基于中西醫(yī)臨床病證特點的病毒性肺炎動物模型分析

狄培琰張雙麗康 樂苗明三

(河南中醫(yī)藥大學,鄭州 450046)

病毒性肺炎(viral pneumonia,VP)是由病毒感染導致的肺部炎癥,通常是指上呼吸道病毒感染、向下蔓延引發(fā)肺部炎癥,導致肺換氣功能障礙的疾病[1]。該疾病傳染性強,病程發(fā)展急驟。 研究發(fā)現(xiàn),病毒感染在非細菌性肺炎中占25%～50%,是肺炎致死的主要原因[2-3]。 病毒性肺炎多發(fā)于5 歲以下兒童,近年來成人重癥病毒性肺炎的發(fā)病率呈上升趨勢[4]。 本文通過對VP 中西醫(yī)病因病機及診斷標準進行歸納總結(jié),對現(xiàn)有動物模型進行分析,有助于進一步研究VP 疾病,為臨床治療奠定理論及實驗基礎(chǔ)。

1 病毒性肺炎的病因病機

1.1 現(xiàn)代醫(yī)學發(fā)病機制

VP 的發(fā)生通常為機體免疫力下降、機體病變或病變后機體未痊愈狀態(tài)病毒入侵呼吸道,進而侵襲肺部引起病變,嚴重時也可影響心、肝、腎等其它器官。 引起VP 的主要病原有流感性病毒、冠狀病毒、麻疹病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒及鼻病毒等[5-6]。 目前較為常見多發(fā)的為流行性病毒肺炎,如甲型H1N1 流感病毒、H7N9、H5N1 禽流感病毒等。 致病嚴重且影響巨大的多為冠狀病毒,如SARS-CoV、COVID-19 等,傳染性極強且初期表現(xiàn)較不明顯。 常發(fā)于兒童的病毒性肺炎多為呼吸道合胞病毒、副流感病毒、人博卡病毒、人偏肺病毒、腺病毒等[7]。 不同病毒引起的肺炎病變程度差別較大,其治療方式也不盡相同。

1.2 中醫(yī)病因病機

病毒性肺炎在中醫(yī)中并無確切的名稱,通常將其歸為“疫病、溫毒、疫癘、時疫、溫變、咳嗽、喘癥”等范疇[8-9]。 中醫(yī)認為VP 的病因為正氣不足、復(fù)感外邪;病位在肺,可累及其他器官[8];病機為熱毒痰瘀,肺壅氣郁,痰濕瘀阻,氣陰虧虛等交互作用[10]。

2 病毒性肺炎的西醫(yī)診斷標準與中醫(yī)辯證標準

2.1 西醫(yī)診斷標準

VP 的西醫(yī)診斷標準參照2006 年發(fā)行的《內(nèi)科疾病診斷與療效標準》[11]、2008 年發(fā)行的《內(nèi)科常見病診斷及治療》[12]及相關(guān)文獻[13],主要分為臨床癥狀、實驗室檢查、胸部X 線檢查、物理檢查/體征、血白細胞計數(shù)、組織病理學特征等六方面,具體診斷標準見表1。 根據(jù)文獻[14]及疾病診斷主次關(guān)系對每項標準進行賦值,因臨床癥狀較為直觀明顯,將其賦值30%,實驗室診斷可信度高,賦值30%,其余四項各賦值10%。

表1 VP的西醫(yī)診斷標準Table1 WesternmedicinediagnosticcriteriaofVP

2.2 中醫(yī)辨證標準

VP 中醫(yī)診斷標準參照2002 年發(fā)行的《中藥新藥臨床研究指導原則(試行)》[15]、2019 年發(fā)行的《小兒病毒性肺炎中醫(yī)診療指南》[16]及相關(guān)文獻[17-18]。 中醫(yī)臨床證型分為風寒郁肺證、風熱郁肺證、痰熱郁肺證、毒熱閉肺證、陰虛肺熱證、肺脾氣虛證、心陽虛衰證和邪陷厥陰證等。 癥狀主要分為臨床主證、次證、舌脈等。 評價VP 動物模型與中醫(yī)臨床診療標準的吻合情況,見表2,主證可歸納為:(1)發(fā)熱、發(fā)汗異常;(2)咳嗽、咽痛、痰稀白/黏黃;(3)氣急喘粗、頭痛乏力。 次證:(1)鼻塞流涕;(2)小便黃少,大便溏塞;(3)口干口渴;(4)心悸神亂、煩躁不安。 根據(jù)文獻[14],將主證每項賦值20%,次證每項賦值10%,合計100%。

表2 VP 的中醫(yī)診斷標準Table 2 TCM diagnostic criteria of VP

3 病毒性肺炎模型分析

常用于VP 造模的動物主要為鼠類,其中小鼠使用頻率最高,如:BALB/c 小鼠、KM 小鼠、ICR 小鼠等。 豚鼠、金黃地鼠、敘利亞倉鼠、Wistar 大鼠以及恒河猴也較為多用;其余可用的模型動物為:雪貂、樹鼩、小型豬以及伊犁母馬。 不同類別的病毒性肺炎造模方式有所差異,其具體方法及模型吻合度見表3。

表3 VP 的模型分析Table 3 VP model analysis

續(xù)表3

4 討論

VP 發(fā)病原因相對于其它疾病而言較為單一,多為自身正氣不足即抵抗力下降復(fù)而外感風邪導致病毒入侵引起肺部病變,但分型種類較多。 目前對于病毒性肺炎診斷重要的標準為臨床表現(xiàn)是預(yù)兆,X 線影像學檢查判斷病變與否,病原學(咽拭子檢測)與細胞病理學特征結(jié)合確定具體病變情況,輔助以血清抗體檢測。 為了深入研究不同病毒引起的肺炎疾病情況,建立合適的動物模型十分有必要,結(jié)合上文中西醫(yī)診斷標準對現(xiàn)有的動物模型進行評價分析,計算與臨床癥狀的吻合度,深入思考各種模型的優(yōu)勢、不足,有望得到吻合度較高的VP動物模型。 VP 造模方法主要有3 大類:單純引入病毒法(經(jīng)鼻滴入病毒模型、鼻腔接種動物模型、尾靜脈注射病毒法)、復(fù)合接種法(氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、眼和口服聯(lián)合接種;滴鼻、靜脈和纖維支氣管鏡復(fù)合接種方式)以及中醫(yī)證候模型(高脂飼料+病毒滴鼻+游泳30 min)。

根據(jù)中西醫(yī)診斷標準的賦值,我們評價了模型的吻合度,可以看到,與西醫(yī)診斷標準吻合度較高的為氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、眼和口服聯(lián)合接種COVID-19 病毒肺炎動物模型(80%)、經(jīng)鼻滴入H5N1 病毒液肺炎動物模型(70%)、高脂飼料+病毒滴鼻+游泳30 min 引起的濕熱證型病毒性肺炎(65%)、尾靜脈注射的方式接種HCMV 病毒懸液(65%)、鼻內(nèi)噴霧(超聲霧化器)感染病毒肺炎動物模型(65%);與中醫(yī)診斷標準吻合度較高的為:高脂飼料+病毒滴鼻+游泳30 min 引起的濕熱證型病毒性肺炎(80%)、滴鼻、靜脈和纖維支氣管鏡復(fù)合接種ADV 肺炎模型(70%)、H3N2 流感病毒滴鼻肺炎模型(70%)。 綜合來看,高脂飼料+病毒滴鼻+游泳30 min 引起的濕熱證型病毒性肺炎模型中西醫(yī)臨床吻合度較高,且有文獻[26,39]證明該模型動物能夠表現(xiàn)發(fā)熱、咽痛、咳嗽、鼻塞流涕、呼吸困難等人類病毒性肺炎臨床特征,且肺組織病理變化明顯,氣道上皮細胞脫落、支氣管黏膜下及氣管壁周圍有大量炎性細胞浸潤,病毒性肺炎濕熱證型;同樣產(chǎn)生的煩躁不安,心悸失眠等現(xiàn)象與VP 疾病特征極其相似。 復(fù)合接種法模型也具有較好的臨床吻合度,但該模型操作較為復(fù)雜,目前存在引起宿主免疫反應(yīng)、導致感染細胞丟失以及外源基因表達短暫等問題,且感染受體的差異性對于模型研究制約較大,有待于進一步完善[40-41]。 其余幾種模型的中西醫(yī)臨床吻合度不能有較強的正向關(guān)系,因此復(fù)制出更符合中醫(yī)特征的病證結(jié)合VP 動物模型是今后的重要任務(wù)。

VP 現(xiàn)代醫(yī)學動物模型較為簡單且完備,目前已有模型更偏向于西醫(yī)模型,只有較少涉及中醫(yī)證候模型,無法體現(xiàn)中醫(yī)藥辨證論治特點。 近些年來臨床上中醫(yī)證候逐漸擴大,復(fù)制出更符合中西醫(yī)病證結(jié)合特點的模型將有助于深入了解VP 疾病的復(fù)雜病因病機,為進一步完善臨床治療研究提供思路,為研發(fā)藥物提供實驗基礎(chǔ)。