非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室防控中存在的問題及對策

李曉露

(秦安縣畜牧獸醫(yī)事務(wù)服務(wù)中心,甘肅 天水 741600)

非洲豬瘟的臨床癥狀與病理變化和豬瘟的癥狀與病變化有諸多相似之處,故對其的診斷主要依靠實(shí)驗(yàn)室來診斷,而實(shí)驗(yàn)室檢測能夠快速準(zhǔn)確的對被檢測的發(fā)病豬確定是不是非洲豬瘟,不是非洲豬瘟,采取治療和綜合防控措施;是非洲豬瘟立即上報,進(jìn)行無害化處理。通過對豬場的環(huán)境樣品采集后監(jiān)測和檢測有無非洲豬瘟,及時切斷病原進(jìn)入豬場,還有對豬場平時的消毒是否到位也是一個檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測和檢測非洲豬瘟能夠?qū)⑽⑿〔《咀兊脽o處可藏,幫助我們及時確診發(fā)病豬只,完善疫病防控的工作流程,彌補(bǔ)生物安全的漏洞,實(shí)驗(yàn)室的這些優(yōu)勢都是其它途徑不能夠?qū)崿F(xiàn)的。

1 非洲豬瘟實(shí)驗(yàn)室防控中存在的問題

1.1 非洲豬瘟樣品的采集不規(guī)范

生豬點(diǎn)對點(diǎn)檢測采集生豬的血液樣品的過程中,在采血管中沒有加入抗凝劑,不能夠保證采集樣品的質(zhì)量,很多樣品在送往實(shí)驗(yàn)室的過程中已經(jīng)出現(xiàn)凝血的現(xiàn)象,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室在檢測的過程中要么不能用或者導(dǎo)致檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確性增加。最終只能重新到場點(diǎn)采集樣品,這樣不但增加了防疫工作人員的工作量,同時養(yǎng)殖場點(diǎn)的負(fù)責(zé)人也會不滿,因?yàn)槎虝r間頻繁的采血對豬的生長是不利的。有些采集人員為了減少采集的量,只對一只豬采集一管血液樣品,這樣雖然理論上對應(yīng)該檢測的豬樣品都采集到了,但是一管樣品不能保證實(shí)驗(yàn)室檢測的準(zhǔn)確性,這樣在復(fù)檢的過程中有有可能出現(xiàn)血液樣品不足的情況,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)檢測的進(jìn)度和準(zhǔn)確性都打折扣。

1.2 樣品的運(yùn)輸條件和保存時間存在問題

由于個別養(yǎng)殖場被采樣數(shù)量龐大,采集人員配備不足,當(dāng)天不能夠全部完成血液樣品的采樣工作,為了圖省事,把當(dāng)天采樣的樣品不送往實(shí)驗(yàn)室,等到一個場全部樣品采集完成后一起送往實(shí)驗(yàn)室。由于樣品數(shù)量多,不能夠按照規(guī)定的保存條件來保存被采集的樣品,還有采集時間超過樣品最長保存7 d的時限,這樣大概率會導(dǎo)致樣品的變質(zhì)和檢測結(jié)果存在誤差,不利于快速檢測出有問題的樣品,也就不能采取相對應(yīng)的處置措施。

1.3 樣品核酸提取不配套

因?yàn)樵谵r(nóng)業(yè)農(nóng)村部批準(zhǔn)使用的試劑盒當(dāng)中,一般情況下不包含核酸提取試劑盒,不同公司提供的核酸提取試劑盒差異非常大,提取的質(zhì)量差異也很大,這樣導(dǎo)致核酸提取儀器跟核酸提取試劑不是同一個廠家生產(chǎn)的,這樣提取樣品的量不能夠保證,同時檢測的結(jié)果有可能跟實(shí)際情況出現(xiàn)巨大的差異。

1.4 實(shí)驗(yàn)室操作人員非洲豬瘟檢測技能不高

實(shí)驗(yàn)室操作人員在整個檢測過程當(dāng)中是非常重要的一個環(huán)節(jié)。因?yàn)榉秦i洲瘟的緣故,各地都在市一級的實(shí)驗(yàn)室新建了分子生物實(shí)驗(yàn)室,但是由于一些實(shí)驗(yàn)室人員以前沒有接觸過分子實(shí)驗(yàn)室操作技能,導(dǎo)致有些實(shí)驗(yàn)室人員的素質(zhì)還是不盡如人意,出現(xiàn)了雖然實(shí)驗(yàn)室配備了,但是檢測結(jié)果和檢測速度跟不上非洲豬瘟防控的要求

2 采取的對策

2.1 規(guī)范采集樣品和樣品運(yùn)輸保存

樣品能在采集后24 h內(nèi)送抵實(shí)驗(yàn)室,環(huán)境溫度高于25℃ 則可放在 4℃ 左右的容器中運(yùn)送,其他溫度則室溫保存運(yùn)送,超過1 d以上送樣-15℃以下保存,樣品建議7 d之內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測。無菌采集5 mL之后加入抗疑血,冷藏運(yùn)輸,到達(dá)檢測實(shí)驗(yàn)室后,冷凍保存。唾液的采集以欄為單位,通過自制或商品化的棉繩懸掛于欄的某一位置,采食前后2 h吸引豬群撕咬,以懸掛1 h之內(nèi)為宜,在采集管中加一些有效的酶抑制劑,有效保持唾液樣本的活性,建議選用特定的保存液用于唾液樣品的采集及保存。

2.2 核酸提取試劑跟儀器要配套使用

當(dāng)前由于經(jīng)過很多精細(xì)化的檢測壁壘實(shí)驗(yàn)以后,有很多試劑盒對跟有些PCR儀器不配套使用的情況下是不能適用的。所以在檢測過程中我們要根據(jù)實(shí)際工作的需要選擇適用的PCR儀器,因?yàn)槊恳环N試劑盒的使用范圍,樣品種類,靈敏度,最低檢測限等是不一致的。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室使用最多的是熒光定量PCR試劑盒,根據(jù)使用試劑盒的檢測目的,有目的性的選擇試劑盒,特別要注意試劑盒的最低檢測限,這樣才能最大限度的保證實(shí)驗(yàn)檢測的準(zhǔn)確率。

2.3 加大實(shí)驗(yàn)室人員的培訓(xùn)

在今后的工作中對所有實(shí)驗(yàn)室人員要制定專門的分子實(shí)驗(yàn)室培訓(xùn)計劃,只有熟練的掌握了分子實(shí)驗(yàn)室的操作規(guī)程和技能,才能在后面的防控中不掉鏈子。全力做好實(shí)驗(yàn)室人員的新技能的培訓(xùn),使其不斷學(xué)習(xí)新技術(shù)、新方法,有本領(lǐng)在手才能更好的開展各項(xiàng)工作。

2.4 健全配套硬件設(shè)施

配備必要的工具和廢話,減少工作量,減少操作步驟,才能讓檢測人員在長時間的檢測工作中不僅完成檢測任務(wù),而且能夠把生物安全做好。同時,對硬件設(shè)施進(jìn)行優(yōu)化設(shè)置,減少人員在工作出現(xiàn)錯誤的幾率也很重要,比建設(shè)實(shí)體隔斷,有時效果更好。

3 按照國家防控方案用好專項(xiàng)基金可有效遏制非洲豬瘟蔓延

非洲豬瘟關(guān)鍵是要防控好,防大于治,因此要認(rèn)真貫徹落實(shí)《全國非洲豬瘟防控工作方案農(nóng)牧字(2019)12號》,嚴(yán)格內(nèi)防外堵,注重強(qiáng)基固本。不斷加強(qiáng)生物安全,擴(kuò)大檢測范圍,提高端點(diǎn)處置能力;改進(jìn)生豬(肉)調(diào)動;成立非瘟專項(xiàng)基金;開展防控技術(shù)攻關(guān),有效遏制非洲豬瘟蔓延。開展系統(tǒng)而科學(xué)的流行病學(xué)調(diào)查,找出問題的癥結(jié)并完善。