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    不孕癥患者NK細(xì)胞、Th1/Th2水平變化及與自身免疫抗體的關(guān)系

    2022-12-02 08:30:36武娟束潁許麗娜
    中國(guó)醫(yī)學(xué)工程 2022年11期
    關(guān)鍵詞:免疫抗體性激素不孕癥

    武娟,束潁,許麗娜

    (周口市中心醫(yī)院 檢驗(yàn)科,河南 周口 466000)

    不孕癥為常見(jiàn)生殖健康缺陷,其病因復(fù)雜,輸卵管疾病、免疫失調(diào)、排卵障礙等影響排卵、著床的因素均可能引發(fā)不孕癥;近年免疫因素所致不孕癥的發(fā)病率逐漸升高,病例占比約達(dá)20%,逐漸引起臨床關(guān)注[1]。研究表明,正常妊娠狀態(tài)Th1 型細(xì)胞因子受到抑制,以分泌Th2 型細(xì)胞因子為主,若Th1/Th2 紊亂,可能導(dǎo)致不孕[2]。自然殺傷(natural killer,NK)細(xì)胞亦為重要免疫細(xì)胞,可能與免疫性不孕癥相關(guān);同時(shí)此類患者外周血自身免疫抗體異常[3]。因此分析不孕癥患者Th1/Th2 平衡性、NK 細(xì)胞水平及自身免疫抗體間可能存在一定聯(lián)系,但不孕癥患者自身免疫抗體與NK細(xì)胞、Th1/Th2 水平變化關(guān)系的相關(guān)研究較少?;诖耍狙芯窟x取周口市中心醫(yī)院132 例不孕癥患者,旨在探究NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與抗精子抗體(AsAb)、抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)、抗卵巢抗體(AoAb)等自身免疫抗體的相關(guān)性,為不孕癥診治提供新思路?,F(xiàn)報(bào)告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    選取2019 年5 月至2021 年12 月周口市中心醫(yī)院收治的132 例不孕癥患者為觀察組,另選取同期孕育功能正常的110 例健康體檢者為健康組。其中觀察組年齡28~39 歲,平均(33.57±2.63)歲;健康組年齡27~39 歲,平均(33.18±2.58)歲。兩組基線資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)周口市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過(guò)。

    1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

    納入標(biāo)準(zhǔn):①符合世界衛(wèi)生組織(WHO)標(biāo)準(zhǔn),未避孕正常性生活≥12 個(gè)月而未妊娠;②近3個(gè)月無(wú)性激素類藥物服用史;③伴侶性功能無(wú)異常;④患者及近親屬均了解本研究并簽訂知情同意書(shū)。

    排除標(biāo)準(zhǔn):①存在炎癥性疾?。虎谄髻|(zhì)性病變所致不孕;③存在認(rèn)知、精神障礙;④存在吸煙、酗酒史;⑤存在惡性腫瘤疾病。

    1.3 方法

    1.3.1 NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平檢測(cè) 入組后均采集100 μL 靜脈血樣,加入100 μL 培養(yǎng)液(RPMI-1640)稀釋,加入96 孔平板,采用莫能霉素、PMA、離子霉素工作液混合后,于CO2(5%)環(huán)境中培養(yǎng)5 h,棄上清液,加入10 μL CD4-FITC 單克隆抗體。靜置15 min(避光),磷酸緩沖液清洗,再次加入破膜劑,靜置15 min 后清洗。采用流式細(xì)胞儀測(cè)定NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平。

    1.3.2 自身免疫抗體檢測(cè) 入組后抽取4 mL 空腹靜脈血,離心(3 500 r/min,10 min)取血清,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定血清中AsAb、抗人絨毛膜促性腺激素抗體(AhCGAb)、EMAb、AoAb 水平,抗體定性試劑盒購(gòu)自伊利康生物公司。

    1.3.3 性激素檢測(cè) 于月經(jīng)第3~5 天空腹采血,閉經(jīng)或月經(jīng)稀疏者以其以往規(guī)律月經(jīng)情況預(yù)測(cè)經(jīng)期進(jìn)行采血,以電化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定血清黃體生成素(LH)、睪酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、孕酮(P)水平。

    1.4 觀察指標(biāo)

    ①比較兩組NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平;②比較兩組自身免疫抗體AsAb、AhCGAb、EMAb、AoAb陽(yáng)性率;③比較兩組LH、FSH、E2、T、P 等性激素水平;④分析NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與自身免疫抗體的相關(guān)性;⑤分析NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與性激素水平的相關(guān)性。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS b23.0 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以百分率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。以Spearman 相關(guān)性分析NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與自身免疫抗體、性激素水平的相關(guān)性。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平比較

    觀察組NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平均高于健康組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 兩組NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平比較()

    表1 兩組NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平比較()

    2.2 兩組自身免疫抗體陽(yáng)性率比較

    觀察組自身免疫抗體AsAb、AhCGAb、EMAb、AoAb 陽(yáng)性率均較健康組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

    表2 兩組自身免疫抗體陽(yáng)性率比較[n(%)]

    2.3 兩組性激素水平比較

    觀察組E2、P 水平較健康組低,LH 水平較健康組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩組FSH、T 水平比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表3。

    表3 兩組性激素水平比較()

    表3 兩組性激素水平比較()

    2.4 NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與自身免疫抗體的相關(guān)性分析

    NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與自身免疫抗體AsAb、AhCGAb、EMAb、AoAb 呈正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表4。

    表4 NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與自身免疫抗體的相關(guān)性分析

    2.5 NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與性激素水平的相關(guān)性分析

    NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與E2、P 呈負(fù)相關(guān),與LH 呈正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表5。

    表5 NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與性激素水平的相關(guān)性分析

    3 討論

    相關(guān)研究表明,正常妊娠過(guò)程中Th1/Th2 的平衡具有重要作用,其中Th1 型細(xì)胞因子可作用于妊娠組織,產(chǎn)生細(xì)胞免疫反應(yīng),而Th2 型細(xì)胞因子則有利于妊娠過(guò)程中胎兒生長(zhǎng)發(fā)育[4]。郭玲等[5]研究亦表明,Th1/Th2 細(xì)胞失衡影響胚胎種植。本研究中觀察組Th1/Th2 水平較健康組明顯升高,原因可能在于:若Th1/Th2 失衡,其比值向Th1 偏倚,Th1 介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng)增強(qiáng),進(jìn)一步激活巨噬細(xì)胞,可能導(dǎo)致滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)生免疫損傷,對(duì)胚胎著床、發(fā)育產(chǎn)生不良影響[6]。NK 細(xì)胞主要存在于子宮內(nèi)膜及外周血中,可通過(guò)自身免疫性反應(yīng)、超敏反應(yīng),無(wú)需抗原致敏性就可參與免疫反應(yīng)過(guò)程,發(fā)揮自發(fā)性殺傷功能[7]。本研究中,觀察組NK 細(xì)胞水平異常升高,表明局部組織存在一定炎性反應(yīng),影響下丘腦-垂體性腺軸功能,進(jìn)一步干擾卵泡發(fā)育。正常免疫過(guò)程中,E2、LH 等性激素對(duì)性器官功能成熟有重要意義,同時(shí)具有細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能,免疫反應(yīng)與性激素相互調(diào)節(jié)[8]。本研究中觀察組E2、P 水平較健康組低,LH 水平較健康組高(P<0.05),性激素水平失衡,且與NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平存在明顯相關(guān)性,提示不孕癥患者不僅性激素失調(diào),而且存在免疫功能障礙,機(jī)體性激素水平紊亂可能是免疫功能異常的重要因素。

    有研究表明,不孕癥與AsAb、AhCGAb 等相關(guān),Th 細(xì)胞功能紊亂可介導(dǎo)B 細(xì)胞抗體異常釋放是影響卵巢功能的重要免疫因素[9]。本研究顯示,觀察組自身免疫抗體AsAb、AhCGAb、EMAb、AoAb 陽(yáng)性率均較健康組高(P<0.05);提示不孕癥病理改變過(guò)程中多種抗體發(fā)生陽(yáng)性改變,故以上抗體對(duì)篩查、診斷不孕癥具有一定指導(dǎo)作用。原因可能為:AsAb 作為抗生育抗體,在干擾精子獲能、代謝及受精卵著床的同時(shí),還對(duì)胚胎發(fā)育過(guò)程具有一定影響,甚者造成不孕、早期流產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局[10]。AhCGAb 可作用于hCG,阻斷其正常功能,導(dǎo)致受精卵不能著床,可能導(dǎo)致胚胎停止發(fā)育、妊娠丟失,引發(fā)不良妊娠結(jié)局[11]。EMAb 的抗生育機(jī)制可介導(dǎo)子宮內(nèi)膜抗原抗體反應(yīng),損傷其生理、生化代謝功能,影響受精卵著床、發(fā)育[12]。AoAb 主要產(chǎn)生于顆粒細(xì)胞、卵母細(xì)胞、黃體細(xì)胞等卵巢組織成分,于創(chuàng)傷、感染刺激等情況下產(chǎn)生,激活自身免疫反應(yīng),干擾孕激素、孕酮的合成分泌,影響卵巢排卵、卵泡發(fā)育[13]。王琪等[14]研究顯示,多巢囊腫綜合征不孕患者NK 細(xì)胞、Th1/Th2 與P(r1=-0.774,r2=-0.451,P<0.05)、E2(r1=-0.552,r2=-0.558,P<0.05)呈負(fù)相關(guān),與LH(r1=0.449,r2=0.621,P<0.05)、T(r1=0.481,r2=0.251,P<0.05)呈正相關(guān)。本研究結(jié)果顯示,NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與E2、P 呈負(fù)相關(guān),與LH 呈正相關(guān)(P<0.05),與其研究結(jié)果相似;可見(jiàn)NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與不孕癥血清性激素水平存在密切聯(lián)系。

    綜上所述,不孕癥患者NK 細(xì)胞、Th1/Th2 水平與AsAb、AhCGAb、EMAb、AoAb、性激素水平存在明顯的正負(fù)相關(guān)性關(guān)系,檢測(cè)相應(yīng)細(xì)胞因子及自身免疫抗體對(duì)診斷不孕癥具有一定臨床意義。

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