辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝及其抗氧化活性分析

王標(biāo)詩(shī)，黃澔楊，譚文慧，劉淑敏，張世奇，韓志萍，彭元懷

辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝及其抗氧化活性分析

王標(biāo)詩(shī)1,2，黃澔楊1，譚文慧1，劉淑敏1,2，張世奇1,2，韓志萍1,2，彭元懷1,2

1. 嶺南師范學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東湛江 524048；2. 廣東省辣木資源開(kāi)發(fā)與利用工程技術(shù)研究中心，廣東湛江 524048

超高壓輔助提取技術(shù)是一種天然產(chǎn)物新型綠色高效提取技術(shù)，在保證提取效率的同時(shí)能最大限度保持天然產(chǎn)物的生物活性。為探究超高壓輔助提取技術(shù)對(duì)辣木籽多糖的提取效果及其抗氧化活性的影響，本研究以辣木籽為原料，通過(guò)超高壓輔助提取技術(shù)提取辣木籽中的水溶性多糖，以多糖得率為考察指標(biāo)，以提取壓力、提取時(shí)間、料液比、粉碎度作為單因素，在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法優(yōu)化辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝，并通過(guò)測(cè)定總抗氧化能力、清除DPPH自由基（DPPH?）和羥自由基（?OH）的能力來(lái)分析辣木籽水溶性多糖的抗氧化活性。結(jié)果表明，辣木籽多糖最佳的超高壓輔助提取工藝條件為：提取壓力100 MPa、保壓時(shí)間6 min、料液比（g/mL）1∶15、粉碎度100目篩，在最佳提取工藝條件下辣木籽多糖最大提取得率為0.346%；在測(cè)試范圍內(nèi)辣木籽多糖清除DPPH自由基能力隨多糖濃度的增加而增加，并有較好的線性關(guān)系，清除率達(dá)到50%時(shí)對(duì)應(yīng)的濃度（IC50）為0.0439 g/L，但是其抗氧化能力低于相同濃度的Vc，在測(cè)試范圍內(nèi)清除羥自由基能力也隨辣木籽多糖濃度的增加而增加，也有較好的線性關(guān)系，IC50為0.1666 g/L，其抗氧化能力與同濃度的Vc較接近，辣木籽多糖的總抗氧化能力為0.0482 mmol/L（以硫酸亞鐵的當(dāng)量濃度表示）。與熱水提取方法相比，超高壓輔助提取方法能夠縮短提取時(shí)間，提取溫度大大降低，提取效率顯著提高；而且提取的辣木籽水溶性多糖具有較好的抗氧化能力，可以作為天然抗氧化劑進(jìn)行開(kāi)發(fā)利用。本研究結(jié)果可為天然抗氧化劑的開(kāi)發(fā)、辣木資源的綜合開(kāi)發(fā)及高值化利用提供技術(shù)支持和參考。

辣木籽；水溶性多糖；超高壓輔助提??；抗氧化活性

辣木（）屬被子門辣木科辣木屬植物，起源于印度，目前，辣木樹(shù)在非洲及世界熱帶、亞熱帶地區(qū)均有種植，被稱為“窮人的牛奶樹(shù)”“奇跡之樹(shù)”[1-2]。辣木樹(shù)渾身是寶，其葉子、花、嫩豆莢、籽均可直接食用。辣木被譽(yù)為植物中的“鉆石”，與西洋參、靈芝合稱為“世界三寶”，受到了醫(yī)學(xué)界、食品界以及營(yíng)養(yǎng)學(xué)界的高度重視。與普通的食品相比，辣木中蛋白質(zhì)、膳食纖維及鈣等礦物質(zhì)元素含量較高，營(yíng)養(yǎng)成分豐富[3]。辣木的種子即為辣木籽，辣木籽中除了含有豐富的蛋白質(zhì)、油脂及礦物元素，還有多糖等活性物質(zhì)[3-4]，可用于食品、醫(yī)藥等方面，具有良好的開(kāi)發(fā)價(jià)值和應(yīng)用前景。

近年來(lái)，從天然植物中開(kāi)發(fā)利用活性多糖成為新的研究熱點(diǎn)，常見(jiàn)的多糖提取方法有很多種，如醇提法、熱水浸提法、酶提法、微波法和超聲波法等，但是大多存在提取率低、耗時(shí)較長(zhǎng)和對(duì)多糖結(jié)構(gòu)和功能造成破壞等缺點(diǎn)[5]。而超高壓提取技術(shù)具有效率高、用時(shí)短和破壞性低等優(yōu)點(diǎn)。目前關(guān)于超高壓輔助提取多糖的研究比較少[6]。從天然產(chǎn)物中提取的多糖，在抗氧化、抗腫瘤、降血糖、降血脂等方面均有較好的效果[5]。

對(duì)辣木葉和辣木籽中多糖的提取已有相關(guān)報(bào)道，如陳瑞嬌[7]和孫鳴燕[8]分別研究了辣木葉多糖的提取工藝條件；董成國(guó)[9]研究了熱水提取辣木籽多糖的工藝條件及其抗氧化活性；CHEN等[10]研究了微波輔助提取辣木葉水溶性多糖的工藝條件及其降糖活性，而利用超高壓輔助提取辣木籽多糖的研究尚無(wú)報(bào)道。

本文以辣木籽為原料，對(duì)辣木籽多糖的超高壓輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并研究辣木籽多糖的抗氧化活性?？蔀槔蹦举Y源的綜合開(kāi)發(fā)和高值化利用提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 植物材料 辣木籽購(gòu)于湛江市旭昇南藥種植專業(yè)合作社。

1.1.2 主要試劑 1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH自由基）分裝產(chǎn)品購(gòu)自Sigma公司；總抗氧化能力（T-AOC）測(cè)試盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所；其他化學(xué)試劑均為分析純。

1.1.3 主要設(shè)備 DFY-800搖擺式高速萬(wàn)能粉碎機(jī)，購(gòu)自溫嶺市林大機(jī)械有限公司；FA1004N電子天平，購(gòu)自上海精密科學(xué)儀器有限公司；W1-400/1.0型超高壓試驗(yàn)殺菌機(jī)，購(gòu)自天津華泰森淼生物工程技術(shù)股份有限公司；TU-1810DASPC紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，購(gòu)自北京普析通用儀器有限公司；TGL16M高速冷凍離心機(jī)，購(gòu)自鹽城市凱特實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；RE-2000B旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，購(gòu)自上海亞榮生化儀器廠；DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，購(gòu)自上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；SHZ-D3循環(huán)水式真空泵，購(gòu)自鞏義市英峪儀器廠；HZS-HA水浴振蕩器，購(gòu)自哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司；ELX808IU酶標(biāo)儀，購(gòu)自美國(guó)Bio-Tek公司。

1.2 方法

1.2.1 原料預(yù)處理 選擇色澤均勻、無(wú)蟲蛀、無(wú)霉變的辣木籽，置于55℃干燥箱中烘72 h，冷卻后用高速萬(wàn)能粉碎機(jī)進(jìn)行破碎；然后把辣木籽粉置于55℃的干燥箱中烘2 h，冷卻后用索氏抽提器脫脂處理，殘留物干燥過(guò)篩備用。

1.2.2 辣木籽多糖測(cè)定 參考梁琰等[11]的方法。分別取0.1 g/L葡萄糖溶液0、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL，用蒸餾水補(bǔ)足至1.00 mL，分別加入5.00 mL濃硫酸及1.00 mL 5%苯酚，每根試管加完后一起放置在90℃熱水中水浴15 min，然后取出冷卻至室溫，于490 nm測(cè)吸光度。多糖得率的計(jì)算公式如下：

式中，表示從標(biāo)準(zhǔn)曲線中求出的辣木籽多糖質(zhì)量（g），0表示辣木籽粉總質(zhì)量（g）。

1.2.3 辣木籽多糖超高壓輔助提取工藝 參考奚灝鏘等[12]的方法。稱取預(yù)處理后的脫脂辣木籽粉3 g，按不同料液比加入一定體積的水，裝袋封口（盡量排出空氣），放入超高壓設(shè)備，按照不同壓力和保壓時(shí)間進(jìn)行超高壓處理。處理后進(jìn)行抽濾，取上清液與Sevage試劑混合（脫蛋白），振搖30 min后離心：3500 r/min離心15 min，取上清液在低溫下醇沉24 h，于20℃ 9000 r/min條件下離心10 min，沉淀物為辣木籽多糖，然后加蒸餾水溶解再定容至100 mL。

單因素試驗(yàn)分別探討料液比、壓力、保壓時(shí)間和粉碎度對(duì)辣木籽多糖提取率的影響。料液比（g/mL）分別選取1∶15、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40；保壓時(shí)間分別選取0、2、4、6、8、10 min；壓力分別選取50、100、150、200、250、300、350、400 MPa；粉碎度分別選取過(guò)篩20、40、60、80、100目。

在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，選取對(duì)辣木籽多糖得率影響比較大的3個(gè)因素（料液比、提取壓力和保壓時(shí)間）作為考察因素，每個(gè)因素選取3個(gè)水平設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，以多糖得率為試驗(yàn)指標(biāo)，優(yōu)化提取工藝。正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素與水平如表1所示。

表1 正交試驗(yàn)因素與水平

1.2.4 辣木籽多糖熱水提取工藝 參考王麗波等[13]的方法，略有修改。稱取3 g辣木籽粉（精確到0.0001 g），量取45 mL水，在溫度為90℃下提取4 h；趁熱抽濾，取上清液與Sevage試劑混合（脫蛋白），振搖30 min后離心：3500 r/min離心15 min，取上清液醇沉24 h，于20℃ 9000 r/min離心10 min，棄上清液，取沉淀加蒸餾水定容至100 mL，以苯酚硫酸法測(cè)吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖得率。

1.2.5 辣木籽多糖清除DPPH自由基的測(cè)定 參考王麗波等[13]的方法。取多糖溶液2 mL于試管中，加入2 mL 0.3 mol/L DPPH，于暗處反應(yīng)30 min，在517 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（i）；再取上述2 mL多糖液，加入無(wú)水乙醇2 mL，反應(yīng)30 min，在517 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度（j）；取DPPH 2 mL，加入無(wú)水乙醇2 mL，反應(yīng)30 min測(cè)定吸光度（0）。每個(gè)濃度的樣品測(cè)定3次，然后取平均值。以VC作陽(yáng)性對(duì)照。DPPH自由基清除率計(jì)算公式如下：

1.2.6 辣木籽多糖清除羥自由基的測(cè)定 參考WANG等[14]的方法。根據(jù)鄰二氮菲-鐵離子-過(guò)氧化氫體系，取2.0 mL pH為7.4的0.05 mol/L磷酸緩沖鹽溶液（PBS）于試管中，加1.5 mL 0.005 mol/L鄰二氮菲溶液后充分混合均勻，加1.0 mL 0.0075 mol/L硫酸亞鐵溶液，立刻混合均勻，再加1.0 mL 0.1%過(guò)氧化氫，最后用蒸餾水補(bǔ)定容至10 mL，反應(yīng)液置于37℃的水浴鍋中保溫1 h，于536 nm處測(cè)吸光度，按1.2.5方法，分別加入不同濃度多糖溶液，37℃水浴鍋中保溫1 h，測(cè)吸光度。羥自由基清除率計(jì)算公式如下：

式中，損傷為加過(guò)氧化氫未加樣品所測(cè)得的吸光度，加樣為加過(guò)氧化氫和樣品所測(cè)得的吸光度，未損傷為未加過(guò)氧化氫和樣品所測(cè)得的吸光度。

1.2.7 辣木籽多糖總抗氧化性（T-AOC）的測(cè)定 參照試劑盒說(shuō)明書及相關(guān)操作測(cè)定。FRAP法測(cè)定辣木籽水溶性多糖的總抗氧化能力的原理是在酸性條件下抗氧化物質(zhì)可以還原Fe3+-TPTZ產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ，在593 nm處讀取吸光度可以計(jì)算出樣品中的總抗氧化能力。首先把試劑1、試劑2、試劑3按10∶1∶1比例配成FRAP工作液，避光37℃保溫，現(xiàn)配現(xiàn)用。稱取27.8 mg的FeSO4·7H2O，溶解后定容至1 mL，此時(shí)濃度為100 mmol/L。取上述配好的FeSO4·7H2O溶液稀釋至0.15、0.30、0.60、0.90、1.20 mmol/L。最后按照說(shuō)明書添加試劑到96孔板，在37℃下孵育5 min，最后置于酶標(biāo)儀測(cè)定各孔值（即吸光度）。

1.3 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)重復(fù)測(cè)定3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。采用Excel軟件等對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 多糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

以吸光度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液濃度為橫坐標(biāo)，所得其線性回歸方程為=0.9221– 0.0029，相關(guān)系數(shù)為0.9992（圖1），說(shuō)明在測(cè)定的濃度范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系較好、準(zhǔn)確度高，可以用于辣木籽多糖含量的測(cè)定。

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 辣木籽多糖超高壓輔助提取單因素試驗(yàn)

2.2.1 壓力對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖2可知，多糖提取得率在處理壓力為100 MPa時(shí)達(dá)到最高，在50～100 MPa時(shí)提取得率隨壓力的增大而增大；在100～400 MPa時(shí)提取得率隨壓力的增大而減小?；诔邏禾崛≡恚谛∮?00 MPa時(shí)，壓力越大，超高壓提取的效果越顯著（<0.05）；在大于100 MPa時(shí)，由于壓力過(guò)大，辣木籽細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)有所損壞，再增加壓力，反而有部分水溶性雜質(zhì)被釋放出來(lái)，同時(shí)，辣木籽多糖黏度也會(huì)提高，從而使擴(kuò)散速率降低，在卸壓的時(shí)候無(wú)法隨著滲透壓將細(xì)胞內(nèi)的多糖物質(zhì)輸送出去，因此多糖得率有所下降。

圖2 提取壓力對(duì)辣木籽多糖得率的影響

2.2.2 時(shí)間對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖3可知，在前2 min內(nèi)隨著保壓時(shí)間的增加，辣木籽水溶性多糖的提取得率逐漸增加，2 min后隨時(shí)間的增加辣木籽多糖得率呈緩慢下降趨勢(shì)，下降幅度不大，在2 min時(shí)提取得率最大，其余時(shí)間均高于保壓0 min（升壓后立即泄壓）的結(jié)果。其原因可能是隨著保壓時(shí)間的增加，在長(zhǎng)時(shí)間的超高壓處理下，辣木籽細(xì)胞膜通透性變差，影響了卸壓時(shí)多糖的滲透速度。

圖3 時(shí)間對(duì)辣木籽多糖得率的影響

2.2.3 料液比對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖4可知，辣木籽水溶性多糖的提取得率隨著料液比的增加呈先輕微增加而后逐漸降低的趨勢(shì)，在1∶20時(shí)達(dá)到最高得率；而1∶20和1∶15兩個(gè)條件下的多糖得率相差不大，無(wú)明顯差異（<0.05），可能是在此范圍內(nèi)能提取到的多糖量基本上達(dá)到最大，多糖得率無(wú)明顯變化。料液比在1∶20～1∶40之間，隨著溶劑量的減少，卸壓時(shí)所提供的滲透壓增大，同時(shí)，水溶性多糖基本完全溶出，如再繼續(xù)增加溶劑量，多糖量不變，而溶劑會(huì)增加，故其濃度反而會(huì)降低。

圖4 料液比對(duì)辣木籽多糖得率的影響

2.2.4 粉碎度對(duì)辣木籽多糖超高壓輔助提取的影響 由圖5可知，粉碎度在20～80目篩之間，超高壓提取辣木籽水溶性多糖得率基本無(wú)變化，100目篩粉碎度時(shí)辣木籽多糖得率最高，可能是由于在一定范圍內(nèi)，高壓對(duì)多糖的溶出影響不大，超出范圍后樣品經(jīng)過(guò)過(guò)細(xì)粉碎后，增大了與溶劑的接觸面積，更有利于多糖的提取和溶出。

圖5 粉碎度對(duì)辣木籽多糖得率的影響

2.3 超高壓輔助提取辣木籽多糖工藝優(yōu)化

單因素試驗(yàn)結(jié)果表明，粉碎度對(duì)超高壓提取辣木籽水溶性多糖的得率影響變化不大，基于單因素試驗(yàn)結(jié)果，采用三因素三水平L9(34)正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化方案，考察壓力、保壓時(shí)間和料液比對(duì)辣木籽多糖提取得率的影響，結(jié)果如表2所示。從表2的極差分析可知，影響辣木籽多糖提取率的因素主次順序?yàn)榱弦罕龋–）＞保壓時(shí)間（A）＞壓力（B），即對(duì)辣木多糖提取得率影響因素最大的是料液比，其次是時(shí)間，最后是壓力，根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果得出最優(yōu)提取工藝參數(shù)組合為A3B2C1，即保壓時(shí)間6 min，料液比1∶15，提取壓力100 MPa。

優(yōu)化后的最優(yōu)組合存在于正交試驗(yàn)組中，最優(yōu)條件下辣木籽多糖的得率為0.345%，在上述最優(yōu)工藝條件下經(jīng)驗(yàn)證得到辣木籽多糖得率為0.346%±0.005%，與正交試驗(yàn)方案的結(jié)果基本一致，所以可認(rèn)為該工藝條件為最優(yōu)工藝條件。

表2 正交試驗(yàn)方案及結(jié)果

2.4 辣木籽多糖超高壓輔助提取與熱水提取比較分析

由圖6可知，辣木籽多糖通過(guò)熱水提取（料液比1∶15，90℃下提取4 h）得率為0.296%± 0.006%，而超高壓輔助提取在最優(yōu)條件下（料液比1∶15，保壓時(shí)間6 min，提取壓力100 MPa）的辣木籽多糖得率為0.345%±0.005%。通過(guò)比較可知，在相同的料液比下，超高壓輔助提取用時(shí)僅需6 min，提取結(jié)果明顯高于熱水提取4 h的結(jié)果（<0.05），可見(jiàn)，超高壓輔助提取與熱水提取相比可大大縮短提取時(shí)間、提高提取效率，而且在常溫下提取對(duì)辣木籽多糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)影響相對(duì)較小。

圖6 提取方法對(duì)辣木籽多糖的提取效果的影響

2.5 辣木籽多糖的抗氧化活性測(cè)定

2.5.1 辣木籽多糖清除DPPH自由基能力 辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除能力如圖7所示。由圖7可知，在0.02～1.00 g/L多糖濃度范圍內(nèi)，辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除效果與濃度有較好的量效關(guān)系，多糖濃度（）與清除率（）的回歸線性方程為=748+16.566，相關(guān)系數(shù)為0.962。測(cè)得辣木籽多糖清除DPPH自由基的IC50值為0.0439 g/L，在相同濃度情況下，Vc對(duì)DPPH自由基的清除率均高于辣木籽多糖，VC清除DPPH自由基的IC50值為0.0088 g/L。以上結(jié)果表明，辣木籽多糖具備一定的DPPH自由基清除能力，但是低于相同濃度下VC對(duì)DPPH自由基的清除能力。

圖7 辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除結(jié)果

2.5.2 辣木籽多糖清除羥自由基能力 辣木籽多糖對(duì)羥自由基清除能力如圖8所示。由圖8可知，辣木籽多糖的清除率與濃度成正比，多糖濃度（）與清除率（）的回歸線性方程為=215.66+ 14.071，相關(guān)系數(shù)為0.9946。根據(jù)數(shù)據(jù)測(cè)得辣木籽多糖清除羥自由基的IC50約為0.1666 g/L，VC清除羥自由基的IC50約為0.1873 g/L，在低濃度條件下（<0.045 g/L），辣木籽多糖清除羥自由基能力高于同濃度的VC，高濃度條件下（>0.045 g/L），辣木籽多糖清除羥自由基能力低于同濃度的VC。

2.5.3 辣木籽多糖總抗氧化能力 由圖9可知，標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系較好，其線性回歸方程為=0.1349+0.0805，相關(guān)系數(shù)為0.9983，說(shuō)明在測(cè)定的濃度范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系較好。

相同條件下測(cè)3次辣木籽多糖樣品，其吸光度為0.087，由公式求得，其值對(duì)應(yīng)的硫酸亞鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為0.0482 mmol/L，即辣木籽多糖溶液的總抗氧化能力為0.0482 mmol/L（以硫酸亞鐵的當(dāng)量濃度表示）。

圖8 辣木籽多糖對(duì)DPPH自由基的清除結(jié)果

圖9 試劑盒測(cè)定用硫酸亞鐵的標(biāo)準(zhǔn)曲線

3 討論

辣木多糖為辣木中重要的有效成分之一，目前，對(duì)辣木多糖的提取、分離和功能研究的相關(guān)報(bào)道較少，孫鳴燕[8]研究了辣木葉多糖的提取工藝條件，不同方法的辣木葉多糖提取率在17.10%～20.17%之間，其中超聲波提取法的多糖得率最高，水提法的多糖得率最低，5種方法提取的多糖量差異均達(dá)到極顯著水平；CHEN等[10]研究了微波輔助提取辣木籽葉多糖的工藝條件，該工藝條件下多糖提取率僅有2.96%。可見(jiàn)，不同提取方法對(duì)辣木葉中的多糖提取效果差別較大。董成國(guó)[9]研究了辣木籽水溶性多糖的熱水提取工藝，其提取率比本研究結(jié)果高，可能與原料預(yù)處理方法及不同產(chǎn)地原料有關(guān)。

辣木多糖具有較好的抗氧化活性，董成國(guó)[9]對(duì)提取的辣木籽多糖進(jìn)行純化后再測(cè)定其抗氧化活性，分離得到的3種多糖組分抗氧化活性（清除羥自由基IC50均大于10 g/L）低于本研究結(jié)果，可見(jiàn)，超高壓輔助提取的辣木多糖抗氧化活性更高，超高壓技術(shù)對(duì)多糖活性影響較小，可以更好地保持多糖的抗氧化活性。本研究首次通過(guò)超高壓提取技術(shù)提取辣木籽多糖并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行分析，與熱水提取法相比，超高壓輔助提取的辣木籽多糖的得率更高，且具有較好的抗氧化活性，本研究為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用辣木資源奠定基礎(chǔ)，同時(shí)為辣木資源的高值化利用提供參考。

[1] GOPALAKRISHNAN L, DORIYA K, UMARK D S.: a review on nutritive importance and its medicinal application[J]. Food Science and Human Wellness, 2016, 5(2): 49-56.

[2] 虎虓真, 陶寧萍, 許長(zhǎng)華. 基于食藥價(jià)值的辣木籽研究進(jìn)展[J]. 食品科學(xué), 2018, 39(15): 302-309.

HU X Z, TAO N P, XU C H. Research advances inseedsbased on the food-drug values[J]. Food Science, 2018, 39(15): 302-309. (in Chinese)

[3] 樊建麟, 邵金良, 葉艷萍, 楊東順. 辣木籽營(yíng)養(yǎng)成分含量測(cè)定[J]. 中國(guó)食物與營(yíng)養(yǎng), 2016, 22(5): 69-72.

FAN J L, SHAO J L, YE Y P, YANG D S. Determination of nutritional content ofseeds[J]. China Food Nutrition, 2016, 22(5): 69-72. (in Chinese)

[4] BARAKAT H, GHAZAL G A. Physicochemical properties ofseeds and their edible oil cultivated at different regions in Egypt[J]. Food and Nutrition Sciences, 2016, 7(6): 472-484.

[5] AL-DHABI N A, PONMURUGAN K. Microwave assisted extraction and characterization of polysaccharide from waste jamun fruit seeds[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2020, 152(1): 1157-1163.

[6] 郭 淼, 宋江峰, 王傳凱. 火龍果莖多糖的超高壓提取及抗氧化活性研究[J]. 熱帶作物學(xué)報(bào), 2017, 38(7): 1371-1376.

GUO M, SONG J F, WANG C K. Study on ultrahigh pressure extraction and antioxidant activity of polysaccharide from stem of[J]. China Journal of Trop Crops, 2017, 38(7): 1371-1376. (in Chinese)

[7] 陳瑞嬌. 辣木葉多糖的提取及分離純化[J]. 中藥材, 2006, 29(12): 1358-1360.

CHEN R J. Extraction, separation and purification of polysaccharide fromleaf[J]. Journal of Chinese Medicinal Materials, 2006, 29(12): 1358-1360. (in Chinese)

[8] 孫鳴燕. 辣木黃酮和多糖提取方法及其含量影響因素的初步研究[D]. 呼和浩特: 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué), 2008.

SUN M Y. Preliminary study on extraction methods and content influencing factors of flavone and polysaccharide from[D]. Huhehaote: Inner Mongolia Agricultural University, 2008. (in Chinese)

[9] 董成國(guó). 辣木籽水溶性多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)表征及其抗氧化活性研究[D]. 哈爾濱: 哈爾濱工業(yè)大學(xué), 2016.

DONG C G. Purification, structure characterization and antioxidant activity of water-soluble polysaccharides fromseeds[D]. Haerbin: Harbin Institute of Technology, 2016. (in Chinese)

[10] CHEN C, ZHANG B, HUANG Q, FU X, LIU R H. Microwave-assisted extraction of polysaccharides fromLamleaves: characterization and hypoglycemic activity[J]. Industrial Crops and Products, 2017, 100: 1-11.

[11] 梁 琰, 趙志國(guó), 張敏敏, 劉 倩, 程素盼, 耿巖玲, 王 曉, 趙恒強(qiáng). 超聲輔助提取苯酚-硫酸法測(cè)定野生平蓋靈芝多糖含量[J]. 食品研究與開(kāi)發(fā), 2018, 39(16): 125-129.

LIANG Y, ZHAO Z G, ZHANG M M, LIU Q, CHENG S P, GENG Y L, WANG X, ZHAO H Q. Ultrasonic-assisted extraction of polysaccharide fromby phenol-sulfuric acid method[J]. Food Research and Development, 2018, 39(16): 125-129. (in Chinese)

[12] 奚灝鏘, 袁根良, 杜 冰, 楊公明. 超高壓提取香菇多糖的研究[J]. 現(xiàn)代食品科技, 2010, 26(9): 991-993.

XI H Q, YUAN G L, DU B, YANG G M. Study on extraction of polysaccharide from lentinan by ultra-high pressure[J]. Modern Food Science and Technology, 2010, 26(9): 991-993. (in Chinese)

[13] 王麗波, 程 龍, 徐雅琴, 王泰恒, 李魯濱, 王瀚嵩. 南瓜籽多糖熱水提取工藝優(yōu)化及其抗氧化活性[J]. 農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào), 2016, 32(9): 284-290.

WANG L B, CHENG L, XU Y Q, WANG T H, LI L B, WANG H S. Extraction technology optimization and antioxidant activity of polysaccharides from pumpkin seeds[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering, 2016, 32(9): 284-290. (in Chinese)

[14] WANG B S, LI B S, ZENG Q X LIU H X. Antioxidant and free radical scavenging activities of pigments extracted from molasses alcohol wastewater[J]. Food Chemistry, 2008, 107(3): 1198-1204.

Ultra-high Pressure Assisted Extraction and Antioxidant Activity of Polysaccharide fromSeeds

WANG Biaoshi1,2, HUANG Haoyang1, TAN Wenhui1, LIU Shumin1,2, ZHANG Shiqi1,2, HAN Zhiping1,2, PENG Yuanhuai1,2

1. School of Food Science and Engineering, Lingnan Normal University, Zhanjiang, Guangdong 524048, China; 2. Guangdong Engineering and Technology Research Center of Development and Utilization of,Zhanjiang, Guangdong 524048, China

Ultra-high pressure assisted extraction (UHP) is a new green and high efficient extraction technology for natural products, and the biological activity of the natural products can be kept as much as possible. Withseeds powder as the experimental material, the water-soluble polysaccharide was extracted by a new ultra-high pressure assisted extraction technology. The antioxidant activities of the water-soluble polysaccharide fromseed were evaluated by the total antioxidant capacity and DPPH and hydroxyl radicals scavenging ability. Taking the yield of polysaccharide as an evaluation index, the effects of pulverization degree, pressure, pressure holding time and ratio of material to liquid on the yield of water-soluble polysaccharide fromseed were investigated by the single factor experiment method. The orthogonal experiment design method was used to get the optimum ultra-high pressure assisted extraction conditions of polysaccharide fromseed. The experiment results showed that the optimum technological conditions of the polysaccharide fromseed were determined as follows: holding pressure of 6 min, solid-liquid ratio of 1∶15 (g/mL), extraction pressure of 100 MPa and degree of pulverization of 100 mesh. The yield of the polysaccharide fromseed under this optimum condition was 0.346%. The experiment results also showed that the scavenging abilities for DPPH and hydroxyl radicals increased with the increase of concentration of the polysaccharide fromseed and there was a good linear relationship between concentration of the polysaccharide fromseed and the radical scavenging ability. The IC50(the concentration when the radical scavenging rate is 50%) of the polysaccharide fromseed for DPPH and hydroxyl radicals was 0.0439 g/L and 0.1666 g/L respectively, and the antioxidant ability was lower than that of Vc at the same concentration, which indicated that the water-soluble polysaccharide fromseed had certain antioxidant capacity within a certain concentration range. The total antioxidant capacity of the water-soluble polysaccharide fromseed was 0.0482 mmol/L (Expressed as the equivalent concentration of FeSO4). The water-soluble polysaccharide fromseedcan be extracted effectively in lower temperature and shorter time by ultra-high pressure assisted extraction technology compared with hot-water extraction method and the water-soluble polysaccharide fromseedhas good antioxidant activities and can be exploited and used as a natural antioxidant. The results of this study could provide technical support and reference for the exploration of natural antioxidant and the development and high value comprehensive utilization of.

seeds; polysaccharide; ultrahigh pressure assisted extraction; antioxidant activity

S202.1

A

10.3969/j.issn.1000-2561.2022.10.020

2022-02-15；

2022-03-12

廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目（No. 2022A1515010360）；中央財(cái)政支持地方高校發(fā)展專項(xiàng)資金項(xiàng)目（No. 0003018015）；嶺南師范學(xué)院自然科學(xué)基金項(xiàng)目（No. ZL1817）。

王標(biāo)詩(shī)（1980—），男，博士，副教授，研究方向：農(nóng)副產(chǎn)品深加工及綜合利用。E-mail：hang_kong2002@163.com。