血漿Hcy、D-D、PAF與不孕癥的關(guān)系及對患者預(yù)后的影響

時會會，陳秀芹，王悅

（1.河南省醫(yī)藥科學(xué)研究院附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450006；2.鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450052；3.河南省人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450003）

不孕癥為干擾男女身心健康的一種世界問題，給患病夫婦帶來巨大精神壓力與社會壓力，同時給家庭和諧帶來不安定因素［1］。據(jù)統(tǒng)計，國內(nèi)不孕癥發(fā)病率約為3.53%～11.3%［2］。不孕癥發(fā)病因素較為復(fù)雜，包括年齡、營養(yǎng)、精神、內(nèi)分泌、機(jī)體免疫、先天發(fā)育與生殖器病變等有關(guān)［3］。血小板活化因子（platelet activating factor,PAF）是由組織細(xì)胞分泌一類調(diào)節(jié)因子，其可參加生殖過程中多個病理生理反應(yīng)［4］。研究顯示，PAF 于排卵、胚胎植入、受精、分娩等多個過程中起到重要作用［5］。同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）為機(jī)體心血管風(fēng)險事件的預(yù)測因子之一，和機(jī)體多個炎性反應(yīng)具有緊密聯(lián)系［6］。血栓前狀況可能引起孕婦出現(xiàn)胚胎反復(fù)種植失敗的狀況［7］。因此，本研究選取不孕癥患者69 例作為研究對象，分析血漿Hcy、D-二聚體（D-dimer,D-D）、PAF 與不孕癥的關(guān)系以及對預(yù)后的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020 年1 月至2021 年2 月期間河南省醫(yī)藥科學(xué)研究院附屬醫(yī)院接收的不孕癥患者69 例作為研究組，選擇同期健康者78 例作為對照組。研究組：年齡24～35 歲，平均（29.54±2.55）歲，體質(zhì)量指數(shù)（body mass index,BMI）20.9～24.1 kg/m2，平均（22.51±0.74）kg/m2；對照組：年齡24～36歲，平均（30.11±2.69）歲，BMI 20.5～24.2 kg/m2，平均（22.37±0.81）kg/m2。兩組年齡、BMI 等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)過排卵檢測、精液分析、子宮輸卵管造影等相關(guān)檢查確診是不孕癥女性；經(jīng)倫理委員會與學(xué)術(shù)委員會審核；自愿參與本研究，并簽署知情同意協(xié)議書者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：輸卵管異常等引起不孕；腎肝功能嚴(yán)重障礙者；中途參與其他研究者；合并認(rèn)知障礙或者精神障礙者；同期參與其他研究者。

1.3 方法

檢測方法：取晨起空腹外周靜脈血5 mL，以3 500 r/min 轉(zhuǎn)速離心取血清；經(jīng)固相夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清PAF 水平；取血清100 μL，加入濃度是10%的三-N-J 基磷化氫，10 μL 的N-二甲基甲酰胺溶液，放在5℃冰箱中孵育0.5 h，將硫基還原和血漿蛋白予以分離，加入100 μL 高氯酸溶液，離心沉淀，取30 μL 上清液，加入NaOH（0.5 mol/L）15 mL，加30 mL SBD-F 衍生液，放置60℃水浴鍋中加熱1 h，待完全反應(yīng)之后，放在冰上冷卻，后精密量取5 μL，通過高效液相色譜法測血漿Hcy 含量。采用免疫比濁法測D-D 含量。

1.4 觀察指標(biāo)

①對比兩組Hcy、D-D、PAF 水平。②分析Hcy、D-D、PAF 對于不孕癥診斷價值。③對比不同預(yù)后Hcy、D-D、PAF 水平。其中預(yù)后良好［接受體外受精-胚胎移植（IVF-ET）后妊娠］者51例、預(yù)后欠佳（IVF-ET 之后未妊娠）者18 例。④分析Hcy、D-D、PAF 對于不孕癥患者預(yù)后的預(yù)測價值。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料采取Bartlett 方差齊性檢驗與Kolmogorov-Smirnov正態(tài)性檢驗，均確認(rèn)具備方差齊性且近似服從正態(tài)分布，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩組間比較采用LSD-t檢驗，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，采用受試者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲線，獲取曲線下面積（AUC）、置信區(qū)間、敏感度、特異度及截斷值，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組D-D、Hcy、PAF 比較

研究組D-D、Hcy 高于對照組，PAF 低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組D-D、Hcy、PAF 比較（）

表1 兩組D-D、Hcy、PAF 比較（）

注：D-D：D-二聚體；Hcy：同型半胱氨酸；PAF：血小板活化因子。

2.2 Hcy、D-D、PAF 對于不孕癥的診斷價值

以不孕癥患者（69 例）作為陽性樣本，以健康體檢患者（78 例）作為陰性樣本，依據(jù)D-D、Hcy、PAF 水平變化趨勢繪制成ROC 曲線。結(jié)果為，聯(lián)合檢測AUC 為0.843、敏感性94.20%、特異性92.31%，D-D 的AUC 為0.775、敏感性75.36%、特異性73.08%，Hcy 的AUC 為0.777、敏感性78.26%、特異性76.92%，PAF 的AUC 為0.769、敏感性72.46%、特異性71.79%，其中聯(lián)合檢測的敏感性、特異性最高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 Hcy、D-D、PAF 對于不孕癥的診斷價值

2.3 不同預(yù)后D-D、Hcy、PAF 比較

預(yù)后良好者D-D、Hcy 低于預(yù)后欠佳者，PAF高于預(yù)后欠佳者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同預(yù)后D-D、Hcy、PAF 比較（）

表3 不同預(yù)后D-D、Hcy、PAF 比較（）

2.4 Hcy、D-D、PAF 對于不孕癥患者預(yù)后的預(yù)測價值

以預(yù)后欠佳患者（18 例）作為陽性樣本，以預(yù)后良好患者（51 例）作為陰性樣本，依據(jù)D-D、Hcy、PAF 水平變化趨勢繪制成ROC 曲線，結(jié)果為，聯(lián)合檢測AUC 為0.818、敏感性94.44%、特異性92.16%，D-D 的AUC 為0.686、敏感性72.22%、特異性72.55%，Hcy 的AUC 為0.767、敏感性77.78%、特異性76.47%，PAF 的AUC 為0.756、敏感性72.22%、特異性70.59%，其中聯(lián)合檢測敏感性、特異性最高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表4。

表4 Hcy、D-D、PAF 對于不孕癥患者預(yù)后的預(yù)測價值

3 討論

PAF 屬于血管活性介質(zhì)之一，于女性月經(jīng)周期和妊娠期間發(fā)揮重要作用［8］。PAF 能影響卵泡細(xì)胞功能和黃體生成，加快胚胎發(fā)育，引發(fā)子宮內(nèi)膜與蛻膜反應(yīng)［9］。在種植窗期間，子宮內(nèi)膜血管擴(kuò)張，通透性增加，PAF 能引發(fā)血管內(nèi)皮細(xì)胞收縮，同時刺激一氧化氮分泌，擴(kuò)大細(xì)胞間隙，致使著床位置血管擴(kuò)張，增加子宮內(nèi)膜容受性［10］。PAF 凝血上升能促進(jìn)子宮內(nèi)膜腺體分泌前列腺素，兩者可共同增加血管通透性，分泌多個營養(yǎng)物質(zhì)，有助于胚胎著床［11］。本研究結(jié)果顯示，不孕癥患者PAF 呈低表達(dá)狀況，且預(yù)后欠佳者PAF 水平較低，其原因可能為PAF 水平下降，可阻礙子宮內(nèi)膜容受性創(chuàng)建，導(dǎo)致孕卵難著床，致使不孕以及預(yù)后欠佳。

Hcy 為甲硫氨酸代謝物，于血漿內(nèi)多和蛋白結(jié)合之后存在。胱硫醚β-合成酶、甲硫氨酸合成酶等為Hcy 代謝過程中重要酶，Hcy 經(jīng)轉(zhuǎn)硫基與甲基化代謝途徑于機(jī)體內(nèi)保存動態(tài)平衡，于健康體檢人群中水平含量偏低。高濃度Hcy 可出現(xiàn)細(xì)胞毒性與胚胎毒性，能抑制胚胎發(fā)育，致使胚胎停育，對不孕以及預(yù)后欠佳發(fā)揮促進(jìn)效果［12］。本研究結(jié)果指出，研究組Hcy 高于對照組，預(yù)后欠佳者Hcy 高于預(yù)后良好者（P＜0.05），說明Hcy 水平升高可在不孕以及胚胎移植后胚胎發(fā)育等產(chǎn)生不良影響。

以往研究指出，血栓前狀態(tài)引起微循環(huán)障礙可相應(yīng)提高不孕癥患者胚胎種植失敗的風(fēng)險，降低患者子宮內(nèi)膜的容受性［13］。胚胎反復(fù)種植失敗者可由于自身多卵泡發(fā)育，使其進(jìn)至高雌激素狀況，本身可能具有獲得性血栓以及遺傳性血栓等，加上黃體支持，病理性高凝狀況可持續(xù)惡性，嚴(yán)重影響子宮內(nèi)膜容受性，增加胚胎種植障礙［14］。臨床上D-D 為評估機(jī)體血栓前狀況的指標(biāo)之一，其主要是由交聯(lián)纖維蛋白降解獲取。本研究顯示，研究組D-D 高于對照組，且預(yù)后欠佳者D-D 呈高表達(dá)狀況（P＜0.05），說明D-D 在不孕癥以及胚胎移植中發(fā)揮重要作用，其原因可能與血栓前狀況相關(guān)。

筆者將D-D、Hcy、PAF 水平變化繪制成ROC曲線對不孕癥診斷效能以及對于預(yù)后的預(yù)測價值予以分析，結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測對于不孕癥的診斷價值A(chǔ)UC 為0.843、敏感性94.20%、特異性92.31%高于D-D、Hcy、PAF，對于不孕癥患者預(yù)后的預(yù)測價值A(chǔ)UC 為0.818、敏感性94.44%、特異性92.16% 高于D-D、Hcy、PAF（P＜0.05），說明D-D、Hcy、PAF 可有效篩查不孕癥，并能有效預(yù)測預(yù)后，分析原因可能是為D-D、Hcy、PAF 可從不同角度分析對于不孕癥以及對于預(yù)后的影響，故在篩查不孕癥以及預(yù)測預(yù)后價值較高。

綜上所述，不孕癥患者D-D、Hcy 呈高表達(dá)狀況，PAF 呈低表達(dá)狀況，聯(lián)合D-D、Hcy、PAF 可有效篩查不孕癥，并能預(yù)測預(yù)后。