高羊毛氨酸硒對陜北白絨山羊羯羊生長性能、血液指標、瘤胃發(fā)酵、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率及氮代謝的影響

李 托 屈 雷 朱海鯨 李隴平*

(1.榆林學(xué)院，陜西省陜北絨山羊工程技術(shù)研究中心，榆林719000；2.榆林學(xué)院，生命科學(xué)學(xué)院，榆林719000)

硒作為動物生長和生產(chǎn)必需的微量元素之一，具有抗氧化、抗衰老、抗輻射等多種功效。硒不僅可以預(yù)防動物某些疾病，還可以促進動物生長發(fā)育，對維持動物正常生長發(fā)育和生產(chǎn)性能有著極其重要的作用[1-2]。陜北白絨山羊是陜北地區(qū)(榆林和延安)主要飼養(yǎng)的絨肉兼用型絨山羊，具有產(chǎn)絨量高和肉品質(zhì)好等特點，僅榆林地區(qū)飼養(yǎng)量就達800萬只，絨山羊養(yǎng)殖也已發(fā)展成為榆林市畜牧業(yè)的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)和陜北地區(qū)鄉(xiāng)村振興的重要途徑。研究表明，陜北白絨山羊飼養(yǎng)區(qū)土壤中硒及陜北白絨山羊血液中硒的含量分別為0.069 mg/kg和0.040 mg/L，說明陜北白絨山羊飼養(yǎng)區(qū)屬于嚴重缺硒地區(qū)，陜北白絨山羊體內(nèi)硒含量也低于國際上公認的0.05 mg/kg硒含量最低閾值，需要通過飼糧添加劑補充硒元素[3]。飼糧中補充硒能夠改善反芻動物瘤胃微生物抗氧化狀態(tài)，從而促進瘤胃微生物生長和瘤胃發(fā)酵，提高營養(yǎng)物質(zhì)消化率，最終促進動物生長[4-6]。Cui等[7]報道，在飼糧中添加酵母硒能夠顯著提高藏羊瘤胃氨態(tài)氮(NH3-N)、總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)、乙酸鹽、丁酸鹽和丙酸鹽濃度。Wei等[8]發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加硒代蛋氨酸羥基類似物提高了奶牛瘤胃發(fā)酵和粗蛋白質(zhì)(CP)、中性洗滌纖維(NDF)和酸性洗滌纖維(ADF)的表觀消化率。也有研究表明，飼糧中添加酵母硒可以提高奶牛的產(chǎn)奶量[9]和綿羊干物質(zhì)(DM)、有機物(OM)、NDF、ADF的表觀消化率和氮代謝[10]。然而，關(guān)于硒元素在陜北白絨山羊上的研究鮮見報道，只有熊忙利[3]研究了亞硒酸鈉對陜北白絨山羊羔羊斷奶成活率的影響和馬雄等[11]研究了酵母硒對絨山羊生長和組織抗氧化的影響。高羊毛氨酸硒(selenohomolanthionine，Se-HLan)是以甘油為生長介質(zhì)，產(chǎn)朊假絲酵母(Candidautilis)進行連續(xù)發(fā)酵獲得的一種新型有機硒[12]。Se-HLan與硒代蛋氨酸(SeMet)在體內(nèi)的代謝途徑不同，SeMet除參與硒蛋白合成外，還有相當一部分被當作蛋氨酸參與正常的蛋白質(zhì)代謝，而Se-HLan主要被用于硒蛋白的合成。研究表明，水溶性Se-HLan在動物體內(nèi)具有更高的生物利用率和沉積率，如果以畜禽產(chǎn)品沉積量作為評價硒生物利用率的指標，Se-HLan至少比SeMet高出10%[13-14]。因此，本研究以生長期陜北白絨山羊羯羊為試驗對象，研究飼糧添加不同水平Se-HLan對生長期陜北白絨山羊羯羊生長性能、血液常規(guī)參數(shù)、血清生化和抗氧化指標、瘤胃發(fā)酵、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和氮代謝的影響，以期為Se-HLan在陜北白絨山羊養(yǎng)殖過程中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選取體重[(26.18±2.71) kg]相近、健康狀況良好的6月齡陜北白絨山羊羯羊32只，隨機分為4組，每組8只羊。試驗羊每天飼喂2次(08:00和17:00)，自由飲水。

1.2 試驗設(shè)計

1.2.1 飼養(yǎng)試驗

參照中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準《肉羊飼養(yǎng)標準》(NY/T 816—2004)[15]中育肥山羊體重25 kg、日增重100 g時的營養(yǎng)需要配制基礎(chǔ)飼糧，加工為顆粒料，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1?；A(chǔ)飼糧中硒含量為0.016 mg/kg，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0、71、146、296 mg/kg的Se-HLan(硒含量為4 000 mg/kg，載體為麥芽糊精)，使飼糧硒含量分別為0.016(對照組，Ⅰ組)、0.300(Ⅱ組)、0.600(Ⅲ組)和1.200 mg/kg(Ⅳ組)。飼養(yǎng)試驗包括10 d預(yù)試期和60 d正試期。飼養(yǎng)試驗結(jié)束前1 d，所有試驗羊晨飼前通過頸靜脈采集5 mL新鮮血液。其中一份血液(肝素鈉抗凝血)當天測定血常規(guī)參數(shù)，另外一份不加抗凝劑的血液3 000 r/min離心10 min制備血清，用于后續(xù)血清生化和抗氧化指標的測定。另外，于飼養(yǎng)試驗結(jié)束當天早上晨飼前，用胃管式瘤胃液采樣管經(jīng)口腔采集所有試驗羊瘤胃液20 mL，為了避免動物唾液的污染，收集20 mL瘤胃液之前先棄去剛開始經(jīng)口腔抽出的50 mL瘤胃液。采集的瘤胃液用4層紗布過濾后，迅速用便攜式pH計測定瘤胃液pH后，低溫運回實驗室轉(zhuǎn)移至-80 ℃超低溫冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1.2.2 消化試驗

飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，將所有試驗羊放入自制的消化代謝籠，上層為飼養(yǎng)活動籠，下層為糞尿自動分離裝置，飼養(yǎng)活動籠的底部為漏縫地板、前方有料槽和飲水槽、后方設(shè)置控位門。按照全收糞、尿法進行為期11 d的消化代謝試驗，其中預(yù)試期7 d，正試期4 d。消化試驗正試期內(nèi)每天記錄每只試驗羊的給料量和剩料量，準確計算每1只試驗羊的采食量；每天08:00和17:00從代謝籠中的糞便收集板收集每只羊的糞便，同時準確稱量糞便重量?；靹蚝蟀纯傊亓康?0%取樣，其中一部分按100 g鮮糞加10%的硫酸10 mL固氮，避免糞中氨氮損失，-20 ℃保存，用于測定糞氮代謝；一部分用于風(fēng)干樣品制備及營養(yǎng)成分的測定。同時，每天用盛有100 mL 10%(v/v)硫酸的塑料盆收集每只羊的尿液，記錄每只試驗羊的尿液容積后，經(jīng)4層紗布過濾，按10%比例取樣，將收集的每只羊4 d尿樣混合到一起，放入-20 ℃冰箱冷凍保存，以備測定尿液中氮含量。所有的羊做完消化代謝試驗之后放回原圈。

1.3 指標測定

1.3.1 生長性能指標

飼養(yǎng)試驗過程中，每天記錄每圈羊的給料量和剩料量并計算平均日采食量(ADFI)，試驗期間每15 d測定1次所有羊的體重，計算平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

ADG=(終末體重-初始體重)/試驗天數(shù)；ADFI=[(試驗期內(nèi)每組
羊總給料量-試驗期內(nèi)
每組羊總剩料量)/試驗天數(shù)]/組內(nèi)試驗羊數(shù)；F/G=ADFI/ADG。

1.3.2 血常規(guī)指標

用肝素鈉抗凝管采集的血液樣品，在采用后2 h內(nèi)使用全自動血細胞分析儀(PE-6800，深圳市普康電子有限公司)及配套試劑測定試驗羊的血常規(guī)參數(shù)，包括紅細胞參數(shù)、白細胞參數(shù)和血小板參數(shù)等。

1.3.3 血清生化和抗氧化指標

血清中總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿素氮(UN)含量測定使用日本富士全自動干式生化分析儀(4000ie)；超氧化物歧化酶(SOD，A001-1)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px，A005-1)活性和丙二醛(MDA，A003-1)含量測定采用南京建成生物工程研究所的試劑盒。

1.3.4 營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

飼糧和糞樣中DM含量參照GB/T 6435—2014中的方法，采用105 ℃烘干法測定；粗脂肪(EE)含量參照GB/T 6433—2006中的方法，采用索式抽提法測定；粗灰分(Ash)的含量參照GB/T 6438—2007中的方法，采用550 ℃灼燒法測定；OM含量為DM和Ash之間的差值計算；粗蛋白質(zhì)(CP)含量和含氮量根據(jù)凱氏定氮法，采用全自動凱氏定氮儀(K9860，濟南海能儀器有限公司)測定；將飼糧和糞便烘干、粉碎、壓塊，采用氧彈量熱儀(ZDHW-5微機全自動量熱儀，鶴壁華諾電子科技有限公司)測定飼糧及糞中的能量；根據(jù)Van Soest等[16]提出的方法測定NDF和ADF含量。

飼糧中某營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100×

(該營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量-糞中該營養(yǎng)物質(zhì)的量)/
該營養(yǎng)物質(zhì)的攝入量；攝入總能(GEI，MJ/d)=日干物質(zhì)采食量(kg/d)×
飼糧燃燒值(MJ/kg)；糞能(FE，MJ/d)=糞便重量(kg/d)×
糞便燃燒值(MJ/kg)；消化能(DE，MJ/d)=GE(MJ/d)-FE(MJ/d)；能量表觀消化率(%)=100×[DE(MJ/d)/
GE(MJ/d)]；食入氮(MJ/d)=日干物質(zhì)采食量×
飼糧DM含氮量；可消化氮(g/d)=攝入氮-糞氮；總排出氮(g/d)=糞氮+尿氮；沉積氮(g/d)=食入氮-糞氮-尿氮；氮消化率(%)=100×可消化氮/食入氮；氮沉積率(%)=100×沉積氮/食入氮。

1.3.5 瘤胃發(fā)酵參數(shù)

用Staidson(SG2)手持式pH計測定瘤胃液pH；按照團體標準(T/NAIA 005—2020)中的方法，用GC102AF型氣相色譜儀測定瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度；按照團體標準(T/NAIA 0004—2020)用堿性次氯酸-苯酚分光光度法(722型分光光度計)測定瘤胃液NH3-N濃度。

1.4 數(shù)據(jù)處理分析

所有試驗數(shù)據(jù)以平均值和均值標準誤的形式表示，數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件one-way ANOVA程序進行單因素方差分析。若有顯著差異則采用LSD法對組間差異進行多重比較，采用正交多項式對比法確定飼糧Se-HLan添加量的線性和二次效應(yīng)。P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊生長性能的影響

由表2可知，隨著Se-HLan添加量的增加，試驗羊ADFI呈現(xiàn)出先增加后降低的二次變化(P<0.05)，Ⅲ組試驗羊ADG、ADFI和終末體重均最高，且Ⅲ組ADG顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組和Ⅳ組ADFI顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，Ⅲ組和Ⅳ組之間以及Ⅰ組和Ⅱ組之間差異不顯著(P>0.05)。Ⅲ組試驗羊F/G最低，顯著低于Ⅰ組(P<0.05)。

表2 不同Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊生長性能的影響

2.2 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊血液常規(guī)參數(shù)的影響

由表3可知，飼糧添加Se-HLan影響陜北白絨山羊羯羊白細胞計數(shù)和嗜酸性粒細胞計數(shù)，其中Ⅲ組試驗羊嗜酸性粒細胞計數(shù)顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，其他各組之間較差異不顯著(P>0.05)，Ⅳ組白細胞計數(shù)最高，Ⅲ組次之，Ⅰ組最低，且Ⅲ組和Ⅳ組顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)。飼糧添加Se-HLan對其余血常規(guī)參數(shù)均無顯著影響(P>0.05)。

表3 不同Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊血液常規(guī)參數(shù)的影響

續(xù)表3項目 Items組別 GroupsⅠⅡⅢⅣSEMP值 P-value方差分析ANOVA線性Liner二次Quadratic嗜堿性粒細胞比率 BASO percentage/%0.570.620.950.820.230.6280.2570.346中性粒細胞比率Neu percentage/%42.1342.7946.5944.143.690.4810.4230.257血小板類指標 Platelet indexes血小板計數(shù)PLT count/(×109個/L)111.38117.50119.25113.132.210.3200.1520.326血小板平均體積MPV/fL14.8314.4414.6514.700.560.3220.1120.604血小板分布寬度PDW/%17.5916.7917.9817.700.680.9560.5890.912血小板壓積 PCT/%0.140.140.150.140.010.5830.4550.309血小板大細胞比率P-LCR/%5.586.046.006.310.530.1320.7090.103

2.3 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊血清生化和抗氧化指標的影響

由表4可知，隨著Se-HLan添加量的增加，試驗羊血清ALB和TP含量呈現(xiàn)出先升高后降低的二次變化(P<0.01)，UN含量則線性降低(P<0.01)，Ⅲ組血清ALB含量顯著高于I組和Ⅳ組(P<0.05)，Ⅱ組和Ⅲ組血清TP含量顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，Ⅲ組和Ⅳ組血清UN含量顯著低于Ⅰ組(P<0.05)。

隨著Se-HLan添加量的增加，試驗羊血清SOD和GSH-Px活性呈現(xiàn)出先升高后降低的二次變化(P<0.01)，MDA含量則呈現(xiàn)出先降低后升高的二次變化(P<0.01)。與Ⅰ組相比，Ⅲ組試驗羊血清SOD和GSH-Px活性顯著升高(P<0.05)，其他3組試驗羊血清MDA含量顯著降低(P<0.05)。Ⅲ組血清SOD活性顯著高于其他3組(P<0.05)，Ⅲ組血清GSH-Px活性顯著高于Ⅳ組和Ⅰ組(P<0.05)；Ⅲ組血清MDA含量最低，Ⅰ組最高，且顯著高于其他3組(P<0.05)。

表4 不同Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊血清生化和抗氧化指標的影響

2.4 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊瘤胃液發(fā)酵參數(shù)的影響

由表5可知，添加Se-HLan有增加陜北白絨山羊羯羊瘤胃液pH的趨勢，但各組之間差異不顯著(P>0.05)；隨著Se-HLan添加量的增加，瘤胃液NH3-N濃度呈現(xiàn)出先增加后降低的二次變化趨勢(P<0.05)，Ⅲ組瘤胃液NH3-N濃度最高，極顯著高于其他3組(P<0.01)；Ⅲ組瘤胃液乙酸濃度最低，顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)；Ⅲ組瘤胃液丙酸濃度最高，顯著高于其他3組(P<0.05)；Ⅱ組瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度最高，顯著高于Ⅰ組和Ⅳ組(P<0.05)；瘤胃液丁酸濃度各組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組和Ⅳ組瘤胃液乙酸/丙酸值顯著低于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.05)，Ⅰ組和Ⅱ組以及Ⅲ組和Ⅳ組之間差異不顯著(P>0.05)。

表5 不同Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊瘤胃液pH、氨態(tài)氮和揮發(fā)性脂肪酸濃度的影響

2.5 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊能量消化的影響

由表6可知，飼糧添加Se-HLan極顯著影響陜北白絨山羊羯羊GEI、FE和DE(P<0.01)。隨著Se-HLan添加量的增加，試驗羊GEI、FE和DE呈現(xiàn)出先升高后降低的二次變化(P<0.01)。其中，Ⅲ組GEI和FE均極顯著高于其他3組(P<0.01)，其他各組之間差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組DE極顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(P<0.01)；Ⅳ組總能表觀消化率最高，但各組之間差異不顯著(P>0.05)。

表6 不同Se-HLan添加水平對陜北白絨山羊羯羊能量消化的影響

2.6 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表7可知，添加Se-HLan顯著或極顯著影響陜北白絨山羊羯羊DM、OM、NDF、ADF、EE、Ca和P的表觀消化率(P<0.05或P<0.01)。隨著飼糧Se-HLan添加量增加，DM、OM、NDF、ADF、EE和Ca的表觀消化率呈現(xiàn)出逐漸增高的變化趨勢(P<0.05或P<0.01)；P的表觀消化率表現(xiàn)出先增高后降低的二次變化(P<0.05)，且Ⅲ組P表觀消化率顯著高于Ⅰ組(P<0.05)。

表7 不同Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

2.7 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊氮代謝的影響

由表8可知，Se-HLan添加量極顯著影響陜北白絨山羊氮利用及氮利用率各項指標(P<0.01)。隨著Se-HLan添加量的增加，食入氮、可消化氮、沉積氮、氮消化率和氮沉積率均呈現(xiàn)出先增高后降低的二次變化(P<0.01)。其中，Ⅲ組食入氮顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，極顯著高于Ⅱ組(P<0.01)；與Ⅰ組相比，Ⅲ組可消化氮、沉積氮和氮沉積率極顯著升高(P<0.01)。

表8 不同Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊氮代謝的影響

3 討 論

3.1 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊生長性能的影響

關(guān)于飼糧添加硒元素對綿羊和山羊生長性能影響的報道中，以前的研究結(jié)果不太一致。張永翠等[17]和賈雪婷等[18]的研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加酵母硒對杜寒雜交羊(0、0.2、0.4和0.8 mg/kg Se)和灘羊(0、0.25、0.50、1.00和2.00 mg/kg Se)ADG和ADFI均無顯著影響；馬雄等[11]的研究表明，飼糧添加酵母硒對4～6月齡絨山羊ADG無顯著影響。但是，郭孝等[19]研究表明，添加15%高硒苜蓿極顯著影響杜泊羊ADG和飼料利用率；郭元晟等[5]的研究表明，添加酵母硒顯著提高蒙古羊ADG；張春香等[20]和朱翱翔等[21]研究表明，飼糧中添加亞硒酸鈉顯著影響山羊生長性能(體重、ADG和飼料轉(zhuǎn)化效率)；陳啟康等[22]對海門山羊的研究也表明，含硒顆粒飼料極顯著影響海門山羊的ADG。本試驗結(jié)果表明，飼糧中不同Se-HLan添加量顯著提高了陜北白絨山羊羯羊ADFI和ADG。本試驗研究結(jié)果與多數(shù)試驗結(jié)果顯示的飼糧添加硒具有提高肉羊生長性能的報道結(jié)果一致。硒參與甲狀腺激素的代謝，而甲狀腺素具有促進生長和發(fā)育的功能。飼糧缺硒會導(dǎo)致三碘甲狀腺原氨酸(T3)減少和四碘甲狀腺原氨酸(T4)增加，降低血液T3/T4的比值，T3減少影響動物生長速率。5-碘甲狀腺原氨酸脫碘酶是一種硒依賴性硒蛋白，具有激活T4向T3轉(zhuǎn)化的功能，也是缺硒狀態(tài)下最后一個活性受到影響的硒蛋白[23]。這表明不同硒蛋白對硒的敏感性存在差異。這在一定程度上解釋了補硒并未對動物生長性能(體重、ADG)產(chǎn)生影響的原因。另外，造成硒對動物生長性能研究結(jié)果不一致的原因還與飼糧添加不同硒源(亞硒酸鈉、酵母硒、蛋氨酸硒和Se-HLan)和不同品種動物(杜寒雜交羊、灘羊和絨山羊)對硒元素的吸收和利用有關(guān)[1-2,23]。

3.2 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊血常規(guī)參數(shù)和血清生化指標的影響

白細胞參數(shù)、紅細胞參數(shù)和血小板參數(shù)構(gòu)成血常規(guī)檢測的主要指標，可以反映動物機體的健康狀態(tài)。白細胞是機體防御衛(wèi)士，白細胞數(shù)量變化是衡量機體免疫力的重要指標[18]。單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞參與調(diào)節(jié)機體局部免疫[24]。本研究結(jié)果表明，添加Se-HLan提高了陜北白絨山羊羯羊血液中白細胞計數(shù)和嗜酸性粒細胞計數(shù)，改善了其免疫狀態(tài)。血小板計數(shù)大于400×109個/L即為血小板增多癥，導(dǎo)致皮下出血和血栓病發(fā)生[17]。本研究中，試驗羊各組間血小板計數(shù)無顯著差異，表明飼糧添加Se-HLan不會對陜北白絨山羊羯羊機體產(chǎn)生不利影響。血清TP、ALB和UN含量反映了機體蛋白質(zhì)代謝情況，本試驗結(jié)果表明，隨著飼糧Se-HLan添加量的增加，血清TP和ALB含量均呈現(xiàn)出先增加后降低的二次變化趨勢，且Ⅲ組含量顯著高于對照組(I組)；血清UN含量隨著Se-HLan添加量的增加逐漸降低，對照組血清UN含量最高，且顯著高于Se-HLan添加組，這些結(jié)果與張春香等[20]和魯玉花等[25]關(guān)于山羊的研究結(jié)果類似，表明添加Se-HLan降低了陜北白絨山羊羯羊血清UN含量，促進氮素利用，有利于機體蛋白質(zhì)合成。另外，添加Se-HLan能夠顯著提高陜北白絨山羊羯羊血清SOD和GSH-Px活性，降低血清MDA含量，張春香等[20]對山羊的研究、黃玉邦等[26]和秦順義等[27]對羔羊的研究以及石磊等[28]對妊娠母羊的研究也得到了類似的結(jié)果，說明添加不同形式硒源均能起到保護動物體內(nèi)細胞氧化損傷作用，提高山羊和綿羊機體抗氧化能力。本研究中，飼糧Se-HLan的添加量為146 mg/kg (硒含量為0.600 mg/kg)，對陜北白絨山羊羯羊血清抗氧化效果最為明顯。

3.3 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊瘤胃健康的影響

瘤胃液pH是反映瘤胃發(fā)酵的重要指標，瘤胃pH的高低直接影響瘤胃微生物活力及瘤胃健康狀態(tài)。最適宜瘤胃微生物生長、繁殖和機體健康的pH為6～7，本研究所有試驗羊瘤胃液pH均在此范圍里內(nèi)，表明飼糧添加Se-HLan不會對陜北白絨山羊羯羊瘤胃微生物活動造成不利影響。NH3-N是瘤胃代謝的中間產(chǎn)物，瘤胃液NH3-N濃度變化反映了瘤胃微生物對飼料蛋白質(zhì)的降解(氮降解)和微生物蛋白合成(氮吸收)之間的平衡狀態(tài)，是衡量反芻動物對氮利用效率的重要指標。研究表明，瘤胃氨含量過高，瘤胃微生物不能利用的那部分氨就會以NH3-N的形式損失掉；但也有研究表明，瘤胃高水平氨是瘤胃微生物高效利用飼料蛋白質(zhì)的結(jié)果，其和血液蛋白質(zhì)代謝相關(guān)[25]。本試驗結(jié)果表明，飼糧添加Se-HLan降低了陜北白絨山羊羯羊血清UN含量，增加了血清TP和ALB含量，顯著增加了瘤胃液NH3-N濃度，說明添加Se-HLan增強了陜北白絨山羊羯羊瘤胃微生物活力，提高了瘤胃微生物利用NH3-N合成自身蛋白質(zhì)的能力，增加了體蛋白的沉積，有利用增重。朱翱翔等[21]和Wang等[10]對綿羊的研究，魯玉花等[25]對山羊研究以及柏建明[29]對湖羊的研究也得出與本試驗基本類似的結(jié)果。瘤胃微生物對飼料營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用產(chǎn)生大量的揮發(fā)性脂肪酸，對于評估瘤胃發(fā)酵和瘤胃微生物活力具有重要的參考價值。本研究結(jié)果表明，添加Se-HLan提高了陜北白絨山羊羯羊瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸和丙酸濃度，降低了瘤胃液乙酸濃度和乙酸/丙酸值，使瘤胃趨于丙酸型發(fā)酵類型。反芻動物丙酸型發(fā)酵可以產(chǎn)生較多的葡萄糖，可以為機體提供更多的能量物質(zhì)，有利用育肥，從而提高增重。這與Xun等[30]和Cui等[7]對綿羊的研究得出的結(jié)果一致。這說明添加Se-HLan對陜北白絨山羊羯羊瘤胃發(fā)酵具有顯著的促進作用，也驗證了飼糧添加Se-HLan提高了能量表觀消化效率。本研究中飼糧Se-HLan的添加量為146 mg/kg (硒含量為0.600 mg/kg)，對陜北白絨山羊羯羊瘤胃發(fā)酵效果最好。

3.4 飼糧Se-HLan添加量對陜北白絨山羊羯羊營養(yǎng)物質(zhì)消化率和氮代謝的影響

有關(guān)硒對絨山羊飼糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率影響的研究較少，但對豬、禽和其他類型的反芻動物的研究較多。研究發(fā)現(xiàn)，蛋氨酸硒能夠顯著或極顯著提高豬、禽飼料轉(zhuǎn)化率[31-32]。劉強等[33]對西門塔爾牛的研究表明，飼糧添加蛋氨酸能夠顯著提高OM、CP、EE、NDF和ADF表觀消化率。魯玉花等[34]的體外試驗表明，添加較低水平硒(0.2、0.3和0.5 mg/kg)顯著提高纖維素消化率，添加較高水平硒(1.0和2.0 mg/kg)有降低纖維素消化率的作用，而添加高水平硒(5～20 mg/kg)顯著降低了纖維素消化率。董升[35]的研究也證實，飼糧添加0.2～0.5 mg/kg的硒能夠顯著提高纖維降解率。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，添加Se-HLan能夠顯著或極顯莉提高陜北白絨山羊羯羊DM、OM、NDF、ADF、EE、Ca和P的表觀消化率。本試驗研究還發(fā)現(xiàn)，飼糧添加Se-HLan增強了陜北白絨山羊羯羊?qū)︼暭Z總能的表觀消化率。這可能的原因是Se-HLan促進了瘤胃微生物的活性，從而提高了飼糧營養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率。另外，瘤胃絕大多數(shù)微生物屬于原核生物細菌，細胞膜結(jié)構(gòu)的完整性對于離子交換、電子傳遞和ATP利用等至關(guān)重要，而硒作為GSH-Px重要組分，具有捕獲和清除自由基，減少脂質(zhì)過氧化損傷的作用，還參與輔酶A和輔酶Q生物合成，在三羧酸循環(huán)和呼吸鏈電子傳遞中發(fā)揮重要作用[36]。因此，Se-HLan促進了瘤胃細菌細胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性，有利于瘤胃發(fā)酵、能量代謝等功能的發(fā)揮。另外，本試驗研究結(jié)果表明，添加Se-HLan增加了陜北白絨山羊羯羊食入氮、消化氮和沉積氮，其中0.600 mg/kg Se-HLan組(Ⅲ組)的效果最好。氮是動物生長和育肥期肉羊代謝最重要的營養(yǎng)素，但是關(guān)于硒對反芻動物氮代謝的研究報道較少。有報道對植物氮代謝進行研究，結(jié)果表明硒可以通過促進硝酸鹽還原酶、谷氨酰胺合成酶和谷氨酸合成酶的活性，從而促進氮代謝[37]。Shi等[4]研究了硒對綿羊飼糧消化率和瘤胃發(fā)酵的影響，發(fā)現(xiàn)硒可以刺激綿羊瘤胃微生物活性和酶活性，進而提高瘤胃發(fā)酵和飼料利用率。Wang等[9]對添加酵母硒的藏綿羊進行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加0.4 mg/kg硒顯著提高了NDF、ADF和EE的消化率，并增加了藏綿羊食入氮、消化氮和沉積氮，與本試驗結(jié)果類似。這些研究表明，硒主要是通過增強瘤胃微生物及其酶活，促進營養(yǎng)物質(zhì)消化率，進而促進氮的攝入、消化和沉積，但是具體機制有待進一步研究。此外，本研究飼糧營養(yǎng)水平是按照山羊25 kg體重設(shè)計，經(jīng)過飼養(yǎng)試驗后開展消化試驗的試驗羊體重均已達到30 kg，飼糧適宜的營養(yǎng)水平是動物健康生長和生產(chǎn)的重要保障，原有的營養(yǎng)水平在一定程度上可能限制了試驗羊?qū)I養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率和氮代謝，試驗羊ADG、瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸濃度均較低。但是，與不加硒的對照組比較，本試驗中添加Se-HLan的試驗羊均表現(xiàn)出較高的飼糧常規(guī)營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、氮代謝、ADG和瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸濃度，提示在飼喂營養(yǎng)水平相對較低的飼糧條件下，硒對飼糧營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用和動物健康也發(fā)揮了積極的作用，具體機制有待進一步研究和分析。

4 結(jié) 論

① 以Se-HLan為補充硒源，飼糧0.600 mg/kg硒含量具有提高生長期陜北白絨山羊羯羊ADFI、ADG、血清抗氧化水平、瘤胃發(fā)酵、營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率和氮代謝，促進生長的作用。

② 以Se-HLan為補充硒源，飼糧硒含量在0.300～1.200 mg/kg時不會對生長期陜北白絨山羊羯羊的血液健康和生長產(chǎn)生負面影響。

③ 根據(jù)本試驗結(jié)果，生長期陜北白絨山羊羯羊飼糧Se-HLan的適宜添加量為146 mg/kg (硒含量為0.600 mg/kg)。