中藥澤漆抗腫瘤作用文獻(xiàn)研究*

劉金輝 方亞妮 賀太平

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，陜西 咸陽 712046)

中藥澤漆[1]，又名五朵云、五鳳靈芝、貓兒眼睛草、綠葉綠花草等，為大戟科大戟屬植物澤漆的干燥全草，廣泛分布于全國，首記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。澤漆性微寒，味辛、苦，有毒，歸肺、小腸、大腸經(jīng)，具有良好的利水消腫、消痰退熱、散結(jié)殺蟲等功效[2]。主要用于治療水氣腫滿，痰飲喘咳，瘧疾，菌痢，瘰疬，癬瘡，結(jié)核性痿管，骨髓炎等疾病。

目前，國內(nèi)外學(xué)者已從中藥澤漆中分離提取出多種化合物，其中符合類藥五原則且生物利用度較好的活性分子超過10種[3]?，F(xiàn)代研究證實，澤漆除具有消炎、抗菌、殺蟲、抗氧化等功效外，還具有明確的抗腫瘤作用[4-5]。單藥澤漆及澤漆與其他中藥配伍對肺癌、肝癌、宮頸癌、食管癌等多種惡性腫瘤均有顯著的抑制作用[6-10]。本文主要對近年來澤漆抗腫瘤的作用及機(jī)制進(jìn)行綜述，為傳統(tǒng)中藥澤漆應(yīng)用于腫瘤臨床治療提供參考。

1 澤漆抗腫瘤作用及機(jī)制

1.1抑制腫瘤細(xì)胞的生長與增殖 不可控制的生長與過度增殖與惡性的腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切先關(guān)。Hua等分析了三種由澤漆中提取的二萜類化合物對人肺腺癌NCI-1975細(xì)胞、肝細(xì)胞癌HepG2細(xì)胞以及人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的生長抑制作用，結(jié)果證實化合物euphoscopoid B對三種腫瘤細(xì)胞均有較強(qiáng)的毒性作用，其中對MCF-7的抑制作用最強(qiáng)，其IC50值為(30.23±4.18)μmol·L-1[11]。Wang等基于MTT實驗證實，澤漆中分離得到2種高含氧二萜化合物(Euphelionolides)能顯著抑制MCF-7細(xì)胞和前列腺癌PANC-1的活性[12]。有學(xué)者從澤漆甲醇提取液中分離得到3種二萜化合物(Euphoheliphanes A-C)，并證實這三種化合物均可在體外抑制6種腎癌細(xì)胞的活性，且IC50值均小于50 μmol·L-1[13]。

Li等發(fā)現(xiàn)澤漆活性成分大戟苷(Euphornin)處理人宮頸腺癌Hela細(xì)胞48 h后，阻滯于G2/M期的腫瘤細(xì)胞顯著增多，且造成Hela細(xì)胞CDK-1磷酸化豐度升高，表明Euphornin抑制Hela細(xì)胞增殖的機(jī)制與調(diào)節(jié)CDK-1信號通路活性有關(guān)[14]。

Wnt/β-catenin途徑是由配體Wnt與膜蛋白受體結(jié)合激發(fā)的一組多下游通道的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)，被證實與多種惡性腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、增殖、侵染和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[15]。Tong等基于western blot分析證實，由澤漆等十味中藥配制的芪玉三龍湯可顯著下調(diào)Lewis肺癌組織中wnt/β-catenin通路節(jié)點因子Wnt1/2/5a、GSK3β和β-catenin的表達(dá)或磷酸化程度，提示該通路是芪玉三龍湯抑制Lewis肺癌生長的關(guān)鍵[16]。

1.2誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡是一種由基因控制的程序性細(xì)胞死亡過程。有效的誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞進(jìn)入凋亡途徑是各類抗癌療法的核心思路之一，也是中醫(yī)藥抗腫瘤研究的主要方向[17-18]。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族(caspase)是細(xì)胞凋亡的發(fā)起者和執(zhí)行者，其活性主要受線粒體和死亡受體介導(dǎo)信號通路調(diào)控[19]。

Li等發(fā)現(xiàn)euphornin在抑制Hela細(xì)胞生長的同時，可以劑量依賴的方式促進(jìn)Hela細(xì)胞的凋亡，其作用主要依賴于caspase3/8/9/10介導(dǎo)的激活來實現(xiàn)[14]。另有研究證實澤漆中分離出的2種三萜化合物(euphorbatrine)可有效促進(jìn)Hela細(xì)胞的凋亡，且該作用不依賴于MLKO介導(dǎo)的程序性壞死[20]。

Cheng等基于肝細(xì)胞癌SMMC-7721荷瘤小鼠模型，研究了澤漆乙酸乙酯提取物對SMMC-7721細(xì)胞的影響。結(jié)果顯示澤漆乙酸乙酯提取物不僅能有效抑制移植瘤的生長，且高劑量(200 μg·mL-1)提取物比等同濃度的5-FU抑制效果更加顯著。該研究進(jìn)一步證實，澤漆提取物處理可顯著上調(diào)移植瘤細(xì)胞caspase3的表達(dá)，并改變Bax/Bcl-2的相對豐度比，提示其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制可能是通過線粒體途徑激活caspase3信號通路[21]。另有研究證實，澤漆乙酸乙酯提取物不僅能抑制三陰型乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞的生長，同樣可以通過增強(qiáng)活性氧(ROS)所致的線粒體損傷誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞發(fā)生凋亡[22]。

凋亡抑制蛋白Survivin可通過抑制caspase3/7以及與CDK4相互作用阻斷細(xì)胞凋亡，其在多種惡性腫瘤高表達(dá)，與腫瘤的診治及患者預(yù)后密切相關(guān)[23]。Tong等的研究表明，芪玉三龍湯可顯著下調(diào)Lewis肺癌組織中的survivin豐度，暗示芪玉三龍湯可能通過下調(diào)survivin達(dá)到誘導(dǎo)Lewis肺癌細(xì)胞凋亡的功效[16]。

1.3抑制腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲與轉(zhuǎn)移 腫瘤轉(zhuǎn)移指腫瘤細(xì)胞脫離原發(fā)病灶繼而擴(kuò)散至周圍組織器官或在遠(yuǎn)端組織沉降，并在到達(dá)繼發(fā)組織器官后繼續(xù)生長增殖，生成新病灶的過程[24]。臨床研究證實，腫瘤轉(zhuǎn)移是造成90%以上癌癥患者死亡的重要誘因[25]。

基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)能降解細(xì)胞外基質(zhì)中的各類蛋白質(zhì)組分，進(jìn)而消除腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的屏障，與惡性腫瘤的遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[26]。Cheng的研究結(jié)果表明，200 μg·mL-1澤漆乙酸乙酯提取物處理可顯著降低SMMC-7721細(xì)胞移植瘤組織中MMP9的表達(dá)量，同時上調(diào)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白nm23-H1的表達(dá)，提示澤漆中的活性成分可通過調(diào)控MMP9和nm23-H1的表達(dá)來抑制SMMC-7721細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[21]。

1.4逆轉(zhuǎn)腫瘤多重耐藥 多重耐藥(multiple drug resistance，MDR)是惡性腫瘤臨床化療失敗的重要原因之一，表現(xiàn)為腫瘤耐受一種抗癌藥物后，繼而對其他結(jié)構(gòu)不同、作用機(jī)制各異的其他抗癌藥產(chǎn)生交叉耐藥性[27]。ATP結(jié)合盒式蛋白(ATP-binding cassette transporter，ABC)過量表達(dá)是MDR產(chǎn)生重要機(jī)制，其中P-糖蛋白(permeability glycoprotein，P-gp/MDR1)在介導(dǎo)MDR中扮演著至關(guān)重要的角色[28]。

邵遠(yuǎn)等基于MTT法探索澤漆乙酸乙酯提取物對MDR介導(dǎo)的人胃癌SGC7901/DDP(順鉑耐藥)細(xì)胞株多重耐藥的逆轉(zhuǎn)作用，證實10 μg·mL-1及20 μg·mL-1的澤漆提取物均能顯著增強(qiáng)耐藥細(xì)胞對順鉑和5-FU的敏感性，其機(jī)制可能與下調(diào)腫瘤細(xì)胞MDR1及LRP基因的表達(dá)有關(guān)[29]。Mai等從澤漆中分離得到17種的麻楓樹烷型二萜化合物(Helioscopianoid A～Q)，并證實20 μM的helioscopianoid H或P可將P-gp介導(dǎo)的人乳腺癌耐藥株MCF-7/ADR對阿霉素的攝入量提升至原來3倍[30]。此外，該研究團(tuán)隊從澤漆中分離得到的兩種二萜酯類化合物Heliosterpenoids A和B，同樣可顯著提升P-gp介導(dǎo)MCF-7/ADR細(xì)胞對阿霉素的攝入量，且Heliosterpenoids A被證實可顯著抑制人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的生長[31]。

2 結(jié)論與展望

綜上所述，目前研究結(jié)果證實澤漆的多種活性成分與不同提取物均具有明確的抗腫瘤作用，對于肺癌、乳腺癌、宮頸腺癌以及胃癌等多種惡性腫瘤的治療，有較大的臨床轉(zhuǎn)化潛力。澤漆的抗腫瘤機(jī)制包括抑制腫瘤細(xì)胞的生長和與增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞遷移、侵襲與轉(zhuǎn)移以及逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的多重耐藥等。同時，本文對已闡明的澤漆抗腫瘤機(jī)制及其涉及的具體靶點分子和信號通路進(jìn)行了探討，為澤漆及其方劑應(yīng)用于惡性腫瘤的臨床治療提供了一定的支撐。

盡管相關(guān)實驗探索已取得較大進(jìn)展，但目前關(guān)于澤漆抗腫瘤作用及機(jī)制的研究仍局限于體外細(xì)胞與動物移植瘤模型的初步階段，且機(jī)制研究多集中于候選基因或特定信號通路，缺少全面客觀的組學(xué)分析。因此，在真正廣泛用于惡性腫瘤的臨床治療之前，仍需首先開展相關(guān)的藥物臨床研究，以明確其在人體內(nèi)的作用效果。此外，與其他中藥一樣，澤漆所含的化學(xué)組分非常復(fù)雜，需結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和實驗研究，進(jìn)一步挖掘其抗腫瘤的關(guān)鍵靶點和信號途徑。隨著中西醫(yī)結(jié)合的持續(xù)深入，澤漆在惡性腫瘤的臨床治療中的潛力將不斷被挖掘，有望成為具有良好應(yīng)用前景的抗腫瘤藥物。