精神分裂癥患者外周血miR-21 表達水平與攻擊行為的相關(guān)性研究

倪 珂，李 磊，回佳印，賀 峰

（齊齊哈爾市精神衛(wèi)生中心睡眠心理治療科，黑龍江 齊齊哈爾 161000）

精神分裂癥（schizophrenia）是臨床上嚴重且復(fù)雜的一種精神性疾病，攻擊行為是精神分裂癥患者常見的表現(xiàn)。據(jù)報道[1，2]，我國精神分裂癥患者攻擊行為的發(fā)生率為20%～40%。攻擊行為具體是指患者對自身、他人、物品進行語言攻擊、身體攻擊，可對患者自身及家屬、醫(yī)務(wù)人員、社會均造成危害。近些年，國內(nèi)多項研究報道了陽性與陰性癥狀量表（positive and negative syndrome scale，PANSS）評分、服藥依從性等是精神分裂癥患者攻擊行為的影響因素[3-5]，但目前尚缺乏能夠評估和預(yù)測精神分裂癥患者攻擊行為的血清或外周血標志物。微小RNA（microRNA，miR）是近些年神經(jīng)及精神疾病研究的熱門分子，能夠在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達并介導(dǎo)相應(yīng)的生物學作用。miR-21 是一種具有神經(jīng)保護作用的miR，對缺氧復(fù)氧、外傷等因素引起的神經(jīng)元損害具有保護作用[6，7]。研究發(fā)現(xiàn)[8]，miR-21 的異常低表達與精神分裂癥的發(fā)病有關(guān)，可能機制是miR-21 的低表達削弱了其神經(jīng)保護作用，進而導(dǎo)致精神分裂癥。為了進一步闡明miR-21 在精神分裂癥發(fā)病中的作用及其與攻擊行為的關(guān)系，本研究觀察了精神分裂癥患者外周血miR-21 表達水平與攻擊行為的相關(guān)性，旨在為今后研究精神分裂癥患者攻擊行為的發(fā)病機制及評估標志物提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年1 月-2019 年12 月于齊齊哈爾市精神衛(wèi)生中心住院治療的114 例精神分裂癥患者作為精神分裂癥組，包括男68 例、女46例；年齡22～52 歲，平均年齡（38.48±9.81）歲；納入標準：①符合《國際疾病分類（第10 版）》（International Classification of Diseases,tenth edition，ICD-10）中精神分裂癥的診斷標準且處于急性發(fā)作期；②入組前3個月未服用抗精神病藥物；③小學文化以上；④臨床資料完整；排除標準：①腦器質(zhì)性疾病或軀體疾病引起的精神障礙；②合并心肝腎功能異?；騼?nèi)分泌系統(tǒng)疾病。另選擇同期在我院進行健康體檢的100 名志愿者作為對照組，均為健康人群，且排除神經(jīng)系統(tǒng)疾病、精神疾病，包括男59 名、女41 名；年齡20～50 歲、平均年齡（36.12±11.03）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過，受試者或其家屬知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 外周血miR-21 表達水平檢測 取精神分裂癥組患者入院后即刻的外周血3 ml 及對照組受試者體檢時的外周血3 ml，采用試劑盒進行miR-21 表達水平的檢測。采用全血RNA 提取試劑盒（廣州吉賽生物公司）進行實驗，提取外周血中的RNA，采用一步法miR 反轉(zhuǎn)錄試劑盒（海爾濱新海基因檢測公司）進行反轉(zhuǎn)錄實驗；合成miR 對應(yīng)的cDNA，采用miR 熒光定量PCR 試劑盒（海爾濱新海基因檢測公司）進行PCR 實驗，配置如下反應(yīng)體系：cDNA 樣本1 μl、試劑盒內(nèi)的PCR 反應(yīng)混合液10 μl、上下游引物（濃度10 μmol/L）各0.4 μl、去離子水補足至20 μl，所用引物分別為miR-21 及內(nèi)參U6 的特異性引物。在熒光定量PCR 儀上按照94 ℃預(yù)變性2～3 min 后94 ℃15 s、60 ℃40 s 重復(fù)40 個循環(huán)的程序完成PCR 反應(yīng)，生成反應(yīng)的循環(huán)曲線及循環(huán)閾值（cycle threshold，Ct）。以U6 為內(nèi)參，計算miR-21 的表達水平。

1.2.2 攻擊行為評價 采用修訂版外顯攻擊行為量表（modified overt aggression scale，MOAS）評價精神分裂癥患者的攻擊行為，MOAS 評分≥5 分認為有攻擊行為、＜5 分認為無攻擊行為。

1.2.3 臨床資料收集 根據(jù)精神分裂癥患者的病歷，收集以下臨床資料：性別、年齡、受教育程度、婚姻狀況、病程、PANSS 評分、皮質(zhì)醇。

1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，應(yīng)用Prism6.0 軟件進行制圖。計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗；采用Pearson 相關(guān)性分析精神分裂癥組患者外周血miR-21 表達與MOAS 評分的關(guān)系；采用Logistic 回歸分析精神分裂癥組患者攻擊行為的影響因素。以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 精神分裂癥組與對照組外周血miR-21 表達比較 精神分裂癥組與對照組外周血miR-21 的表達水平分別為（0.59±0.21）、（1.00±0.26），組間比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見圖1。

圖1 精神分裂癥組與對照組外周血miR-21 表達比較

2.2 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者外周血miR-21 表達比較 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者外周血miR-21 的表達水平分別為（0.65±0.02）分、（0.44±0.03）分，組間比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見圖2。

圖2 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者外周血miR-21 表達比較

2.3 精神分裂癥組患者外周血miR-21 表達與MOAS 評分的相關(guān)性 Pearson 相關(guān)性分析顯示，精神分裂癥組患者外周血miR-21 表達水平與MOAS評分呈負相關(guān)（r=-0.7189，P＜0.05），見圖3。

圖3 精神分裂癥組患者外周血miR-21 表達與MOAS 評分的相關(guān)性

2.4 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者臨床特征比較 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者病程、PANSS 評分中的陽性癥狀評分、陰性癥狀評分、一般精神病理學癥狀評分、血清皮質(zhì)醇含量比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；而二者性別、年齡、受教育程度、婚姻狀況比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者臨床特征比較[n（%），]

表1 精神分裂癥組中有攻擊行為和無攻擊行為患者臨床特征比較[n（%），]

2.5 精神分裂癥組患者攻擊行為的影響因素 按照精神分裂癥患者是否存在攻擊行為作為因變量，有攻擊行為和無攻擊行為患者中有統(tǒng)計學差異的因素作為自變量，經(jīng)Logistic 回歸分析顯示，miR-21 表達、陽性癥狀評分、陰性癥狀評分、一般精神病理學癥狀評分是精神分裂癥患者攻擊行為的影響因素（P＜0.05），見表2。

表2 精神分裂癥組患者攻擊行為的影響因素

3 討論

精神分裂癥是攻擊性最強的精神疾病之一，患者可出現(xiàn)多種形式的攻擊行為，包括語言攻擊、身體攻擊等。目前，精神分裂癥患者攻擊行為的發(fā)病機制尚不十分清楚，多項研究發(fā)現(xiàn)[9，10]，炎癥及應(yīng)激等是與精神分裂癥發(fā)病密切相關(guān)的環(huán)節(jié)。同時多項臨床研究也報道了血清皮質(zhì)醇、炎癥細胞因子等標志物對精神分裂癥患者攻擊行為的評估價值[11-13]，但不同研究的結(jié)果存在差異。薛坤喜等[12]研究認為，血清皮質(zhì)醇與精神分裂癥患者的攻擊行為不相關(guān)，而趙巍峰等[13]研究也發(fā)現(xiàn)，血清皮質(zhì)醇對精神分裂癥患者的攻擊行為具有預(yù)測價值，造成上述研究結(jié)果不一致的可能原因是精神分裂癥患者的個體差異較大，不同患者血清中激素及細胞因子變化的差異可能較大。因此，需要從發(fā)病分子機制的上游層面尋找精神分裂癥病情的評估標志物。

miR 是近些年精神和神經(jīng)疾病研究的熱門分子，其生物學功能是與靶基因的3'非翻譯區(qū)結(jié)合并使基因表達沉默，進而產(chǎn)生不同的生物學效應(yīng)。研究表明[14]，多種miRs 在精神分裂癥的發(fā)病過程中存在異常表達。miR-21 是與多種精神和神經(jīng)疾病發(fā)生密切相關(guān)的miR，在精神分裂癥小鼠[8]、腦外傷小鼠[15]、抑郁癥小鼠[16]的腦組織中miR-21 均呈低表達趨勢。本研究檢測了外周血中miR-21 的表達水平并發(fā)現(xiàn)，精神分裂癥患者外周血miR-21 表達低于對照組，與miR-21 在精神分裂癥小鼠腦組織中低表達的趨勢一致，表明miR-21 的低表達可能與精神分裂癥的發(fā)病有關(guān)。在此基礎(chǔ)上，本研究采用MOAS量表對精神分裂癥患者的攻擊行為進行評價，在入組的114 例精神分裂癥患者中，共35 例患者的MOAS 評分≥5 分，即存在攻擊行為，攻擊行為發(fā)生率為30.70%。在使用MOAS 評分篩選存在攻擊行為的精神分裂癥患者后分析miR-21 表達的差異可知，有攻擊行為患者的外周血miR-21 表達水平低于無攻擊行為患者，同時還發(fā)現(xiàn)miR-21 表達水平與MOAS 評分呈負相關(guān)，這一結(jié)果表明miR-21 低表達與攻擊行為的發(fā)生有關(guān)，且miR-21 表達越低，攻擊行為越明顯。已有miR-21 相關(guān)的研究證實[17]，miR-21 能夠抑制炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細胞凋亡等環(huán)節(jié)并起到神經(jīng)元保護作用。結(jié)合本研究的結(jié)果進行分析，miR-21 低表達引起攻擊行為可能的分子機制是激活炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、細胞凋亡等，但具體的機制仍有待今后進一步的基礎(chǔ)研究來證實。

目前，精神分裂癥患者攻擊行為的發(fā)病機制尚不清楚，但國內(nèi)多項研究對相關(guān)的影響因素進行了分析，發(fā)現(xiàn)PANSS 量表中的各項評分是精神分裂癥患者攻擊行為的影響因素[3-5]。本研究通過Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，PANSS 量表中的陽性癥狀評分、陰性癥狀評分、一般精神病理學癥狀評分是精神分裂癥患者攻擊行為的影響因素。當精神分裂癥患者陽性癥狀明顯時，容易出現(xiàn)幻覺、敵對情緒并誘發(fā)攻擊行為；當陰性癥狀明顯時，容易出現(xiàn)抑郁、焦慮等并誘發(fā)自傷、自殺等行為。除此之外，本研究還通過Logistic 分析發(fā)現(xiàn)miR-21 表達也是精神分裂癥患者攻擊行為的影響因素，這與有攻擊行為患者miR-21 表達減少及miR-21 與MOAS 評分呈負相關(guān)的結(jié)果吻合，進一步表明miR-21 表達減少與精神分裂癥患者攻擊行為的產(chǎn)生有關(guān)。

綜上所述，精神分裂癥患者外周血miR-21 表達減少且與攻擊行為的產(chǎn)生有關(guān)，檢測外周血miR-21 的表達水平對精神分裂癥患者的攻擊行為具有評估價值，這為今后研究精神分裂癥患者攻擊行為的發(fā)病機制及治療靶點提供了新思路。