壯藥調理補虛方質量標志物初步預測：基于質量標志物“五原則”

陳海燕，隨家寧，李芳嬋，郭勇秀，謝孟姣，賴信宏，黃小洪，梁資就，蔣 林，2，3*

(1.廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530200；2.廣西壯瑤藥工程技術研究中心，廣西 南寧 530200；3.廣西高校中藥制劑共性技術研發(fā)重點實驗室，廣西 南寧 530200)

壯藥調理補虛方由益智仁、補骨脂、烏藥、金櫻子、覆盆子、黃精、枸杞子、桑椹、芡實、肉蓯蓉和炙甘草十一味藥組成，諸藥合用共奏暖腎祛寒、溫脾養(yǎng)肝、縮尿止遺之功，主治腎陽虛、脾腎兩虛，下元虛冷之腰膝酸軟，尿頻遺尿等癥，該藥在廣西扶綏壯族地區(qū)臨床應用多年，對老年人夜尿癥有很好的療效。老年人夜尿癥是老年人臨床常見病、多發(fā)病，70歲以上老年人的患病率大于60%，嚴重影響老年人的健康和生活質量，可引發(fā)抑郁、認知功能障礙、情緒障礙等癥狀[4]。目前國內外尚缺少理想而有效的治療方法，無法滿足夜尿癥患者的需求，開發(fā)治療夜尿癥藥物具有較大的應用前景。本研究通過對復方中各藥味化學成分和藥理作用進行梳理總結，基于中藥質量標志物“五原則”——即有效、特有、傳遞與溯源、可測性和處方配伍對該方全面論述，預測其質量標志物成分，為開發(fā)臨床有效、工藝合理、質量可控、滿足社會需要的醫(yī)院制劑——壯藥調理補虛膏提供理論依據(jù)。

1 主要化學成分

現(xiàn)代研究表明，壯藥調理補虛方中主要含有黃酮類、多酚類、多糖類、揮發(fā)油類、倍半萜等成分。

1.1 黃酮類

壯藥調理補虛方中補骨脂、益智仁、金櫻子、覆盆子、枸杞子、桑椹和芡實中均含有黃酮類成分，如楊芽黃素、白楊素、良姜素、橙皮苷、金絲桃苷、蘆丁、木犀草素、山柰素、槲皮素、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、椴樹苷、紫云英苷、二氫槲皮素、芹菜素、異補骨脂二氫黃酮、新補骨脂異黃酮、4′-O-甲基補骨脂查耳酮、補骨脂色烯查耳酮等[5，20]。

該方中還含有較多的類黃酮-花色苷類成分，如桑椹中含有矢車菊素-3-葡萄糖苷、矢車菊素-3-蕓香糖苷、矢車菊色素、芍藥色素等[21-24]。

1.2 多酚類

壯藥調理補虛方中含有較多的多酚類成分，如烏藥中含有表兒茶素、原花青素等黃烷醇類多酚[25]；金櫻子中含有原兒茶酸、沒食子酸、兒茶素[8，26]；覆盆子中含有鞣花酸[10]；枸杞子中含有咖啡酸、阿魏酸、反式肉桂酸等[27-28]；補骨脂中含有補骨脂酚等單帖酚類成分[18]。

1.3 倍半萜類

壯藥補虛方中倍半萜類成分多來源于君藥益智仁，如圓柚酮、7-表-香科酮、香科酮、12-羥基圓柚酮等[29-31]。

1.4 揮發(fā)油類

壯藥調理補虛方中含有較多的揮發(fā)油成分，如益智仁中主要含有油酸、亞油酸、棕櫚酸 (十六烷酸)、香草酸等[30-34]；烏藥中含有香樟內酯、(-)-馬兜鈴烯、β-桉葉油醇等[22，35-36]；芡實中含有棕櫚酸、硬脂酸、十五酸、月桂酸、肉豆蔻酸等揮發(fā)油成分。

1.5 多糖類

壯藥調理補虛方的多糖類成分較多，如金櫻子多糖[37]、桑椹多糖[38]、黃精多糖[39]、肉蓯蓉多糖[40]。

2 藥理作用

中醫(yī)將夜尿癥歸屬于“腎虛”“遺溺”等范疇，認為其發(fā)病與脾肺肝腎密切相關，多屬中醫(yī)肝腎不足、命門火衰、膀胱氣化無力等病機，而中醫(yī)辨證求其根本，應調以肝腎、責以膀胱氣化[41]。津液代謝的重要環(huán)節(jié)是尿液的生成，與肝、脾、肺密切相關，尿液的排泄與膀胱和腎有關，腎陰封藏與腎陽推動作用的平衡發(fā)揮著重要作用[42]。由此可見，夜尿癥的發(fā)生，與腎、肝、脾、肺、膀胱有密切的聯(lián)系。腎精虧虛，腦髓化生乏源，髓海失充失養(yǎng)，則腦功能發(fā)揮失常，出現(xiàn)眩暈耳鳴、癡呆、記憶力減退等記憶障礙[41]。且骨骼的生長有賴于骨髓的滋養(yǎng)，而骨髓為腎精所化，故腎精虧虛，會導致骨質疏松癥的發(fā)生[43]。因此，夜尿癥的發(fā)生會間接引起阿爾茲海默和骨質疏松等病癥的發(fā)生。以下將重點論述壯藥調理補虛方在調節(jié)膀胱、肝、腎功能，以及改善記憶力和抗骨質疏松方面發(fā)揮的作用。

2.1 調節(jié)臟腑功能

2.1.1 調節(jié)膀胱功能 《素問》有言：“水泉不止者，是膀胱不藏也?！?若下焦?jié)駸?，膀胱氣化失司，亦如熱積膀胱，小便“不禁而頻來”，夜間亦如此。因此，膀胱功能失調，會引起夜尿癥的發(fā)生。通過查閱文獻可知，壯藥調理補虛方中作用于膀胱發(fā)揮縮尿作用的主要為益智仁和烏藥。HAN YUN等[44]研究發(fā)現(xiàn)，益智仁多糖可通過增加膀胱逼尿肌蛋白激酶A蛋白的表達，降低老年尿失禁大鼠的排尿量，對尿失禁具有較好的治療效果。龔曉猛等[45]研究發(fā)現(xiàn)，益智仁中7-表-香科酮可通過抑制膀胱逼尿肌收縮張力，發(fā)揮縮尿作用。談博等[46]研究發(fā)現(xiàn)，烏藥提取物可改善膀胱過度活動癥大鼠膀胱上皮細胞的生長。綜上所述，益智仁多糖、7-表-香科酮以及烏藥提取物可作為發(fā)揮縮尿作用的藥效物質基礎。

2.1.2 調節(jié)肝功能 《格致余論》曰：“主閉藏者腎也，司疏泄者肝也?！比舾侮柨菏⒒蚋侮幪?，陰不制陽，虛火內炎；或肝氣郁而化熱，而致肝疏泄太過，涉及水津，即肝之疏泄勝于腎之封藏，則腎主水無權而水液失調，即可出現(xiàn)夜尿頻數(shù)。因此，調節(jié)肝功能，可改善夜尿增多的情況。陳益耀等[47]研究發(fā)現(xiàn)，益智仁中原兒茶酸和白楊素可通過抗氧化應激減少肝細胞內脂肪滴，對非酒精性脂肪肝細胞起到保護作用。陳方亮等[48]研究發(fā)現(xiàn)，烏藥醚內酯高劑量可降低CCl4誘導的肝損傷大鼠體內MDA與ALT、AST的濃度，提高SOD和GSH-Px的活力，從而起到護肝作用。有研究表明，補骨脂酚可通過不同的作用機制對肝臟起到保護作用[49-51]。

大量研究表明，多糖類、多酚類及黃酮類成分均具有保護肝臟的作用，如黃精多糖可通過抑制血清中酶的活性，提高抗氧化和抗凋亡作用，對肝臟起到保護作用[52-53]；桑椹花色苷提取物可對酒精性肝病模型發(fā)揮改善作用[54]；桑椹花青素提取物能通過調節(jié)紅細胞相關因子緩解肝細胞損傷[55]；桑椹多糖可改善抗氧化防御系統(tǒng)，發(fā)揮出對肝臟的保護作用[56]；芡實多酚類成分可通過調控IRs-1和CYP2E1來消除脂質積累和氧化應激，從而改善非酒精性脂肪肝[57]；山柰酚-3-O-蕓香糖苷具有保護肝臟、抗肝毒性作用[58]。綜上所述，烏藥醚內酯、補骨脂酚、黃精多糖、桑椹多糖、枸杞多糖、桑椹花色苷、桑椹花青素、白楊素、原兒茶酸、芡實多酚類、毛蕊花糖苷、松果菊苷和山柰酚-3-O-蕓香糖苷是具有保肝作用的活性成分。

2.1.3 調節(jié)腎功能 隋代巢元方《諸病源候論》有言：“腎氣下通于陰，腑既虛寒，不能溫其臟，故小便白而多。其至夜尿偏甚者，則內陰氣生也。” 指出體內陰寒較勝者，腎與膀胱陽氣虛衰更甚，在“小便白而多”基礎上則可見夜尿頻數(shù)、小便清長，故腎功能失調可引起夜尿癥的發(fā)生。通過查閱文獻可知，壯藥調理補虛方中多糖類和黃酮類成分為改善腎功能的主要有效成分。蘇上貴等[59]研究發(fā)現(xiàn)，金櫻子多糖可增加TRPV5的表達，改善腎小管重吸收功能，恢復腎功能。籍艷秋等[60]研究發(fā)現(xiàn)，覆盆子中正丁醇可改善氫化可的松所致的小鼠腎陽虛癥狀，研究還發(fā)現(xiàn)可從覆盆子有效部位中分離出覆盆子素、山柰酚、槲皮素等有效物質成分。肖小妹等[61]研究發(fā)現(xiàn)，黃精多糖可增加紅細胞免疫功能，改善兒童腎病綜合征的蛋白尿、低蛋白血癥、高脂血癥和水腫的癥狀。王忠彥等[62]研究發(fā)現(xiàn)，甘草酸可提高ConA所致急性腎損傷大鼠腎組織中白細胞介素-25 (IL-25)，從而下調巨噬細胞TLR4的表達，改善腎臟功能。綜上所述，黃精多糖、金櫻子多糖、覆盆子素、山柰酚、槲皮素、甘草酸等，可能是改善腎功能的活性成分。

2.2 對夜尿癥引起的并發(fā)癥的影響

2.2.1 保護神經 《內經精義》指出：“事物之所以不忘賴此記性，記在何處，則在腎精。蓋腎生精化為髓而藏之于腦中。”由此可見，腎虛會導致健忘、記憶力衰退的癥狀[63]。通過查閱文獻可知，壯藥調理補虛方中揮發(fā)油類、黃酮類、苷類和多糖類為保護神經的主要有效成分。益智仁中的揮發(fā)油、圓柚酮、原兒茶酸均可改善學習和記憶障礙[64-68]；補骨脂中的補骨脂素可改善阿爾茨海默病癥狀[69，70]；覆盆子中的覆盆子黃酮具有抗阿爾茲海默證的作用[71]；覆盆子中槲皮素和山柰酚對損傷的細胞具有保護作用，初步說明黃酮類成分可改善學習記憶功能[72]；桑椹中的矢車菊素-3-O-葡萄糖苷可提高大鼠的記憶力[73]；肉蓯蓉中肉蓯蓉多糖以及毛蕊花糖苷可保護D-半乳糖致衰小鼠的腦神經細胞[74-75]。綜上所述，圓柚酮、原兒茶酸、白楊素、補骨脂素、槲皮素、山柰酚、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、毛蕊花糖苷等，具有保護神經功能的藥效物質基礎。

2.2.2 抗骨質疏松 《醫(yī)經精義》載：“腎藏精，精生髓，髓生骨，故骨者腎之所合也。髓者腎精所生，精足則髓充，髓充者則骨強?！庇纱丝梢姡I虛導致的夜尿癥亦可引發(fā)骨質疏松癥[43]。通過查閱文獻可知，壯藥調理補虛方中多糖類、黃酮類、苷類成分為抗骨質疏松癥的主要有效成分。王軍等[76]研究發(fā)現(xiàn)，補骨脂中異補骨脂素具有抗骨質疏松的作用。龔劍秋等[77]研究發(fā)現(xiàn)，覆盆子覆盆子素A、覆盆子素B可抑制破骨細胞活性以及骨吸收，山柰酚、槲皮素可刺激成骨細胞的活性。王延濤等[78]通過網絡藥理學篩選，發(fā)現(xiàn)肉蓯蓉中毛蕊花糖苷等13個主要成分可通過成骨分化特異性轉錄分子2 (RUNX2)等靶點，WNT (Wingless/Integrated)、VEGF、TNF等信號通路治療骨質疏松。王琳琳等[79]研究發(fā)現(xiàn)，肉蓯蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷可通過刺激產生雌激素，從而對骨質疏松發(fā)揮治療和預防作用。綜上所述，異補骨脂素、覆盆子素A、覆盆子素B、山柰酚、槲皮素、肉蓯蓉多糖、松果菊苷、毛蕊花糖苷等，具有發(fā)揮抗骨質疏松作用的藥效物質基礎。

2.3 其他

壯藥調理補虛方還具有抗腫瘤、抗疲勞、改善更年期的作用，其中倍半萜類、多糖類、黃酮類和苷類為主要有效成分。劉自堯等[80]研究發(fā)現(xiàn)，烏藥中異烏藥內酯可通過線粒體途徑誘導人乳腺癌MCF-7細胞凋亡，且這種誘導作用呈時間和劑量依賴性。黃俞龍等[81]從金櫻子中分離純化出多糖以及蘆丁和槲皮素兩種黃酮類化合物，這些化合物均可抑制人類肝癌細胞BEL-7402的增殖，初步證明金櫻子多糖和黃酮類化合物具有抗腫瘤作用。KWOK CHUI CHENG等[82]采用桑椹水提物作用于二乙基亞硝胺(DEN)誘導肝腫瘤大鼠模型，發(fā)現(xiàn)腫瘤變小。閆磊等[83]研究發(fā)現(xiàn)，肉蓯蓉多糖對D-半乳糖致衰老小鼠可產生抗疲勞的作用。張娜娜[84]研究發(fā)現(xiàn)，肉蓯蓉多糖可改善內分泌，發(fā)揮改善更年期癥狀的作用。張濤等[85]研究發(fā)現(xiàn)，肉蓯蓉多糖和松果菊苷可干擾K562白血病細胞的細胞周期，從而抑制細胞的生長，最終發(fā)揮抗白血病的作用。

3 質量標志物的預測分析

3.1 基于質量傳遞與溯源的質量標志物預測分析

以壯藥補虛調理方中的十一味藥材作為關鍵詞，通過TCMSP(https：//tcmspw.com/tcmsp.php)數(shù)據(jù)庫，根據(jù)藥物動力學篩選條件“OB≥30%，DL≥0.18” 進行檢索，共篩選出247個活性成分；其中益智中有34個成分、黃精中有14個成分、覆盆子中有12個成分、桑椹中有6個成分、肉蓯蓉中有6個成分、枸杞子中有58個成分、金櫻子中有14個成分、芡實中有2個成分、烏藥中有9個成分、甘草中有92個成分，由于在TCMSP數(shù)據(jù)庫中未載入補骨脂的相關成分，但是通過ETCM(http：//www.tcmip.cn/ETCM/)數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)補骨脂含亞油酸、補骨脂素、異補骨脂素、胡蘿卜苷等42個成分。

由于中藥里面真正發(fā)揮藥效的活性成分與其他固有成分存在不同，因此只有從血中發(fā)現(xiàn)直接作用的活性物質才能真正揭示中藥臨床療效的藥效物質基礎[86]。本研究通過調研“中國知網”“維普”“萬方”等數(shù)據(jù)庫，結果發(fā)現(xiàn)尚未有將壯藥調理補虛方作為一個整體復方的入血成分的研究報道，同時此部分研究內容也是本課題組正在進行研究的內容。因此，可選取對壯藥調理補虛方中各單味藥體內入血成分或者在其他復方中可能的入血成分，作為質量標志物的預測分析基礎。秦子飛[87]研究發(fā)現(xiàn)，中藥復方“仙靈骨金葆”大鼠給藥后入血成分補骨脂素、異補骨脂素、補骨脂苷、異補骨脂苷等可歸屬于補骨脂；李夢琪[88]通過研究縮泉丸大鼠入血成分，發(fā)現(xiàn)益智仁中含有圓柚酮、7-表-香科酮、楊黃芽素、白楊素、益智醇、益智酮甲及其代謝成分11，1-二羥基圓柚酮等有效成分；許飛等[89]通過灌胃大鼠實驗，發(fā)現(xiàn)樓桂枝湯中甘草可能發(fā)揮入血作用的成分含有黃酮類化合物，包括甘草苷、芒柄花苷、甘草素及三萜類成分，如甘草酸、甘草次酸等；顏昱[90]對中藥肉蓯蓉進行了體內成分分析，結果表明肉蓯蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷、異毛蕊花糖苷、肉蓯蓉苷F、咖啡酸等17個成分以原型成分出現(xiàn)于血漿中；林秀蓮[91]通過研究補腎強身片血中移行成分，發(fā)現(xiàn)金櫻子中原兒茶酸以原型成分形式存在；王玲[92]對右歸丸入血成分進行研究，發(fā)現(xiàn)甜菜堿、原兒茶酸和原兒茶醛為方中枸杞子的入血成分。

3.2 基于成分特有性的質量標志物預測分析

益智仁為姜科植物益智AlpiniaoxyphyllaMiq.的干燥成熟果實，藥典規(guī)定益智仁揮發(fā)油為含量測定指標性成分。益智仁中主要含有倍半萜類、單萜類、二萜類、二苯庚烷類、黃酮類、簡單芳香族化合物及脂肪族化合物，其中圓柚酮、7-表-香科酮等倍半萜類為其特征性成分[93]。

烏藥為樟科植物烏藥Linderaaggregata(Sims) kosterm.的干燥塊根，藥典規(guī)定烏藥醚內酯和去甲異波爾定為指標性成分。烏藥主要成分為呋喃倍半萜及內酯、揮發(fā)油、黃酮類、異喹啉生物堿類等，其中包含一些主要且特殊的成分，如烏藥醚內酯、去甲異波爾定等[94]。

補骨脂為豆科植物補骨脂PsoraleacorylifoliaL.的干燥成熟果實，藥典規(guī)定補骨脂素和異補骨脂素為指標性成分。補骨脂屬共有130種植物，我國僅補骨脂一種有分布。補骨脂主要成分為香豆素及苯并呋喃類、黃酮類、單萜酚類等，具有多種生物活性[95]。

金櫻子為薔薇科植物金櫻子RosaLaevigataMichx.的干燥成熟果實，藥典規(guī)定金櫻子多糖為指標性成分。金櫻子中主要成分為多糖類、黃酮類和三萜類等[96]。

覆盆子為薔薇科植物華東覆盆子RubuschingiiHu的干燥果實，藥典規(guī)定鞣花酸和山柰酚-3-O-蕓香糖苷為其指標性成分。覆盆子中有效成分主要包括黃酮類、萜類、甾醇、揮發(fā)油、氨基酸等，其中覆盆子素、葡萄糖苷、山柰酚和槲皮素等均具有多種生物活性[97]。

黃精為百合科植物滇黃精PolygonatumkingianumColl.et Hemsl.、黃精PolygonatumsibiricumRed.或多花黃精PolygonatumcyrtonemaHua 的干燥根莖，藥典規(guī)定黃精多糖為其指標性成分。黃精主要成分包括多糖類、皂苷類、黃酮類、揮發(fā)油、氨基酸等，其中黃精多糖和三萜皂苷類毛地黃皂苷、薯蕷皂苷以及菝葜皂苷為其主要有效成分[98]。

枸杞子為茄科植物寧夏枸杞LyciumbarbarumL.的干燥成熟果實，藥典規(guī)定枸杞多糖和甜菜堿為其指標性成分。枸杞子中主要有效成分包括黃酮類、揮發(fā)油類、生物堿類和氨基酸類等，其中綠原酸、蘆丁、槲皮素以及山柰酚等成分在枸杞子中含量最高[99]。

桑椹為桑科植物桑MorusalbaL.的干燥果穗，桑椹主要成分包括黃酮類、多糖類、花色苷類等，其中矢車菊-3-O-蕓香糖苷、天竺葵-3-O-蕓香糖苷、矢車菊-3-O-葡萄糖苷和天竺葵-3-O-葡萄糖苷等花色苷類具有廣泛的藥理活性[100-101]。

芡實為睡蓮科植物芡EuryaleferoxSalisb.的干燥成熟種仁，芡實主要成分為木脂素類、腦苷脂類、生育酚類、環(huán)二肽、多酚類和黃酮類，其中山柰酚、沒食子酸、槲皮素、蘆丁等具有多種藥理活性[102]。

肉蓯蓉為列當科多年生草本寄生植物荒漠肉蓯蓉CistanchedeserticolaY.C.Ma和管花肉蓯蓉C.tubulosa(Schenk) Wight干燥帶鱗葉的肉質莖，藥典規(guī)定松果菊苷和毛蕊花糖苷為其指標性成分。肉蓯蓉主要有效成分包括苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜苷類、木脂素類成分等[103]，其中苯乙醇苷類是列當科的代表性成分，也是發(fā)揮藥效的基礎物質，僅存在于列當屬、肉蓯蓉屬和草蓯蓉屬中，且肉蓯蓉屬中含量最高，因此苯乙醇苷類成分專屬性較強[104]。

炙甘草為豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch、脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根和根莖，藥典規(guī)定甘草苷和甘草酸為其指標性成分。甘草中主要有效成分包括黃酮類、三萜類、生物堿類和糖類等[105]。

通過以上總結可知，總多糖類、總黃酮類、萜類、香豆素類、花色苷類、苯乙醇苷類、揮發(fā)油類為壯藥調理補虛方的主要成分，可作為基于成分特有性的質量標志物的預測首選。

3.3 基于成分與藥效的相關質量標志物預測分析

據(jù)前文可知，益智仁多糖、7-表-香科酮具有縮尿作用；黃精多糖、金櫻子多糖、覆盆子素、山柰酚、槲皮素、甘草酸可對腎臟起保護作用；補骨脂酚、烏藥醚內酯、黃精多糖、桑椹多糖、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、花青素、原兒茶酸、白楊素、毛蕊花糖苷和松果菊苷可改善肝功能；圓柚酮、原兒茶酸、白楊素、補骨脂素、槲皮素、山柰酚、毛蕊花糖苷、肉蓯蓉多糖、肉蓯蓉苷具有保護神經的功效，可提高記憶力，改善學習記憶障礙。異補骨脂素、覆盆子素A、覆盆子素B、山柰酚、槲皮素、松果菊苷、毛蕊花糖苷、益母草堿、京尼平酸等可延緩骨質疏松；松果菊苷可抗白血?。蝗馍惾囟嗵强煽蛊?、改善更年期癥狀、抗白血??；山柰酚-3-O-蕓香糖苷具有保護肝臟和神經系統(tǒng)的作用。

因此，益智仁中益智仁多糖、7-表-香科酮、圓油酮、原兒茶酸、白楊素；補骨脂中補骨脂酚、補骨脂素、異補骨脂素；烏藥中烏藥醚內酯、異烏藥內酯；金櫻子中金櫻子多糖；覆盆子中覆盆子素、山柰酚-3-O-蕓香糖苷；肉蓯蓉中肉蓯蓉多糖、毛蕊花糖苷、松果菊苷、肉蓯蓉苷、益母草堿、京尼平酸；黃精中黃精多糖；芡實中山柰酚、槲皮素、蘆??；甘草中甘草酸；桑椹中桑椹多糖、矢車菊素-3-O-葡萄糖苷、花青素；甘草中甘草酸等，可作為與藥效相關的質量標志物預測分析的首選成分。

3.4 基于配伍原則的質量標志物預測分析

壯藥調理補虛方中君藥鹽益智仁能暖腎溫脾、固精縮尿；鹽益智仁中益智仁多糖、7-表-香科酮具有調節(jié)膀胱功能的作用；原兒茶酸和白楊素具保肝作用；圓柚酮、原兒茶酸具保護神經的作用。君藥補骨脂溫腎助陽、納氣平喘、溫脾止瀉，補骨脂酚具保肝作用，補骨脂素可保護神經，異補骨脂素有抗骨質疏松作用。烏藥行氣止痛、溫腎散寒，能除膀胱和腎間冷氣，止小便頻數(shù)；金櫻子固精縮尿；覆盆子益腎固精縮尿，三藥能收澀固腎、溫下焦虛寒以輔助君藥加強治療腎虛之下元虛冷，共為臣藥。烏藥醚內酯具保肝作用，金櫻子多糖、覆盆子素A、覆盆子素B、山柰酚、槲皮素可改善腎功能，抗骨質疏松。黃精補脾氣、益脾陰、益腎精；枸杞子滋補肝腎，益精血；桑椹滋陰補血，生津潤燥，三藥均具滋腎陰之效，在補陽之中配伍補陰藥，意在“陰中求陽”，可協(xié)助君藥補腎暖脾并滋補肝腎而強筋骨、溫腰府，緩解腰膝酸軟等證；芡實益腎固精，且可健脾；肉蓯蓉具有補腎陽、益精血、潤腸通便的功效；以上五藥共為佐藥。黃精多糖、桑椹多糖、桑椹花色苷和花青素、芡實多酚類及肉蓯蓉中毛蕊花糖苷、松果菊苷和山柰酚-3-O-蕓香糖苷具保肝作用；桑椹中矢車菊素-3-O-葡萄糖苷改善記憶力；松果菊苷、毛蕊花糖苷、益母草堿、京尼平酸可抗骨質疏松；黃精多糖和皂苷可改善腎功能；甘草酸可改善腎功能，甘草益氣補中、調和藥性，諸藥合用共為使藥。根據(jù)以上分析，上述成分可作為基于配伍原則的質量標志物預測的首選成分。

3.5 基于可測性相關質量標志物的預測分析

紫外分光光度計可檢測總多糖的含量[106]，采用HPLC法可測定鹽益智仁中白楊素[107]和圓柚酮[108]，補骨脂中補骨脂苷、異補骨脂苷、補骨脂素、異補骨脂素、補骨脂酚[18]，金櫻子中槲皮素、山柰酚的含量[109]，覆盆子中山柰酚-3-O-蕓香糖苷、槲皮素、山柰酚的含量[110]，黃精中薯蕷皂苷元、槲皮素及山柰酚的含量[111]，甘草中甘草苷、異甘草苷、甘草素、異甘草素、甘草酸、甘草酸銨等成分的含量[112]。 采用UPLC-Q-TOF-MS法可測定益智仁中原兒茶酸、白楊素、山柰素、楊芽黃素、圓柚酮等成分的含量[113]，烏藥中烏藥醚內酯、去甲異波爾定等成分的含量[25]，桑椹中天竺葵-3-O-葡萄糖苷、氯化芍藥素-3-O-葡萄糖苷、矢車菊-3-O-蕓香葡萄糖苷、錦葵色素-3-5-二葡萄糖苷、矢車菊-3-O-葡萄糖等成分的含量[114]。采用UPLC法可測出松果菊苷、肉蓯蓉苷A、毛蕊花糖苷、管花苷A、異毛蕊花糖苷、2'-乙酰毛蕊花糖苷和管花苷B等成分的含量[115]。經過臨床研究發(fā)現(xiàn)，壯藥調理補虛方的水提液為治療夜尿癥的有效物質，而不溶于水的烏藥醚內酯、圓油酮，以及山柰酚、槲皮素、蘆丁等存在于多個藥材中，專屬性不強，因此不能作為質量標志物的首選成分。

在壯藥調理補虛方質量標準物預測分析的過程中，雖然方中有許多成分，但經過分析發(fā)現(xiàn)，部分成分不可測，或無專屬性和藥效相關性，故而需要選取成分特有，與壯藥調理補虛方藥效有關聯(lián)且便于檢測的化合物。綜上所述，壯藥調理補虛方中多糖(益智仁多糖、金櫻子多糖、黃精多糖、枸杞多糖、肉蓯蓉多糖、桑椹多糖)、原兒茶酸、白楊素、補骨脂素、異補骨脂素、補骨脂酚、山柰酚-3-O-蕓香糖苷、松果菊苷、毛蕊花糖、甘草酸等成分均可以作為該方初步質量預測分析的標志物。見表1。

表1 壯藥調理補虛方的質量標志物信息

4 結語

壯藥調理補虛方是以廣西壯族自治區(qū)壯族民間常用驗方為基礎研制的藥方，全方重在調理腎、脾、肝三臟，諸藥合用共奏暖腎祛寒、溫脾養(yǎng)肝、縮尿止遺之功，主治腎陽虛、脾腎兩虛、下元虛冷之腰膝酸軟、尿頻遺尿等癥。組方符合壯醫(yī)藥主幫帶原則，藥味雖然較多，但不雜亂，立法嚴謹，選藥適當，處方水提液經多年臨床觀察和動物實驗，結果表明治療效果良好，未見毒副反應。但是作為民間驗方，尚未有研究將壯藥調理補虛方作為一個整體復方進行研究，本課題組也正在將壯藥調理補虛方作為整體復方進行質量標準、血清藥物化學等一系列研究，因此本研究的質量標志物初步分析為本課題組的整體復方研究提供了理論基礎，同時也為建立壯藥補虛調理膏質量控制及質量溯源體系提供了參考依據(jù)。