細(xì)胞焦亡在肝病中的作用及中醫(yī)藥治療的研究進(jìn)展*

于金洋，符佳美，謝晶日

1 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，哈爾濱 150040；2 黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，哈爾濱 150040

細(xì)胞死亡是生物學(xué)中普遍存在的現(xiàn)象，細(xì)胞焦亡作為一種細(xì)胞程序性死亡的新形式，在免疫防御機(jī)制中具有重要的影響。近期研究表明，細(xì)胞焦亡是肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。肝臟疾病發(fā)病因素多樣，造成人體不可逆損害，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。為進(jìn)一步探討肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制，明確細(xì)胞焦亡與肝臟疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，通過(guò)總結(jié)國(guó)內(nèi)外最新文獻(xiàn)論述，對(duì)細(xì)胞焦亡的發(fā)生機(jī)制、細(xì)胞焦亡在肝病中的作用及中醫(yī)藥的治療進(jìn)展作一闡述。

1 細(xì)胞焦亡的發(fā)生機(jī)制

細(xì)胞焦亡是動(dòng)物生長(zhǎng)、組織維持平衡及衰老過(guò)程中的一個(gè)環(huán)節(jié)[1]，其發(fā)生的過(guò)程是一種由炎性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspases）誘導(dǎo)的壞死性和炎癥性、程序性細(xì)胞死亡的過(guò)程[2]，是機(jī)體抵御外界病原體的天然免疫反應(yīng)；但細(xì)胞焦亡過(guò)度發(fā)生可能引起炎癥反應(yīng)及免疫系統(tǒng)疾病。細(xì)胞焦亡的發(fā)生機(jī)制可分為4 個(gè)階段：①“危險(xiǎn)信號(hào)”的識(shí)別；②炎癥小體活化；③caspase-1 蛋白的激活；④最終導(dǎo)致細(xì)胞焦亡的觸發(fā)。宿主生物具有模式識(shí)別受體（pattern-recognition receptors，PRRs），天然免疫系統(tǒng)可以識(shí)別病原體相關(guān)分子模式（pathogen-associated molecular patterns，PAMPs）或損傷相關(guān)分子模式（damage-associated molecular patterns，DAMPs），來(lái)激發(fā)宿主的防御機(jī)制，模式識(shí)別受體是識(shí)別信號(hào)的關(guān)鍵，最先接觸病原體。經(jīng)典的細(xì)胞焦亡途徑與炎癥小體密切相關(guān)，是依賴caspase-1 的細(xì)胞焦亡途徑[3]。受體PRRs 通過(guò)識(shí)別PAMPs 和DAMPs，來(lái)激活炎癥小體。以無(wú)活性形式存在的pro caspase-1 被CARD 結(jié)構(gòu)域（caspase recruitment domain，CARD）和熱蛋白結(jié)構(gòu)域（pyrin domain，PYD）募集水解成為具有活性的caspase-1。而成熟的caspase-1 是切割白介素1β（interleukin-1β，IL-1β）的關(guān)鍵，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)源危險(xiǎn)信號(hào)或病原體被細(xì)胞質(zhì)中的受體所識(shí)別，引發(fā)受體的活化與寡聚[4，5]。具有活性的caspase-1 將IL-1β 前體和IL-18（interleukin-18，IL-18）前體變?yōu)橛谢钚缘腎L-1β 和IL-18，并切割gasdermin-D（gasdermin-D，GSDMD），其N(xiāo) 端在細(xì)胞膜上成孔，導(dǎo)致細(xì)胞腫脹破裂，炎癥因子大量釋放到胞外，從而引發(fā)細(xì)胞的焦亡[6，7]。非經(jīng)典的細(xì)胞焦亡途徑則是依賴caspase-4、caspase-5、caspase-11 介導(dǎo)的（其中人類(lèi)為caspase-4、caspase-5，鼠類(lèi)為caspase-11）[8]，這些蛋白能夠直接識(shí)別革蘭陰性菌的內(nèi)毒素壁脂多糖（lipopolysaccharides，LPS），焦亡是它們激活后的主要反應(yīng)。與Caspase-1 激活發(fā)生在巨噬細(xì)胞或樹(shù)突狀細(xì)胞中，不同的是，caspase-4、caspase-5、caspase-11 發(fā)生在巨噬細(xì)胞和非巨噬細(xì)胞[9]，在TLR3/TLR4-TRIF（Toll-like receptor 3，TLR3；Toll-like receptor 4，TLR4；TIRdomain-containing adaptor-inducing interferon-β，TRIF）的作用下，可直接誘導(dǎo)IL-1β 和IL-18 成熟與釋放，從而使細(xì)胞焦亡現(xiàn)象發(fā)生。當(dāng)caspase-11 的CARD 結(jié)構(gòu)域與LPS 結(jié)合時(shí)，加速了自身寡聚與活化，從而產(chǎn)生蛋白酶活性，切割GSDMD 使其N(xiāo) 端在細(xì)胞膜上快速形成直徑為10～15 nm 的膜孔，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡的發(fā)生[10]。簡(jiǎn)而言之，細(xì)胞焦亡能夠產(chǎn)生IL-1β 與IL-18，是人體產(chǎn)生急性和慢性炎癥的主要原因，其屬于內(nèi)源性致熱源，也是發(fā)熱的主要因素[11，12]。

2 細(xì)胞焦亡在肝臟疾病中的作用

肝臟疾病發(fā)病率的增高，已是我國(guó)長(zhǎng)期以來(lái)嚴(yán)重威脅健康的重要問(wèn)題，部分因各種原因?qū)е赂尾〉幕颊咧饾u發(fā)展為肝硬化以及肝癌[13]。近期研究報(bào)告表明，細(xì)胞焦亡可能在肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展中起到關(guān)鍵作用。肝臟炎癥、感染性肝纖維化，以及肝細(xì)胞癌已被證實(shí)與肝硬化進(jìn)展過(guò)程中的細(xì)胞焦亡有關(guān)[14]。

2.1 細(xì)胞焦亡與病毒性肝炎

肝炎作為常見(jiàn)消化系統(tǒng)疾病，包括病毒性肝炎和自身免疫性肝炎。病毒性肝炎是指肝細(xì)胞受病毒感染而引起的肝臟炎癥，具有較高死亡率。以乙型病毒性肝炎（hepatitis B virus，HBV）和丙型病毒性肝炎（hepatitis C virus，HCV）為主，可發(fā)展為肝纖維化，甚者導(dǎo)致肝硬化、肝癌。細(xì)菌內(nèi)毒素可以高度誘導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞焦亡，這也可能觸發(fā)細(xì)胞焦亡而影響肝病的進(jìn)展[15]。已有文獻(xiàn)證明，在病毒性肝炎中，乙型、丙型肝炎的發(fā)生、發(fā)展與細(xì)胞焦亡相關(guān)[16]。病毒DNA/RNA 和模式PRRs 的識(shí)別誘導(dǎo)炎性小體激活并導(dǎo)致細(xì)胞焦亡。轉(zhuǎn)移受體的TM 結(jié)構(gòu)域可能通過(guò)阻斷多種病毒感染過(guò)程中依賴AIM2 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路、而降低包括裂解的caspase-1 和IL-1β 在內(nèi)的細(xì)胞焦亡標(biāo)志物的表達(dá)。乙型肝炎病毒通過(guò)抑制NF-κB（nuclear transcriptional factor Kappa B，NFκB）分子信號(hào)通路和活性氧(reactive oxygen species，ROS)的合成，從而抑制脂多糖誘導(dǎo)的NLRP3（Nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）和IL-1β 的表達(dá)。研究表明，乙型肝炎核心抗原（hepatitis b core antigen，HBcAg）能誘導(dǎo)包括IL-18 在內(nèi)的另一種嗜熱性細(xì)胞焦亡指標(biāo)的分泌，這意味著HBcAg 的侵襲是HBV 介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡的主要誘發(fā)因素之一[17，18]。在過(guò)氧化氫刺激條件下，NLRP3 炎癥體被高水平的mitoROS 激活，并介導(dǎo)乙型肝炎病毒x 蛋白（hepatitis b virus x protein，HBx）誘導(dǎo)的肝臟炎癥和肝細(xì)胞焦亡[19]。丙型肝炎病毒可通過(guò)caspase-1 和caspase-3 信號(hào)介導(dǎo)誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡。而在在肝臟細(xì)胞中，脂質(zhì)滴的形成與NLRP3 密切相關(guān)，導(dǎo)致HCV 的形態(tài)變化與復(fù)制，在肝病的發(fā)展中起到促進(jìn)作用[20]。根據(jù)相關(guān)研究，在慢性HCV 中，Kupffer 細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1β 與炎癥反應(yīng)相關(guān)，已被證實(shí)為IL-1β 的主要來(lái)源[21]。因此，為明確病毒性肝炎的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制應(yīng)深入研究細(xì)胞焦亡與乙型、丙型病毒性肝炎的關(guān)系，從而為疾病的治療提供方向。

2.2 細(xì)胞焦亡與酒精性肝病

酒精性肝?。╝lcoholic liver disease，ALD）是由過(guò)量飲酒引起的肝臟損傷和炎癥，是死亡率較高的疾病，也是導(dǎo)致肝纖維化和肝硬化的重要因素，其特征是肝細(xì)胞脂質(zhì)沉積異常和氧化應(yīng)激過(guò)度。雖然多項(xiàng)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了幾種典型的酒精誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷途徑，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、氧化應(yīng)激、細(xì)胞焦亡、凋亡和自噬；但這些機(jī)制如何導(dǎo)致病情惡化仍有待驗(yàn)證。研究指出，RNA 測(cè)序分析顯示，實(shí)驗(yàn)中ALD 患者和小鼠肝臟組織中caspase-4 和caspase-11 基因的表達(dá)水平升高[22]。NLRP3 寡聚抑制劑MCC950 能顯著提高細(xì)胞活力，保護(hù)肝細(xì)胞免受乙醇誘導(dǎo)的細(xì)胞焦亡，這充分表明，NLRP3 炎性小體的激活在ALD 的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。據(jù)報(bào)道，NLRP3可以募集凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白（apoptosis-associated specklike protein containing a caspase recruitment domain，ASC）和Pro caspase-1，使之成為成熟的caspase-1，從而引發(fā)肝損傷。NLRP3 的炎性小體激活與ROS 密切相關(guān)，而主要來(lái)源是線粒體。許多研究證實(shí)，線粒體相關(guān)的能量代謝、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和ROS 的產(chǎn)生，是細(xì)胞程序性死亡的關(guān)鍵[23]。在酒精作用下，肝細(xì)胞中的miRNA-148a 的表達(dá)降低，還可使硫氧蛋白相互作用蛋白（thioredoxin-interacting protein，TXNIP）過(guò)度表達(dá)，而TXNIP 的過(guò)度表達(dá)可活化NLRP3 炎癥小體，從而發(fā)生以caspase-1 介導(dǎo)的細(xì)胞焦亡。上述表明，NLRP3 炎癥小體在酒精性肝病的發(fā)生、發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，而NLRP3 的激活機(jī)制尚不完全明確，后續(xù)可以此為切入點(diǎn)深入研究。

2.3 細(xì)胞焦亡與非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪性肝?。╪on-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是在沒(méi)有大量酒精攝入的情況下發(fā)生彌漫性的肝細(xì)胞脂肪變性，通常與肥胖、糖尿病和代謝綜合征有關(guān)。疾病范圍從伴有或不伴有炎癥的輕度脂肪變性、到脂肪變性引起炎癥和肝細(xì)胞損傷，甚至發(fā)生纖維化和肝硬化。非酒精性脂肪性炎癥（non-alcoholic steatohepatitis，NASH）不僅是NAFLD 的重要病理階段，也是NAFLD 治療的關(guān)鍵時(shí)期。有實(shí)驗(yàn)用HepG2 細(xì)胞（oleic acid（OA）-treated human hepatoma cells，HepG2）制備N(xiāo)ASH 模型，在模型組中，NLRP3、GSDMD 和IL-1β 的表達(dá)明顯增加，說(shuō)明NLRP3 炎癥小體是NASH 形成的因素。NAFLD 發(fā)生的刺激因素還與胰島素抵抗有關(guān)，NLRP3 可激活炎癥因子IL-1β、IL-18 以及NF-κB，而這些炎癥因子和相關(guān)蛋白與胰島素抵抗密切相關(guān)，促進(jìn)了NAFLD 的發(fā)生、發(fā)展[24]，引起肝細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)，ROS可以觸發(fā)TXNIP 從TRX 解離并與NLRP3 結(jié)合，導(dǎo)致NLRP3 激活，且TXNIP 表達(dá)的上調(diào)使IL-1β、IL-18 過(guò)度表達(dá)，加重炎癥程度[25]。故NLRP3 小體的活化是細(xì)胞焦亡的關(guān)鍵所在，而細(xì)胞焦亡導(dǎo)致NAFLD 與NASH 的發(fā)生。

2.4 細(xì)胞焦亡與肝纖維化

肝纖維化是肝組織中細(xì)胞外基質(zhì)的過(guò)多沉積，導(dǎo)致肝臟結(jié)構(gòu)和功能的改變。這些變化的基礎(chǔ)是由慢性肝損傷引起的纖維生成和纖維溶解之間的不平衡。小鼠和人的肝細(xì)胞可以在NLRP3 炎性小體激活后發(fā)生焦亡，隨后釋放NLRP3 炎癥小體，從而促進(jìn)和維持炎癥小體驅(qū)動(dòng)的纖維化形成。抑制caspase-1 和GSDMD 的激活可抑制細(xì)胞焦亡的發(fā)生。研究表明，敲除GSDMD 的人肝細(xì)胞癌HepG2 細(xì)胞或GSDMD 敲除小鼠原代肝細(xì)胞，兩者對(duì)炎性小體誘導(dǎo)的細(xì)胞焦亡具有抵抗力，表明肝細(xì)胞的死亡依賴于GSDMD 的激活。研究還指出，肝細(xì)胞NLRP3 過(guò)度激活導(dǎo)致肝細(xì)胞焦亡和炎癥小體分泌到胞外間隙。在NASH 患者肝組織中，存在Caspase-1 活性，其血清中caspase-1 活性與肝損傷程度、尤其是與肝纖維化程度有關(guān)。活化的Caspase-1、IL-1β 和IL-18 能夠活化NLRP3，而IL-1β 和IL-18 誘導(dǎo)膠原蛋白沉積，對(duì)于形成肝纖維化十分重要[26]。細(xì)胞焦亡與肝纖維化密切相關(guān)，應(yīng)繼續(xù)根據(jù)NLRP3 炎癥小體引起肝纖維化的機(jī)制作深入研究，以便于更好地控制該病的發(fā)生與發(fā)展。

2.5 細(xì)胞焦亡與肝細(xì)胞癌

原發(fā)性肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）在肝病中較為常見(jiàn)，在消化道惡性腫瘤中屬于極具侵略性的原發(fā)腫瘤，尋找新的治療靶點(diǎn)成為HCC 治療的迫切需求。炎性小體作為細(xì)胞內(nèi)多蛋白復(fù)合體，能夠介導(dǎo)宿主對(duì)病原體感染和細(xì)胞損傷的免疫反應(yīng)。在腫瘤微環(huán)境中，慢性炎癥，在腫瘤發(fā)展過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。炎癥小體在不同類(lèi)型的癌癥中具有“雙刃劍”作用，既是腫瘤的促進(jìn)者，也是腫瘤的抑制者。NLRP3 炎癥小體的成分在肝癌細(xì)胞中顯著下調(diào)，肝癌組織和細(xì)胞中的細(xì)胞焦亡受到抑制，這表明依賴NLRP3 的細(xì)胞焦亡可能在肝癌中起關(guān)鍵作用[27]。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNAs）作為新型調(diào)節(jié)因子，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的關(guān)鍵，包括細(xì)胞焦亡、增殖、凋亡和細(xì)胞周期進(jìn)展。相關(guān)研究表明，肝癌組織和細(xì)胞系中SNHG7 和SIRT1（small nucleolar RNA hostgene 7，SNHG7；sirtuin1，SIRT1）基因表達(dá)上調(diào)，miR-34a 基因表達(dá)下調(diào)。SNHG7 能夠抑制miR-34a，同時(shí)上調(diào)SIRT1 的表達(dá)，從而抑制NLRP3 誘導(dǎo)的細(xì)胞焦亡。這些研究結(jié)果表明，SNHG7/miR-34a/SIRT1 軸可能是治療肝癌的潛在靶點(diǎn)[28]。另外，IRAK1（interleukin-1 receptor-associated kinases 1，IRAK1）是TLR 介導(dǎo)的信號(hào)通路中的關(guān)鍵分子。TLR 分子的激活可以誘導(dǎo)MyD88（myeloid differentiation primary response protein 88，MyD88）的合成，從而導(dǎo)致IRAK1 及其下游信號(hào)通路的激活而誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡。IL-1 受體相關(guān)激酶包括一類(lèi)絲氨酸蘇氨酸激酶（如IRAK1、IRAK2、IRAK3 和IRAK4）。研究證實(shí)，IRAKs 與代謝、炎癥和惡性疾病的病理生理過(guò)程有關(guān)。IRAK1 在肝癌進(jìn)展中的生物學(xué)功能及其調(diào)控機(jī)制，其下調(diào)可以抑制NLRP3 炎性小體的激活，阻止肝癌細(xì)胞的侵襲、增殖及遷移，促進(jìn)肝癌細(xì)胞的凋亡。實(shí)驗(yàn)顯示，IRAK1 基因的敲除可以抑制ERK/JNK-NLRP3（extracellular signal regulated kinase，ERK；c -Jun N -terminal kinases，JNK）炎性小體的激活，從而阻止肝癌的惡性進(jìn)展。IRAK1 在肝癌中的分子機(jī)制與NLRP3 信號(hào)的介導(dǎo)有關(guān)，提示IRAK1是治療肝癌的潛在靶點(diǎn)。研究者發(fā)現(xiàn)，IRAK1 的敲除可以顯著下調(diào)IL-1β、NLRP3、p-ERK1/2、p-JNK1/2 的表達(dá)，并推測(cè)IRAK1 對(duì)肝癌的促進(jìn)作用可能與MAPKs/NLRP3/IL-1β（mitogen-activated protein kinases，MAPKs）通路有關(guān)[29]。靶向調(diào)控NLRP3 炎癥小體，可能達(dá)到控制阻止肝癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲，這可能為治療該病提供新的方向。

3 中醫(yī)藥調(diào)控細(xì)胞焦亡

中醫(yī)《素問(wèn)·靈蘭秘典論》記載：“肝者，將軍之官，謀慮出焉”，將肝的功能比作將軍，論述其統(tǒng)帥臟腑氣機(jī)運(yùn)行，貯藏血液助君臟行血，為“將軍之官”的核心體現(xiàn)。肝易受到情志及外感、內(nèi)傷等因素的影響，從而形成多種疾病，如中醫(yī)古籍中提到的“脅痛”“黃疸”“鼓脹”等，中醫(yī)常以疏肝、健脾、解毒、化瘀、利膽、退黃等方法辯證施治。隨著中醫(yī)藥的現(xiàn)代化進(jìn)展，許多中藥復(fù)方、中醫(yī)經(jīng)典方劑以及中藥單體可以通過(guò)調(diào)控細(xì)胞焦亡發(fā)揮治療肝臟疾病的作用。

3.1 中藥復(fù)方

吳佳蔓等[30]認(rèn)為，痰、瘀、毒互結(jié)是高脂血癥肝臟脂代謝紊亂的重要因素，既是主要病機(jī)也是病理產(chǎn)物。運(yùn)用清熱解毒法可顯著降低實(shí)驗(yàn)組SD 大鼠的血脂水平，對(duì)細(xì)胞焦亡炎癥小體NLRP3、Caspase-1、IL-1、IL-1β 的蛋白水平和mRNA水平有顯著下調(diào)作用，能夠下調(diào)炎癥因子水平，改善肝組織細(xì)胞。唐標(biāo)、尹抗抗等[31，32]對(duì)降脂理肝湯（澤瀉10 g，決明子30 g，郁金10 g，丹參10 g，荷葉10 g，海藻30 g）干預(yù)高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD 作用機(jī)制進(jìn)行研究，模型組大鼠肝組織GSDMD、GSDMD-N、Caspase-11 的蛋白表達(dá)水平升高，血清TNF-α、IL-18、IL-1β、IL-6 的表達(dá)水平升高。經(jīng)降脂理肝湯干預(yù)后，各項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)水平均顯著降低，表明降脂理肝湯可抑制非經(jīng)典細(xì)胞焦亡，對(duì)在高脂飲食誘導(dǎo)下的NAFLD 有干預(yù)作用。岳紫晨等[33]通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，健脾理氣方（黃芪30 g、白術(shù)10 g、白芍15 g、薏苡仁15 g、神曲10 g、云苓15 g、郁金10 g、法半夏10 g、柴胡6 g）通過(guò)下調(diào)NLRP3 炎癥小體、防治D-GalN（D-galactosamine，D-GalN）誘導(dǎo)的大鼠內(nèi)毒素性急性肝損傷。周青麗等[34]經(jīng)實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，在NAFL 進(jìn)展為NASH 的過(guò)程中，NLRP3 炎癥小體表達(dá)升高。在NASH 模型大鼠中，去脂軟肝方（三七、白芍、莪術(shù)、山楂等7 味中藥）可降低NLRP3 炎癥小體的表達(dá)，減輕脂肪變性及炎癥病變。

3.2 中藥經(jīng)方

穆杰等[35]結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究四逆散調(diào)控炎癥小體對(duì)NAFLD 的治療作用，提示四逆散能夠作用于NLRP3 炎癥小體及其相關(guān)炎癥因子，模型組肝組織中NF-κB、ASC、NLRP3、Caspase-1 的蛋白含量及mRNA 水平升高，肝組織與血清中TNF-α、IL-1、IL-1β 含量升高?；颊呓?jīng)四逆散治療后，NF-κB、ASC、NLRP3、Caspase-1 的蛋白含量及mRNA 水平明顯下降，血清中TNF-α、IL-1、IL-1β 含量降低。上述結(jié)果表明，在慢性心理應(yīng)激相關(guān)的NAFLD 中，應(yīng)用四逆散對(duì)其細(xì)胞焦亡引起的炎癥反應(yīng)有顯著改善。鄧楠等[36]實(shí)驗(yàn)也證實(shí)，四逆散調(diào)控細(xì)胞焦亡相關(guān)通路NLRP3/IL-1β 治療NAFLD。楊瑩等[37]為驗(yàn)證五苓散在代謝綜合征小鼠肝腎炎癥中的保護(hù)作用，進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)并得出結(jié)論，五苓散可以下調(diào)動(dòng)物模型肝臟SREBP-1c（sterol regulatory element-binding protein-1c，SREBP-1c）、FAS（fatty acid synthase，F(xiàn)AS）、SCD1（stearoyl-CoA desaturase-1，SCD1）蛋白表達(dá)，抑制NLRP3 炎癥小體與NF-κB 通路的激活，從而改善模型組小鼠肝臟中的炎癥狀況，減輕了甘油三酯的堆積與炎癥，證明五苓散對(duì)果糖誘導(dǎo)的肝臟炎癥損傷可能發(fā)揮著預(yù)防與治療作用。

3.3 中成藥

郝媛媛等[38]研究表明，中藥津力達(dá)降低甘油三酯與谷草轉(zhuǎn)氨酶的含量，下調(diào)NLRP3、Caspase-1 的蛋白表達(dá)水平，抑制P20、IL-1β 基因表達(dá)，通過(guò)抑制焦亡通路蛋白治療NAFLD。汪溪等[39]在痤瘡丙酸桿菌和脂多糖誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型中，驗(yàn)證了扶正養(yǎng)肝合劑對(duì)急性肝損傷的緩解作用，抑制小鼠AST、ALT（aspartate aminotransferase，AST；alanine aminotransferase，ALT）水平，降低脂質(zhì)過(guò)氧化指標(biāo)MDA（malondialdehyde，MDA）含量，增加肝臟的抗氧化能力，從而對(duì)肝臟起到保護(hù)作用，其作用機(jī)制與扶正養(yǎng)肝合劑抑制急性肝損傷小鼠組織中的NLRP3 炎癥小體激活有關(guān)。徐嬌雅等[40]研究發(fā)現(xiàn)，降脂顆?？梢愿纳芅ASH 小鼠脂毒性肝損傷，其作用機(jī)制可能與降低UCP2（uncoupling protein 2，UCP2）表達(dá)與抑制JNK/c-Jun 信號(hào)通路的激活有關(guān)，從而使NLRP3 炎癥小體的活化受到抑制。周桃梅等[41]通過(guò)臨床觀察對(duì)外周血進(jìn)行檢測(cè)，觀察組患者NLRP3、IL-1β、IL-18 與對(duì)照組相比明顯降低，提示強(qiáng)肝膠囊聯(lián)合二甲雙胍對(duì)NAFLD 患者的胰島素抵抗、糖脂代謝紊亂以及肝損害有改善作用，可能與抑制NLRP3 和下游炎癥因子相關(guān)。段桂嬌等[42]通過(guò)隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)得出結(jié)論，柔肝化纖顆粒聯(lián)合恩替卡韋治療肝腎陰虛型的代償期乙肝肝硬化收效顯著，可下調(diào)Caspase-1、IL-1β、IL-18及TNFα（tumor necrosis factor-alpha，TNFα）的表達(dá)水平。

3.4 中藥單體

黃芩苷（baicalin，BA）可降低NLRP3 和GSDMD 表達(dá)水平，減少I(mǎi)L-1β 和IL-18 的釋放，從而減輕細(xì)胞焦亡。此外，GSDMD 基因敲除還可減弱BA 的改善作用。在體外BA 可通過(guò)阻斷NLRP3/GSDMD 信號(hào)通路減輕肝細(xì)胞焦亡，從而減輕非酒精性脂肪性肝炎細(xì)胞模型的損傷程度[43]。環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide，CP）是治療癌癥常用藥，其應(yīng)用較為廣泛，弊端是引起急性肝毒性。川芎嗪對(duì)CP 及其活性代謝物4-羥基環(huán)磷酰胺所致的肝損傷具有保護(hù)作用，通過(guò)對(duì)TXNIP/Trx/NF-κB 通路的抑制作用，從而顯著減輕肝損傷，抑制炎癥反應(yīng)與氧化應(yīng)激，改善肝臟結(jié)構(gòu)與功能[44]。柴胡皂苷d 對(duì)人肝細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用，能夠抗肝纖維化，抑制肝L02 細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷、提高細(xì)胞活力，抑制肝L02 細(xì)胞焦亡，控制上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程，從而達(dá)到抗肝纖維化的作用[45]。莪術(shù)醇可以抑制NLRP3 炎癥小體，降低Caspase-1 與IL-1β 表達(dá)，從而降低肝臟炎癥反應(yīng)，這可能與其抗肝纖維化機(jī)制有關(guān)[46]。槲皮黃酮可以抑制LPS 誘導(dǎo)的肝L02 細(xì)胞炎癥反應(yīng)，下調(diào)炎癥小體NLRP3、IL-1β、Caspase-1 與TNF-α 的表達(dá)，能夠促進(jìn)肝細(xì)胞增殖，改善肝細(xì)胞損傷[47]。人參皂苷能改善高脂飲食模型小鼠的NAFLD，可抑制NLRP3、IL-1β 來(lái)減輕肝臟炎癥，提高氧化酶活性，改善脂質(zhì)過(guò)氧化，減輕肝臟損傷[48]。

在現(xiàn)有研究中，已證實(shí)細(xì)胞焦亡與肝臟疾病存在相關(guān)性，細(xì)胞焦亡在肝病領(lǐng)域的研究尚處于基礎(chǔ)階段。中藥復(fù)方、中醫(yī)經(jīng)典方劑以及中藥單體對(duì)于治療肝臟疾病療效顯著，通過(guò)干預(yù)細(xì)胞焦亡來(lái)治療肝臟疾病的研究逐步深入，其仍具有較大發(fā)展空間。

4 總結(jié)

作為細(xì)胞死亡的一種新形式，細(xì)胞焦亡在維持新陳代謝和免疫平衡方面起著重要作用。細(xì)胞焦亡作為近年來(lái)的研究的熱點(diǎn)，為肝病的治療提供新方案，受到國(guó)內(nèi)外研究人員和臨床醫(yī)生的關(guān)注。NLRP3 炎性小體的激活是細(xì)胞焦亡過(guò)程的重要調(diào)節(jié)因子，在包括HBV、HCV、NAFLD、HCC 和纖維化等肝病的發(fā)生發(fā)展中起著不同的作用?；诩?xì)胞焦亡的中醫(yī)治療肝臟疾病的研究處于基礎(chǔ)階段，仍需深入研究，目前較多的是探討細(xì)胞焦亡對(duì)非酒精性脂肪性肝病的影響，而其他類(lèi)型肝臟疾病涉及較少。在以往的研究中，GSDMD 在肝細(xì)胞中的表達(dá)水平較低，但在胃腸道疾病研究中顯示有較高的表達(dá)水平，提示在將來(lái)的科研工作中應(yīng)著重采用回復(fù)實(shí)驗(yàn)、正向驗(yàn)證與反向驗(yàn)證相結(jié)合等方法，明確其在肝病發(fā)病機(jī)制中的作用。近年來(lái)，中醫(yī)藥治療肝臟疾病療效得到認(rèn)可，應(yīng)積極開(kāi)展對(duì)于細(xì)胞焦亡在中醫(yī)藥治療肝臟疾病中的作用機(jī)制研究。對(duì)于細(xì)胞焦亡與肝病發(fā)病機(jī)制的探討已為預(yù)防和治療肝臟疾病提供了有意義的策略，而細(xì)胞焦亡的相關(guān)研究仍需努力拓展，進(jìn)一步明確肝臟疾病的發(fā)生機(jī)制，為中西醫(yī)治療肝病提供新思路。