淫羊藿苷對生殖系統(tǒng)影響的研究進展*

李康梅，黎明星，陳泯锜，陳秀榕，段桂嬌，戴明明，何國珍△

1 廣西中醫(yī)藥大學(xué)研究生學(xué)院，廣西 南寧 530200；2 廣西中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院；3 廣西中醫(yī)藥大學(xué)賽恩斯新醫(yī)藥學(xué)院

淫羊藿又稱為淫羊藿素、三枝九葉草、羊合葉等，性溫，味辛、甘，主要歸肝、腎經(jīng)，最早出自《神農(nóng)本草經(jīng)》，主要功效為補腎壯陽，祛風(fēng)除濕，屬于我國傳統(tǒng)補益中藥［1］。淫羊藿主要有5種，分別為心葉淫羊藿、箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊藿以及朝鮮淫羊藿［2］。心葉淫羊藿Epmedium brevicornuMaxim.為莖細圓柱形，莖生葉對生，二回三出復(fù)葉，小葉有長柄基部心形，葉片薄且為革質(zhì)，形狀卵圓形，上表面為黃綠色，下表面為灰綠色，無臭味微苦。心葉淫羊藿生長于海拔650～2100 m 潮濕且背光的灌木叢中。箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum（S.Et Zucc.）Maxim.是淫羊藿屬物種中分布最廣泛的一種，不同地區(qū)分布的形態(tài)差異較大。剪葉淫羊藿株高14～90 cm，根狀莖短粗，結(jié)節(jié)狀且延展性差，一回三出復(fù)葉，卵圓形或者卵狀披針形，邊緣有細刺毛，葉片革質(zhì)，莖生葉形與根出葉極其類似，基部呈歪箭狀心形而先端逐漸變尖。柔毛淫羊藿Epimedium pubescensMaxim.葉片下表面灰色及葉柄密為白色網(wǎng)狀茸毛。柔毛淫羊藿生長于海拔300～2000 m 的灌叢中、山坡或山溝的蔭濕處。巫山淫羊藿Epimedium wushanenseT.S.Ying 根狀莖呈結(jié)節(jié)狀，堅硬，表面較多須根。一回三出復(fù)葉，邊緣有刺齒。巫山淫羊藿生長于海拔300～1300 m的山坡灌草叢中或石縫中，且分布集中在兩個地區(qū)，其中一個為四川的東部和重慶的北部；另一個為貴州東南部及湖南西南部，廣西和陜西也有少量分布但分布區(qū)域比較狹窄。朝鮮淫羊藿Epimedium koreanumNakai，二回三出復(fù)葉，小葉較長為卵形，先端又長又尖，并且葉片較薄為紙質(zhì)。朝鮮淫羊藿生長于海拔200～900 m多蔭的林下或灌叢間。日本沿海岸、朝鮮北部和中國長白山地區(qū)都有分布，在中國主要分布于吉林和遼寧的東部，黑龍江和吉林交界處也有少量分布。朝鮮淫羊藿自身朝向從西南到東北隨著經(jīng)緯度變化而變化。

淫羊藿主要含有黃酮類、多糖類、揮發(fā)油、生物堿及鉀、鈣、鎂等多種微量元素［3］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，淫羊藿的主要活性成分為淫羊藿苷Icariin，ICA［4-5］，有治療神經(jīng)系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)疾病以及抗炎、抗腫瘤等作用［6］。本文主要闡述淫羊藿苷對生殖系統(tǒng)的作用，為后續(xù)本課題組的實驗研究提供一定的理論支持。

1 對下丘腦-垂體-性腺軸的影響

下丘腦和垂體位于動物的中樞，下丘腦通過分泌釋放激素和釋放抑制激素，調(diào)節(jié)垂體內(nèi)細胞的分泌，后者又可以調(diào)節(jié)性腺的分泌和功能活動，從而控制生殖過程，因此下丘腦-垂體-性腺軸是生殖調(diào)控的高級中樞。淫羊藿可作用于這一高級調(diào)控中樞，發(fā)揮其促進生殖的作用。章振保等［7］通過實驗證明淫羊藿苷可通過下丘腦-垂體-性腺軸促進衰老大鼠分泌睪酮。汪興生等［8］運用水提法提取效成分提取，每天SD 灌胃大鼠中藥水提液兩個月，通過血液指標檢測LH、FSH 等相關(guān)指標，證實淫羊藿可以作用于睪丸的間質(zhì)細胞，分泌睪酮，通過負反饋作用于垂體，影響LH 和FSH 分泌。張森［9］對垂體細胞進行原代培養(yǎng)并進行PCR試驗，發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷能增進垂體前葉細胞分泌卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，F(xiàn)SH）以及促黃體生成素（luteinizing hormone，LH），可增進垂體細胞中FSH mRNA以及LH mRNA的表達。武密山等［10］研究表明對去卵巢模型組大鼠使用50 以及100 mg/kg 的淫羊藿苷醫(yī)治后，大鼠血清E2水平、椎骨骨密度、脛骨以及下丘腦弓狀核ERβ mRNA表達提升較大，而下丘腦室旁核、視上核ERβ mRNA表達下降較大。高學(xué)勇等［11］將大鼠分為空白對照組、陰性對照組、模型組、淫羊藿苷治療組，使用放射免疫法和SABC 免疫組織化學(xué)檢測，結(jié)果顯示淫羊藿苷對血清FSH、LH 水平無明顯影響，認為可能是由于垂體-性腺軸存在負反饋調(diào)節(jié)機制作用的原因，因睪酮水平降低能增進腺垂體前葉促性腺細胞分泌FSH、LH，睪酮水平提高可反作用削弱促性腺細胞分泌FSH、LH，而FSH、LH的分泌也受GnRH的調(diào)控。張君濤等［12］淘汰游泳后不適應(yīng)的大鼠，將剩余大鼠隨機分為對照組及不同濃度組進行淫羊藿苷-鋅結(jié)合物灌胃，42 天后對大鼠睪丸以及前列腺等進行稱重并計算各自指數(shù)，觀察肝或肌組織勻漿中的肝糖原以及肌糖原的含量，結(jié)果顯示不同濃度的淫羊藿苷鋅可以影響大鼠性腺發(fā)育及生育功能，對大鼠性腺發(fā)育及分泌功能均具有促進作用。

2 對性激素的影響

大量研究表明，淫羊藿苷有明顯的性激素樣作用，不僅能夠促進血清睪酮分泌，還能促進雌性內(nèi)分泌系統(tǒng)，上調(diào)雌激素受體（estrogen receptor，ER）的表達并促進體外培養(yǎng)卵母細胞的成熟和受精，同時認為淫羊藿苷可以保護酒精致雄性小鼠的生殖損傷［11，13-14］。梁志健等［15］將雄性SD 大鼠隨機分為正常對照組、摘除右側(cè)睪丸組等5 組，分別對各組灌胃給予蒺藜淫羊藿復(fù)合物或純凈水，結(jié)果顯示蒺藜淫羊藿復(fù)合物具有一定的雄激素樣作用，可促進睪酮分泌，改善由于睪酮分泌減少所致的性功能障礙，增加精子活率及活力。張森［9］、楊桂梅等［16］研究表明，淫羊藿苷可促進成年雌性大鼠FSH、LH和雌激素（estradiol，E2）的分泌。盛文潔［17］也證實了淫羊藿苷可通過提高CYP17、CYP19 的表達，促進大鼠卵巢顆粒細胞分泌E2和孕酮（progesterone，P）。張孟之等［18］研究表明，淫羊藿苷可促進大鼠卵巢顆粒細胞增殖，升高CYP17、CYP19 mRNA 蛋白表達，促進E2及P 的分泌。卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞比卵母細胞和基膜細胞更早出現(xiàn)細胞凋亡的結(jié)果，而淫羊藿苷可使線粒體凋亡途徑的激活得到克制，使Bax 以及Caspase-3 基因表達降低，Bcl-2 基因的表達升高，從而削弱體外培養(yǎng)顆粒細胞凋亡以及卵泡閉鎖［19］。黃菊［20］研究表明，淫羊藿甙可抑制原始卵泡形成以及啟動，使卵泡的生長發(fā)育周期延長，減少每個周期中優(yōu)勢卵泡的個數(shù)，增加生殖細胞儲備量，從而使大鼠卵巢衰老延遲。李美玲［21］對加入藥物處理的人類顆粒細胞樣腫瘤細胞進行培養(yǎng)并將其分為不同濃度組，分別檢測顆粒細胞增殖能力、雌激素、孕激素分泌等，結(jié)果表明淫羊藿苷可明顯促進顆粒細胞雌二醇的分泌，使顆粒細胞的增殖水平上調(diào)，并在淫羊藿苷濃度為5 ug/L 時促進作用最為明顯，認為是淫羊藿苷通過使顆粒細胞芳香化酶基因轉(zhuǎn)錄分子通路上調(diào)而發(fā)揮的作用所致。董若曦［22］研究表明，淫羊藿苷可通過磷酸化激活PI3K/Akt/mTOR 信號通路，使化療損傷性卵巢早衰大鼠的氧化應(yīng)激水平降低，使大鼠卵巢細胞的凋亡降低，從而使大鼠化療損傷性卵巢早衰得到改善。

3 對性器官的影響

淫羊藿苷除了可以作用于性腺外，還可以直接刺激性器官，對性器官表現(xiàn)出一定的保護作用。高學(xué)勇［23］研究認為，環(huán)磷酰胺可以阻礙睪丸產(chǎn)生精子，使生殖細胞發(fā)生凋亡，而淫羊藿苷可通過改善睪丸生精小管結(jié)構(gòu)，降低生殖細胞凋亡，升高血清睪酮濃度，促進精子產(chǎn)生。同時，淫羊藿苷對雌性大鼠卵巢和子宮的發(fā)育也有促進作用［9］。研究表明，淫羊藿苷可增加卵巢質(zhì)量和子宮的發(fā)育，在30～1000 μg/L 的劑量范圍內(nèi)可促進卵泡顆粒細胞分泌雌二醇［9，13，24］。尤旭等［25］將不同濃度組的SD 大鼠飼養(yǎng)4 個月后處死，采用HE 染色法、黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法、免疫熒光法以及Western blotting 法檢測睪丸組織中相關(guān)因子及相關(guān)蛋白的表達水平，結(jié)果認為淫羊藿苷可通過激活Nrf2/HO-1 信號通路使睪丸組織抗氧化能力增強，使自然衰老大鼠睪丸中γ-H2AX、p-p53 和p21 蛋白表達下降，使自然衰老大鼠睪丸生殖細胞DNA 損害降低。同時實驗也表明淫羊藿苷可調(diào)節(jié)Sertoli 細胞自噬水平，激活自噬，減輕Sertoli 細胞損傷，使衰老所致的大鼠睪丸生精功能衰退減慢［26］。淫羊藿苷可使精索靜脈曲張導(dǎo)致的附睪上皮組織結(jié)構(gòu)和功能損害得到修復(fù)，其機制可能是通過抑制精索靜脈曲張導(dǎo)致的氧化應(yīng)激來治療的［27］。淫羊藿苷可增進未成年雄性大鼠腺垂體、附睪及精囊腺重量的提升，促進生殖器官的發(fā)育，提升睪丸Leydig 細胞睪酮的分泌，促使動物精液分泌［28］。

4 對性功能的影響

章振保等［29］通過利用環(huán)磷酰胺制造生殖系統(tǒng)受損、雄激素部分缺乏的大鼠模型，然后對模型大鼠進行淫羊藿甙和菟絲子提取物灌胃，7 天后檢測大鼠血清睪酮、LH、FSH 的含量，同時使用HE 染色和原位末端標記法檢測睪丸組織以及陰莖海綿體平滑肌細胞的變化，結(jié)果表明淫羊藿甙可使陰莖海綿體平滑肌cGMP 濃度升高，使離體培養(yǎng)的陰莖海綿體平滑肌得到很好的松弛，促進陰莖勃起功能，認為其作用機制與影響NO-cGMP 通路的活性、提高cGMP水平有關(guān)。楊春［30］、章振保等［7］研究表明，淫羊藿苷可增強陰蒂海綿體平滑肌細胞NOS 活性，促進一氧化氮（nitric oxide，NO）生成，使磷酸二酯酶（phosphodiesterases，PDES）受到抑制，提升NO-cGMP 通路的活性，使性刺激下陰蒂海綿體平滑肌松弛，促進陰蒂充血脹大勃起。另外，淫羊藿苷可通過升高機體雄激素濃度以及下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺（dopamine，DA）、5 羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）含量、改進陰莖勃起、增加陰莖海綿體內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）含量、使老齡大鼠的性活動能力增加，提升性欲，加強勃起［31］。喬梁等［32］利用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）技術(shù)和125I 放射免疫法分別檢測兔陰蒂海綿體中PDE5 mRNA 的表達以及淫羊藿甙對陰蒂海綿體內(nèi)磷酸二酯酶5（phosphodiesterase 5，PDE5）酶底物cGMP 濃度的影響，認為淫羊藿甙可明顯提高陰蒂海綿體內(nèi)的cGMP 濃度，具有顯著的濃度依賴性，其可能是通過PDE5 與NO cGMP 信號通路發(fā)揮作用的。DING 等［33］研究表明，血清睪酮水平和NO濃度、下丘腦DA和5-HT水平以及eNOS、PI3K和磷酸化AKT在陰莖組織中的表達均高于對照組。淫羊藿苷的作用呈劑量依賴性增強。證明ICA 可以改善雄性小鼠的性功能，可能與下丘腦-垂體-性腺軸和PI3K/AKT/eNOS/NO 信號通路有關(guān)。

5 小結(jié)

隨著社會的不斷發(fā)展，生活壓力的增大，女性生殖健康的問題日益突出，如卵巢早衰，多囊卵巢綜合征等疾病發(fā)病率逐漸上升［34-35］。本研究主要綜述淫羊藿苷對下丘腦-垂體-性腺軸、性激素、性器官、性功能等方面影響，表明淫羊藿苷對生殖系統(tǒng)具有較好的保護作用，但目前并未徹底明確淫羊藿治療的作用機制，需要對淫羊藿苷進行深入探討，為后續(xù)本課題組的實驗研究提供一定的理論支持，為生殖系統(tǒng)疾病提供更好的診治方法。