G蛋白偶聯(lián)受體75去孤兒化研究及在疾病中的作用*

吉雨恬，劉戀戀，劉嬌莉，張 淳，李開遠(yuǎn)，郭立榮，曾俊偉，韓 勇

（遵義醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)教研室，貴州 遵義 563000）

G蛋白偶聯(lián)受體（G-protein-coupled receptors，GPCRs）是已知人類基因組中最大的一類膜蛋白受體家族，包括A類視紫紅質(zhì)樣受體、B類分泌素受體、C類代謝型谷氨酸受體、D類真菌交配信息素受體、E類環(huán)腺苷酸受體及F類卷曲受體（Frizzled/Smoothened家族）［1-2］。其中A類視紫紅質(zhì)樣受體包含了GPCRs中大部分種類，共含有19個(gè)子類（A1～A19）719種，是目前臨床上大多數(shù)藥物作用的潛在靶點(diǎn)［3-4］。在A類視紫紅質(zhì)樣受體家族中，目前已知197種受體存在明確的配體（不包括嗅覺(jué)、視覺(jué)、味覺(jué)及犁鼻器感覺(jué)受體），但87種受體目前尚不清楚其內(nèi)源性配體，被稱為“孤兒（orphan）受體”，其中54種孤兒受體至少有一篇文獻(xiàn)報(bào)道了其可能的內(nèi)源性配體［5］。探尋并鑒定孤兒GPCRs的內(nèi)源性配體的研究即為GPCRs的去孤兒化（deorphanization）［6］，但由于大部分內(nèi)源性配體的特性未知及相關(guān)工具藥物的缺乏，相關(guān)受體的去孤兒化研究受到較大限制。目前，鑒定內(nèi)源性配體的研究策略主要有受體-配體綁定分析、受體內(nèi)化激活分析、β-arrestin募集分析及環(huán)磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）和三磷酸肌醇（inositol triphosphate，IP3）生成、鈣離子信號(hào)通路檢測(cè)等方法［6-7］。

G蛋白偶聯(lián)受體75（G-protein-coupled receptor 75，GPR75）被國(guó)際基礎(chǔ)與臨床藥理學(xué)聯(lián)合會(huì)列為孤兒受體之一［5］。在最近的研究中發(fā)現(xiàn)，GPR75可與CC基序趨化因子配體5（C-C motif chemokine ligand 5，CCL5）或20-羥二十烷四烯酸（20-hydroxyeicosatetraenoic acid，20-HETE）交互作用［8-9］，與高血壓、神經(jīng)退行性病變、腫瘤、肥胖相關(guān)代謝綜合征等疾病相關(guān)。

1 GPR75概述

1999年，Tarttelin等［10］在人類基因組中鑒定出Gpr75基因，它定位于人類染色體2p16區(qū)，可編碼分子量為59.4 kD、含有540個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，該蛋白具有典型的GPCRs特征，即7個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域、位于N末端的N-糖基化位點(diǎn)及位于C末端的絲氨酸和蘇氨酸磷酸化位點(diǎn)。后續(xù)研究證實(shí)GPR75屬于A類視紫紅質(zhì)樣家族的Gαq蛋白偶聯(lián)受體，與秀麗隱桿線蟲神經(jīng)肽Y受體（24%同源）、大鼠甘丙肽受體3（25%同源）和豬生長(zhǎng)激素促分泌素1b型受體（25%同源）具有相關(guān)同源性［10-11］。早期的研究認(rèn)為，GPR75主要在視網(wǎng)膜和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中表達(dá)，但其具體功能或者與相關(guān)疾病的關(guān)系不清楚，如Sauer等［12］研究未發(fā)現(xiàn)GPR75與視網(wǎng)膜相關(guān)疾病有密切關(guān)聯(lián)。后續(xù)研究證實(shí)，GPR75有廣泛的表達(dá)譜，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心腦血管系統(tǒng)以及胰島、前列腺等組織、器官中表達(dá)［8-9］，且其功能以及與相關(guān)疾病聯(lián)系逐漸被揭示。

2 GPR75去孤兒化研究

2.1 GPR75與CCL5CCL5屬于CC類亞族的炎癥趨化因子，主要在T淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá)［13］。CCL5作為配體可與CC類趨化因子受體1（CC chemokine receptor 1，CCR1）、CCR3和CCR5結(jié)合，尤其與CCR5親和力最高［14］。CCL5/CCR5配對(duì)與細(xì)胞增殖、遷移以及血管生成相關(guān)，在炎癥、腫瘤發(fā)生、病毒感染等疾病中發(fā)揮重要作用［15-16］。

2006年，Ignatov等［8］報(bào)道CCL5可能與另外一種視紫紅質(zhì)樣孤兒受體GPR75結(jié)合。該研究分別在過(guò)表達(dá)GPR75的HEK293細(xì)胞、內(nèi)源性表達(dá)GPR75的小鼠海馬神經(jīng)元HT22細(xì)胞以及CV-1細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)CCL5具有刺激細(xì)胞內(nèi)IP3累積、Ca2+濃度增加以及激活蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/AKT）、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號(hào)通路作用。而CCL5的上述效應(yīng)可被磷酯酶C（phospholipase C，PLC）信號(hào)通路 抑 制劑U73122或者磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）抑制劑渥曼青霉素所阻斷。Liu等［17］在小鼠及人類胰島的β細(xì)胞中觀察到，已知的CCL5受體CCR1、CCR3和CCR5的表達(dá)水平非常低，但卻顯著表達(dá)GPR75，當(dāng)下調(diào)Gpr75表達(dá)后，可有效阻斷CCL5誘導(dǎo)的Ca2+增加和促胰島素分泌作用。Dedoni等［18］的研究發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞中，分別 應(yīng)用CCR1抑制劑BX471、CCR3抑 制 劑SB328437或者CCR5抑制劑DAPTA，不能阻斷CCL5所誘導(dǎo)的AKT、糖原合成酶激酶3β（glycogen synthase kinase 3β，GSK3β）及細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）的磷酸化。但敲減Gpr75表達(dá)后，卻可有效阻斷CCL5的上述效應(yīng)。最近，在一項(xiàng)關(guān)于GPR54、GPR56和GPR75在胰腺β細(xì)胞功能調(diào)控中的作用研究中發(fā)現(xiàn)，CCL5作為GPR75配體參與刺激胰島素分泌和改善血糖穩(wěn)態(tài)，可促進(jìn)MIN6胰腺β細(xì)胞胰島素分泌［19］。

CCL5與GPR75之間作用關(guān)系，目前僅有如上4項(xiàng)相關(guān)研究（表1）提出CCL5可能是孤兒受體GPR75內(nèi)源性配體的觀點(diǎn)，但這些研究均未觀察CCL5與GPR75之間直接綁定或相互結(jié)合作用，并且Southern等［20］通過(guò)β-arrestin募集試驗(yàn)篩選孤兒GPCRs天然配體的研究中，未能證實(shí)CCL5對(duì)GPR75的激活作用。

2.2 GPR75與20-HETE20-HETE是由細(xì)胞色素P450酶（Cytochrome P450，CYP450）家族中CYP4A/4F酶催化花生四烯酸代謝生成的血管活性物質(zhì)［21］。近年在臨床以及動(dòng)物模型研究中發(fā)現(xiàn)，20-HETE參與高血壓、腦卒中、缺血性心肌病、心力衰竭等心腦血管疾病的發(fā)生與發(fā)展［22-25］。研究證實(shí)，20-HETE存在結(jié)構(gòu)類似物并且可拮抗20-HETE的生物學(xué)作用［26］，提示20-HETE作用受體的存在。但是，由于20-HETE具有較高的脂溶特性，會(huì)被快速酯化成磷脂，因而對(duì)于20-HETE是否綁定并結(jié)合膜受體蛋白繼而發(fā)揮生物學(xué)作用的研究進(jìn)展緩慢。

2017年，Garcia等［9］在血管系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)GPR75表達(dá)，并鑒定出20-HETE可激活并綁定該受體，證實(shí)20-HETE以GPR75依賴機(jī)制誘導(dǎo)血管內(nèi)皮功能紊亂及平滑肌細(xì)胞收縮。該研究發(fā)現(xiàn)，在血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells，VSMC）中，20-HETE具有激活GPR75作用，引起后者與其偶聯(lián)的Gαq蛋白解離，繼而激活PLC信號(hào)通路引起細(xì)胞內(nèi)IP3生成；IP3生成不僅是GPCRs激活的標(biāo)志物，并能通過(guò)蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）途徑以及肌漿網(wǎng)IP3受體門控通道誘發(fā)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高，從而增強(qiáng)VSMC收縮［9］。同樣，在血管內(nèi)皮細(xì)胞中，20-HETE通過(guò)與GPR75配對(duì)機(jī)制，激活G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1（G-protein-coupled receptor kinase-interacting protein 1，GIT1），誘導(dǎo)表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）磷酸化，通過(guò)NF-κB信號(hào)通路引起血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（angiotensin-converting enzyme，ACE）表達(dá)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂［9］。另外，該研究中未觀察到CCL5處理后GPR75與Gαq蛋白解離現(xiàn)象，這與Southern等［20］發(fā)現(xiàn)CCL5不具有激活GPR75作用的報(bào)道相一致。

最近，包括本課題組在內(nèi)的多項(xiàng)研究，證實(shí)了20-HETE/GPR75信號(hào)途徑在多種器官組織及相關(guān)疾病中發(fā)揮重要作用（表1）。Cárdenas等［27］在前列腺癌PC-3細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)GPR75表達(dá)，且20-HETE處理后促進(jìn)了EGFR、NFκB、AKT和p38的磷酸化；而沉默Gpr75表達(dá)，或應(yīng)用一種水溶性的20-HETE受體拮抗劑——N-disodium succinate-20-hydroxyeicosa 6（Z），15（Z）-diencarboxamide（AAA）阻斷GPR75的作用，則可逆轉(zhuǎn)20-HETE的上述效應(yīng)。Gilani等［28］在3T3-1分化的脂肪細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象，觀察到AAA可阻斷20-HETE對(duì)胰島素受體Tyr972位點(diǎn)磷酸化的抑制作用。在最近的一項(xiàng)研究中，Pascale等［29］觀察了20-HETE、CCL5與GPR75之間的交互作用關(guān)系。一方面發(fā)現(xiàn)，CCL5雖然可誘導(dǎo)HTLA細(xì)胞和人內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加，但并非呈GPR75依賴性；反之，過(guò)表達(dá)GPR75后CCL5誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)肌醇1-磷酸（inositol 1-phosphate，IP-1）的累積和Ca2+濃度呈下降趨勢(shì)；另一方面，使用CCL5處理后卻明顯抑制20-HETE誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度增加以及IP-1的積累，還阻斷了20-HETE誘導(dǎo)的β-arrestin募集增加［29］。如上結(jié)果提示，20-HETE、CCL5與GPR75具有不同的結(jié)合位點(diǎn)，20-HETE是GPR75的高親和力配體，而CCL5作為低親和性配體結(jié)合GPR75后，競(jìng)爭(zhēng)性抑制20-HETE對(duì)GPR75的激活 作 用，因 此CCL5可能 是20-HETE/GPR75綁定的負(fù)性調(diào)控因子。

表1 GPR75的潛在配體及在疾病中作用Table 1.Putative ligands of G-protein-coupled receptor 75（GPR75）and its role in diseases

筆者所在實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞及大鼠H9c2心肌細(xì)胞中觀察到，GPR75在mRNA和蛋白水平表達(dá)，使用20-HETE處理后心肌細(xì)胞內(nèi)IP3含量、Ca2+濃度及活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平升高，同時(shí)PKC、NADPH氧化酶活性增強(qiáng)；敲減Gpr75表達(dá)或者阻斷PLC以及PKC信號(hào)通路，則可逆轉(zhuǎn)20-HETE如上效應(yīng)［30-31］。這提示20-HETE/GPR75信號(hào)途徑在心臟生理、病理進(jìn)程中發(fā)揮重要作用。

綜上所述，Ignatov等［8，17-19］認(rèn)為GPR75是趨化因子受體CCR1、CCR3和CCR5之外CCL5的第4種受體，主要證據(jù)來(lái)自于CCL5誘導(dǎo)IP3累積和Ca2+濃度升高等作用，但這些研究均未開展二者之間直接綁定作用的研究，且不能被β-arrestin募集試驗(yàn)所證實(shí)［20］。Garcia等［9，27-31］在不同組織器官中鑒定出一種新的GPR75可能配體——20-HETE，其中Pascale等［29］探討了CCL5和20-HETE與GPR75之間的作用關(guān)系，認(rèn)為CCL5可能是20-HETE與GPR75相互作用的負(fù)性調(diào)控因子。雖然GPR75內(nèi)源性配體的研究尚存爭(zhēng)議，但GPR75生物學(xué)功能及與相關(guān)疾病關(guān)系的研究得以逐步深入。

3 GPR75功能及與相關(guān)疾病關(guān)系

3.1 GPR75在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用GPR75首先被鑒定在腦、脊髓以及視網(wǎng)膜等部位表達(dá)，但初期研究并未發(fā)現(xiàn)其與相關(guān)神經(jīng)系統(tǒng)疾病關(guān)聯(lián)［10-12］。Ignatov等［8］在對(duì)CCL5和GPR75配對(duì)的作用和機(jī)制研究中，發(fā)現(xiàn)GPR75介導(dǎo)了CCL5的神經(jīng)保護(hù)功能。β-淀粉樣蛋白（amyloid β-protein，Aβ）在神經(jīng)組織中的累積被認(rèn)為具有較強(qiáng)的神經(jīng)毒性作用，與阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD）中神經(jīng)元變性相關(guān)［32］。Ignatov等［8］發(fā)現(xiàn)在內(nèi)源性表達(dá)GRP75的海馬神經(jīng)元HT22細(xì)胞中，CCL5可有效抑制Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡，而過(guò)表達(dá)GPR75后增強(qiáng)了該效應(yīng)。Dedoni等［18］在神經(jīng)母細(xì)胞瘤SH-SY5Y細(xì)胞中研究發(fā)現(xiàn)，CCL5可 通 過(guò)GPR75誘 導(dǎo)Gαq蛋 白 下 游AKT和MAPK等蛋白磷酸化激活，這兩種蛋白激活具有抗凋亡和促神經(jīng)細(xì)胞存活作用，這可能是GPR75發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)功能的分子機(jī)制。

與CCL5在神經(jīng)系統(tǒng)中的作用不同，20-HETE被認(rèn)為具有神經(jīng)毒性作用，參與腦卒中、認(rèn)知障礙和AD的發(fā)生、發(fā)展［33］。神經(jīng)系統(tǒng)的活動(dòng)增強(qiáng)需與局部血流的增加相匹配，被稱為神經(jīng)血管偶聯(lián)（neurovascular coupling，NVC）［34］。在腦卒中患者的腦脊液和血漿中，20-HETE含量增加，導(dǎo)致卒中后腦血流量減少，不能滿足神經(jīng)元活動(dòng)增加后的能量需求，從而誘發(fā)NVC受損，抑制20-HETE生成可有效改善缺血后腦血管痙攣及梗死面積的增加［35-36］。最近Gonzalez-Fernandez等［37］進(jìn)一步檢測(cè)了20-HETE合成酶——CYP4A與GPR75在大鼠腦組織中的表達(dá)關(guān)系。發(fā)現(xiàn)在腦的新皮層、內(nèi)嗅皮層等多個(gè)部位同時(shí)表達(dá)CYP4A和GPR75，但星形膠質(zhì)細(xì)胞中只表達(dá)CYP4A。此外，二者在腦血管的軟腦膜動(dòng)脈、穿通小動(dòng)脈的內(nèi)皮細(xì)胞、VSMC以及周細(xì)胞中均有表達(dá)［37］，提示20-HETE可能以旁分泌方式通過(guò)GPR75介導(dǎo)，影響腦血管VSMC和周細(xì)胞功能。

3.2 GPR75對(duì)心血管系統(tǒng)功能的影響血管系統(tǒng)中，近年來(lái)在多種動(dòng)物模型中觀察到GPR75參與高血壓發(fā)生、發(fā)展。如在Cyp4a12轉(zhuǎn)基因小鼠誘導(dǎo)的20-HETE依賴性高血壓的動(dòng)物模型中，敲減Gpr75表達(dá)可有效降低多西環(huán)素處理的Cyp4a12小鼠血壓升高，同時(shí)降低ACE表達(dá)并明顯改善Cyp4a12轉(zhuǎn)基因小鼠血管內(nèi)皮功能紊亂［9］。在另一種Cyp1a1-Ren-2轉(zhuǎn)基因大鼠誘導(dǎo)的血管緊張素II（angiotensin II，Ang II）依賴性惡性高血壓動(dòng)物模型中，應(yīng)用20-HETE受體拮抗劑AAA阻斷GPR75作用，可有效逆轉(zhuǎn)3-吲哚甲醇處理后大鼠惡性高血壓的發(fā)生與發(fā)展，這與阻斷GPR75作用后減少血漿及腎臟中Ang II水平有關(guān)［38］。最近，Agostinucci等［39］構(gòu)建了一種VSMC靶向過(guò)表達(dá)Cyp4a12轉(zhuǎn)基因小鼠，該動(dòng)物模型特異性表現(xiàn)出VSMC收縮特性增強(qiáng)并呈20-HETE依賴性高血壓和血管功能障礙，應(yīng)用AAA處理后同樣可有效降低動(dòng)物血壓，并可改善由乙酰膽堿誘導(dǎo)的

血管舒張功能受損。Tunctan等［40］在膿毒癥休克大鼠模型中，發(fā)現(xiàn)20-HETE類似物——5，14-HEDGE，同樣具有激活GPR75作用，并可有效抑制脂多糖誘導(dǎo)的大鼠低血壓及心動(dòng)過(guò)速反應(yīng)，而使用AAA可逆轉(zhuǎn)5，14-HEDGE如上作用。這些研究初步揭示了GPR75參與高血壓的作用和機(jī)制，敲減GPR75表達(dá)或者阻斷其作用可有效發(fā)揮降低血壓作用，為臨床治療高血壓疾病提供了新的思路和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

GPR75對(duì)心臟功能的影響研究較少。筆者所在實(shí)驗(yàn)室報(bào)道了GPR75在培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞及大鼠H9c2心肌細(xì)胞中表達(dá)，慢病毒敲減Gpr75表達(dá)或阻斷GPR75下游信號(hào)通路作用，可有效抑制20-HETE誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，這可能是20-HETE參與誘導(dǎo)缺血性心肌病重要受體機(jī)制，為拓展GPR75在心臟中的功能提供了新的線索［30-31］。但20-HETE在心臟中對(duì)GPR75的激活作用及其機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

3.3 GPR75在代謝綜合征中作用GPR75的兩個(gè)潛在假定配體CCL5與20-HETE在代謝綜合征中均發(fā)揮重要作用。有研究報(bào)道，CCL5具有抑制葡萄糖刺激誘導(dǎo)胰高血糖素樣肽1和胰高血糖素樣肽2的分泌作用，從而導(dǎo)致小鼠葡萄糖依賴性的胰島素分泌受損［41］。此外，在超重和肥胖者血漿內(nèi)CCL5水平顯著升高，與體重指數(shù)（body mass index，BMI）及體脂率呈正相關(guān)，且CCL5/CCR5信號(hào)通路的激活加劇肥胖發(fā)生和胰島素抵抗［42-43］。同樣，20-HETE也與BMI、高血糖和血漿胰島素水平呈正相關(guān)，是導(dǎo)致體重增加、升高空腹血糖水平和胰島素抵抗的重要因素［44］。最近，Gilani等［28］證實(shí)，GPR75的激活是20-HETE誘導(dǎo)肥胖相關(guān)糖尿病及胰島素分泌信號(hào)通路障礙的必要條件。

GPR75參與肥胖相關(guān)代謝綜合征的重要發(fā)現(xiàn)來(lái)自Akbari等［45-46］最近在《Science》的報(bào)道。該研究通過(guò)人類大規(guī)模外顯子組測(cè)序技術(shù)，對(duì)分別來(lái)自英國(guó)、美國(guó)和墨西哥共64.5萬(wàn)名個(gè)體的外顯子組樣本進(jìn)行測(cè)序，評(píng)估罕見(jiàn)基因編碼變異與BMI之間的相關(guān)性，共鑒定出16個(gè)與BMI高度相關(guān)的外顯子基因突變，包括5種在神經(jīng)系統(tǒng)表達(dá)的GPCRs（CALCR、MC4R、GIPR、GPR151和GPR75）；在約4/10 000個(gè)測(cè)序個(gè)體中發(fā)現(xiàn)存在GPR75蛋白截?cái)嗤蛔儯╬roteintruncating variants），這些個(gè)體的BMI平均降低1.8 kg/m2，體重降低5.3 kg，較非雜合子個(gè)體肥胖風(fēng)險(xiǎn)幾率降低54%［45］。為進(jìn)一步確證GPR75在抑制肥胖發(fā)生中的作用，該研究在高脂飲食誘導(dǎo)的小鼠肥胖模型中發(fā)現(xiàn)，喂食14周后未處理小鼠體重增加1倍，而Gpr75基因缺失的雜合子（Gpr75+/-）小鼠體重較正常小鼠減輕25%，而Gpr75基因缺失的純合子（Gpr75-/-）小鼠體重減輕達(dá)到45%。此外，缺失1個(gè)或2個(gè)Gpr75基因拷貝的小鼠在對(duì)葡萄糖耐受性和胰島素敏感性方面也得到有效改善［45］。該研究通過(guò)遺傳學(xué)分析證據(jù)及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究揭示了Gpr75基因在肥胖中的重要作用，提示抑制GPR75活性或研發(fā)靶向GPR75的基因沉默藥物、抗體或小分子調(diào)節(jié)劑，對(duì)于預(yù)防肥胖及治療代謝綜合征具有廣闊應(yīng)用前景。

4 問(wèn)題與展望

近年來(lái)，盡管GPR75的去孤兒化研究及對(duì)相關(guān)疾病的影響得到深入開展，但仍存在諸多問(wèn)題尚待揭示。首先，GPR75的內(nèi)源性天然配體研究尚存爭(zhēng)議，目前國(guó)際基礎(chǔ)與臨床藥理學(xué)聯(lián)合會(huì)仍將GPR75列為孤兒受體［5］。基于目前的研究，在GPR75的2個(gè)潛在假定配體中，20-HETE與GPR75的親和力要高于CCL5，Pascale等［29］認(rèn)為CCL5可作為負(fù)性調(diào)控因子影響20-HETE與GPR75的綁定結(jié)合。因此，尚需在更多的組織器官中深入研究GPR75、20-HETE和CCL5之間是否存在類似的交互作用關(guān)系。其次，作為GPR75可能的配體，20-HETE/GPR75配對(duì)機(jī)制也需在其他組織、器官中進(jìn)一步確認(rèn)。如心臟是20-HETE發(fā)揮生理、病理作用的重要器官，但目前尚待明確GPR75在20-HETE誘導(dǎo)的心肌損傷中的重要作用，尤其是20-HETE對(duì)GPR75激活的機(jī)制還不清楚。此外，尚不能確定GPR75是否是20-HETE的唯一受體。目前的研究證據(jù)顯示，在各組織器官中可能存在不同的GPR75亞型，或者表達(dá)其他可以與20-HETE結(jié)合的受體。如以往的研究證實(shí)20-HETE在腎臟近曲小管及髓袢升支粗段具有抑制Na+轉(zhuǎn)運(yùn)作用，通過(guò)促進(jìn)鈉尿排泄從而在血壓調(diào)節(jié)中發(fā)揮作用［47］。但是Garcia等［9］在腎臟組織中，并未發(fā)現(xiàn)GPR75表達(dá)，提示GPR75可能在不同組織中存在多種亞型或剪接變異體，或者GPR75可能并不是20-HETE的唯一受體。實(shí)際上，Trauelsen等［48］最近研究報(bào)道，20-HETE可通過(guò)激活另一種受體——游離脂肪酸受體1而發(fā)揮促胰島素分泌作用。

雖然GPR75配體及生物學(xué)功能尚存諸多值得深入探究的科學(xué)問(wèn)題，但GPR75已展現(xiàn)出在高血壓、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病，尤其在肥胖相關(guān)代謝綜合征中發(fā)揮重要作用。因此，作為典型的GPCRs，GPR75有望成為新的可高度藥物化的靶點(diǎn)，研發(fā)靶向GPR75的激動(dòng)劑或拮抗劑藥物是未來(lái)可能取得突破的領(lǐng)域。事實(shí)上，近期阿斯利康（AstraZeneca）和再生元（Regeneron）公司已經(jīng)開始合作研發(fā)靶向Gpr75基因沉默藥物、抗體或小分子調(diào)節(jié)劑，以期預(yù)防肥胖及治療與其相關(guān)的共病。不僅如此，GPR75有望成為新的治療血脂異常、糖尿病、心腦血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物作用靶點(diǎn)。