五味子根的化學(xué)成分研究

劉 艷，劉 爽，彭紫琪，王思藝，姜軼鎧，潘 娟，管 偉，郝智超，匡海學(xué)，楊炳友

五味子根的化學(xué)成分研究

劉 艷，劉 爽，彭紫琪，王思藝，姜軼鎧，潘 娟，管 偉，郝智超，匡海學(xué)，楊炳友*

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 教育部北藥基礎(chǔ)與應(yīng)用研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150040

研究木蘭科植物北五味子(Turcz.) Baill.干燥根的化學(xué)成分及其苯丙素類化學(xué)成分的神經(jīng)保護(hù)作用。綜合運(yùn)用硅膠、MCI、ODS、Sephadex LH-20及HPLC等色譜方法對五味子根中化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離純化，利用MS、NMR等手段對分離得到的化學(xué)成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。采用CCK8法評價分離得到化合物對H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用。從五味子根70%乙醇提取物中分離并鑒定了37個化合物，包括22個苯丙素類：C-藜蘆酰乙二醇（1）、baihuaqianhuaside（2）、methyl-4comaroylquinate（3）、7,8--4,7,9,9′-tetra-hydroxy-3,3′- dimethoxy-84′-neolignan（4）、二氫去氫雙松柏醇（5）、開環(huán)異落葉松樹脂酚（6）、(?)-secoisolariciresinol-9βxylopyranoside（7）、(＋)-異落葉松樹脂醇（8）、ent-isolariciresinol-9βxylopyranoside（9）、schizandriside（10）、左旋馬尾松樹脂醇（11）、羅漢松脂素（12）、2-hydroxy-2-(3′,4′-dihydroxy-phenyl)methyl-3-(3′′,4′′-dimethoxy-phenyl) methyl--butyrolactone（13）、去甲絡(luò)石苷（14）、絡(luò)石苷（15）、牛蒡子苷（16）、(＋)-neo-olivil（17）、matairesinol 4βglucopyranoside（18）、3,7-dihydroxy-1,2,13,14-tetramethoxydibenzo cyclooctadiene 12βglucopyranoside（19）、五味子酯 D（20）、leptolepisol D（21）、xanthiumnolic C（22）；7個單萜類：反式-索布瑞醇（23）、magnoliaterpenoid C（24）、(1,2,4)-2-hydroxy-1,8-cineole-βglucopyranoside（25）、(1,4,6)-6-hydroxy-bornan-2-one 6βglucopyranoside（26）、(1,4,5)-5-endo-hydroxycam-phor5βglucopyrao-side（27）、雞矢藤苷（28）、paediatrics acid methyl ester（29）；5個芳香族類：3-ethoxy-4-hydroxy-benzoic acid（30）、沒食子酸乙酯（31）、benzyl βglucopyranoside（32）、3,4- dimethoxyphenyl-βglucopyranoside（33）、草夾竹桃苷（34）；2個黃酮類：表兒茶素（35）、taxifolin-3βxylopyranoside（36），以及1個二芳基庚烷類化合物：rhoiptelol C（37）?；衔?～3、6～7、13～17、21、25～31、37為首次從木蘭科中分離出來，化合物4～5、9～12、22～23、32、34、36為首次從五味子屬植物中分離得到，化合物8、18、33、35為首次從五味子中分離得到。體外神經(jīng)保護(hù)活性研究表明，在6.25 μmol/L時苯丙素類化合物3、10、17細(xì)胞存活率較高。

木蘭科；五味子；苯丙素；神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)；C-藜蘆酰乙二醇；二氫去氫雙松柏醇

五味子根為木蘭科植物北五味子(Turcz.) Baill.的干燥根?！吨袊幍洹?020年版記載五味子具有收斂固澀、益氣生津、補(bǔ)腎寧心的功效[1]。五味子的主要化學(xué)成分為木脂素類、三萜類、揮發(fā)油類、多糖類。近年來，通過對五味子的藥理活性研究發(fā)現(xiàn)，五味子對中樞神經(jīng)系統(tǒng)[2]、腎臟[3]、心血管系統(tǒng)[4]具有保護(hù)作用，還具有促進(jìn)生殖[5]、保護(hù)肝臟[6]、抗腫瘤[7-8]、抗衰老[9]和抗炎[10]等作用。研究表明，木脂素類化合物為五味子中的主要活性成分且木脂素類化合物具有較好的神經(jīng)保護(hù)作用[11-12]，而五味子根中木脂素含量較多[13]。迄今為止，對五味子的植物化學(xué)研究主要集中在果實(shí)[14]、果梗[15]、藤莖[16-18]和葉[19]的研究上，對根的研究較少。為進(jìn)一步豐富五味子根的化學(xué)成分和生物活性，本研究對五味子根的成分進(jìn)行研究，從五味子根70%乙醇提取物中分離并鑒定了37個化合物，包括22個苯丙素類：C-藜蘆酰乙二醇（c-veratroylglycol，1）、baihuaqianhuaside（2）、methyl-4comaroylquinate（3）、7,8--4,7,9,9′- tetra-hydroxy-3,3′-dimethoxy-84′-neolignan（4）、二氫去氫雙松柏醇（dihydrodehydrodiconiferyl alcohol，5）、開環(huán)異落葉松樹脂酚[(?)-secoiso- lariciresinol 6]、(?)-secoisolariciresinol-9βxylopyranoside（7）、(＋)-異落葉松樹脂醇[(＋)- isolariciresinol，8]、-isolariciresinol-9βxylopyranoside（9）、schizandriside（10）、左旋馬尾松樹脂醇[(?)-massoniresinol 11]、羅漢松脂素[(?)-matairesinol 12]、2-hydroxy-2-(3′,4′-dihydroxy- phenyl)methyl-3-(3′′,4′′-dimethoxyphenyl)methyl--butyrolactone（13）、去甲絡(luò)石苷（nortracheloside，14）、絡(luò)石苷（tracheloside，15）、牛蒡子苷（arctiin，16）、(＋)-neo-olivil（17）、matairesinol4βglucopyranoside（18）、3,7-dihydroxy-1,2,13,14- tetramethoxydibenzo cyclooctadiene 12βglucopyranoside（19）、五味子酯 D（schisantherin D，20）、leptolepisol D（21）、xanthiumnolic C（22）；7個單萜類：反式-索布瑞醇（-sobrerol，23）、magnoliaterpenoid C（24）、(1,2,4)-2-hydroxy- 1,8-cineole-βglucopyranoside（25）、(1,4,6)- 6-hydroxy-bornan-2-one 6βglucopyranoside（26）、(1,4,5)-5-endo-hydroxycamphor-5--βglucopyraoside（27）、雞矢藤苷（paederoside，28）、paediatrics acid methyl ester （29）；5個芳香族類：3-ethoxy-4-hydroxy-benzoic acid（30）、沒食子酸乙酯（ethyl gallate，31）、benzyl βglucopyranoside（32）、3,4-dimethoxyphenyl-βglucopyranoside（33）、草夾竹桃苷（androsin，34）；2個黃酮類：表兒茶素（epicatechin，35）、taxifolin-3βxylopyranoside（36）和1個二芳基庚烷類化合物：rhoiptelol C（37）。其中化合物1～3、6～7、13～17、21、25～31、37為首次從木蘭科中分離出來，化合物4～5、9～12、22～23、32、34、36為首次從五味子屬中分離出來，化合物8、18、33、35為首次從五味子中分離出來。苯丙素類化合物4、14表現(xiàn)出顯著的神經(jīng)保護(hù)活性。該研究對五味子根中化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，為闡明五味子根的藥效成分奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，為充分開發(fā)和利用五味子根的資源提供了理論依據(jù)。

1 儀器與材料

Bruker-600超導(dǎo)核磁共振光譜儀（瑞士Bruker公司）；LC-20AR制備型HPLC（日本島津公司）；2424-2998型分析HPLC（美國Waters公司）；Q-TOF（ESI）高分辨質(zhì)譜儀（美國Waters公司）；Epoch 2型酶標(biāo)儀（美國BioTek公司）；電子分析天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；恒溫CO2培養(yǎng)箱（美國Thermo公司）；GI54DS型高壓滅菌器（廈門致微儀器有限公司）；倒置相差顯微鏡（德國Carl Zeiss公司）；低溫冷凍離心機(jī)（日本日立公司）；WT-1ND超凈工作臺（北京王堂藍(lán)翼科技有限公司）。

Shim-pack（250 mm×20 mm，5 μm）制備型（日本島津公司）；SunFire C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）分析型（美國Waters公司）；柱色譜用硅膠（80～100、200～300目，中國青島海洋化工廠）；柱色譜用ODS（50 μm，ODS-A-HG，日本YMC股份有限公司）；MCI GEL CHP20P（37～75 μm，日本三菱化學(xué)株式會社）；正相硅膠薄層板（中國青島海洋化工廠）；色譜甲醇（美國Fisher公司）；色譜乙腈（美國Fisher公司）；分析純試劑（中國天津富宇化工有限公司）；PC12細(xì)胞系（武漢大學(xué)細(xì)胞保藏中心）；胎牛血清（北京賽貝生物技術(shù)有限公司）；RPMI 1640（美國Thermo公司）；胰蛋白酶細(xì)胞消化液（上海碧云天生物技術(shù)有限公司）；青霉素-鏈霉素（雙抗）（上海碧云天生物技術(shù)有限公司）；細(xì)胞培養(yǎng)瓶（美國Corning公司）；細(xì)胞凍存液[DMEM∶FBS∶DMSO（7∶2∶1），北京索萊寶科技有限公司]；96孔板（美國Corning公司）；CCK-8（上海恒斐生物科技有限公司）。

實(shí)驗(yàn)用五味子根于2020年6月采收于黑龍江省哈爾濱市清河縣林區(qū)，經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室樊銳鋒副教授鑒定為木蘭科植物五味子(Turcz.) Baill.的干燥根。植物標(biāo)本（20200615）保存于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

2 提取與分離

干燥的五味子根49 kg，以70%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，趁熱濾過，減壓濃縮，得粗膏6.5 kg。取2 kg粗膏水溶液上AB-8大孔吸附樹脂，分別用10%乙醇[2 BV（樹脂床體積）]、50%乙醇（2 BV）、95%乙醇（4 BV）以1 BV/h體積流量進(jìn)行柱色譜洗脫，收集洗脫液，得到10%、50%、95%乙醇洗脫組分。減壓濃縮后分別獲得10%乙醇洗脫組分浸膏521.0 g、50%乙醇洗脫組分浸膏470 g、95%乙醇洗脫組分浸膏606.9 g。取50%乙醇洗脫組分405.6 g通過硅膠柱色譜劃段，流動相采用二氯-甲醇（1∶0→0∶1）系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫，將所得到的洗脫液經(jīng)TLC反復(fù)鑒別合并，最終劃分為10段Fr. A～J。

Fr. C經(jīng)ODS柱色譜分離，得組分Fr. C1～C24，繼續(xù)進(jìn)行高效液相分離，流動相體積流量均為5 mL/min。其中Fr. C2經(jīng)制備型高效液相分離得化合物1 [10.9 mg，R＝25.0 min，甲醇-水（35∶65）]，F(xiàn)r. C7經(jīng)制備型高效液相分離得化合物4 [20.1 mg，R＝36.5 min，甲醇-水（44∶56）]、8 [39.7 mg，R＝39.0 min，甲醇-水（44∶56）]、11 [12.4 mg，R＝30.5 min，甲醇-水（44∶56）]，F(xiàn)r. C8經(jīng)制備型高效分離液相分離得化合物23 [7.2 mg，R＝69.0 min，甲醇-水（44∶56）]、30 [18.3 mg，R＝78.5 min，甲醇-水（44∶56）]，F(xiàn)r. C11經(jīng)制備型高效液相分離得化合物6 [33.0 mg，R＝39.0 min，甲醇-水（50∶50）]，F(xiàn)r. C22經(jīng)制備型高效液相分離得化合物17 [2.2 mg，R＝20.0 min，甲醇-水（49∶51）]。

Fr. D經(jīng)ODS柱色譜分離，得組分Fr. D1～ D21，其中Fr. D4經(jīng)制備型高效液相分離得到化合物37 [14.1 mg，R＝42.0 min，甲醇-水（45∶55）]，F(xiàn)r. D8經(jīng)制備型高效液相分離得化合物5 [10.2 mg，R＝66.5 min，甲醇-水（45∶55）]。

Fr. E經(jīng)ODS柱色譜分離，得組分Fr. E1～ E25，其中Fr. E2經(jīng)制備型高效液相分離得化合物33 [28.4 mg，R＝24.5 min，甲醇-水（32∶68）]，F(xiàn)r. E3經(jīng)制備型高效液相分離得化合物32 [2.8 mg，R＝43.5 min，甲醇-水（32∶68）]、34 [6.1 mg，R＝27.5 min，甲醇-水（32∶68）]，F(xiàn)r. E5經(jīng)制備型高效液相分離得化合物31 [41.6 mg，R＝57.0 min，甲醇-水（40∶60）]、35 [14.4 mg，R＝32.0 min，甲醇-水（40∶60）]，F(xiàn)r. E6經(jīng)制備型高效液相分離得化合物2 [13.6 mg，R＝48.0 min，甲醇-水（41∶59）]、3 [3.0 mg，R＝27.0 min，甲醇-水（41∶59）]、21 [7.7 mg，R＝22.5 min，甲醇-水（41∶59）]，F(xiàn)r. E7經(jīng)制備型高效液相分離得化合物24 [11.2 mg，R＝35.0 min，甲醇-水（45∶55）]，F(xiàn)r. E8經(jīng)制備型高效液相分離得化合物26 [48.4 mg，R＝33.0 min，甲醇-水（47∶53）]、28 [46.3 mg，R＝26.0 min，甲醇-水47∶53）]，F(xiàn)r. E9經(jīng)制備型高效液相分離得化合物14 [12.8 mg，R＝25.5 min，甲醇-水（47∶53）]、25 [6.4 mg，R＝51.0 min，甲醇-水（47∶53）]，F(xiàn)r. E11經(jīng)制備型高效液相分離得化合物15 [18.3 mg，R＝32.5 min，甲醇-水（50∶50）]、18 [81.0 mg，R＝30.0 min，甲醇-水（50∶50）]，F(xiàn)r. E12經(jīng)制備型高效液相分離得化合物29 [5.3 mg，R＝51.0 min，甲醇-水（50∶50）]，F(xiàn)r. E14經(jīng)制備型高效液相分離得化合物16 [7.3 mg，R＝37.0 min，甲醇-水（50∶50）]、22 [5.1 mg，R＝33.0 min，甲醇-水（50∶50）]。

Fr. F經(jīng)MCI柱色譜分離，得組分Fr. F1～F15，其中Fr. F3經(jīng)制備型高效液相分離得化合物27 [2.2 mg，R＝29.5 min，甲醇-水（50∶50）]，F(xiàn)r. F7經(jīng)制備型高效液相分離得化合物36 [3.3 mg，R＝39.0 min，甲醇-水（49∶51）]，F(xiàn)r. F9經(jīng)制備型高效液相分離得化合物9 [27.0 mg，R＝41.5 min，甲醇-水（46∶54）]、10 [21.6 mg，R＝32.0 min，甲醇-水（46∶54）]、19 [5.5 mg，R＝51.0 min，甲醇-水（46∶54）]，F(xiàn)r. F11經(jīng)制備型高效液相分離得化合物7 [19.3 mg，R＝51.0 min，甲醇-水（46∶54）]，F(xiàn)r. F12經(jīng)制備型高效液相分離得化合物12 [50.3 mg，R＝42.0 min，甲醇-水（49∶51）]、13 [9.7 mg，R＝46.5 min，甲醇-水（49∶51）]、20 [15.0 mg，R＝51.0 min，甲醇-水（49∶51）]。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C10H12O5；HR-ESI-MS213.075 4 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.58 (1H, m, H-6), 7.56 (1H, m, H-2), 6.87 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 5.10 (1H, m, H-8), 3.90 (3H, s, 3-OCH3), 3.88 (1H, dd,= 11.8, 3.7 Hz, H-9), 3.73 (1H, dd,= 11.8, 5.2 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 199.6 (C-7), 153.8 (C-4), 149.2 (C-3), 128.1 (C-1), 125.0 (C-6), 115.9 (C-2), 112.4 (C-5), 75.5 (C-8), 66.2 (C-9), 56.4 (3-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[20]，故鑒定化合物1為C-藜蘆酰乙二醇。

化合物2：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C16H22O8；HR-ESI-MS343.138 8 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.63 (1H, dd,= 8.5, 1.6 Hz, H-6), 7.57 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 7.21 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 5.03 (1H, d,= 7.6 Hz, H-1), 3.89 (3H, s, 3-OCH3), 3.87 (1H, overlapped, H-6), 3.69 (1H, dd,= 12.0, 5.6 Hz, H-6), 3.53 (1H, m, H-5), 3.48 (1H, m, H-4), 3.46 (1H, m, H-3), 3.40 (1H, m, H-2), 1.16 (3H, t,= 7.3 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 202.0 (C-7), 152.2 (C-4), 150.6 (C-3), 132.7 (C-1), 123.8 (C-6), 116.2 (C-5), 112.3 (C-2), 101.8 (C-1), 78.3 (C-5), 77.8 (C-3), 74.7 (C-2), 71.2 (C-4), 62.4 (C-6), 56.6 (3-OCH3), 32.3 (C-8), 8.8 (C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[21]，故鑒定化合物2為baihuaqianhuaside。

化合物3：黃色無定型固體（甲醇），分子式為C17H20O8；HR-ESI-MS353.123 6 [M＋H]+，1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.69 (1H, d,= 15.9 Hz, H-7), 7.47 (2H, d,= 8.3 Hz, H-2, 6), 6.80 (2H, d,= 8.3 Hz, H-3, 5), 6.42 (1H, d,= 15.9 Hz, H-8), 4.81 (1H, dd,= 8.6, 2.4 Hz, H-4), 4.25 (2H, m, H-3, 5), 3.74 (3H, s, H-8), 2.19 (1H, dd,= 14.1, 2.6 Hz, H-6), 2.15 (1H, m, H-2), 2.05 (1H, m, H-2), 2.00 (1H, m, H-6)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 175.7 (C-7), 168.9 (C-9), 161.3 (C-4), 146.7 (C-7), 131.2 (C-2, 6), 127.3 (C-1), 116.8 (C-3, 5), 116.3 (C-4), 115.4 (C-8), 78.6 (C-4), 76.4 (C-1), 69.0 (C-3), 65.7 (C-5), 52.9 (C-8), 42.1 (C-6), 38.4 (C-2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的基本一致[22]，故鑒定化合物3為methyl-4comaroylquinate。

化合物4：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H26O7；HR-ESI-MS379.175 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.99 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.81 (1H, overlapped, H-6), 6.80 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.78 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.72 (1H, d,= 8.4 Hz, H-5), 6.65 (1H, dd,= 8.0, 1.7 Hz, H-6), 4.81 (1H, d,= 5.7 Hz, H-7), 4.27 (1H, m, H-8), 3.83 (1H, dd,= 12.0, 5.7 Hz, H-9), 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 3.77 (3H, s, 3-OCH3), 3.74 (1H, m, H-9), 3.54 (2H, t,= 6.5 Hz, H-9), 2.59 (2H, t,= 7.6 Hz, H-7), 1.78 (2H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.8 (C-3), 148.7 (C-3), 147.2 (C-4), 146.9 (C-4), 138.1 (C-1), 134.1 (C-1), 121.8 (C-6), 121.0 (C-6), 119.6 (C-5), 115.6 (C-5), 114.0 (C-2), 111.8 (C-2), 74.1 (C-7), 86.6 (C-8), 62.2 (C-9, 9), 56.5 (3-OCH3), 56.3 (3-OCH3), 35.5 (C-8), 32.7 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[23]，故鑒定化合物4為7,8--4,7,9,9′-tetrahydroxy-3,3′- dimethoxy-84′-neolignan。

化合物5：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H24O6；HR-ESI-MS361.164 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.94 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.81 (1H, dd,= 8.1, 1.8 Hz, H-6), 6.75 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 6.71 (2H, s, H-2, 5), 5.48 (1H, d,= 6.3 Hz, H-7), 3.85 (1H, m, H-9), 3.83 (3H, s, 3-OCH3), 3.79 (3H, s, 3-OCH3), 3.74 (1H, m, H-9), 3.56 (2H, m, H-9), 3.46 (1H, m, H-8), 2.61 (2H, t,= 7.5 Hz, H-7), 1.80 (2H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.0 (C-3), 147.5 (C-4), 147.4 (C-4), 145.2 (C-3), 136.9 (C-5), 134.8 (C-1), 129.8 (C-1), 119.7 (C-6), 117.9 (C-6), 116.1 (C-5), 114.0 (C-2), 110.5 (C-2), 89.0 (C-7), 65.0 (C-9), 62.2 (C-9), 56.7 (3-OCH3), 56.3 (3-OCH3), 55.4 (C-8), 35.8 (C-7), 32.9 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[24]，故鑒定化合物5為二氫去氫雙松柏醇。

化合物6：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H26O6；HR-ESI-MS363.180 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.65 (2H, d,= 8.0 Hz, H-5, 5), 6.58 (2H, brs, H-2, 2), 6.54 (2H, brd,= 8.0 Hz, H-6, 6), 3.72 (6H, s, 3, 3-OCH3), 3.58 (4H, m, H-9, 9), 2.65 (2H, dd,= 13.7, 6.8 Hz, H-7, 7), 2.55 (2H, dd,= 13.7, 7.8 Hz, H-7, 7), 1.89 (2H, m, H-8, 8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 148.8 (C-3, 3), 145.4 (C-4, 4), 133.9 (C-1, 1), 122.7 (C-6, 6), 115.8 (C-5, 5), 113.4 (C-2, 2), 62.1 (C-9, 9), 56.2 (3, 3-OCH3), 44.1 (C-8, 8), 36.0 (C-7, 7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[25]，故鑒定化合物6為開環(huán)異落葉松樹脂酚。

化合物7：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C25H34O10；HR-ESI-MS495.222 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.65 (1H, d,= 7.9 Hz, H-5), 6.64 (1H, d,= 7.9 Hz, H-5), 6.61 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 6.59 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 6.54 (1H, overlapped, H-6), 6.53 (1H, overlapped, H-6), 4.15 (1H, d,= 7.6 Hz, H-1), 3.93 (1H, dd,= 9.8, 6.2 Hz, H-9), 3.84 (1H, dd,= 11.4, 5.3 Hz, H-5), 3.73 (6H, s3, 3-OCH3), 3.63 (1H, dd,= 11.0, 5.3 Hz, H-9), 3.54 (1H, dd,= 11.0, 2.3 Hz, H-9), 3.48 (1H, m, H-9), 3.45 (1H, m, H-4), 3.28 (1H, m, H-3), 3.19 (1H, dd,= 13.2, 7.6 Hz, H-2), 3.16 (1H, mH-5), 2.62 (1H, m, H-7), 2.58 (2H, m, H-7), 2.55 (1H, m, H-7), 2.08 (1H, m, H-8), 1.96 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 148.8 (C-3), 148.7 (C-3), 145.4 (C-4, 4), 134.0 (C-1), 133.8 (C-1), 122.8 (C-6), 122.7 (C-6), 115.7 (C-5, 5), 113.4 (C-2, 2), 105.3 (C-1), 78.0 (C-3), 75.1 (C-2), 71.3 (C-4), 70.8 (C-9), 67.0 (C-5), 62.6 (C-9), 56.2 (3-OCH3), 56.1 (3-OCH3), 44.0 (C-8), 41.4 (C-8), 35.6 (C-7), 35.3 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的基本一致[26]，故鑒定化合物7為(?)-secoisolariciresinol-9βxylopyranoside。

化合物8：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H24O6；HR-ESI-MS361.164 9 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.73 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.67 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 6.63 (1H, s, H-2), 6.60 (1H, dd,= 8.0, 1.6 Hz, H-6), 6.18 (1H, s, H-5), 3.79 (1H, m, H-7), 3.78 (3H, s3-OCH3), 3.75 (3H, s, 3-OCH3), 3.69 (1H, dd,= 11.0, 4.8 Hz, H-9), 3.66 (2H, m, H-9), 3.39 (1H, dd,= 11.0, 4.0 Hz, H-9), 2.76 (2H, d,= 7.7 Hz, H-7), 1.99 (1H, m, H-8), 1.76 (1H, dt,= 10.1, 3.5 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.0 (C-3), 147.2 (C-3), 145.8 (C-4), 145.2 (C-4), 138.6 (C-1), 134.1 (C-6), 129.0 (C-1), 123.2 (C-6), 117.3 (C-5), 116.0 (C-5), 113.8 (C-2), 112.4 (C-2), 65.9 (C-9), 62.2 (C-9), 56.4 (3, 3-OCH3), 48.0 (C-7), 47.9 (C-8), 39.9 (C-8), 33.5 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[27]，故鑒定化合物8為(＋)-異落葉松樹脂醇。

化合物9：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C25H32O10；HR-ESI-MS493.206 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.72 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.70 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.63 (1H, s, H-2), 6.57 (1H, dd,= 8.0, 1.7 Hz, H-6), 6.17 (1H, s, H-5), 3.98 (1H, d,= 7.6 Hz, H-1), 3.79 (3H, s, 3-OCH3), 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 3.76 (1H, m, H-5), 3.75 (1H, m, H-7), 3.72 (2H, m, H-9), 3.69 (1H, m, H-9), 3.59 (1H, dd,= 10.3, 2.3 Hz, H-9), 3.45 (1H, m, H-4), 3.23 (1H, t,= 9.0 Hz, H-10), 3.15 (1H, dd,= 8.7, 7.6 Hz, H-2), 3.01 (1H, t,= 11.2 Hz, H-5), 2.86 (1H, dd,= 15.7, 11.3 Hz, H-7), 2.73 (1H, dd,= 15.7, 4.3 Hz, H-7), 1.97 (1H, m, H-8), 1.90 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 148.8 (C-3), 147.2 (C-3), 145.9 (C-4), 145.2 (C-4), 138.7 (C-6), 133.7 (C-1), 129.2 (C-1), 123.2 (C-6), 117.4 (C-5), 116.0 (C-5), 114.2 (C-2), 112.3 (C-2), 104.7 (C-1), 77.9 (C-3), 74.8 (C-2), 71.2 (C-4), 70.3 (C-9), 67.0 (C-5), 65.4 (C-9), 56.4 (3, 3-OCH3), 48.5 (C-7), 45.5 (C-8), 40.7 (C-8), 33.7 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[28]，故鑒定化合物9為-isolariciresinol-9βxylopyranoside。

化合物10：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C25H32O10；HR-ESI-MS493.207 0 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.77 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.73 (1H, d,= 8.0 Hz, H-6), 6.64 (1H, s, H-2), 6.62 (1H, dd,= 8.0, 1.8 Hz, H-5), 6.16 (1H, s, H-5), 4.05 (1H, m, H-9), 4.03 (1H, m, H-1), 3.96 (1H, dd,= 9.8, 2.5 Hz, H-9), 3.80 (3H, s, 3-OCH3), 3.79 (3H, s, 3-OCH3), 3.79 (1H, m, H-5), 3.74 (1H, m, H-9), 3.70 (1H, m, H-9), 3.45 (1H, m, H-4), 3.27 (1H, m, H-7), 3.22 (1H, dd,= 9.5, 3.3 Hz, H-3), 3.19 (1H, m, H-5), 3.10 (1H, t,= 11.3 Hz, H-2), 2.81 (2H, m, H-7), 2.06 (1H, m, H-8), 1.85 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 148.9 (C-3), 147.2 (C-3), 145.9 (C-4), 145.2 (C-4), 138.6 (C-6), 134.3 (C-1), 129.1 (C-1), 123.1 (C-6), 117.4 (C-5), 116.1 (C-5), 114.3 (C-2), 112.4 (C-2), 105.8 (C-1), 77.9 (C-2), 75.0 (C-3), 71.3 (C-4), 69.4 (C-9), 66.9 (C-9), 65.1 (C-5), 56.4 (3-OCH3, 3-OCH3), 47.9 (C-7), 45.9 (C-8), 39.6 (C-8), 33.8 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[29]，故鑒定化合物10為schizandriside。

化合物11：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H24O8；HR-ESI-MS393.154 8 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.02 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 6.93 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 6.78 (1H, dd,= 8.1, 1.6 Hz, H-5), 6.74 (1H, overlapped, H-6), 6.73 (1H, overlapped, H-6), 6.72 (1H, overlapped, H-5), 5.00 (1H, s, H-7), 3.86 (1H, d,= 8.9 Hz, H-9), 3.84 (6H, s, 3, 3-OCH3), 3.78 (1H, d,= 11.4 Hz, H-9), 3.68 (1H, d,= 11.4 Hz, H-9), 3.67 (1H, d,= 8.9 Hz, H-9), 2.95 (1H, d,= 13.8 Hz, H-7), 2.89 (1H, d,= 13.8 Hz, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 148.6 (C-3, 3), 147.1 (C-4), 146.2 (C-4), 131.2 (C-1), 130.2 (C-1), 124.1 (C-6), 121.7 (C-6), 115.7 (C-5), 115.4 (C-2, 5), 112.9 (C-2), 86.2 (C-7), 82.4 (C-8), 82.1 (C-8), 74.8 (C-9), 64.4 (C-9), 56.4 (3-OCH3, 3-OCH3), 40.1 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[30]，故鑒定化合物11為左旋馬尾松樹脂醇。

化合物12：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H22O6；HR-ESI-MS359.149 2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.69 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.67 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.66 (1H, d,= 1.6 Hz, H-2), 6.57 (1H, dd,= 8.0, 1.6 Hz, H-6), 6.54 (1H, d,= 1.4 Hz, H-2), 6.49 (1H, dd,= 8.0, 1.4 Hz, H-6), 4.14 (1H, m, H-4), 3.90 (1H, m, H-4), 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 3.76 (3H, s, 3-OCH3), 2.87 (1H, dd,= 14.0, 5.4 Hz, H-6), 2.80 (1H, dd,= 14.0, 7.0 Hz, H-6), 2.62 (1H, m, H-2), 2.51 (2H, m, H-5), 2.47 (1H, m, H-3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 181.6 (C-1), 149.0 (C-3, 3), 146.4 (C-4), 146.2 (C-4), 131.4 (C-1), 130.8 (C-1), 123.0 (C-6), 122.2 (C-6), 116.1 (C-5, 5), 113.9 (C-2), 113.2 (C-2), 72.9 (C-4), 56.3 (3, 3-OCH3), 47.7 (C-2), 42.5 (C-3), 38.9 (C-5), 35.3 (C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[31]，故鑒定化合物12為羅漢松脂素。

化合物13：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H22O7；HR-ESI-MS375.143 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.85 (1H, d,= 8.6 Hz, H-5), 6.70 (2H, overlapped, H-2, 5), 6.69 (1H, overlapped, H-2), 6.68 (1H, overlapped, H-6), 6.56 (1H, dd,= 8.0, 1.7 Hz, H-6), 3.97 (2H, dd,= 8.8, 3.1 Hz, H-4), 3.78 (3H, s, 4-OCH3), 3.77 (3H, s, 3-OCH3), 3.11 (1H, d,= 13.6 Hz, H-5), 2.85 (1H, d,= 13.6 Hz, H-5), 2.79 (1H, dd,= 13.6, 5.0 Hz, H-6), 2.50 (1H, dd,= 13.6, 9.5 Hz, H-6), 2.43 (1H, m, H-3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 180.6 (C-1), 150.5 (C-4), 149.1 (C-3), 148.8 (C-4), 146.7 (C-3), 133.4 (C-1), 128.2 (C-1), 124.1 (C-6), 122.2 (C-6), 116.1 (C-5), 114.9 (C-2), 113.8 (C-5), 113.2 (C-2), 77.4 (C-2), 71.8 (C-4), 56.5 (4-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 44.5 (C-3), 41.9 (C-5), 32.2 (C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[32]，故鑒定化合物13為2-hydroxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)methyl-3-(3,4-dimethoxyphenyl)methyl--butyrolactone。

化合物14：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C26H32O12；HR-ESI-MS537.196 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.06 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.75 (1H, brs, H-2), 6.71 (1H, overlapped, H-2), 6.69 (1H, overlapped, H-5), 6.68 (1H, overlapped, H-6), 6.59 (1H, brd,= 8.2 Hz, H-6), 4.84 (1H, overlapped, H-1), 3.98 (2H, d,= 8.3 Hz, H-9), 3.84 (1H, m, H-6), 3.81 (3H, s, 3-OCH3), 3.79 (3H, s, 3-OCH3), 3.67 (1H, m, H-6), 3.45 (2H, m, H-2, 5), 3.38 (2H, m, H-3, 4), 3.14 (1H, d,= 13.6 Hz, H-7), 2.88 (1H, d,= 7.7 Hz, H-7), 2.77 (1H, dd,= 13.7, 5.1 Hz, H-7), 2.48 (1H, m, H-7), 2.41 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 180.4 (C-9), 150.6 (C-3), 149.0 (C-4), 147.1 (C-4), 146.1 (C-3), 131.9 (C-1), 131.7 (C-1), 124.1 (C-6), 122.4 (C-6), 117.8 (C-5), 116.3 (C-5), 115.9 (C-2), 113.6 (C-2), 102.8 (C-1), 78.2 (C-5), 77.8 (C-3), 77.3 (C-8), 74.9 (C-2), 71.8 (C-9), 71.3 (C-4), 62.4 (C-6), 56.8 (3-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 44.6 (C-8), 41.8 (C-7), 32.2 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[33]，故鑒定化合物14為去甲絡(luò)石苷。

化合物15：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C27H34O12；HR-ESI-MS551.212 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.07 (1H,,= 8.3 Hz, H-5), 6.86 (1H, d,= 8.0 Hz, H-5), 6.78 (1H, brs, H-2), 6.71 (1H, overlapped, H-6), 6.69 (1H, overlapped, H-2), 6.68 (1H, overlapped, H-6), 4.84 (1H, overlapped, H-1), 3.98 (2H, d,= 8.3 Hz, H-9), 3.84 (1H, m, H-6), 3.79 (9H, s, 3, 4, 3-OCH3), 3.67 (1H, m, H-6), 3.46 (1H, m, H-5), 3.44 (1H, m, H-2), 3.37 (2H, m, H-3, 4), 3.14 (1H, d,= 13.6 Hz, H-7), 2.89 (1H, d,= 13.6 Hz, H-7), 2.79 (1H, dd,= 13.8, 5.1 Hz, H-7), 2.51 (1H, dd,= 13.8, 9.7 Hz, H-7), 2.43 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 180.4 (C-9), 150.6 (C-4, 4), 149.2 (C-3), 147.2 (C-3), 133.3 (C-1), 131.7 (C-1), 124.1 (C-6), 122.2 (C-6), 117.8 (C-5), 115.9 (C-2), 113.9 (C-2), 113.2 (C-5), 102.8 (C-1), 78.2 (C-5), 77.8 (C-3), 77.3 (C-8), 74.9 (C-2), 71.8 (C-9), 71.3 (C-4), 62.5 (C-6), 56.8 (3-OCH3), 56.6 (3-OCH3), 56.5 (4-OCH3), 44.6 (C-8), 41.8 (C-7), 32.2 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[34]，故鑒定化合物15為絡(luò)石苷。

化合物16：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C27H34O11；HR-ESI-MS535.217 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.05 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.81 (1H, d,= 8.6 Hz, H-5), 6.74 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.64 (1H, dd,= 8.2, 1.7 Hz, H-6), 6.58 (1H, overlapped, H-2, 6), 4.85 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1), 4.17 (1H, dd,= 8.8, 7.7 Hz, H-9), 3.92 (1H, dd,= 8.8, 8.0 Hz, H-9), 3.85 (1H, d,= 12.0 Hz, H-6), 3.78 (6H, s, 3, 4-OCH3), 3.74 (3H, s, 3-OCH3), 3.68 (1H, m, H-6), 3.48 (1H, m, H-5), 3.45 (1H, m, H-2), 3.40 (2H, m, H-3, 4), 2.90 (1H, dd,= 14.0, 5.3 Hz, H-7), 2.81 (1H, dd,= 14.0, 7.4 Hz, H-7), 2.67 (1H, m, H-8), 2.56 (1H, m, H-7), 2.54 (1H, brs, H-7), 2.49 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 181.3 (C-9), 150.6 (C-3), 150.4 (C-3), 149.1 (C-4), 146.8 (C-4), 134.2 (C-1), 132.7 (C-1), 123.0 (C-6), 122.1 (C-6), 117.8 (C-5), 114.8 (C-2), 113.6 (C-2), 113.0 (C-5), 102.9 (C-1), 78.1 (C-5), 77.8 (C-3), 74.9 (C-2), 72.9 (C-9), 71.3 (C-4), 62.5 (C-6), 56.7 (3-OCH3), 56.5 (3-OCH3), 56.4 (4-OCH3), 47.6 (C-8), 42.5 (C-8), 38.9 (C-7), 35.4 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[35]，故鑒定化合物16為牛蒡子苷。

化合物17：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H24O7；HR-ESI-MS377.159 9 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.02 (2H, d,= 1.7 Hz, H-2, 2), 6.86 (2H, dd,= 8.0, 1.7 Hz, H-6, 6), 6.78 (2H, d,= 8.0 Hz, H-5, 5), 4.92 (2H, d,= 8.5 Hz, H-7, 7), 3.87 (6H, s, 3, 3-OCH3), 3.69 (2H, dd,= 11.3, 3.4 Hz, H-9, 9), 3.60 (2H, dd,= 11.3, 5.2 Hz, H-9, 9), 2.31 (2H, m, H-8, 8);13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 149.1 (C-3, 3), 147.4 (C-4, 4), 134.9 (C-1, 1), 120.5 (C-6, 6), 116.0 (C-5, 5), 111.2 (C-2, 2), 84.4 (C-7, 7), 61.8 (C-9, 9), 56.4 (3-OCH3, 3-OCH3), 55.4 (C-8, 8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[36]，故鑒定化合物17為(+)-neo-olivil。

化合物18：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C26H32O11；HR-ESI-MS521.201 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.05 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 6.74 (1H, brs, H-2), 6.68 (1H, d,= 7.9 Hz, H-5), 6.65 (1H, brd,= 8.2 Hz, H-6), 6.56 (1H, brs, H-2), 6.49 (1H, brd,= 7.9 Hz, H-6), 4.85 (1H, d,= 6.9 Hz, H-1), 4.16 (1H, m, H-9), 3.91 (1H, m, H-9), 3.85 (1H, brd,= 12.0 Hz, H-6), 3.79 (3H, s, 3-OCH3), 3.76 (3H, s, 3-OCH3), 3.68 (1H, m, H-6), 3.49 (1H, m, H-2), 3.46 (1H, m, H-3), 3.39 (2H, m, H-4, 5), 2.88 (1H, dd,= 13.9, 5.3 Hz, H-7), 2.82 (1H, dd,= 13.9, 7.0 Hz, H-7), 2.66 (1H, m, H-8), 2.52 (2H, m, H-7), 2.46 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 181.4 (C-9), 150.6 (C-3), 149.0 (C-3), 146.8 (C-4), 146.2 (C-4), 134.2 (C-1), 131.3 (C-1), 123.0 (C-6), 122.2 (C-6), 117.8 (C-5), 116.2 (C-5), 114.8 (C-2), 113.3 (C-2), 102.8 (C-1), 78.1 (C-5), 77.8 (C-3), 74.9 (C-2), 72.9 (C-9), 71.3 (C-4), 62.4 (C-6), 56.7 (3-OCH3), 56.4 (3-OCH3), 47.6 (C-8), 42.6 (C-8), 38.9 (C-7), 35.3 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[37]，故鑒定化合物18為matairesinol 4βglucopyranoside。

化合物19：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C28H38O12；HR-ESI-MS581.243 7 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.91 (1H, s, H-11), 6.54 (1H, s, H-4), 5.09 (1H, d,= 7.4 Hz, H-1), 3.89 (3H, s, 13-OCH3), 3.88 (1H, m, H-6), 3.83 (3H, s, 2-OCH3), 3.69 (1H, dd,= 12.1, 6.0 Hz, H-6), 3.52 (1H, m, H-2), 3.51 (1H, m, H-3), 3.49 (1H, m, H-5), 3.46 (3H, s, 1-OCH3), 3.44 (3H, s, 14-OCH3), 3.39 (1H, m, H-4), 2.77 (1H, dd,= 14.3, 2.0 Hz, H-6), 2.58 (1H, d,= 13.6 Hz, H-9), 2.38 (1H, d,= 13.6 Hz, H-9), 2.27 (1H, dd,= 14.3, 8.4 Hz, H-6), 1.19 (3H, s, H-18), 1.78 (1H, m, H-7), 0.80 (3H, d,= 7.1 Hz, H-17)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 152.7 (C-14), 152.5 (C-1), 150.8 (C-12), 150.5 (C-3), 142.0 (C-13), 140.2 (C-2), 136.2 (C-10), 135.3 (C-5), 126.7 (C-15), 122.8 (C-16), 116.1 (C-11), 115.5 (C-4), 102.2 (C-1), 78.1 (C-3, 5), 75.1 (C-2), 73.7 (C-8), 71.5 (C-4), 62.7 (C-6), 61.9 (13-OCH3), 61.2 (2-OCH3), 61.0 (1-OCH3), 60.8 (14-OCH3), 42.6 (C-9), 42.2 (C-7), 35.9 (C-6), 29.6 (C-18), 16.3 (C-17)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[38]，故鑒定化合物19為3,7- dihydroxy-1,2,13,14-tetramethoxydibenzo cyclooctadiene 12βglucopyranoside。

化合物20：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C29H28O9；HR-ESI-MS521.181 0 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CDCl3): 7.50 (2H, m, H-3, 7), 7.48 (1H, m, H-5), 7.32 (2H, m, H-4, 6), 6.76 (1H, s, H-4), 6.54 (1H, s, H-11), 6.00 (1H, d,= 1.3 Hz, -OCH2O-), 5.98 (1H, d,= 1.3 Hz, -OCH2O-), 5.74 (1H, d,= 1.5 Hz, -OCH2O-), 5.70 (1H, s, H-6), 5.58 (1H, d,= 1.5 Hz, -OCH2O-), 3.80 (3H, s, 14-OCH3), 3.35 (3H, s, 1-OCH3), 2.39 (1H, dd,= 14.0, 10.0 Hz, H-9), 2.21 (1H, d,= 14.0 Hz, H-9), 2.09 (1H, m, H-8), 1.36 (3H, s, H-18), 1.17 (3H, d,= 7.1 Hz, H-17)；13C-NMR (150 MHz, CDCl3): 164.6 (C-1), 148.8 (C-12), 148.0 (C-3), 141.5 (C-1), 140.1 (C-14), 136.8 (C-2), 135.3 (C-15), 133.8 (C-13), 132.8 (C-2), 129.4 (C-3, 5, 7), 129.1 (C-16), 127.8 (C-4, 6), 121.4 (C-10), 120.5 (C-5), 105.9 (C-11), 102.4 (C-4), 101.3 (-OCH2O-), 100.3 (-OCH2O-), 84.8 (C-6), 72.2 (C-7), 59.6 (1-OCH3), 58.6 (14-OCH3), 42.6 (C-8), 36.3 (C-9), 28.2 (C-18), 18.8 (C-17)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[39]，故鑒定化合物20為五味子酯 D。

化合物21：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C27H32O10；HR-ESI-MS517.206 9 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.02 (1H, s, H-2), 6.82 (1H, overlapped, H-6), 6.80 (1H, s, H-2), 6.72 (1H, dd,= 8.0, 1.6 Hz, H-5), 6.69 (1H, overlapped, H-6), 6.67 (1H, overlapped, H-2), 6.64 (1H, overlapped, H-5), 6.62 (1H, overlapped, H-5), 6.56 (1H, d,= 8.1 Hz, H-6), 4.94 (1H, d,= 5.3 Hz, H-7), 4.80 (1H, d,= 5.5 Hz, H-7), 4.29 (1H, m, H-8), 3.83 (1H, m, H-9), 3.82 (1H, m, H-9), 3.81 (3H, s, 3-OCH3), 3.74 (1H, m, H-9), 3.72 (3H, d,= 3.8 Hz, 3-OCH3), 3.68 (1H, m, H-9), 3.63 (3H, s, 3-OCH3), 2.88 (1H, m, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.3 (C-3), 148.7 (C-3), 148.4 (C-3), 148.0 (C-4), 146.9 (C-4), 146.2 (C-4), 139.3 (C-1), 134.2 (C-1), 132.0 (C-1), 123.2 (C-6), 120.9 (C-6), 120.2 (C-2), 118.3 (C-5), 115.7 (C-5), 115.6 (C-2), 114.6 (C-5), 112.4 (C-6), 111.8 (C-2), 86.2 (C-8), 75.1 (C-7), 74.0 (C-7), 64.4 (C-9), 62.1 (C-9), 56.6 (C-8), 56.4 (3-OCH3), 56.3 (3, 3-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[40]，故鑒定化合物21為leptolepisol D。

化合物22：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C30H36O10；HR-ESI-MS557.238 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.01 (1H, d,= 1.5 Hz, H-2), 6.96 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.91 (1H, d,= 8.3 Hz, H-5), 6.86 (1H, overlapped, H-6), 6.83 (1H, overlapped, H-6), 6.74 (2H, overlapped, H-2, 6), 6.73 (1H, overlapped, H-5), 5.52 (1H, d,= 5.9 Hz, H-7), 4.83 (1H, d,= 5.8 Hz, H-7), 4.38 (1H, m, H-8), 3.87 (3H, s, 3-OMe), 3.81 (2H, m, H-9), 3.79 (3H, s, 3-MeO), 3.77 (2H, m, H-9), 3.76 (3H, s, 3-MeO), 3.58 (2H, t,= 6.5 Hz, H-9), 3.45 (1H, m, H-8), 2.64 (2H, t,= 7.5 Hz, H-7), 1.83 (2H, q,= 7.8 Hz, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 151.9 (C-3), 148.9 (C-4), 148.6 (C-3), 147.5 (C-4), 147.0 (C-4), 145.2 (C-3), 137.5 (C-1), 137.0 (C-1), 134.0 (C-1), 129.7 (C-5), 121.1 (C-6), 119.3 (C-6), 118.9 (C-5), 117.9 (C-6), 115.6 (C-5), 114.1 (C-2), 111.8 (C-2), 111.1 (C-2), 88.6 (C-7), 86.2 (C-8), 74.1 (C-7), 65.0 (C-9), 62.2 (C-9, 9), 56.7 (3-MeO), 56.4 (3-MeO), 56.3 (3-MeO), 55.5 (C-8), 35.8 (C-8), 32.9 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[41]，故鑒定化合物22為xanthiumnolic C。

化合物23：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C10H18O2；HR-ESI-MS171.138 2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 5.55 (1H, d,= 4.9 Hz, H-2), 3.95 (1H, brs, H-6), 2.10 (1H, m, H-3), 1.95 (1H, d,= 13.5 Hz, H-3), 1.77 (2H, overlapped, H-5), 1.75 (3H, s, H-7), 1.36 (1H, m, H-4), 1.15 (6H, s, H-9, 10)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 135.4 (C-1), 126.2 (C-2), 72.8 (C-8), 69.2 (C-6), 39.8 (C-4), 34.2 (C-5), 28.0 (C-3), 27.1 (C-9), 26.9 (C-10), 21.1 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[30]，故鑒定化合物23為反式-索布瑞醇。

化合物24：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C16H26O7；HR-ESI-MS331.175 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.87 (1H, d,= 5.6 Hz, H-2), 4.45 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1), 3.78 (1H, dd,= 11.9, 1.6 Hz, H-6), 3.62 (1H, dd,= 11.9, 5.6 Hz, H-6), 3.34 (1H, m, H-5), 3.26 (1H, m, H-4), 3.20 (1H, m, H-3), 3.13 (1H, m, H-2), 2.67 (1H, m, H-6), 2.47 (1H, m, H-3), 2.32 (1H, m, H-3, 6), 2.19 (1H, m, H-4), 1.72 (3H, s, H-10), 1.28 (3H, s, H-8), 1.24 (3H, s, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 203.5 (C-7), 148.2 (C-2), 135.8 (C-1), 98.5 (C-1), 79.3 (C-5), 78.3 (C-5), 77.6 (C-3), 75.2 (C-2), 71.7 (C-4), 62.8 (C-6), 46.7 (C-4), 40.4 (C-6), 28.6 (C-3), 24.8 (C-8), 23.5 (C-9), 15.6 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的基本一致[42]，故鑒定化合物24為magnoliater-penoid C。

化合物25：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C16H28O7；HR-ESI-MS333.190 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 4.26 (1H, d,= 7.7 Hz, H-1), 3.62 (1H, dd,= 10.0, 2.4 Hz, H-2), 3.85 (1H, brd,= 11.6 Hz, H-6), 3.66 (1H, dd,= 11.6, 5.7 Hz, H-6), 3.33 (1H, m, H-5), 3.28 (1H, m, H-4), 3.24 (1H, m, H-3), 3.22 (1H, m, H-2), 2.18 (1H, m, H-3, 6), 2.04 (1H, m), 1.98 (1H, m, H-5), 1.72 (2H, m, H-3, 6), 1.50 (1H, m, H-5), 1.47 (1H, m, H-4), 1.40 (1H, m), 1.30 (3H, s, H-10), 1.24 (3H, s, H-9), 1.13 (3H, s, H-7)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 106.1 (C-1), 79.5 (C-2), 77.9 (C-5), 77.7 (C-3), 75.9 (C-2), 75.6 (C-8), 74.2 (C-1), 71.8 (C-4), 62.9 (C-6), 34.8 (C-4), 34.7 (C-3), 30.6 (C-10), 29.3 (C-9), 28.3 (C-6), 23.1 (C-7), 22.8 (C-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[43]，故鑒定化合物25為(1,2,4)-2-hydroxy-1,8- cineole-βglucopyranoside。

化合物26：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C16H26O8；HR-ESI-MS347.169 8 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, C5D5N): 4.80 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 4.57 (1H, brd,= 8.4 Hz, H-6), 4.52 (1H, brd,= 11.7 Hz, H-6), 4.36 (1H, dd,= 11.7, 5.2 Hz, H-6), 4.14～4.19 (2H, m, H-3, 4), 3.91 (1H, m, H-5), 3.83 (1H, m, H-2), 2.43 (1H, m, H-5), 2.30 (1H, dd,= 17.9, 3.2 Hz, H-3), 2.06 (1H, brd,= 17.9 Hz, H-3), 1.96 (1H, m, H-4), 1.80 (1H, brd,= 13.3 Hz, H-5), 1.12 (3H, s, H-10), 0.79 (3H, s, H-9), 0.69 (3H, s, H-8)；13C-NMR (150 MHz, C5D5N): 215.0 (C-2), 103.8 (C-1), 82.5 (C-6), 78.9 (C-3), 78.8 (C-5), 74.9 (C-2), 71.8 (C-4), 63.2 (C-6), 62.9 (C-1), 48.7 (C-7), 43.5 (C-3), 42.2 (C-4), 36.1 (C-5), 20.5 (C-8), 20.3 (C-9), 8.4 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[44]，故鑒定化合物26為(1,4,6)-6- hydroxybornan-2-one 6βglucopyranoside。

化合物27：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C16H26O8；HR-ESI-MS347.169 8 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 4.70 (1H, m, H-5), 4.25 (1H, d,= 7.8 Hz, H-1), 3.86 (1H, brd,= 11.3 Hz, H-6), 3.64 (1H, dd,= 11.3, 5.3 Hz, H-6), 3.32 (1H, m, H-2), 3.25 (1H, m, H-4), 3.24 (1H, m, H-3), 3.13 (1H, dd,= 9.1, 8.0 Hz, H-5), 2.77 (1H, d,= 18.7 Hz, H-3), 2.40 (1H, t,= 4.4 Hz, H-4), 2.21 (1H, dd,= 14.6, 9.8 Hz, H-6), 2.15 (1H, dd,= 18.7, 4.0 Hz, H-3), 1.37 (1H, dd,= 14.6, 3.7 Hz, H-6), 1.03 (3H, s, H-8), 0.85 (3H, s, H-10), 0.83 (3H, s, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 221.4 (C-2), 102.8 (C-1), 78.1 (C-5), 78.0 (C-3), 76.8 (C-2), 75.1 (C-5), 71.6 (C-4), 62.8 (C-6), 59.7 (C-1), 48.1 (C-4), 47.2 (C-7), 40.1 (C-6), 36.1 (C-3), 20.5 (C-9), 19.5 (C-8), 9.5 (C-10)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[45]，故鑒定化合物27為(1,4,5)-5-endo-hydroxycamphor 5βglucopyranoside。

化合物28：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C18H22O11S；HR-ESI-MS447.095 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.29 (1H, brs, H-3), 5.93 (1H, brs, H-1), 5.73 (1H, brs, H-7), 5.56 (1H, brd,= 6.4 Hz, H-6), 4.90 (1H, overlapped, H-10), 4.81 (1H, overlapped, H-10), 4.67 (1H, d,= 7.9 Hz, H-1), 3.91 (1H, brd,= 11.6 Hz, H-6), 3.68 (1H, overlapped, H-6), 3.66 (1H, m, H-5), 3.38 (1H, m, H-3), 3.35 (1H, m, H-5), 3.31 (1H, overlapped, H-9), 3.27 (1H, m, H-4), 3.18 (1H, m, H-2), 2.34 (3H, s, H-13)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 172.7 (C-11), 172.5 (C-12), 150.3 (C-3), 143.8 (C-8), 129.5 (C-7), 106.1 (C-4), 100.0 (C-1), 93.2 (C-1), 86.2 (C-6), 78.3 (C-5), 77.9 (C-3), 74.6 (C-2), 71.5 (C-4), 64.3 (C-10), 62.7 (C-6), 45.2 (C-9), 37.5 (C-5), 13.6 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[46]，故鑒定化合物28為雞矢藤苷。

化合物29：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C19H26O12S；HR-ESI-MS479.121 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.65 (1H, d,= 1.1 Hz, H-3), 6.02 (1H, d,= 1.4 Hz, H-7), 5.09 (1H, d,= 14.7 Hz, H-10), 5.05(1H, d,= 9.0 Hz, H-1), 4.94 (1H, d,= 14.7 Hz, H-10), 4.80 (1H, dd,= 5.8, 1.9 Hz, H-6), 4.71 (1H, d,= 7.9 Hz, H-1), 3.85 (1H, m, H-6), 3.73 (3H, s, H-14), 3.63 (1H, dd,= 11.9, 5.8 Hz, H-6), 3.38 (1H, m, H-3), 3.36 (1H, m, H-5), 3.26 (1H, m, H-4), 3.25 (1H, m, H-2), 3.03 (1H, ddd,= 7.4, 7.4, 1.3 Hz, H-5), 2.62 (1H, t,= 8.3 Hz, H-9), 2.34 (3H, s, H-13)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 172.9 (C-11), 169.3 (C-12), 155.4 (C-3), 145.5 (C-8), 132.4 (C-7), 108.1 (C-4), 101.3 (C-1), 100.7 (C-1), 78.6 (C-5), 77.9 (C-3), 75.3 (C-6), 74.9 (C-2), 71.6 (C-4), 66.2 (C-10), 63.0 (C-6), 51.8 (C-14), 46.2 (C-9), 42.4 (C-5), 13.5 (C-13)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道的基本一致[47]，故鑒定化合物29為paediatrics acid methyl ester。

化合物30：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C9H10O4；HR-ESI-MS183.065 3 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD)，有1組苯環(huán)信號: 7.41 (1H, overlapped, H-6), 7.39 (1H, overlapped, H-2), 6.79 (1H, d,= 8.1 Hz, H-5), 4.28 (2H, q,= 7.1 Hz, H-8), 1.34 (3H, t,= 7.1 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 168.4 (C-7), 151.6 (C-3), 146.1 (C-4), 123.5 (C-6), 122.9 (C-1), 117.4 (C-5), 115.8 (C-2), 61.6 (C-8), 14.6 (C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[48]，故鑒定化合物30為3-ethoxy-4-hydroxy- benzoic acid。

化合物31：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C9H10O5；HR-ESI-MS199.060 2 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.04 (2H, s, H-2, 6), 4.25 (2H, q,= 7.1 Hz, H-8), 1.32 (3H, t,= 7.1 Hz, H-9)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 168.6 (C-7), 146.4 (C-3, 5), 139.6 (C-4), 121.7 (C-1), 110.0 (C-2, 6), 61.7 (C-8), 14.6 (C-9)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[49]，故鑒定化合物31為沒食子酸乙酯。

化合物32：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C13H18O6；HR-ESI-MS271.117 3 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.41 (2H, d,= 7.3 Hz, H-2, 6), 7.31 (2H, t,= 7.3 Hz, H-3, 5), 7.26 (1H, t,= 7.3 Hz, H-4), 4.92 (1H, d,= 11.8 Hz, H-7), 4.66 (1H, d,= 11.8 Hz, H-7), 4.34 (1H, d,=7.7 Hz, H-1), 3.89 (1H, dd,= 11.9, 2.1 Hz, H-6), 3.67 (1H, dd,= 11.9, 5.7 Hz, H-6), 3.33 (1H, m, H-5), 3.28 (1H, m, H-4), 3.26 (1H, m, H-3), 3.23 (1H, m, H-2)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 139.1 (C-1), 129.3 (C-3, 5), 129.2 (C-2, 6), 128.7 (C-4), 103.3 (C-1), 78.1 (C-3), 78.0 (C-5), 75.1 (C-2), 71.7 (C-7, 4), 62.8 (C-6)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[50]，故鑒定化合物32為benzyl βglucopyranoside。

化合物33：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C14H20O8；HR-ESI-MS317.123 3 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.85 (1H, d,= 8.7 Hz, H-3), 6.81 (1H, brs, H-6), 6.66 (1H, brd,= 8.7 Hz, H-2), 4.77 (1H, d,= 7.0 Hz, H-1), 3.80 (3H, s, 4-OCH3), 3.77 (3H, s, 5-OCH3)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 154.0 (C-1), 151.1 (C-5), 146.0 (C-4), 113.9 (C-3), 109.3 (C-2), 104.1 (C-6), 103.5 (C-1), 78.2 (C-5), 78.0 (C-3), 75.0 (C-2), 71.6 (C-4), 62.6 (C-6), 57.1 (4-OCH3), 56.4 (5-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[51]，故鑒定化合物33為3,4- dimethoxyphenyl-βglucopyranoside。

化合物34：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C15H20O8；HR-ESI-MS329.123 3 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.64 (1H, dd,= 8.5, 2.0 Hz, H-6), 7.57 (1H, d,= 2.0 Hz, H-2), 7.22 (1H, d,= 8.5 Hz, H-5), 5.03 (1H, d,= 7.6 Hz, H-1), 3.90 (3H, s, 3-OCH3), 3.88 (1H, dd,= 12.2, 2.3 Hz, H-6), 3.69 (1H, dd,= 12.2, 5.7 Hz, H-6), 3.53 (1H, m, H-5), 3.48 (1H, m, H-4), 3.46 (1H, m, H-3), 3.40 (1H, m, H-2), 2.56 (3H, s, H-8)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 199.4 (C-7), 152.5 (C-4), 150.6 (C-3), 132.9 (C-1), 124.4 (C-6), 116.2 (C-5), 112.4 (C-2), 101.8 (C-1), 78.4 (C-3), 77.9 (C-5), 74.7 (C-2), 71.2 (C-4), 62.4 (C-6), 56.6 (3-OCH3), 26.4 (C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[52]，故鑒定化合物34為草夾竹桃苷。

化合物35：黃色無定形固體（甲醇），分子式為C15H14O6；HR-ESI-MS291.086 6 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.97 (1H, d,= 1.7 Hz, H-2), 6.78 (1H, dd,= 8.2, 1.7 Hz, H-6), 6.75 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 5.93 (1H, d,= 2.2 Hz, H-8), 5.91 (1H, d,= 2.2 Hz, H-6), 4.80 (1H, s, H-2), 4.17 (1H, brs, H-3), 2.85 (1H, dd,= 16.7, 4.6 Hz, H-4), 2.73 (1H, dd,= 16.7, 2.8 Hz, H-4)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 158.0 (C-7), 157.6 (C-5), 157.4 (C-9), 145.9 (C-4), 145.8 (C-3), 132.3 (C-1), 119.4 (C-6), 115.9 (C-2), 115.3 (C-5), 100.1 (C-10), 96.4 (C-6), 95.9 (C-8), 79.9 (C-2), 67.5 (C-3), 29.2 (C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[53]，故鑒定化合物35為表兒茶素。

化合物36 黃色無定形固體（甲醇），分子式為C20H20O11；HR-ESI-MS437.107 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 6.98 (1H, brs, H-2), 6.82 (1H, dd,= 8.2, 1.4 Hz, H-6), 6.72 (1H, d,= 8.2 Hz, H-5), 5.92 (1H, brs, H-8), 5.89 (1H, d,= 1.6 Hz, H-6), 5.42 (1H, d,= 2.7 Hz, H-2), 4.54 (1H, d,= 2.7 Hz, H-3), 4.53 (1H, d,= 7.0 Hz, H-1), 3.66 (1H, dd,= 11.6, 5.0 Hz, H-5), 3.41 (1H, m, H-4), 3.28 (1H, m, H-3), 3.18 (1H, dd,= 8.6, 7.0 Hz, H-2), 3.10 (1H, dd,= 11.6, 9.2 Hz, H-5)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 194.4 (C-4), 168.8 (C-7), 165.9 (C-5), 164.2 (C-9), 146.5 (C-4), 145.9 (C-3), 128.4 (C-1), 120.4 (C-6), 116.1 (C-5), 115.8 (C-2), 103.4 (C-1), 102.2 (C-10), 97.2 (C-6), 96.4 (C-8), 82.0 (C-2), 77.0 (C-3), 76.5 (C-3), 74.4 (C-2), 71.1 (C-4), 66.6 (C-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[54]，故鑒定化合物36為taxifolin-3βxylopyranoside。

化合物37：白色固體（甲醇），分子式為C20H26O6；HR-ESI-MS363.180 5 [M＋H]+。1H-NMR (600 MHz, CD3OD): 7.06 (2H, d,= 8.2 Hz, H-2, 6), 6.74 (1H, d,= 1.8 Hz, H-2), 6.69 (2H, d,= 8.2 Hz, H-3, 5), 6.67 (1H, overlapped, H-5), 6.60 (1H, dd,= 8.0, 1.8 Hz, H-6), 3.89 (1H, m, H-5), 3.80 (3H, s, 3-OCH3), 3.65 (1H, m, H-3), 3.58 (1H, m, H-2), 2.78 (1H, dd,= 13.8, 5.3 Hz, H-1), 2.65 (1H, m, H-7), 2.61 (1H, m, H-1), 2.54 (1H, ddd,= 13.9, 9.8, 6.5 Hz, H-7), 1.74 (1H, m, H-4), 1.70 (2H, m, H-6), 1.66 (1H, m, H-4)；13C-NMR (150 MHz, CD3OD): 156.6 (C-4), 148.8 (C-3), 145.4 (C-4), 135.2 (C-1), 131.4 (C-1, 2, 6), 121.8 (C-6), 116.1 (C-3, 5), 116.0 (C-5), 113.1 (C-2), 76.4 (C-2), 72.9 (C-3), 70.7 (C-5), 56.3 (3-OCH3), 40.9 (C-4), 40.8 (C-6), 39.6 (C-1), 32.3 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報道基本一致[55]，故鑒定化合物37為rhoiptelol C。

4 體外神經(jīng)保護(hù)活性

細(xì)胞培養(yǎng)于含10%胎牛血清、1%青霉素-鏈霉素的RPMI 1640培養(yǎng)基中（37 ℃、5% CO2）。本實(shí)驗(yàn)稱取已分離得到的單體化合物各0.5～1.0 mg，RPMI 1640培養(yǎng)基充分溶解后，配制成濃度為1 mmol/L的母液，?20 ℃下冰箱保存?zhèn)溆谩?shù)生長期的PC12細(xì)胞（大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞系；購自于武漢大學(xué)細(xì)胞保藏中心）以1×104個/孔接種96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，過夜培養(yǎng)。次日，每孔細(xì)胞用終濃度為100 μmol/L的H2O2刺激24 h后，加入濃度為6.25 μmol/L的待篩選化合物和陽性對照藥維生素E（VE），37 ℃、5%CO2條件繼續(xù)培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)結(jié)束后，用酶標(biāo)儀在450 nm下檢測各孔吸光度（）值。CCK8法檢測各化合物處理組的細(xì)胞生存率。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以表示。使用SPSS 18.0軟件，采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。

相對生存率＝各處理組/未處理組

結(jié)果（表1）顯示，在6.25 μmol/L時，苯丙素類化合物3、10、17細(xì)胞存活率較高；同時，推測可能與化合物中羰基的存在有關(guān)。

5 討論

本研究對五味子根進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分分離，采用1D-NMR及2D-NMR波譜學(xué)手段并結(jié)合HR-ESI-MS質(zhì)譜數(shù)據(jù)，共鑒定出37個化合物。其中19個化合物在該科植物中首次發(fā)現(xiàn)，11個化合物在該屬植物中首次發(fā)現(xiàn)。苯丙素類化合物為五味子植物中最主要的有效成分之一，含量較大，且結(jié)合文獻(xiàn)報道在神經(jīng)保護(hù)方面具有較好活性。故本實(shí)驗(yàn)采用CCK8法，測定苯丙素類化合物對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的體外神經(jīng)保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)在不同濃度下，苯丙素類化合物均表現(xiàn)出不同程度的體外神經(jīng)保護(hù)作用，其中化合物3、10、17在6.25 μmol/L濃度下表現(xiàn)出顯著的神經(jīng)保護(hù)活性。本研究評價了五味子根中分離得到的苯丙素類化合物對H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的體外神經(jīng)保護(hù)作用，為今后五味子的利用和開發(fā)提供了初步的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。同時推測化合物中羰基的存在可能有助于H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的體外神經(jīng)保護(hù)作用。

表1 化合物1～22對H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)作用(, n＝3)

Table 1 Neuroprotective effect of compounds 1—22 on PC12 cells-induced by H2O2 (, n＝3)

組別細(xì)胞生存率/%組別細(xì)胞生存率/% 對照100.00±1.091153.92±3.55 模型 42.53±4.161234.85±3.36 陽性對照 70.04±4.711341.11±3.22 1 26.93±2.591422.83±2.49 2 23.50±1.641534.52±3.64 3 64.39±5.321628.10±2.59 4 34.66±3.751764.39±5.46 5 11.29±1.351834.66±2.48 6 22.73±2.561950.53±5.34 7 34.52±2.772050.99±5.12 8 28.10±2.442119.01±3.25 9 47.70±2.692219.48±1.69 10 63.63±5.29

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 中國藥典[S]. 一部. 2020: 68.

[2] 茹意, 樊慧杰, 柴智, 等. 五味子醇甲對中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥理作用研究進(jìn)展 [J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2022, 40(7): 182-185.

[3] 熊剛, 鄒華, 胡承蓮, 等. 基于HMGB1/TLR4信號通路評價五味子乙素對2型糖尿病腎病大鼠腎臟功能的保護(hù)作用 [J]. 醫(yī)學(xué)研究雜志, 2019, 48(3): 140-143.

[4] 劉威, 張茜, 張成義. 五味子對心血管系統(tǒng)作用的研究 [J]. 北華大學(xué)學(xué)報: 自然科學(xué)版, 2011, 12(1): 47-49.

[5] 呂秀平. 探討五味子對心血管保護(hù)作用的機(jī)理 [J]. 人人健康, 2016(8): 202.

[6] 宋昌梅, 杲春陽, 付燕來, 等. 淫羊藿-五味子藥對治療非酒精性脂肪肝機(jī)制的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究[J]. 世界中醫(yī)藥, 2021, 16(14): 2067-2072.

[7] 賴思幀, 趙軒竹, 王俊英, 等. 五味子甲素抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究進(jìn)展 [J]. 中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志, 2021, 27(6): 928-931.

[8] 譚暉, 王吉昌, 董丹鳳, 等. 五味子酯甲通過抑制CCAT1和PI3K-AKT信號通路抑制肺癌細(xì)胞的遷移和侵襲[J]. 世界中醫(yī)藥, 2021, 16(13): 1966-1971.

[9] 劉靜, 胡迪, 趙夢丹, 等. 五味子多糖抗衰老作用研究進(jìn)展 [J]. 吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報, 2022, 43(4): 279-282.

[10] 謝曉莉, 王萍. 五味子的生物活性成分、生物學(xué)功能及其在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用 [J]. 飼料研究, 2022, 45(13): 156-159.

[11] 劉媛媛, 黃仕其, 李玉澤, 等. 五味子屬植物木脂素類化學(xué)成分及其藥理作用研究進(jìn)展[J]. 中草藥, 2022, 53(6): 1903-1918.

[12] 林河煒, 劉澤潤, 林虹敏, 等. 五味子木脂素的藥理作用及其代謝途徑和代謝產(chǎn)物研究進(jìn)展 [J]. 特產(chǎn)研究, 2021, 43(5): 100-105.

[13] 丁璞, 王冰, 宋新, 等. HPLC測定五味子根莖葉中6種木脂素含量 [J]. 中國中藥雜志, 2013, 38(13): 2078-2081.

[14] 張?zhí)m杰, 張維華, 趙珊紅. 北五味子果實(shí)中多糖的提取與純化研究 [J]. 鞍山師范學(xué)院學(xué)報, 2002, 4(1): 58-60.

[15] 楊炳友, 常遠(yuǎn)航, 劉艷, 等. 五味子果?；瘜W(xué)成分的分離鑒定 [J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2018, 24(10): 49-54.

[16] 劉艷, 陳張林, 吳丹丹, 等. 五味子藤莖中萜類和木脂素類成分的研究 [J]. 中成藥, 2021, 43(6): 1484-1493.

[17] 楊炳友, 陳張林, 劉艷, 等. 五味子藤莖化學(xué)組分的拆分與分析 [J]. 中成藥, 2017, 39(11): 2334-2340.

[18] Liu Y, Liu G Z, Li X M,. Anti-proliferative properties of schinensilactone A, A schinortriterpenoid with 7,8-seco-1, 8-cyclo scaffold against caco-2 by inducing cell apoptosis from the leaves of[J]., 2022, 40(11): 1331-1336.

[19] Bai J T, Liu Y, Sun Y P,. Two new quinic acid derivatives from the leaves of[J]., 2022, 24(7): 657-662.

[20] 黃鷹, 常睿潔, 金慧子, 等. 觀光木酚性成分研究(英文) [J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā), 2012, 24(2): 176-178.

[21] 趙亞, 原忠. 北沙參中一個新香豆素苷 [J]. 藥學(xué)學(xué)報, 2007, 42(10): 1070-1073.

[22] Wu P L, Hsu Y L, Zao C W,. Constituents of-and their biological activities [J]., 2005, 68(8): 1180-1184.

[23] 王威, 劉小紅, 高華, 等. 東北鐵線蓮地上部位化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2014, 45(17): 2440-2446.

[24] 王春華, 王英, 王國才, 等. 牛大力的化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2008, 39(7): 972-975.

[25] 崔澤旭, 徐嵬, 楊秀偉, 等. 細(xì)葉十大功勞莖水提取物脂溶性部位的化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2018, 49(1): 80-89.

[26] 王躍虎, 張仲凱, 何紅平, 等. 白粉藤的木脂素和三萜成分(英文) [J]. 云南植物研究, 2006(4): 433-437.

[27] 蔣芝華, 馮興陽, 郭微, 等. 定心藤枝葉中化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2018, 49(2): 282-287.

[28] Le H T, Ha D T, Minh C T A,. Constituents from the stem barks ofwith cytoprotective activity against hydrogen peroxide-induced hepatotoxicity [J]., 2012, 35(1): 87-92.

[29] 董禮, 陳敏, 李梅, 等. 柴胡紅景天中一個新氰苷類化合物 [J]. 藥學(xué)學(xué)報, 2009, 44(12): 1383-1386.

[30] 方振峰, 凌志群, 施璐, 等. 大八角枝葉化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2018, 49(5): 1019-1024.

[31] Youssef D, Frahm A W. Constituents of the Egyptian. III. Phenolic constituents of the aerial parts [J]., 1995, 61(6): 570-573.

[32] Rastrelli L, de Simone F, Mora G,. Phenolic constituents of[J]., 2001, 64(1): 79-81.

[33] 李廷釗, 張衛(wèi)東, 顧正兵, 等. 糙葉敗醬中木脂素成分研究 [J]. 藥學(xué)學(xué)報, 2003, 38(7): 520-522.

[34] Bhatarrai G, Seong S H, Jung H A,. Isolation and quantitative analysis of BACE1 inhibitory compounds fromflower [J]., 2019, 25(4): 326.

[35] 劉欣, 葉文才, 車鎮(zhèn)濤, 等. 瑞香狼毒的木脂素類成分研究 [J]. 中國藥科大學(xué)學(xué)報, 2003, 34(2): 116-118.

[36] Sch?ttner M, Reiner J, Tayman F S K. (+)-neo-olivil from roots of[J]., 1997, 46(6): 1107-1109.

[37] Ban N K, Thoa N T K, Linh T M,. Chemical constituents ofleaves [J]., 2018, 13(2): 1934578X1801300.

[38] Yang B Y, Guo J T, Li Z Y,. New thymoquinol glycosides and neuroprotective dibenzocyclooctane lignans from the rattan stems of[J]., 2016, 13(9): 1118-1125.

[39] 劉海濤, 李興博, 張進(jìn), 等. 華中五味子果實(shí)石油醚部位化學(xué)成分的研究 [J]. 中國中藥雜志, 2012, 37(11): 1597-1601.

[40] 楊炳友, 楊春麗, 劉艷, 等. 洋金花根中苯丙素類化學(xué)成分研究 [J]. 中草藥, 2017, 48(14): 2820-2826.

[41] Jiang H, Yang L, Ma G X,. New phenylpropanoid derivatives from the fruits ofand their anti-inflammatory activity [J]., 2017, 117: 11-15.

[42] Feng W S, He Y H, Zheng X K,. Four new monoterpenoid glycosides from the flower buds of[J]., 2016, 21(6): 728.

[43] 曲揚(yáng). 多葉姜黃的化學(xué)成分研究 [D]. 沈陽: 沈陽藥科大學(xué), 2009.

[44] Orihara Y, Noguchi T, Furuya T. Biotransformation of (+)-camphor by cultured cells of[J]., 1994, 35(4): 941-945.

[45] Kim K H, Choi J W, Choi S U,. Terpene glycosides and cytotoxic constituents from the seeds of[J]., 2010, 76(5): 461-464.

[46] Calis I, Heilmann J, Tasdemir D,. Flavonoid, iridoid, and lignan glycosides from[J]., 2001, 64(7): 961-964.

[47] 鄒旭, 梁健, 丁立生, 等. 雞屎藤化學(xué)成分的研究 [J]. 中國中藥雜志, 2006, 31(17): 1436-1441.

[48] 榮光慶, 耿長安, 馬云保, 等. 合歡花乙酸乙酯部位化學(xué)成分研究 [J]. 中國中藥雜志, 2014, 39(10): 1845-1851.

[49] 田童, 王崢濤, 楊穎博. 塊根糙蘇化學(xué)成分及降糖活性研究[J]. 中草藥, 2020, 51(12): 3131-3138.

[50] 劉燕, 王志堯, 賀文軍, 等. 小蕓木莖和葉中化學(xué)成分研究(英文) [J]. 藥學(xué)學(xué)報, 2015, 50(4): 475-479.

[51] 柳航, 郭培, 張東明. 黃皮莖化學(xué)成分的研究 [J]. 中成藥, 2017, 39(6): 1203-1206.

[52] 楊炳友, 盧震坤, 劉艷, 等. 洋金花莖化學(xué)成分的分離鑒定 [J]. 中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2017, 23(17): 34-40.

[53] 張云封,昝妮利, 朱枝祥, 等. 苗藥血人參中黃酮類化學(xué)成分研究[J]. 中草藥, 2021, 52(12): 3485-3492.

[54] 成煥波, 劉新橋, 陳科力. 杠板歸乙酸乙酯部位化學(xué)成分研究 [J]. 中藥材, 2012, 35(7): 1088-1090.

[55] Jiang Z H, Tanaka T, Hirata H,. Three diarylheptanoids from[J]., 1996, 43(5): 1049-1054.

Chemical constituents from roots of

LIU Yan, LIU Shuang, PENG Zi-qi, WANG Si-yi, JIANG Yi-kai, PAN Juan, GUAN Wei, HAO Zhi-chao, KUANG Hai-xue, YANG Bing-you

Key Laboratory of Basic and Application Research of Beiyao, Ministry ofEducation, Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin 150040, China

To study the chemical constituents from the roots of, and the neuroprotective effect of phenylpropanoid chemical constituents.The chemical constituents from the roots ofwere isolated with silica gel, MCI, ODS, Sephadex LH-20 column chromatographies together with HPLC, and their structures were determined by entirely analyzing MS and NMR spectrums. The neuroprotective effect of the isolated compounds on PC12 cells induced by H2O2was evaluated by the CCK8 method.A total of 37 compounds were isolated and identified from the roots of, including 22 phenylpropanoids: c-veratroylglycol (1), baihuaqianhuaside (2), methyl-4comaroy-lquinate (3), 7,8-- 4,7,9,9′-tetrahydroxy-3,3′-dimethoxy-84′-neolignan (4), dihydrodehydro-diconiferyl alcohol (5), (?)-secoisolariciresinol (6), (?)-secoisolariciresinol-9βxylopyranoside (7), (＋)-isolariciresinol (8),-isolariciresinol-9βxylopyranoside (9), schizandriside (10), (?)-massoniresinol (11), (?)-matairesinol (12), 2-hydroxy-2-(3′,4′-dihydroxyphenyl)methyl-3-(3′′,4′′- dimethoxyphenyl)methyl--butyrolactone (13), nortra-cheloside (14), tracheloside (15), arctiin (16), (＋)-neo-olivil (17), matairesinol4βglucopyranoside (18), 3,7-dihydroxy-1,2,13,14-tetramethoxydibenzo-cyclooctadiene12βglucopyranoside (19), schisantherin D (20), leptolepisol D (21), xanthiumnolic C (22), seven monoterpenoids:-sobrerol (23), magnoliaterpenoid C (24), (1,2,4)-2-hydroxy-1,8-cineole-βglucopyranoside (25), (1,4,6)-6-hydroxy-bornan-2-one-6βglucopyranoside (26), (1,4,5)-5-endo-hydroxycamphor5βglucopyraoside (27), paederoside (28), paediatrics acid methyl ester (29), five aromatics: 3-ethoxy-4-hydroxy-benzoic acid (30), ethyl gallate (31), benzyl βglucopyranoside (32), 3,4-dimethoxyphenyl-βglucopyranoside (33), androsin (34), two flavonoids: epicatechin (35), taxifolin-3βxylopyranoside (36), and one diarylheptane-type compound: rhoiptelol C (37).Compounds 1—3, 6—7, 13—17, 21, 25—31 and 37 are isolated from Magnoliaceae for the first time. Compounds 4—5, 9—12, 22—23, 32, 34 and 36 are isolated fromfor the first time, and compounds 8, 18, 33 and 35 are isolated fromfor the first time.cellular neuroprotective activity studies showed that the phenylpropanoids 3,10 and 17 exhibited significantcytoprotective activity at 6.25 μmol/L.

Magnoliaceae;(Turcz.) Baill.;phenylpropanoids; neuroprotection; c-veratroylglycol; dihydrodehydro-diconiferyl alcohol

R284.1

A

0253 - 2670(2022)19 - 5959 - 13

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.19.003

2022-05-23

黑龍江省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目（GA21D008）；青年人才托舉工程（2021-QNRC2-B10）；黑龍江省“頭雁”團(tuán)隊(duì)；黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)?；穑?018pt01，2018bs03）

劉 艷（1987—），博士，副教授，主要研究方向?yàn)橹兴幩幮镔|(zhì)基礎(chǔ)研究。E-mail: lifeliuyan@163.com

楊炳友（1970—），博士，教授，主要研究方向?yàn)橹兴幩幮镔|(zhì)基礎(chǔ)研究。Tel: (0451)82193007 E-mail: ybywater@163.com

[責(zé)任編輯 王文倩]