• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    粗壯潤(rùn)楠化學(xué)成分及其活性研究

    2022-11-16 08:49:24里艷茹黃勝男尋園程林友謝百波中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所天然活性物質(zhì)與功能國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)北京100050北京慧寶源生物技術(shù)股份有限公司北京1006中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門(mén)醫(yī)院南區(qū)北京10618廣西慧寶源醫(yī)藥科技有限公司廣西欽州55008
    中南藥學(xué) 2022年10期
    關(guān)鍵詞:苯甲酸甲氧基石油醚

    里艷茹,黃勝男,尋園,程林友,謝百波,*(1.中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所,天然活性物質(zhì)與功能國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn),北京 100050;.北京慧寶源生物技術(shù)股份有限公司,北京 1006;.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門(mén)醫(yī)院南區(qū),北京 10618;.廣西慧寶源醫(yī)藥科技有限公司,廣西 欽州 55008)

    潤(rùn)楠屬(Machilus)植物為常綠喬木或灌木,在全世界約有100 余種,分布于亞洲東南部和東部的熱帶、亞熱帶,中國(guó)西南部及印度為其主要產(chǎn)地。我國(guó)約有68 種3 變種,產(chǎn)于長(zhǎng)江流域及以南各省區(qū)和山東東部,以云南和華南為主要產(chǎn)地,是當(dāng)?shù)刂饕慕?jīng)濟(jì)林木[1]。粗壯潤(rùn)楠為高大喬木,樹(shù)皮粗糙,灰黑色。我國(guó)主要分布于云南南部、貴州南部、廣西、廣東[2]。潤(rùn)楠屬植物資源豐富,在我國(guó)民間作為草藥廣泛使用,具有溫中順氣、舒筋活血、消腫止痛等較強(qiáng)的生物活性,治療各種皮膚病和風(fēng)濕性疾病,臨床上用于治療胃呆食少、腹脹、腹瀉、扭挫傷等[3]。前文主要報(bào)道了粗壯潤(rùn)楠中的木脂素和苷類化合物的分離和結(jié)構(gòu)鑒定及其神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)和保肝活性[4-6]。本文繼續(xù)報(bào)道該植物化學(xué)成分的分離和結(jié)構(gòu)鑒定及其活性篩選結(jié)果。

    1 材料

    Perkin-Elmer 343 型旋光測(cè)定儀;美國(guó)Varian 公司Mercury-300、Mercury-400、Inova-500 或SYS-600 核磁共振儀(測(cè)定溫度297 K,以溶劑峰信號(hào)作為參照);Micromass Autospec-Ultima ETOF 型質(zhì)譜儀和 Q-Trap LC/MS/MS(Turbo Ionspray source)型質(zhì)譜儀(Waters 公司);R-205 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Buchi公司);閃式快速分離系統(tǒng)(AB SCIEX 公司);Waters 600 高效液相色譜儀和Agilent HP 1100、1200型高效液相色譜儀;柱色譜硅膠(200~300目)(青島海洋化工廠);高效制備薄層硅膠板(HSGF)(煙臺(tái)江友硅膠發(fā)展有限公司);Sephadex LH-20(瑞典Amersham Pharmacia 公司);MCI Gel CHP-20 樹(shù)脂(70~150 μm)(日本三菱公司);Thermo SKANIT SOFTWARE 3.2(Thermo 公司);DMEM及馬血清(Gibco 公司);胎牛血清(Hyclone 公司);細(xì)胞株P(guān)C12 細(xì)胞購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞中心。

    植物樣品采自廣西壯族自治區(qū)大瑤山,經(jīng)廣西林業(yè)局龍光日工程師鑒定為粗壯潤(rùn)楠Machilus robusta,標(biāo)本現(xiàn)存于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所標(biāo)本室,標(biāo)本號(hào)為(No.041)。

    2 提取與分離

    稱取粉碎干燥的粗壯潤(rùn)楠莖皮5.3 kg,用95%乙醇45 L 于室溫浸漬提取3 次,每次48 h。提取液減壓濃縮,得干浸膏535.0 g,混懸于2000 mL 水中,用乙酸乙酯萃?。?×2000 mL),乙酸乙酯萃取部分(261.0 g)進(jìn)行硅膠柱(100~200目,1000 g,8 cm×100 cm)色譜分離,用石油醚-丙酮(100∶0~0∶100)梯度洗脫,最后用甲醇洗脫;洗脫液經(jīng)薄層色譜檢測(cè),TLC 暗斑在紫外燈254 nm 或365 nm 下觀察,通過(guò)碘熏或噴5%硫酸乙醇溶液后加熱顯色檢測(cè)。合并組成相似的流分,回收溶劑得到9 個(gè)部分(Fr.A~Fr.I)。

    Fr.B(石油醚-丙酮=20∶1 洗脫)部分析出紅色針晶,經(jīng)過(guò)濾,用石油醚反復(fù)洗滌得到化合物6(2 mg)。剩余Fr.B 母液減壓蒸干(17.5 g),經(jīng)硅膠柱(200~300 目,150 g)色譜分離,石油醚-乙酸乙酯(100∶5~100∶20)梯度洗脫得到5 個(gè)洗脫部分(B1~B5),B1經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜(石油醚-氯仿-甲醇=5∶5∶1 洗脫)分離純化析出白色結(jié)晶,經(jīng)石油醚-丙酮重結(jié)晶純化得化合物14(5053 mg),B2硅膠柱色譜分離(石油醚-乙酸乙酯=50∶1 洗脫),經(jīng)反相HPLC 半制備色譜(MeOH-H2O=91∶9)洗脫,分離純化得化合物10(2.5 mg)和11(1.6 mg)。B3部分經(jīng)反相Flash 柱色譜分離,50%~100%甲醇水溶液洗脫得到6 個(gè)亞組分(B3-1~B3-6)。B3-2部分析出白色結(jié)晶,經(jīng)石油醚-丙酮重結(jié)晶純化得化合物15(25 mg)和16(20 mg)。B4經(jīng)Sephadex LH-20柱色譜(石油醚-氯仿-甲醇=5∶5∶1 洗脫)分離純化,再經(jīng)反相HPLC 半制備(C18,5 μm,10 mm×250 mm)色譜,以MeOH-H2O(89∶11)為流動(dòng)相,制備純化得到化合物8(2 mg)。B5經(jīng)硅膠柱色譜 [氯仿-丙酮(0%~100%)]洗脫,得到B5-1~B5-4。B5-2經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜(石油醚-氯仿-甲醇=5∶5∶1 洗脫)分離純化,得到B5-2-1~B5-2-11,B5-2-3再經(jīng)反相HPLC 半制備(C18,5 μm,10 mm×250 mm) 色譜,以MeOH-H2O(93∶7)為流動(dòng)相,制備純化得到化合物3(1.5 mg)和4(2 mg)。Fr.C(70 g)經(jīng)MCI 凝膠柱色譜(以30%~100%甲醇梯度洗脫),除去色素,分成兩部分C1和C2,C2部分經(jīng)硅膠柱色譜分離(石油醚-乙酸乙酯=50∶1 洗脫),經(jīng)反相HPLC 半制備色譜(MeOH-H2O=95∶5 洗脫)分離純化得化合物1(1.0 mg)和2(3.0 mg)。

    Fr.D(2.0 g)經(jīng)MCI 凝膠柱色譜(30%~100%甲醇梯度洗脫),分成6 個(gè)部分(D1~D6)。D5部分經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜(石油醚-乙酸乙酯體系洗脫)和反相HPLC 半制備色譜(MeOH-H2O系統(tǒng)洗脫)分離純化得到化合物5(2.0 mg)。

    Fr.E(15.0 g)經(jīng)MCI 凝膠柱色譜(10%~100%甲醇梯度洗脫)得到5 個(gè)部分(E1~E5)。E1部分經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜(石油醚-氯仿-甲醇=2∶2∶1)洗脫,分離純化得到化合物19(4.1 mg)。E2部分再經(jīng)反相Flash 柱色譜分離,30%~70%甲醇水溶液洗脫得到3 個(gè)洗脫部分(E2-1~E2-3),E2-1經(jīng)反相HPLC 半制備(C18,5 μm,10 mm×250×250 mm)色譜,以MeOHH2O=8∶2 為流動(dòng)相,制備純化得到化合物12(1.0 mg)和13(1.1 mg)。E4反復(fù)經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜(石油醚-氯仿-甲醇=2∶2∶1)洗脫,得到化合物17(4.5 mg)和18(3.0 mg)。E5經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜(石油醚-氯仿-甲醇=2∶2∶1)洗脫,再經(jīng)反相HPLC 半制備色譜(MeOH-H2O=58∶42 洗脫)分離純化得到化合物9(1.1 mg)。

    Fr.F(25.0 g)經(jīng)MCI 凝膠柱色譜(10%~100%甲醇梯度洗脫),分成5 個(gè)部分(F1~F5)。F3部分經(jīng)Sephadex LH-20 柱色譜(氯仿-甲醇=5∶1)洗脫,分離純化得到化合物7(5.0 mg)。

    3 結(jié)構(gòu)鑒定

    化合物1:白色結(jié)晶(氯仿);ESI-MSm/z465 [M+Na]+;1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ4.84(2H,s,H-26a,H-27a),4.56(2H,s,H-26b,H-27b),3.25(2H,dd,J=11.5,4.0 Hz,H-3 和H-21),2.41(2H,d,J=13.0 Hz,H-5 和H-15),1.97(2H,dt,J=13.0,5.0 Hz,H-7 和H-15),1.75(2H,m,H-6 和H-16),1.72(2H,m,H-1 和H-19),1.67(2H,m,H-2 和H-20),1.57(2H,m,H-10 和H-18),1.55(2H,m,H-6 和H-16),1.53(2H,m,H-11 和H-12),1.38(2H,m,H-1 和H-19),1.11(2H,m,H-5和H-17),0.99(2H,s,H-23 和H-30),0.76(2H,s,H-24 和H-29),0.64(2H,s,H-25 和H-28);13C NMR(125 MHz,CDCl3)δ37.0(C-1和C-19),28.0(C-2 和C-20),78.9(C-3 和C-21),39.1(C-4 和C-22),54.7(C-5 和C-17),24.0(C-6 和C-16),38.3(C-7 和C-15),148.4(C-8 和C-14),57.6(C-9 和C-13),39.3(C-10和C-18),22.6(C-11 和C-12),28.3(C-23 和C-30),15.4(C-24 和C-29),14.5(C-25 和C-28),106.7(C-26 和C-27)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7-8]報(bào)道的α-芒柄花萜醇數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物1 為α-芒柄花萜醇。

    化合物2:白色無(wú)定形粉末;(-)-ESIMSm/z455 [M-H]-;1H NMR(500 MHz,pyridine-d5)δ5.49(1H,brs,H-12),3.46(1H,m,H-3),2.64(1H,m,H-18),1.24(3H,s,H-27),1.23(3H,s,H-26),1.05(3H,s,H-23),1.00(3H,d,J=6.5 Hz,H-30),1.00(3H,s,H-25),0.95(3H,d,J=6.0 Hz,H-29),0.88(3H,s,H-24);13C NMR(125 MHz,pyridine-d5)δ39.2(C-1),28.0(C-2),77.9(C-3),38.9(C-4),55.6(C-5),18.6(C-6),33.4(C-7),39.8(C-8),47.9(C-9),39.2(C-10),17.3(C-11),125.4(C-12),139.1(C-13),42.3(C-14),28.6(C-15),24.7(C-16),47.9(C-17),53.4(C-18),39.3(C-19),37.3(C-20),30.9(C-21),37.1(C-22),28.5(C-23),16.4(C-24),15.5(C-25),17.3(C-26),23.7(C-27),179.9(C-28),23.4(C-29),21.2(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9-10]報(bào)道的熊果酸的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物2 為熊果酸。

    化合物3:白色結(jié)晶(氯仿);ESI-MSm/z455 [M-H]-;1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ3.19(1H,dd,J=11.0,4.5 Hz,H-3),3.00(1H,ddd,J=10.0,10.0,6.0 Hz,H-19),0.94(3H,s,H-23),0.75(3H,s,H-24),0.82(3H,s,H-25),0.97(3H,s,H-26),0.98(3H,s,H-27),4.61,4.74(each,1H,brs,H2-29),1.67(3H,s,H-30);13C NMR(125 MHz,CDCl3)δ38.8(C-1),27.4(C-2),79.0(C-3),38.7(C-4),55.3(C-5),19.4(C-6),34.3(C-7),40.7(C-8),50.5(C-9),37.2(C-10),20.8(C-11),25.5(C-12),38.4(C-13),42.4(C-14),30.5(C-15),32.1(C-16),56.2(C-17),46.9(C-18),49.3(C-19),150.4(C-20),29.7(C-21),37.0(C-22),28.0(C-23),15.3(C-24),16.0(C-25),16.1(C-26),14.7(C-27),180.1(C-28),18.2(C-29),109.7(C-30)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道的白樺脂酸數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物3 為白樺脂酸。

    化合物4: 白色晶體(丙酮),1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ5.14(1H,t,J=3.5 Hz,H-12),3.53(1H,q,J=11.0 Hz,H-28),3.24(1H,dd,J=11.0,5.0 Hz,H-3),3.19(1H,d,J=11.0 Hz,H-28),1.10(3H,s,Me-27),1.00(3H,s,Me-26),0.98(3H,s,Me-25),0.96(3H,s,Me-23),0.94(3H,d,J=6.0 Hz,Me-29),0.81(3H,d,J=5.5 Hz,Me-30),0.79(3H,s,Me-24);13C NMR(125 MHz,CDCl3)δ38.8(C-1),27.2(C-2),79.0(C-3),38.8(C-4),55.2(C-5),18.3(C-6),32.8(C-7),40.0(C-8),47.7(C-9),36.9(C-10),23.4(C-11),125.0(C-12),138.7(C-13),42.0(C-14),26.0(C-15),23.3(C-16),38.0(C-17),54.0(C-18),39.4(C-19),39.4(C-20),30.6(C-21),35.2(C-22),28.1(C-23),15.6(C-24),15.7(C-25),17.3(C-26),23.3(C-27),69.9(C-28),21.3(C-29),16.8(C-30)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道的熊果醇數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物4 為熊果醇。

    化合物5:無(wú)色粉末,ESI-MSm/z:571 [M+H]+,593 [M+Na]+,569 [M-H]-;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ6.30(1H,d,J=1.8 Hz,H-4'),6.25(1H,d,J=1.8 Hz,H-6),6.22(2H,d,J=1.8 Hz,H-2'和H-6'),6.19(1H,d,J=1.8 Hz,H-4),5.25(1H,m,H-14'),2.88(2H,m,H-7),2.49(2H,m,H-7'),1.67~1.74(4H,m,H-8 和H-8'),1.39~1.60(26H,m,H-9~H-16 和H-9'~H-12'),1.33(2H,m,H-16'),1.31(2H,m,H-13'),0.88(2H,t,J=7.2 Hz,H-17'),0.85(2H,t,J=7.2 Hz,H-17);13C NMR(150 MHz,CDCl3)δ149.0(C-1),105.4(C-2),160.1(C-3),101.4(C-4),165.2(C-5),101.4(C-6),34.2(C-7),32.2(C-8),28.8~30.1(C-9~C-14 和C-9'~C-12'),31.9(C-15),22.7(C-16),13.9(C-17),171.7(C=O),146.0(C-1'),110.8(C-2'和C-6'),156.6(C-3'和C-5'),108.0(C-4'),36.6(C-7'),30.8(C-8'),25.3(C-13'),75.8(C-14'),37.0(C-15'),18.8(C-16'),14.1(C-17')。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13-14]報(bào)道的8-(3,5-二羥基苯基)-1-丙基辛醇2,4-二羥基-6-十一烷基苯甲酸酯的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物5 為8-(3,5-二羥基苯基)-1-丙基辛醇2,4-二羥基-6-十一烷基苯甲酸酯。

    化合物6:紅色針晶;ESI-MSm/z:283 [MH]-;1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ12.31(1H,s,OH),12.12(1H,s,OH),7.63(1H,s,4-H),7.37(1H,d,J=2.5 Hz,5-H),7.08(1H,s,2-H),6.69(1H,d,J=2.5 Hz,7-H),3.94(3H,s,OMe),2.45(3H,s,Ar-CH3)。13C NMR(125 MHz,CDCl3)δ165.2(C-1),124.5(C-2),148.4(C-3),121.3(C-4),133.2(C-4a),110.3(C-5),162.5(C-6),106.8(C-7),166.5(C-8),108.2(C-8a),190.8(C-9),113.7(C-9a),182.0(C-10),135.2(C-10a),56.1(OMe),22.2(Me)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15-16]報(bào)道的大黃素甲醚基本一致,確定化合物6 為大黃素甲醚。

    化合物7:白色針狀結(jié)晶;ESI-MSm/z433 [M+Na]+;在3 種不同展開(kāi)溶劑(氯仿-乙酸乙酯=4∶1,Rf值為0.5;正己烷-乙酸乙酯=2∶1,Rf值為0.5;氯仿-甲醇=40∶1,Rf值為0.7)系統(tǒng)中,其薄層色譜Rf值與對(duì)照品β-谷甾醇一致,確定化合物7 為β-谷甾醇。

    化合物8:無(wú)色油狀物;[R]20D+11(c 0.03,CHCl3);ESI-MSm/z261 [M+Na]+,237 [M-H]-;1H NMR(500 MHz,CDCl3):δ6.82(1H,d,J=1.5 Hz,H-2),6.89(1H,d,J=8.0 Hz,H-5),6.78(1H,dd,J=8.0,1.5 Hz,H-6),4.11(1H,d,J=10.0 Hz,H-7),2.84(1H,dq,J=7.5,10.0 Hz,H-8),2.26(3H,s,H3-9'),0.77(3H,d,J=6.5 Hz,H3-9),3.91(3H,s,OMe-3),3.10(3H,s,OMe-7);13C NMR(125 MHz,acetone-d6)δ212.1(C-8'),146.9(C-3),145.6(C-4),131.2(C-1),121.2(C-6),113.9(C-5),108.9(C-2),86.3(C-7),56.5(OMe-3),56.0(OMe),53.5(C-8),29.9(C-9'),13.7(C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[17]報(bào)道的(+)-(7S,8R)-4-羥基-3,7-二甲氧基-1',2',3',4',5',6',7'-降七碳木脂烷-8'-酮的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物8為(+)-(7S,8R)-4-羥基-3,7-二甲氧基-1',2',3',4',5',6',7'-降七碳木脂烷-8'-酮。

    化合物9:無(wú)色膠狀物;(+)-ESI-MSm/z245[M+Na]+;1H NMR(500 MHz,acetone-d6)δ7.05(1H,d,J=15.1 Hz,H-7),6.44(1H,d,J=15.1 Hz,H-8),5.89(1H,s,H-4),2.62(1H,d,J=18.5 Hz,H-2a),2.10(1H,d,J=18.5 Hz,H-2b),2.40(3H,s,H3-10),1.85(3H,s,H3-13),1.18(3H,s,H3-11),0.96(3H,s,H3-12);13C NMR(125 MHz,acetone-d6)δ42.0(C-1),50.2(C-2),196.9(C-3),127.9(C-4),167.4(C-5),79.6(C-6),136.9(C-7),131.6(C-8),201.2(C-9),24.5(C-10),23.8(C-11),23.5(C-12),19.5(C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[18]中報(bào)道的(+)-去氫催吐蘿芙木醇數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物9為(+)-去氫催吐蘿芙木醇。

    化合物10:白色粉末,ESI-MS 223 [M+H]+,245 [M+Na]+;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ1.33(t,J=7.2 Hz,3H,CH3),3.93(s,3H,ArOCH3),4.26(q,J=7.2 Hz,2H,CH2),5.83(s,1H,ArOH),6.29(d,J=16.2 Hz,1H,ArCH=CH),6.92(d,J=8.4 Hz,1H,6-ArH),7.08(dd,J=8.4,1.8 Hz,1H,5-ArH),7.03(d,J=1.8 Hz,1H,2-ArH),7.61(d,J=16.2 Hz,ArCH=CH);13C NMR(150 MHz,CDCl3)δ125.6(C-1),114.7(C-2),148.5(C-3),146.7(C-4),115.7(C-5),123.0(C-6),144.7(C-7),109.3(C-8),178.5(C-9),60.4(C-10),14.4(C-11),55.9(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19-20]報(bào)道的3-羥基-4-甲氧基苯丙烯酸乙酯的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物10 為3-羥基-4-甲氧基苯丙烯酸乙酯。

    化合物11:白色粉末;ESI-MS 223 [M+H]+,245 [M+Na]+;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ1.33(t,J=7.2 Hz,3H,CH3),3.93(s,3H,ArOCH3),4.26(q,J=7.2 Hz,2H,CH2),5.83(s,1H,ArOH),6.29(d,J=16.2 Hz,1H,ArCH=CH),6.92(d,J=8.4 Hz,1H,6-ArH),7.08(dd,J=8.4,1.8 Hz,1H,5-ArH),7.03(d,J=1.8 Hz,1H,2-ArH),7.61(d,J=16.2 Hz,ArCH=CH);13C NMR(150 MHz,CDCl3)δ127.1(C-1),115.7(C-2),147.9(C-3),146.7(C-4),114.7(C-5),123.0(C-6),144.6(C-7),109.3(C-8),168.0(C-9),60.3(C-10),55.9(-OCH3),14.4(C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20-23]報(bào)道的4-羥基-3-甲氧基苯丙烯酸乙酯ethyl ferulate 的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物11 為4-羥基-3-甲氧基苯丙烯酸乙酯。

    化合物12:白色針晶(丙酮);EIMS 176[M]+;1H NMR(300 MHz,acetone-d6)δ7.58(1H,d,J=9.0 Hz,H-4),7.26(1H,d,J=8.4 Hz,H-5),7.22(1H,d,J=8.4 Hz,H-6),6.60(1H,s,H-8),6.54(1H,d,J=9.0 Hz,H-3),3.58(3H,s,OMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24]報(bào)道的7-甲氧基香豆素的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物12 為7-甲氧基香豆素。

    化合物13:黃色無(wú)定形固體;(+)-ESI-MSm/z223 [M+H]+,245 [M+Na]+;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ7.59(1H,d,J=9.6 Hz,H-4),6.28(1H,d,J=9.6 Hz,H-3),6.65(1H,s,H-8),3.94(3H,s,OMe-5),3.88(3H,s,OMe-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[25]報(bào)道的5,7-二甲氧基-6-羥基香豆素的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物13 為5,7-二甲氧基-6-羥基香豆素。

    化合物14:白色針晶(氯仿);ESI-MSm/z197 [M-H]-;1H NMR(300 MHz,acetone-d6)δ7.37(2H,s,H-2,H-6),3.88(6H,s,OMe-2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[26]報(bào)道的4-羥基-3,5-二甲氧基苯甲酸的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物14 為4-羥基-3,5-二甲氧基苯甲酸。

    化合物15:白色針狀結(jié)晶(氯仿);(-)-ESIMSm/z121 [M-H]-;1H NMR(600 MHz,CDCl3)δ12.40(1H,brs,COOH),8.14(2H,d,J=7.5Hz,H-2,6),7.63(1H,m,H-4),7.49(2H,m,H-3,5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[27]報(bào)道的苯甲酸的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物15 為苯甲酸。

    化合物16:白色無(wú)定型粉末;ESI-MSm/z123 [M+H]+,145 [M+Na]+,121 [M-H]-;1H NMR(500 MHz,CDCl3)δ9.88(1H,s,H-7),7.81(2H,d,J=8.0 Hz,H-2,H-6),6.95(2H,d,J=8.0 Hz,H-3,H-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[28]報(bào)道的對(duì)羥基苯甲醛的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物16 為對(duì)羥基苯甲醛。

    化合物17:白色無(wú)定型粉末;ESI-MSm/z139 [M+H]+,161 [M+Na]+;1H NMR(500 MHz,acetone-d6)δ8.08(1H,s,HO-6),7.03(2H,d,J=8.0 Hz,H-2,H-6),6.73(2H,d,J=8.0 Hz,H-3,H-5),3.66(2H,m,H-8),2.69(2H,t,J=7.5 Hz,H-7),3.57(1H,m,HO-8);13C NMR(125 MHz,acetone-d6)δ131.0(C-1),130.7(C-2,C-6),115.8(C-3,C-5),156.5(C-4),39.4(C-7),64.2(C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[29]報(bào)道的對(duì)羥基苯乙醇的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物17 為對(duì)羥基苯乙醇。

    化合物18:白色針狀結(jié)晶(丙酮);ESI-MSm/z153 [M-H]-;1H NMR(300 MHz,acetone-d6)δ10.8(1H,s,COOH),9.19(2H,s,OH),7.52(1H,d,J=1.2Hz,H-2),7.48(1H,dd,J=8.1,1.2 Hz,H-6),6.89(1H,d,J=8.1 Hz,H-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[30]報(bào)道3,4-二羥基苯甲酸的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物18 為3,4-二羥基苯甲酸。

    化合物19:白色針狀結(jié)晶(氯仿);(-)-ESIMSm/z167 [M-H]-;1H NMR(300 MHz,acetone-d6)δ10.82(1H,brs,COOH),8.34(1H,brs,HO-3),7.59(1H,dd,J=8.5,1.5 Hz,H-6),7.55(1H,d,J=1.5 Hz,H-2),6.90(1H,d,J=8.4 Hz,H-5),3.90(3H,s,OCH3);13C NMR(75 MHz,acetone-d6)δ124.8(C-1),115.5(C-2),148.0(C-3),152.0(C-4),113.4(C-5),122.8(C-6),167.4(C-7),56.3(OMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[31]報(bào)道的3-羥基-4-甲氧基苯甲酸的數(shù)據(jù)基本一致,確定化合物19 為3-羥基-4-甲氧基苯甲酸。

    各化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

    圖1 各化合物的結(jié)構(gòu)Fig 1 Structure of compounds

    4 生物活性測(cè)定

    4.1 神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)活性篩選

    PC12 細(xì)胞接種至多聚賴氨酸包被的96 孔板中,密度為每孔3.0×10 個(gè)。培養(yǎng)24 h 細(xì)胞貼壁后,換液,對(duì)照組加入含5%胎牛血清、5%馬血清的高糖DMEM 培養(yǎng)基,模型組加入終濃度為150 μmol·L-1MPP+的 DMEM 完全培養(yǎng)基,各給藥組在MPP+模型基礎(chǔ)上加入終濃度為1.0×10-5mol·L-1的化合物1~19(用DMSO配制);于37 ℃、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h。每孔加入MTT(終濃度0.5 mg·mL-1)再培養(yǎng)4 h。酶標(biāo)儀于570 nm 處測(cè)定吸光度(A)。細(xì)胞活力以相對(duì)保護(hù)率評(píng)價(jià)[32]。

    相對(duì)保護(hù)率(%)=[樣品組的OD(光密度)值-模型組OD值]/[對(duì)照組的OD值-模型組的OD值]×100%

    測(cè)定化合物1~19 對(duì)MPP+誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷保護(hù)的影響,結(jié)果表明,在1.0×10-5mol·L-1下,化合物9 對(duì)MPP+誘導(dǎo)的PC12 細(xì)胞損傷顯示出一定的保護(hù)作用,其相對(duì)保護(hù)率為(76.60±10.67)%。與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    4.2 其他生物活性篩選

    與此同時(shí),對(duì)得到的單體化合物分別進(jìn)行了抗氧化[33]、人腫瘤細(xì)胞毒(HCT28、Bel-7402、BGC-823、A549 和A2780 細(xì)胞株)[34]、肝細(xì)胞保護(hù)[35]和抗人類免疫缺陷病毒(HIV)(VsVG/HIV模型)[36]等生物活性篩選。在相同濃度下,所有化合物在藥理模型篩選中均未顯示明顯活性。

    5 討論

    本研究對(duì)樟科植物粗壯潤(rùn)楠中的化學(xué)成分及其生物活性進(jìn)行探討。首次從該科中分離得到α-芒柄花萜醇和8-(3,5-二羥基苯基)-1-丙基辛醇2,4-二羥基-6-十一烷基苯甲酸酯。并對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行生物活性篩選。在1.0×10-5mol·L-1下,(+)-去氫催吐蘿芙木醇(9)對(duì)MPP+誘導(dǎo)的PC12 細(xì)胞損傷顯示出一定的保護(hù)作用,其相對(duì)保護(hù)率為(76.60±10.67)%。下一步應(yīng)通過(guò)更廣泛的生物活性及其作用機(jī)制的深入研究,明確其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用靶點(diǎn),為后續(xù)臨床應(yīng)用及質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù),促進(jìn)民間習(xí)用藥材粗壯潤(rùn)楠的藥學(xué)研究及資源開(kāi)發(fā)利用。

    猜你喜歡
    苯甲酸甲氧基石油醚
    離子交換樹(shù)脂催化合成苯甲酸甲酯
    云南化工(2020年11期)2021-01-14 00:50:52
    錦燈籠宿萼與果實(shí)的石油醚部位化學(xué)成分及抗氧化活性比較①
    2-(2-甲氧基苯氧基)-1-氯-乙烷的合成
    補(bǔ)腎活血湯石油醚提取物對(duì)BMSCs遷移過(guò)程中Wnt5a/PKC通路的影響
    中成藥(2017年12期)2018-01-19 02:06:26
    DAD-HPLC法同時(shí)測(cè)定龍須藤總黃酮中5種多甲氧基黃酮
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:50
    煙草石油醚含量研究
    含有苯甲酸的紅棗不能吃?
    3,5-二氨基對(duì)氯苯甲酸異丁酯的合成研究
    田基黃石油醚提取物與5-Fu聯(lián)用對(duì)HepG2細(xì)胞增殖及凋亡的影響
    中成藥(2014年9期)2014-02-28 22:28:43
    5,5’-二硫雙(2-硝基苯甲酸)構(gòu)筑的鈷配合物的合成與晶體結(jié)構(gòu)
    日韩欧美精品v在线| 长腿黑丝高跟| 给我免费播放毛片高清在线观看| 校园春色视频在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品无大码| 少妇的逼好多水| 欧美成人一区二区免费高清观看| 老司机福利观看| 日韩欧美在线乱码| 精品人妻偷拍中文字幕| 天堂√8在线中文| 久久久久国内视频| 精品久久久久久久久久久久久| 97超碰精品成人国产| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品久久久久久精品电影| 欧美激情在线99| 熟女人妻精品中文字幕| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产视频一区二区在线看| 最新中文字幕久久久久| 久久韩国三级中文字幕| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产精品亚洲美女久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 色吧在线观看| 激情 狠狠 欧美| 嫩草影院入口| 欧美色视频一区免费| 韩国av在线不卡| 一级毛片aaaaaa免费看小| 精品不卡国产一区二区三区| 在线观看一区二区三区| 久久精品国产清高在天天线| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产精品永久免费网站| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国语自产精品视频在线第100页| 成年版毛片免费区| 亚洲中文字幕日韩| 神马国产精品三级电影在线观看| 18禁黄网站禁片免费观看直播| av国产免费在线观看| 国产不卡一卡二| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国国产精品蜜臀av免费| 偷拍熟女少妇极品色| 欧美zozozo另类| 亚洲五月天丁香| 国产亚洲精品久久久com| 一本久久中文字幕| 国产亚洲精品久久久com| 俺也久久电影网| 国产亚洲精品久久久com| 国产片特级美女逼逼视频| 午夜精品在线福利| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品一二三区在线看| 又爽又黄无遮挡网站| 欧美丝袜亚洲另类| 简卡轻食公司| 免费看日本二区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 99久久成人亚洲精品观看| 国内精品久久久久精免费| 在线a可以看的网站| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久国产乱子免费精品| 亚洲av免费在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 成年免费大片在线观看| 不卡视频在线观看欧美| 男女下面进入的视频免费午夜| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲久久久久久中文字幕| 少妇熟女aⅴ在线视频| 午夜影院日韩av| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产真实乱freesex| 精品久久久噜噜| 精品一区二区三区人妻视频| av免费在线看不卡| 俺也久久电影网| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99视频精品全部免费 在线| 91av网一区二区| 乱人视频在线观看| 韩国av在线不卡| 国产精品电影一区二区三区| 一进一出抽搐gif免费好疼| 日韩中字成人| 六月丁香七月| 色尼玛亚洲综合影院| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲精品成人久久久久久| 亚洲av一区综合| 色视频www国产| 欧美激情国产日韩精品一区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 免费搜索国产男女视频| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产乱人视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 特大巨黑吊av在线直播| h日本视频在线播放| 一区福利在线观看| 卡戴珊不雅视频在线播放| 欧美另类亚洲清纯唯美| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产精品免费一区二区三区在线| 亚洲成人久久爱视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 最好的美女福利视频网| 久久韩国三级中文字幕| 青春草视频在线免费观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产精品爽爽va在线观看网站| 美女 人体艺术 gogo| 91在线观看av| 草草在线视频免费看| 97热精品久久久久久| 乱码一卡2卡4卡精品| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 亚洲精品在线观看二区| 欧美激情在线99| 日本在线视频免费播放| 免费在线观看影片大全网站| 一个人免费在线观看电影| 91精品国产九色| 日韩精品中文字幕看吧| 波多野结衣高清作品| 午夜福利在线观看吧| 熟女人妻精品中文字幕| 国产精品不卡视频一区二区| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产亚洲精品久久久com| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 久久久精品大字幕| 国产乱人视频| 国产黄色小视频在线观看| 亚洲不卡免费看| 国产视频一区二区在线看| 国产男人的电影天堂91| 桃色一区二区三区在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 一进一出好大好爽视频| 久久精品夜色国产| 亚洲色图av天堂| 亚洲av.av天堂| 在线免费十八禁| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久精品人妻少妇| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久草成人影院| 白带黄色成豆腐渣| 哪里可以看免费的av片| 免费看日本二区| 亚洲成人av在线免费| 国产男人的电影天堂91| 精品久久久久久成人av| 神马国产精品三级电影在线观看| 男人的好看免费观看在线视频| 免费观看精品视频网站| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美人与善性xxx| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费在线观看成人毛片| 亚洲电影在线观看av| 舔av片在线| 国产精品久久电影中文字幕| 亚洲av中文av极速乱| 岛国在线免费视频观看| 99久久精品一区二区三区| 久久国产乱子免费精品| 亚洲成人久久爱视频| 日韩精品中文字幕看吧| 久久久久久大精品| 性欧美人与动物交配| 亚洲av中文字字幕乱码综合| av天堂在线播放| 亚洲av熟女| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99国产极品粉嫩在线观看| 91久久精品国产一区二区成人| 久久久久久久亚洲中文字幕| 美女免费视频网站| 美女 人体艺术 gogo| 日韩精品中文字幕看吧| 2021天堂中文幕一二区在线观| 露出奶头的视频| 老司机福利观看| 亚洲成人久久性| 国产黄色小视频在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 国产美女午夜福利| 免费av观看视频| 香蕉av资源在线| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产黄片美女视频| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲美女搞黄在线观看 | 在线免费观看不下载黄p国产| 亚洲色图av天堂| 久久久久久国产a免费观看| 人妻久久中文字幕网| 日本-黄色视频高清免费观看| 色综合站精品国产| 久久久a久久爽久久v久久| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日韩成人伦理影院| 黑人高潮一二区| 欧美中文日本在线观看视频| 亚洲国产高清在线一区二区三| 一级毛片电影观看 | 欧美高清性xxxxhd video| 欧美日韩综合久久久久久| 五月玫瑰六月丁香| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 黄色配什么色好看| 97超视频在线观看视频| 午夜激情欧美在线| 大香蕉久久网| 久久久久久久午夜电影| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久精品国产清高在天天线| 老司机午夜福利在线观看视频| 小说图片视频综合网站| 成人漫画全彩无遮挡| 欧美丝袜亚洲另类| 国产午夜福利久久久久久| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 成年免费大片在线观看| 九九在线视频观看精品| 免费观看人在逋| 国产久久久一区二区三区| 国产精品一区二区性色av| 中国国产av一级| 亚洲天堂国产精品一区在线| 1000部很黄的大片| 亚洲av一区综合| 99久久成人亚洲精品观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 精品久久国产蜜桃| 特大巨黑吊av在线直播| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产一区二区在线av高清观看| 在线播放国产精品三级| 欧美日本亚洲视频在线播放| 午夜免费激情av| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲自拍偷在线| 一区二区三区免费毛片| 日韩成人伦理影院| 亚洲精品色激情综合| 如何舔出高潮| 欧美三级亚洲精品| 一夜夜www| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日日啪夜夜撸| 精品久久久久久久末码| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 91久久精品国产一区二区三区| 美女高潮的动态| 欧美最新免费一区二区三区| 观看美女的网站| 国产色爽女视频免费观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 性插视频无遮挡在线免费观看| 色5月婷婷丁香| 久久久久久久久大av| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 三级经典国产精品| 最近视频中文字幕2019在线8| 成熟少妇高潮喷水视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品日产1卡2卡| 欧美国产日韩亚洲一区| h日本视频在线播放| 老熟妇仑乱视频hdxx| a级毛片免费高清观看在线播放| 男人的好看免费观看在线视频| 一级毛片我不卡| 校园春色视频在线观看| 欧美高清成人免费视频www| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 最近视频中文字幕2019在线8| 午夜精品在线福利| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 婷婷亚洲欧美| 国产精品福利在线免费观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日韩欧美在线乱码| 色综合站精品国产| 久久人妻av系列| 久久久午夜欧美精品| 麻豆国产97在线/欧美| 国内精品宾馆在线| 中文字幕久久专区| 国产精品综合久久久久久久免费| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日韩成人伦理影院| 亚洲精品色激情综合| 国产单亲对白刺激| 在线天堂最新版资源| 淫秽高清视频在线观看| 久久久精品大字幕| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 超碰av人人做人人爽久久| 美女高潮的动态| 国产精品99久久久久久久久| 午夜福利18| 午夜亚洲福利在线播放| 特大巨黑吊av在线直播| 伦精品一区二区三区| 日本五十路高清| 十八禁网站免费在线| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国内精品久久久久精免费| 色哟哟哟哟哟哟| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产精品久久视频播放| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产午夜福利久久久久久| 丰满的人妻完整版| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美一区二区国产精品久久精品| 亚洲国产精品国产精品| 精品国产三级普通话版| 精品午夜福利视频在线观看一区| 成人毛片a级毛片在线播放| 久久6这里有精品| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 久久人人精品亚洲av| 国产精华一区二区三区| 亚洲av二区三区四区| 亚洲av第一区精品v没综合| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 婷婷精品国产亚洲av在线| 禁无遮挡网站| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产高清激情床上av| 嫩草影院入口| 国产亚洲欧美98| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 午夜福利在线在线| 1000部很黄的大片| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 一区二区三区免费毛片| 国产成人a区在线观看| ponron亚洲| 99在线人妻在线中文字幕| 国产真实乱freesex| 亚洲欧美成人精品一区二区| 老熟妇仑乱视频hdxx| 乱人视频在线观看| 亚洲图色成人| 欧美一区二区精品小视频在线| 俄罗斯特黄特色一大片| 中出人妻视频一区二区| 国产高清不卡午夜福利| 日韩欧美三级三区| 1024手机看黄色片| 午夜日韩欧美国产| 久久国产乱子免费精品| 国产精品精品国产色婷婷| 欧美丝袜亚洲另类| 国产精品亚洲美女久久久| 久久这里只有精品中国| 亚洲av免费高清在线观看| 91在线观看av| 精品一区二区免费观看| 国内精品宾馆在线| 中国美白少妇内射xxxbb| www日本黄色视频网| 亚洲五月天丁香| 天堂网av新在线| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲国产欧美人成| 韩国av在线不卡| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲精品成人久久久久久| 男女边吃奶边做爰视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久久久久久久久成人| 国内揄拍国产精品人妻在线| 精品久久久久久久末码| 观看免费一级毛片| 中文字幕av成人在线电影| 校园人妻丝袜中文字幕| 高清毛片免费看| 成年女人看的毛片在线观看| 日韩强制内射视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲av电影不卡..在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产精品一二三区在线看| 欧美不卡视频在线免费观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 插阴视频在线观看视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 成人亚洲欧美一区二区av| 床上黄色一级片| 国产91av在线免费观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 淫秽高清视频在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产精品亚洲美女久久久| 日韩制服骚丝袜av| 久久午夜亚洲精品久久| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 精品人妻视频免费看| 午夜老司机福利剧场| 麻豆一二三区av精品| av在线观看视频网站免费| 69人妻影院| 亚洲丝袜综合中文字幕| 美女大奶头视频| 亚洲最大成人手机在线| 日韩国内少妇激情av| 免费高清视频大片| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 高清日韩中文字幕在线| 99热全是精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 中文字幕久久专区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 久久鲁丝午夜福利片| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产成人影院久久av| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 看非洲黑人一级黄片| 日韩高清综合在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 十八禁网站免费在线| 国产精品久久久久久久久免| 又粗又爽又猛毛片免费看| 毛片一级片免费看久久久久| 国产精品99久久久久久久久| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲久久久久久中文字幕| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲精品国产成人久久av| 可以在线观看毛片的网站| 可以在线观看毛片的网站| 少妇被粗大猛烈的视频| 在现免费观看毛片| 欧美激情国产日韩精品一区| 国内精品美女久久久久久| 舔av片在线| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 色在线成人网| 亚洲国产精品成人综合色| 老女人水多毛片| 村上凉子中文字幕在线| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 免费黄网站久久成人精品| 熟女电影av网| 我要搜黄色片| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 日本色播在线视频| 1024手机看黄色片| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 天堂√8在线中文| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 波多野结衣高清无吗| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 成人永久免费在线观看视频| 久久久久久久久久黄片| 国产69精品久久久久777片| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 97在线视频观看| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲精品一区av在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| av在线亚洲专区| 久久久成人免费电影| 国产日本99.免费观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 午夜福利18| 亚洲欧美日韩高清专用| 色综合色国产| or卡值多少钱| 日韩大尺度精品在线看网址| 最新中文字幕久久久久| 亚洲国产精品成人久久小说 | 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲成人久久性| 99国产精品一区二区蜜桃av| 97超碰精品成人国产| 国产私拍福利视频在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 一级黄色大片毛片| 成年女人永久免费观看视频| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲精品国产av成人精品 | 欧美又色又爽又黄视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 校园春色视频在线观看| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日韩国内少妇激情av| 丰满乱子伦码专区| 真实男女啪啪啪动态图| 色噜噜av男人的天堂激情| 日本黄色片子视频| 国产视频内射| 国产精品一区二区性色av| 午夜亚洲福利在线播放| 真人做人爱边吃奶动态| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 成人特级av手机在线观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美激情久久久久久爽电影| 日本 av在线| 国产91av在线免费观看| 村上凉子中文字幕在线| 成年女人毛片免费观看观看9| 日本免费一区二区三区高清不卡| 一进一出抽搐动态| 国产精品一区二区性色av| 国产成人a∨麻豆精品| 波野结衣二区三区在线| 日本爱情动作片www.在线观看 | 日韩中字成人| 九九爱精品视频在线观看| 深夜a级毛片| 久久精品国产亚洲网站| 91久久精品电影网| 最近的中文字幕免费完整| 不卡一级毛片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日本黄色视频三级网站网址| 日本一二三区视频观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 亚洲最大成人手机在线| 成年女人看的毛片在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 日本熟妇午夜| 亚洲高清免费不卡视频| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久精品国产清高在天天线| 国产精品永久免费网站| 深夜a级毛片| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产精品国产高清国产av| 色吧在线观看| 国内精品久久久久精免费| 精品乱码久久久久久99久播| 国产在线精品亚洲第一网站| 高清日韩中文字幕在线| 精品久久久久久久久久久久久| 97超视频在线观看视频| 久久人妻av系列| 亚洲av成人av| 黄色欧美视频在线观看| 永久网站在线| 久久久久国内视频| .国产精品久久| 超碰av人人做人人爽久久| 真人做人爱边吃奶动态| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 成人美女网站在线观看视频| 久久久久久久久久黄片| 午夜激情欧美在线| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产美女午夜福利| 日本免费一区二区三区高清不卡| 午夜精品在线福利| 国产一级毛片七仙女欲春2| 最后的刺客免费高清国语| 中文在线观看免费www的网站| 日韩中字成人| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲av中文av极速乱| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美日韩精品成人综合77777| 最近的中文字幕免费完整| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产日本99.免费观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 天堂8中文在线网| 欧美日韩综合久久久久久| 婷婷色av中文字幕| 国产精品福利在线免费观看| a级毛色黄片| 只有这里有精品99| 久久精品久久久久久久性| 男女边摸边吃奶| 一级黄片播放器| 91久久精品电影网| 大香蕉97超碰在线| 全区人妻精品视频| 成人二区视频|