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    高級別腦膠質(zhì)瘤中GFAP、p53、Ki67的表達水平及臨床意義

    2022-12-21 06:34:48程鈺李永來黃璐
    海南醫(yī)學(xué) 2022年23期
    關(guān)鍵詞:高級別膠質(zhì)瘤免疫組化

    程鈺,李永來,黃璐

    安康市中心醫(yī)院病理科,陜西 安康 725000

    腦膠質(zhì)瘤又被稱為腦干腫瘤,在顱內(nèi)腫瘤中占比37%~52%,通常是神經(jīng)膠質(zhì)瘤,其中,較為多見的是極性成膠質(zhì)細胞瘤與星形細胞瘤[1]。腦膠質(zhì)瘤中,惡性超過75%,惡性腦膠質(zhì)瘤又稱高級別膠質(zhì)瘤。依據(jù)相關(guān)文獻顯示,高級別腦膠質(zhì)瘤好發(fā)于中年及青少年,且多數(shù)為男性[2]。血清指標檢測因為其重復(fù)性高、客觀、簡便等優(yōu)點,在腫瘤疾病診治方面得到廣泛關(guān)注。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)屬于膠質(zhì)腫瘤的一種標志蛋白,它能夠在細胞分裂、增殖及血-腦脊液屏障維護等方面發(fā)揮作用,往往被應(yīng)用于明確顱內(nèi)膠質(zhì)腫瘤的來源[3]。p53蛋白是由于p53基因突變而產(chǎn)生的,屬于腫瘤促進生長因子之一,可以對p53基因的作用進行抑制,同時,p53基因出現(xiàn)突變,使細胞增殖失控,進而引發(fā)癌變[4]。然而相關(guān)文獻顯示,p53蛋白于膠質(zhì)瘤內(nèi)的陽性表達率約為50%,于低級別膠質(zhì)瘤內(nèi)陽性表達率更低[5]。Ki67屬于一種細胞增殖標志物,在細胞核中存在,且同細胞周期息息相關(guān),廣泛應(yīng)用于臨床。目前有文獻顯示,伴隨腦膠質(zhì)瘤級別的增加,Ki67的表達也不斷增加[6]。本研究主要探討高級別腦膠質(zhì)瘤中GFAP、p53、Ki67的表達水平及臨床意義,現(xiàn)將結(jié)果報道如下:

    1 資料與方法

    1.1 一般資料回顧性分析2019年1月至2021年12月在安康市中心醫(yī)院診治的126例腦膠質(zhì)瘤患者的臨床資料。納入標準:(1)通過影像學(xué)、病理學(xué)等診斷為腦膠質(zhì)瘤;(2)同世界衛(wèi)生組織(WHO)公布的公布的樞神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)瘤病理分級標準相符[7];(3)臨床資料完整;(4)未接受放、化療等干預(yù)。排除標準:(1)心、腎、肺、肝功能障礙;(2)其他腦類疾??;(3)嚴重感染者。其中男性62例,女性64例;年齡34~76歲,平均(50.25±8.36)歲;腫瘤直徑1~8 cm,平均(5.96±0.52)cm。按照世界衛(wèi)生組織(WHO)中腫瘤病理分級標準,分為高級別組(Ⅲ~Ⅳ級腦膠質(zhì)瘤)70例與低級別組(Ⅰ~Ⅱ級腦膠質(zhì)瘤)56例。

    1.2 檢測方法將所有研究對象的腦組織用中性甲醛10%固定之后,用石蠟包埋,并切片4 μm,之后實施免疫組化染色,期間選擇上海億新生物科技有限公司生產(chǎn)的GFAP、p53、Ki67單克隆抗體(鼠抗人)、磷酸緩沖鹽溶液緩沖液、DAB顯色劑,嚴格依據(jù)試劑盒說明書操作。依據(jù)免疫組化染色評分判斷結(jié)果[8]:(1)陽性細胞計數(shù),隨機挑選5個400倍視野,對陽性細胞數(shù)進行觀察,之中0~5%記0分,6%~25%記1分,26%~50%記2分,51%~75%記3分,超過75%記4分;(2)染色強度,對胞質(zhì)顏色進行觀察,顏色為棕黃、淡黃、棕褐色記陽性細胞,其中無著色記0分、淡黃色記1分、棕黃色記2分、棕褐色3分。最終評分為陽性細胞計數(shù)評分同染色強度評分的乘積,陽性為≥2分,陰性為<2分。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,比較采用t檢驗,計數(shù)資料比較采用χ2檢驗;采用Spearman相關(guān)性分析GFAP、p53、Ki67陽性表達率與病理分級的相關(guān)性。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組患者的GFAP、p53、Ki67陽性表達率比較高級別組患者的GFAP陽性表達率明顯低于低級別組,p53、Ki67陽性表達率明顯高于低級別組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),見表1。

    表1 兩組患者的GFAP、p53、Ki67陽性表達率比較[例(%)]

    2.2 不同病理特征患者的GFAP、p53、Ki67陽性表達率比較不同性別、年齡、腫瘤原發(fā)位置及腫瘤大小患者的GFAP、p53、Ki67陽性表達率比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),見表2。

    表2 不同病理特征患者的GFAP、p53、Ki67陽性表達率比較[例(%)]

    2.3 GFAP、p53、Ki67陽性表達率與病理分級的相關(guān)性經(jīng)Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示,GFAP陽性表達率與病理分級呈負相關(guān)(r=-0.663,P=0.001),p53、Ki67陽性表達率與病理分級呈正相關(guān)(r=0.732、0.441,P=0.001、0.001)。

    2.4 典型病例患者女性,55歲,反復(fù)頭暈半年來院。頭顱CT提示:右側(cè)丘腦、基底節(jié)區(qū)及右側(cè)頂、枕、顳葉改變,考慮腫瘤性病變。建議MRI平掃+增強檢查。查顱腦磁共振平掃+增強+DWI+MRS:右側(cè)頂、枕、顳葉、右側(cè)海馬區(qū)、胼胝體壓部占位,考慮腫瘤性病變,高級別膠質(zhì)瘤可能(枕葉病灶邊緣彌散稍受限),腦疝形成。給予安排急診手術(shù)。病理大體肉眼所見:灰白灰紅腦樣碎組織一堆,總體積7.0 cm×5.0 cm×2.0 cm。病理回報:“顱內(nèi)腫瘤”高級別膠質(zhì)瘤,形態(tài)學(xué)結(jié)合免疫組化考慮膠質(zhì)母細胞瘤(WHOⅣ級),IDH-1陰性,見圖1~9(SP法)。

    圖1 腫瘤HE切片(10×)

    圖2 出現(xiàn)血管增生(10×)

    圖3 壞死(10×)

    圖4 腫瘤細胞密度增大(10×)

    圖5 細胞核出現(xiàn)異型性(10×)

    圖6 免疫組化GFAP:膜漿陽性(10×)

    圖7 免疫組化Olig2:核陽性(10×)

    圖8 免疫組化p53:核陽性(10×)

    圖9 Ki67高表達,增殖指數(shù)高(10×)

    3 討論

    腦膠質(zhì)瘤起病慢,病情逐漸加重,具有復(fù)雜性與多樣性,輕癥者呈現(xiàn)出頭痛、頭暈等癥狀,重癥者則可能產(chǎn)生發(fā)作性昏迷、紅核震顫等,且膠質(zhì)瘤患者往往在就診時惡性程度就較高,所以及時診斷非常重要。相關(guān)文獻顯示,細胞周期調(diào)控同腫瘤進展息息相關(guān),抑癌基因、癌基因喪失調(diào)控細胞周期的作用后,會較大幅度地提升細胞癌變概率[9]。近幾年,伴隨研究的逐漸深入,發(fā)現(xiàn)諸多基因于互相作用下能加快腫瘤的發(fā)展。

    GFAP屬于損壞星形膠質(zhì)細胞后產(chǎn)生的標志物之一,具有特異性,能夠判斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)出現(xiàn)的腫瘤細胞來源[10]。于缺血狀況下,成熟星形細胞被刺激后后就能產(chǎn)生GFAP,所以,GFAP能夠?qū)δX細胞缺血狀況進行判斷,同時也能作為此類型腦膠質(zhì)瘤的評價指標[11]。本次研究表明,高級別腦膠質(zhì)瘤患者的GFAP陽性表達率明顯低于低級別腦膠質(zhì)瘤患者,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明惡性程度較高的腫瘤細胞使GFAP的分泌及釋放受到了抑制。相關(guān)文獻顯示,腦膠質(zhì)瘤細胞中GFAP的表達同惡性程度為負相關(guān)關(guān)系,高惡性程度的腫瘤細胞切片后幾乎沒有GFAP表達[12]。這同本次研究相符。所以,GFAP能夠鑒別腦膠質(zhì)瘤的級別。

    人體中p53基因分為突變型、野生型兩種,p53野生型基因?qū)儆谝职┗蛑?,于調(diào)節(jié)細胞周期、細胞凋亡期間作用顯著[13]。外界諸多因素干擾下,DNA不能對損傷進行修復(fù),p53野生型基因會在較短時間內(nèi)使細胞出現(xiàn)凋亡,抑制潛在癌變細胞的發(fā)育與生長,進而體現(xiàn)它在人體內(nèi)的抑癌價值[14]。然而,p53野生型基因于人體內(nèi)會由于諸多原因?qū)е峦蛔?,進而喪失抑癌功能,p53突變之后不能對癌細胞增殖進行抑制,進而產(chǎn)生腫瘤。此外,相關(guān)研究表明,p53蛋白產(chǎn)生于p53突變基因,同ras/cmyc癌基因等誘導(dǎo)細胞癌變,加快腫瘤發(fā)生的速度[15]。本次研究中,p53于高級別腦膠質(zhì)瘤患者中的陽性表達率為82.86%,明顯高于低級別腦膠質(zhì)瘤患者的39.29%,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),說明p53能夠鑒別腦膠質(zhì)瘤的級別,同時經(jīng)Spearman相關(guān)分析顯示,p53陽性表達率同病理分級為正相關(guān)關(guān)系。

    Ki-67在增殖細胞內(nèi)的核抗原中存在,它的免疫反應(yīng)同細胞周期有一定相關(guān)性,是當前應(yīng)用最廣泛的一種指標,同時在腫瘤細胞增殖活性檢測中也比較可靠[16]。Ki-67能夠反映腫瘤細胞生長的活躍程度,換句話說就是Ki-67水平越高,惡性程度越高,腫瘤細胞生長越活躍[17]。本研究顯示,p53于高級別腦膠質(zhì)瘤患者中的陽性表達率為81.43%,明顯高于低級別腦膠質(zhì)瘤患者的33.93%,說明Ki-67可以反映腦膠質(zhì)瘤的惡性程度,同時經(jīng)Spearman相關(guān)分析顯示,Ki-67陽性表達率同病理分級為正相關(guān)關(guān)系。這同黃卓彥等[18]的研究相符。

    綜上所述,GFAP于高級別腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達率較低,且同病理分級呈負相關(guān)關(guān)系,p53、Ki67于高級別腦膠質(zhì)瘤中的陽性表達率較高,同病理分級呈正相關(guān)關(guān)系。

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