血清補體及IL-25 在SLE 中的表達及臨床意義

王楊 羅鈺鴻 廖媛

SLE 是一種典型的、全身性的自身免疫性疾病，以多臟器系統(tǒng)受累及多種自身抗體陽性為主要臨床特征。如果SLE 患者未得到及時診治或病情長期未得到控制，將出現(xiàn)不可逆的器官損傷，甚至死亡。狼瘡性腎炎（LN）是SLE 最常見和最重要的并發(fā)癥；精神神經(jīng)性狼瘡（NPSLE）、血液系統(tǒng)受累也是SLE 的嚴重并發(fā)癥［1-2］。補體（C）是一組在激活后存在于血清、組織液和細胞膜上的酶活性物質(zhì)，是抗體發(fā)揮溶細胞功能的輔助物質(zhì)，具有抗感染、免疫調(diào)節(jié)功能。C3 是血漿中含量最高的補體活性物質(zhì)。C4 可以通過C1s 的水解過程產(chǎn)生C4a 和C4b 兩種片段，這兩種片段促進補體活化、細胞吞噬?？傃a體（CH50）活性檢測結(jié)果反映C1～C49 的綜合水平。在自身免疫性疾病中，疾病活動期補體被過度激活，CH50 水平下降，而當病情穩(wěn)定時CH50 水平反應(yīng)性升高。SLE的病理變化使患者血清中存在多種自身抗體，這些自身抗體與相對應(yīng)的自身抗原形成大量免疫復(fù)合物（IC），廣泛沉積于多臟器及系統(tǒng)中，激活補體可能造成這些部位的炎癥損傷［3］。既往研究者認為，補體系統(tǒng)參與SLE，可用于SLE 患者的診斷和疾病活動情況的監(jiān)測［4］。CRP 是急性時相蛋白，在SLE 中更常見的抗CRP 自身抗體并不針對天然循環(huán)CRP，而是針對表面上CRP 解離時暴露的表位［5］。雙鏈DNA（dsDNA）是重要的遺傳物質(zhì)，抗dsDNA 抗體與DNA 結(jié)合形成的免疫復(fù)合體，其水平主要用于判斷SLE 疾病活動度的情況以及療效的監(jiān)測［6］。IL-25 由2 型輔助性T 淋巴細胞（Th2）和肥大細胞、肺泡巨噬細胞等產(chǎn)生，調(diào)節(jié)機體的免疫反應(yīng)，從而促進機體的炎癥反應(yīng)。研究表明，IL-25 通過抑制炎性細胞因子（包括IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-12p70、IL-17A）的產(chǎn)生，緩解了SLE 小鼠的臨床癥狀［7］。本研究探討補體及IL-25 等指標在SLE 患者中的變化，為SLE 患者的診斷和療效評價提供選擇依據(jù)。

對象與方法

一、研究對象

2021 年7 月至2022 年3 月在本院診治的151例SLE 患者，均符合《2020 中國系統(tǒng)性紅斑狼瘡診療指南》中的SLE 診斷標準［8］。根據(jù)2019 年歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟/美國風(fēng)濕病學(xué)會（EULAR/ACR）SLE 分類診斷標準，按SLE 累及器官情況將151例患者分為單純SLE 組 58 例、單器官損傷組67例（包括51 例LN、13 例SLE 血液系統(tǒng)損傷、3例其他器官損傷）、多器官損傷組26 例（包括25例LN 合并其他器官損傷、1 例血液系統(tǒng)損傷合并腦損傷）。排除標準：有其他風(fēng)濕性疾病者，有惡性腫瘤者，合并其他基礎(chǔ)代謝性疾病者，有感染性疾病者，有其他原因如心血管疾病、繼發(fā)顱內(nèi)病變、藥物不良反應(yīng)等所導(dǎo)致的器官損傷者。本研究經(jīng)中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院倫理委員會批準（批件號：中大附三醫(yī)倫［2019］02-309-01），入組患者均已簽署知情同意書。

二、方 法

于患者空腹狀態(tài)下抽取靜脈血，分離血清，使用日立7600 全自動生化分析儀以免疫比濁法檢測C3、C4、CH50、CRP，其中C3 參考值范圍為0.80～1.60 g/L，C4 參考值范圍為0.10～0.40 g/L，CH50 參考值范圍為23～46 kU/L，CRP 參考值范圍為0～6 mg/L；以化學(xué)發(fā)光法檢測抗dsDNA 抗體，將 ≥10 kU/L 定義為陽性；以ELISA 檢測IL-25，通過標準曲線計算血清中IL-25 的水平。

三、統(tǒng)計學(xué)處理

使用SPSS 25.0 進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料采用例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗。正態(tài)分布的計量資料采用 表示；非正態(tài)分布的計量資料采用M（P25，P75）表示，3 組間的比較采用Kruskal-Wallis H 檢驗，2 組間的比較采用Wilcoxon符號秩檢驗，組間兩兩比較采用Bonferroni 法校正，即P ＜0.05/3 = 0.017 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。α= 0.05。

結(jié) 果

一、3 組SLE 患者的一般資料比較

單純SLE 組、單器官損傷組、多器官損傷組患者的性別構(gòu)成比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P >0.05）。與其他2 組相比，單純SLE 組患者的年齡較大、病程較長（P 均＜0.017）。見表1。

表1 3 組SLE 患者的一般資料比較

二、3 組SLE 患者的血清C3、C4、CH50、IL-25 和CRP 水平比較

單純SLE 組、單器官損傷組和多器官損傷組患者間血清C4、CH50、IL-25 和CRP 水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P 均> 0.017）。3 組患者的血清C3 水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05），其中多器官損傷組患者的血清C3 水平低于單純SLE組（P ＜0.017）。見圖1。

圖1 3 組SLE 患者的血清IL-25、C3、C4、CH50 和CRP 水平比較

三、SLE 患者的血清C3 與C4、CH50、IL-25、CRP 水平的相關(guān)性分析

Spearman 相關(guān)性分析顯示，SLE 患者的C3 水平與C4 水平（rs= 0.73，P ＜0.001）、CH50（rs=0.81，P ＜0.01）呈正相關(guān)，而與IL-25 水平呈負相關(guān)（rs= -0.14，P ＜0.001），與CRP 無相關(guān)性（P >0.05）。見圖2。

圖2 SLE 患者的血清C3 與C4、CH50、IL-25、CRP水平的相關(guān)性分析

四、3 組SLE 患者抗dsDNA 抗體陽性率比較

單純SLE 組、單器官損傷組和多器官損傷組患者的抗dsDNA 抗體陽性率分別為29%（17/58）、45%（30/67）和58%（15/26），組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2= 6.663，P = 0.030）；多器官損傷組的抗dsDNA 抗體陽性率高于單純SLE 組（χ2=6.132，P = 0.013）；單純SLE 組與單器官損傷組間（χ2= 1.251，P = 0.263）、單器官損傷組與多器官損傷組間（χ2= 3.169，P = 0.075）的抗dsDNA抗體陽性率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

討 論

SLE 發(fā)病機制復(fù)雜，能夠同時造成多種器官及系統(tǒng)損傷，且因免疫系統(tǒng)異?？沙霈F(xiàn)多種自身抗體高表達，而自身抗體積累、IC 沉積以及無法建立免疫耐受可導(dǎo)致各種靶器官出現(xiàn)炎癥性損傷［9］。

SLE 患者體內(nèi)在疾病活動期和感染期均存在著大量IC，補體系統(tǒng)會被激活清除IC，從而導(dǎo)致C3和C4 被大量消耗，故C3、C4 在SLE 疾病活動期和發(fā)生感染的情況下會有所降低。CH50 反映血清中補體經(jīng)典激活途徑的溶血活性，其與C1～C9 各成分的數(shù)量及活性均有關(guān)，但隨著C3、C4 水平及活性降低，血清CH50 活性及含量均會降低。雖然C3、C4 可以反映SLE 的疾病活動，但因為SLE急性期補體基因拷貝數(shù)和表達的個體差異及個體補體代謝率差異與疾病變化不同步，部分患者雖病情有所緩解但C3、C4 水平仍未恢復(fù)［10］。LN 是SLE 常見的重要臟器受累表現(xiàn)。研究顯示，血清低C3 水平而非低C4 水平是LN 復(fù)發(fā)的標志［11］。本研究顯示，多器官損傷組患者的C3 水平低于單純SLE 組患者。CRP 是一種急性時相反應(yīng)蛋白。在感染過程中，CRP 能針對侵入細胞發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用和吞噬作用，并參與炎癥反應(yīng)［12］。本研究顯示，單純SLE 組、單器官損傷組及多器官損傷組的血清CRP 水平在組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，這可能與SLE 疾病活動期伴隨IC 的清除，血漿CRP 清除加快有關(guān)。IL-25 是一種Th2 因子，通過異二聚體受體（IL-25R）發(fā)出信號。它通過信號級聯(lián)、上皮和活化的T 淋巴細胞的成分參與促進2型炎癥。Selvaraja 等［13］研究顯示，IL-25 在SLE 患者中升高，高水平的IL-25 與SLE 疾病活動相關(guān)，但本研究顯示3 組SLE 患者血清IL-25 水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，故IL-25 在SLE 中的作用還有待進一步研究探討。本研究顯示，SLE 患者的C3 水平與C4、CH50 水平呈正相關(guān)，而與IL-25 呈負相關(guān)，結(jié)果顯示SLE 患者體內(nèi)補體水平和炎癥反應(yīng)有一定關(guān)系。

抗dsDNA 抗體參與腎臟、皮膚和中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）等多個終末器官的IC 形成和炎癥損傷過程［14］。本研究顯示，3 組SLE 患者的抗dsDNA抗體陽性率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，其中多器官損傷組的抗dsDNA 抗體陽性率高于單純SLE 組。

綜上所述，血清C3 水平下降和抗dsDNA 抗體陽性提示SLE 患者可能出現(xiàn)多器官損傷，血清C3 水平和抗dsDNA 抗體檢測對SLE 患者診療方案的制定和預(yù)后評估有積極意義。