高，可導(dǎo)致細(xì)胞電生理特性發(fā)生改變，從而影響細(xì)胞的遷移與轉(zhuǎn)移。β2AR的389位氨基酸殘基細(xì)胞內(nèi)胞漿受體尾部，是受體與G蛋白偶聯(lián)的重要結(jié)構(gòu)。β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G，可發(fā)揮促進(jìn)腫瘤細(xì)胞發(fā)生、生長和轉(zhuǎn)移的作用[15]。本研究由于時(shí)間限制，隨訪時(shí)間比較短，且沒有納入非手術(shù)治療患者，基因多態(tài)性位點(diǎn)分析也比較少，將在后續(xù)研究中進(jìn)行探討。

綜上所述，前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)比較常見，β2AR Arg389Gly GG基因型與等位基因G為影響前列腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的重要因素。