血清IL-17、HMGB1的水平與原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者發(fā)病及Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡的關(guān)系①

鄭為強(qiáng)

(福清市婦幼保健院，福建 福清 350300)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)是指孕婦在妊娠的過程中，連續(xù)性3次或者3次以上的流產(chǎn)情況，造成以上原因是患者自身存有內(nèi)分泌混亂，感染，遺傳等[1]。而原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)中會(huì)有大約50%的患者發(fā)病原因不詳，臨床將其命名為原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(recurrentspontaneous abortion,URSA)。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)URSA是因?yàn)樵袐D在妊娠早期母體對(duì)胎兒產(chǎn)生一定的免疫反應(yīng)造成，最明顯的為免疫反應(yīng)為輔助性T 細(xì)胞17(Thelper cell 17,Th17)，Treg，以上細(xì)胞在母體內(nèi)和胎兒之間，相互影響以及作用，隨之出現(xiàn)免疫耐受，并產(chǎn)生免疫排斥，TH17，Treg失衡；高遷移率族蛋白B1(high mobility group protein 1，HMGB1)、晚期糖基化終產(chǎn)物屬于免疫炎性反應(yīng)較強(qiáng)的因子，參與到機(jī)體內(nèi)炎性反應(yīng)，讓體內(nèi)的炎性反應(yīng)加劇[2,3]，為更好的進(jìn)行治療，需分析出有效治療方案，基于以上的背景資料，本文針對(duì)本院2020-03～2021-03進(jìn)行收治的原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者34例以及健康孕婦34例進(jìn)行分析，評(píng)定HMGB1的水平和URSA患者發(fā)病、Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡之間的聯(lián)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2020-03～2021-03選取于本院收治的原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者34例作為研究對(duì)象，列為研究組，年齡22～36歲，平均(28.03±5.56)歲，孕周8～14周，平均(11.21±1.02)周；另外選取健康孕婦34例列為參照組，年齡22～37歲，，平均(28.56±5.89)歲，孕周9～13周，平均(11.05±1.13)周。兩組年齡及孕周相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

患者住院后，在空腹?fàn)顟B(tài)下，采集靜脈血液5mL，將其加入抗凝管內(nèi)，并且用離心機(jī)進(jìn)行離心，以此獲得外周血單細(xì)胞，并制作成細(xì)胞液懸液，再利用Th17細(xì)胞流式檢測(cè)盒測(cè)定患者Th17、Treg，并且計(jì)算出Th17/Treg。血液樣本通過高速離心機(jī)進(jìn)行離心，以此得到血清，并且采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)HMGB1，晚期糖基化終產(chǎn)物，白細(xì)胞介素-6(Interleukin 6 ，IL-6), 白細(xì)胞介素-17(Interleukin 7，IL-17), 白細(xì)胞介素-10(Interleukin 10，IL-10)，所有的檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照要求進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

記錄和分析組內(nèi)HMGB1、Th17/Treg、晚期糖基化終產(chǎn)物、Th17、Treg、組內(nèi)IL-6、IL-17、IL-10、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 HMGB1、Th17/Treg、晚期糖基化終產(chǎn)物、Th17、Treg對(duì)比

研究組HMGB1、晚期糖基化終產(chǎn)物，Th17、Th17/Treg含量高于參照組，研究組Treg含量低于參照組，組間對(duì)比存有同質(zhì)性(P<0.05)，見表1。

表1 兩組HMGB1、Th17/Treg、晚期糖基化終產(chǎn)物、Th17、Treg對(duì)比

2.2 IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量比較

研究組IL-6、IL-17高于參照組，研究組IL-10、TGF-β含量低于參照組，組間存有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量比較

2.3 HMGB1和其它疾病的指標(biāo)關(guān)系

血清IL-17、HMGB1與URSA呈現(xiàn)出正相關(guān)性(r=0.522，P<0.05)；HMGB1和Th17、Th17/Treg、晚期糖基化終產(chǎn)物、IL-6、IL-17呈現(xiàn)出正相關(guān)性(r=0.457、0.490、0.530、0.400、0.440，P均<0.05)；和Treg、IL-10、TGF-β呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)性(r=-0.554、-0.526、-0.440，P均<0.05)。

3 討論

近些年復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者增加，其中以不明原因自發(fā)性流產(chǎn)居多，對(duì)女性身心健康造成影響，不利于正常妊娠和分娩[4]。對(duì)于自發(fā)性流產(chǎn)的病因隨著深入了解可知，患者自身的免疫學(xué)因素和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病理之間存在聯(lián)系。母體和胚胎之間接觸的位置在醫(yī)學(xué)上稱為母胎界面，正常健康妊娠孕婦母胎界面會(huì)存在一定量的免疫細(xì)胞，一般情況下，免疫細(xì)胞會(huì)按照適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行分布，形成獨(dú)特免疫耐受屏障[5]，有助妊娠，確保胎兒能夠正常分娩。但在某些病理的影響，母胎界面的免疫數(shù)量以及功能會(huì)出現(xiàn)變化，例如體內(nèi)的炎性細(xì)胞因子增加，會(huì)改變?cè)袐D自身的免疫反應(yīng)，提高孕婦感染率，自身免疫性疾病等，不利于正常妊娠，也無法正常給子宮胚胎供應(yīng)營(yíng)養(yǎng)，導(dǎo)致妊娠失敗，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)[6]。

HMGB1屬于可廣泛分布在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的高度保守和蛋白，擁有較強(qiáng)的晚期促進(jìn)炎癥等表現(xiàn)，近年研究中發(fā)現(xiàn)，HMGB1多參與到機(jī)體組織細(xì)胞DNA復(fù)制，轉(zhuǎn)錄，重組以及修復(fù)的過程中，在機(jī)體免疫炎性反應(yīng)中具有重要的作用，在病理性妊娠患者體內(nèi)就會(huì)看到HMGB1異常，當(dāng)處于子癇前期，胎盤器官表現(xiàn)出缺氧等情況時(shí)則可釋放到母體循環(huán)當(dāng)中，而早期植入本身就是可導(dǎo)致炎癥因子分泌釋放的一個(gè)重要的原因。根據(jù)研究報(bào)道可知，當(dāng)機(jī)體反復(fù)合并出現(xiàn)炎癥性刺激也被歸為早期植入失敗的最主要原因，同時(shí)炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展可導(dǎo)致非常高濃度的HMGB1暴露在母胎界面[7]，繼而出現(xiàn)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，出現(xiàn)妊娠的失敗。同時(shí)隨著相關(guān)報(bào)道的增加，也證實(shí)了HMGB1一般在損傷、感染、缺氧等應(yīng)激狀態(tài)下作為炎癥因子和損傷相關(guān)分子模式分子發(fā)揮多種作用，但近期研究發(fā)現(xiàn)機(jī)體在無感染的狀態(tài)下，HMGB1 也會(huì)發(fā)揮較強(qiáng)的促進(jìn)作用。另外，也有研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)，HMGB1在胎兒炎癥反應(yīng)中起到重要的調(diào)節(jié)作用。所以需要分析HMGB1的水平和Th17/Treg平衡關(guān)系，為后續(xù)治療提供參考。近年來，臨床資料顯示[8]，Treg細(xì)胞機(jī)體當(dāng)中一種具有較強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能的細(xì)胞群，在人體內(nèi)可發(fā)揮較強(qiáng)的免疫抑制作用，Treg還可對(duì)Th1/Th2平衡開始向著Th2偏倚。也有相關(guān)學(xué)者研究證實(shí)發(fā)現(xiàn)，Treg的細(xì)胞缺失也會(huì)導(dǎo)致母體對(duì)胎兒免疫排斥等，導(dǎo)致妊娠結(jié)局較差或者是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。由此可說明Treg一旦在機(jī)體內(nèi)數(shù)量及功能存在缺失的情況也會(huì)導(dǎo)致并加重URSA的發(fā)生及發(fā)展。Th17細(xì)胞則是一種近年來所發(fā)現(xiàn)的具有較強(qiáng)抗炎作用的CD4+T細(xì)胞，該指標(biāo)在URSA中的報(bào)道相對(duì)較少[9]?，F(xiàn)我院就HMGB1的水平和原因不明復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(URSA)患者發(fā)病、Th17/Treg細(xì)胞免疫失衡之間的聯(lián)系進(jìn)行探討及分析，旨在為該病的發(fā)病機(jī)制提供基礎(chǔ)。

本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)，研究組HMGB1、晚期糖基化終產(chǎn)物，Th17、Th17/Treg含量高于參照組，研究組Treg含量低于參照組；研究組IL-6、IL-17高于參照組，研究組IL-10、TGF-β含量低于參照組，組間存在差異(P<0.05)，其說明了不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者體內(nèi)的HMGB1、Th17、Th17/Treg、IL-6、IL-17、IL-10、TGF-β含量和正常孕婦對(duì)比，會(huì)有變化，體內(nèi)的Th17會(huì)過度表達(dá)，對(duì)Treg表達(dá)產(chǎn)生阻抑，體內(nèi)形成了過度免疫耐受，Th17和Treg比例失衡，導(dǎo)致失衡；URSA患者體內(nèi)的HMGB1的水平也會(huì)出現(xiàn)升高的跡象，HMGB1的水平會(huì)在TH17細(xì)胞促進(jìn)炎性細(xì)胞因子的釋放，讓TH17細(xì)胞和相關(guān)性細(xì)胞因子中的IL-6、IL-17上升，呈現(xiàn)正相關(guān)；HMGB1會(huì)在Treg細(xì)胞中產(chǎn)生作用，并且參與免疫阻抑因子的調(diào)控，讓Treg和其它相關(guān)的細(xì)胞因子隨著HMGB1上升而減少。HMGB會(huì)對(duì)TH17和Treg進(jìn)行調(diào)整，打破了Th17/Treg平衡，且HMGB1會(huì)和體內(nèi)的晚期糖基化終產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)合，參與到機(jī)體內(nèi)的免疫炎性反應(yīng)。

綜上所述，URSA患者HMGB1的水平和Th17/Treg存在一定的平衡聯(lián)系，一旦患者的HMGB1的水平和Th17/Treg失衡，就會(huì)造成URSA的發(fā)生。在今后的研究中可進(jìn)一步的擴(kuò)大樣本量，增加觀察指標(biāo)，以此更好的探討URSA患者的臨床優(yōu)勢(shì)性。