多次捐獻(xiàn)單采血小板對男性獻(xiàn)血者白細(xì)胞與血小板相關(guān)參數(shù)的影響研究*

宋英偉 卞成蓉 潘雪 張曉娟 馮麗梅 張宏飛 宋麗娟 汪德清

血小板輸注在治療血液系統(tǒng)疾病和腫瘤相關(guān)疾病等方面發(fā)揮著極其重要的作用[1]。隨著醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)步和發(fā)展，醫(yī)學(xué)診療水平不斷提高，臨床上對血小板的需求逐年攀升。我國于2019年9月1日起施行的《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2019版）中關(guān)于單采血小板的獻(xiàn)血時間間隔規(guī)定為單采血小板獻(xiàn)血間隔：不少于2周/次，不大于24次/年。我國捐獻(xiàn)單采血小板的人群以長期定期獻(xiàn)血者為主，國內(nèi)外多數(shù)采供血機(jī)構(gòu)也通過增加獻(xiàn)血者的采血頻次來滿足日益增長的臨床需求[2]。近年來，國內(nèi)對高獻(xiàn)血次數(shù)、高獻(xiàn)血頻度單采血小板獻(xiàn)血者的健康狀況相關(guān)研究逐漸增多，也發(fā)現(xiàn)了若干問題，如較多獻(xiàn)血次數(shù)及高頻次的捐獻(xiàn)單采血小板會導(dǎo)致獻(xiàn)血者出現(xiàn)不同程度血清鐵蛋白和血紅蛋白的減低[3-4]，盡管目前有眾多關(guān)于單采血小板獻(xiàn)血者血常規(guī)方面的研究，但多數(shù)存在研究對象少，研究對象獻(xiàn)血總次數(shù)少，研究內(nèi)容不夠深入等不足，我們選取了本中心成功捐獻(xiàn)單采血小板且獻(xiàn)血總次數(shù)分別為初次、十的整數(shù)倍次及百次以上的448名男性自愿無償獻(xiàn)血者為研究對象，其中十次以上的獻(xiàn)血者年獻(xiàn)血次數(shù)≥8次，獲取其末次單采前外周血血常規(guī)指標(biāo)，分析其變化規(guī)律，以期為評估多次數(shù)捐獻(xiàn)單采血小板對獻(xiàn)血者是否有遠(yuǎn)期影響提供依據(jù)，同時為采供血機(jī)構(gòu)的單采血小板獻(xiàn)血者招募工作提供新的思考。

材料與方法

1研究對象 選擇2020年4月23日～2021年4月23日在本中心成功捐獻(xiàn)單采血小板的448名男性自愿無償獻(xiàn)血者。獻(xiàn)血者資料來源于本中心血液管理信息系統(tǒng)，滿足納入標(biāo)準(zhǔn)者均已納入研究。研究對象納入標(biāo)準(zhǔn)：①獻(xiàn)血者均為適齡獻(xiàn)血者且自愿無償捐獻(xiàn)單采血小板；②所有獻(xiàn)血者均符合國家規(guī)定的獻(xiàn)血者健康體格檢查標(biāo)準(zhǔn)且成功完成血小板捐獻(xiàn)；③獻(xiàn)血者獻(xiàn)血總次數(shù)為初次、10、20、30、40、50、60、70、80、90、≥100次的單采血小板獻(xiàn)血者；④獻(xiàn)血總次數(shù)≥10次的獻(xiàn)血者需同時滿足末次獻(xiàn)血前其年獻(xiàn)血次數(shù)≥8次。排除標(biāo)準(zhǔn)：①女性單采血小板獻(xiàn)血者；②各項(xiàng)資料與結(jié)果不全者；③獻(xiàn)血總次數(shù)與年獻(xiàn)血次數(shù)未滿足要求者；④研究區(qū)間內(nèi)有全血捐獻(xiàn)記錄者。根據(jù)總獻(xiàn)血次數(shù)，將男性單采血小板獻(xiàn)血者分為7組：對照組157人（初次組）、1組37人（10次組）、2組69人（20次、30次組）、3組55人（40次、50次組）、4組37人（60次、70次組）、5組35人（80次、90次組）、6組58人（百次以上組）。研究對象均按照《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2019版）相關(guān)規(guī)定，選擇年齡在18周歲～60周歲的健康男性，無不滿足無償獻(xiàn)血要求的各類疾病史者，人口學(xué)特征較為一致。

2獻(xiàn)血前檢測 獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》（GB 18467-2011）標(biāo)準(zhǔn)。獻(xiàn)血者血常規(guī)檢測樣本，均嚴(yán)格按照《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2019版）相關(guān)規(guī)定，使用EDTA-K2抗凝的真空管于肘部靜脈采集。獻(xiàn)血者血常規(guī)檢測采用XS-900i全自動血液分析儀（日本希森美康株式會社）。

3單采設(shè)備與耗材 血液成分分離機(jī)Amicus及配套管路（費(fèi)森尤斯卡比（中國）投資有限公司），血液成分分離機(jī)Trima Accel及配套管路{泰爾茂比司特醫(yī)療產(chǎn)品貿(mào)易（上海）有限公司}，血液成分分離機(jī)XCF-3000及配套管路（四川南格爾生物科技有限公司）。

4觀察指標(biāo) 所有單采血小板獻(xiàn)血者記錄以下指標(biāo)：(1)白細(xì)胞計(jì)數(shù)（white blood cell，WBC），參考范圍：（3.5～10）×109/L；(2)血小板（platelet，PLT），參考范圍：（100～300）×109/L；(3)血小板分布寬度（platelet distribution width，PDW），參考范圍：9.6～15.2 fL；(4)平均血小板體積（mean platelet volume，MPV），參考范圍：6.8～12.8 fL；(5)大型血小板比率（platelet -larger cell ratio，P-LCR%），參考范圍：19.7%～42.4%；(6)血小板壓積（plateletcrit，PCT），參考范圍：0.19%～0.39%；(7)中性粒細(xì)胞數(shù)（neutrophils，NEUT#），參考范圍：（1.8～8.89）×109/L；(8)淋巴細(xì)胞數(shù)（lymphocyte，LYMPH#），參考范圍：（1.26～3.35）×109/L；(9)單核細(xì)胞數(shù)（monocyte，MONO#），參考范圍：（0.25～0.95）×109/L；(10)嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)（eosinophilia，EO#），參考范圍：（0.01～0.59）×109/L；(11)嗜堿性粒細(xì)胞數(shù)（basophil，BASO#），參考范圍：（0.01～0.07）×109/L[5]。

5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用Excel表建立數(shù)據(jù)庫，使用Graphpad Prism 8.0進(jìn)行繪圖，使用統(tǒng)計(jì)軟件Stata16進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。非正態(tài)分布計(jì)量資料以中位數(shù)（第三四分位數(shù)～第一四分位數(shù)）表示，兩偏態(tài)獨(dú)立樣本采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)，分析結(jié)果以優(yōu)勢比（OR）及其95%置信區(qū)間（CI）表示，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

1初次和百次以上男性單采血小板獻(xiàn)血者血常規(guī)部分參數(shù)水平比較 兩組獻(xiàn)血者的WBC、PLT、PCT、NEUT#和LYMPH#差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），其中WBC、PCT、NEUT#雖有顯著性差異，但兩組獻(xiàn)血者三項(xiàng)指標(biāo)中位數(shù)仍在正常參考值范圍內(nèi)，PLT則在可捐獻(xiàn)單采血小板血液檢查要求（≥150×109/L且＜450×109/L）范圍內(nèi)（表1）。初次獻(xiàn)血者中LYMPH#低于正常參考值者占比6.37%，指標(biāo)正常者占比93.63%，百次以上獻(xiàn)血者中LYMPH#低于正常參考值者占比高達(dá)86.21%，指標(biāo)正常者占比13.79%，OR值為91.875，獻(xiàn)血百次以上是獻(xiàn)血者發(fā)生淋巴細(xì)胞低于正常參考值的高危因素（P＜0.001）（表2）。

表1 初次與百次以上男性單采血小板獻(xiàn)血者外周血血小板及白細(xì)胞相關(guān)參數(shù)對比

表2 初次與百次以上男性單采血小板獻(xiàn)血者外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)情況

2不同獻(xiàn)血總次數(shù)男性單采血小板獻(xiàn)血者血常規(guī)部分參數(shù)水平比較 捐獻(xiàn)次數(shù)越多的組，其NEUT#、PLT、PCT中位數(shù)水平越高，但對照組與其他六組獻(xiàn)血者NEUT#、PCT中位數(shù)仍在正常參考值范圍內(nèi)，PLT則在可捐獻(xiàn)單采血小板血液檢查要求（≥150×109/L且＜450×109/L）范圍內(nèi)；捐獻(xiàn)次數(shù)越多的組，其WBC、LYMPH#中位數(shù)水平越低，其中所有獻(xiàn)血者WBC仍在正常參考值范圍內(nèi)，而LYMPH#低于正常參考值者隨著捐獻(xiàn)次數(shù)的增多而增多（表3，圖1）。六組獻(xiàn)血者中LYMPH#低于參考值下限者分別占比21.62%、46.38%、69.09%、78.38%、85.71%、86.21%，均顯著高于對照組，且OR值分別為4.055、12.714、32.859、53.287、88.200、91.875，隨著單采血小板獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)次數(shù)的增多，獻(xiàn)血者發(fā)生淋巴細(xì)胞低于正常參考值的風(fēng)險(xiǎn)逐步增高（P＜0.01）。（表4）。

表3 不同獻(xiàn)血總次數(shù)男性單采血小板獻(xiàn)血者血常規(guī)部分參數(shù)水平

表4 不同獻(xiàn)血總次數(shù)男性單采血小板獻(xiàn)血者外周血淋巴細(xì)胞情況

圖1 不同獻(xiàn)血總次數(shù)男性單采血小板獻(xiàn)血者外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)情況分布圖

討論

血常規(guī)是健康體檢的重要項(xiàng)目，主要檢測人體血液中紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、WBC、血紅蛋白（Hb）、PLT、NEUT#、LYMPH#等指標(biāo)水平，血常規(guī)結(jié)果有助于醫(yī)務(wù)工作者對受檢者進(jìn)行健康狀況評估或?qū)ζ渌技膊∵M(jìn)行初步判定。淋巴細(xì)胞是構(gòu)成機(jī)體免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞群體，尤其在防御與清除病毒方面發(fā)揮著非常重要的作用，人體內(nèi)淋巴細(xì)胞嚴(yán)重低于正常參考值可能會導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生免疫功能抑制[6]。

本研究通過選取本中心相似獻(xiàn)血頻度（年獻(xiàn)血次數(shù)≥8次），不同獻(xiàn)血次數(shù)且成功捐獻(xiàn)單采血小板的男性獻(xiàn)血者為研究對象，盡可能縮小被研究者之間的差異。本次研究結(jié)果顯示，百次以上男性單采血小板獻(xiàn)血者與初次單采血小板獻(xiàn)血者WBC、PLT、PCT、NEUT#和LYMPH#指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），其中WBC、PLT、PCT、NEUT #雖有顯著性差異，但兩組獻(xiàn)血者WBC、PCT、NEUT#中位數(shù)仍在正常參考值范圍內(nèi)，百次以上獻(xiàn)血者PLT中位數(shù)雖高于正常參考值，但仍在可捐獻(xiàn)單采血小板血液檢查要求（≥150×109/L且＜450×109/L）范圍內(nèi)，百次以上獻(xiàn)血者的PLT中位數(shù)為 309.5×109/L，顯著高于初次獻(xiàn)血者的PLT中位數(shù)254×109/L。獻(xiàn)血者在捐獻(xiàn)血小板后，機(jī)體會因PLT減少而產(chǎn)生更多的血小板生成素（TPO），刺激骨髓造血干細(xì)胞向巨核細(xì)胞系祖細(xì)胞分化，從而導(dǎo)致獻(xiàn)血者血小板繼發(fā)性增高，另有研究顯示，多次數(shù)高頻率捐獻(xiàn)單采血小板易導(dǎo)致獻(xiàn)血者出現(xiàn)鐵缺乏癥，鐵對巨核細(xì)胞有一定的抑制作用，所以鐵缺乏癥可能會間接導(dǎo)致獻(xiàn)血者血小板增高[7-8]，本研究中也觀察到百次以上單采血小板獻(xiàn)血者LYMPH#中位數(shù)明顯低于正常參考值，且低于正常參考值者占比86.21%，百次以上單采血小板獻(xiàn)血者的LYMPH#中位數(shù)為0.84×109/L，顯著低于初次單采血小板獻(xiàn)血者的LYMPH#中位數(shù)2.1×109/L。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，獻(xiàn)血總次數(shù)越多的獻(xiàn)血者，其WBC、LYMPH#中位數(shù)水平越低，因捐獻(xiàn)單采血小板前對獻(xiàn)血者WBC有計(jì)數(shù)要求，所以所有獻(xiàn)血者WBC仍在正常參考值范圍內(nèi)波動，而各組淋巴細(xì)胞中位數(shù)則隨著捐獻(xiàn)次數(shù)的增多逐步降低，獻(xiàn)血次數(shù)越多的組，淋巴細(xì)胞低于正常參考值者占比也越高，且各組淋巴細(xì)胞低于參考值者均顯著高于對照組（P＜0.01），圖1可見隨著捐獻(xiàn)次數(shù)的增多，獻(xiàn)血者的淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)整體水平逐步下行，趨勢明顯，此結(jié)果與國外多個研究結(jié)果一致。RICHA[9]發(fā)現(xiàn)多次單采獻(xiàn)血者血小板計(jì)數(shù)升高，而白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)降低，淋巴細(xì)胞降低與單采次數(shù)和血小板量有關(guān)。GANSNER等[10]在頻繁采用Trima血細(xì)胞分離機(jī)單采血小板的獻(xiàn)血者中發(fā)現(xiàn)，隨著單采頻次的升高，CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞顯著降低，部分獻(xiàn)血者甚至低于正常值。RAHMANI[11]報(bào)道在獻(xiàn)血者停止單采1年后仍然呈現(xiàn)CD4+T淋巴細(xì)胞減少。初步推測，本中心多次數(shù)單采血小板獻(xiàn)血者出現(xiàn)淋巴細(xì)胞降低的原因之一是由于使用血細(xì)胞分離機(jī)進(jìn)行血小板采集時，血細(xì)胞分離機(jī)內(nèi)置的物理性去白細(xì)胞系統(tǒng)會在血液采集過程中去除大部分的白細(xì)胞，血液采集完畢后會有部分白細(xì)胞滯留于整個采集管路內(nèi)而無法完全回輸給獻(xiàn)血者所致。此外，目前醫(yī)療市場上采集單采血小板所使用的一次性管路耗材主要以環(huán)氧乙烷滅菌為主，因?yàn)榫璜I(xiàn)單采血小板的整個采集過程，既有血液通過一次性管路耗材輸出的過程，同時也有血液回輸過程，所以耗材中未解析完全的環(huán)氧乙烷隨回輸血液進(jìn)入無償獻(xiàn)血者體內(nèi)，也是導(dǎo)致獻(xiàn)血者發(fā)生淋巴細(xì)胞降低的風(fēng)險(xiǎn)因素之一[12]。本研究雖然觀察到多次數(shù)捐獻(xiàn)單采血小板會導(dǎo)致獻(xiàn)血者發(fā)生淋巴細(xì)胞降低，但要確定降低的淋巴細(xì)胞種類，需做進(jìn)一步研究。本研究也發(fā)現(xiàn)獻(xiàn)血總次數(shù)越多的獻(xiàn)血者，其NEUT#、PLT、PCT中位數(shù)水平越高，但各組對應(yīng)項(xiàng)目中位數(shù)仍保持在正常參考值范圍內(nèi)，差異可能是由于捐獻(xiàn)血液后機(jī)體發(fā)生代償所導(dǎo)致。

在無償獻(xiàn)血工作中，我們應(yīng)該高度關(guān)注多次數(shù)、高頻率的單采血小板獻(xiàn)血者，對于出現(xiàn)淋巴細(xì)胞低于正常參考值的獻(xiàn)血者，采供血機(jī)構(gòu)應(yīng)暫緩獻(xiàn)血者獻(xiàn)血，待其淋巴細(xì)胞水平升至正常再行歸隊(duì)。淋巴細(xì)胞在預(yù)防病毒感染與疾病的轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮著重要的作用[13-14]，淋巴細(xì)胞水平與人的病毒抵御能力息息相關(guān)，同時淋巴細(xì)胞在人體內(nèi)亦發(fā)揮著抗腫瘤細(xì)胞的作用[15]，所以多次數(shù)單采血小板獻(xiàn)血者發(fā)生淋巴細(xì)胞降低后，其健康狀況應(yīng)該得到采供血機(jī)構(gòu)更多關(guān)注。評估淋巴細(xì)胞降低是否會對多次數(shù)單采血小板獻(xiàn)血者的健康造成不良影響，需對獻(xiàn)血者進(jìn)行較為長期的跟蹤與隨訪，此內(nèi)容將有可能成為我們接下來的研究選題方向。盡管采供血機(jī)構(gòu)通過增加定期獻(xiàn)血者的采血頻次可有效提升所采集血液的安全性，但是應(yīng)該以保障無償獻(xiàn)血者健康為前提，未來采供血機(jī)構(gòu)的招募工作也應(yīng)該在鞏固和維護(hù)好現(xiàn)有的定期獻(xiàn)血者隊(duì)伍之余，進(jìn)一步擴(kuò)大和加強(qiáng)非定期獻(xiàn)血者的招募力度。筆者也建議相關(guān)部門從關(guān)愛獻(xiàn)血者的角度積極出臺應(yīng)對政策，建立更科學(xué)的獻(xiàn)血體格檢查標(biāo)準(zhǔn)，例如在單采血小板獻(xiàn)血者健康檢查要求中置入淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、血清鐵蛋白等血液篩查要求；采供血機(jī)構(gòu)也可以在現(xiàn)有的法律法規(guī)框架內(nèi)，根據(jù)獻(xiàn)血者的個人體格檢查情況、血液檢測結(jié)果等制定出更個性化的獻(xiàn)血方案，通過實(shí)際行動真正做到關(guān)心、關(guān)愛獻(xiàn)血者，保證獻(xiàn)血者身體健康不會因獻(xiàn)血受到不良影響。

本文是對已有數(shù)據(jù)的回顧性研究，為擴(kuò)大研究樣本量同時避免重復(fù)納入研究對象，本文針對百次以下的多次獻(xiàn)血者僅納入10的整數(shù)倍獻(xiàn)血次數(shù)者；本文中獻(xiàn)血者的獻(xiàn)血次數(shù)僅為獻(xiàn)血者在本機(jī)構(gòu)的獻(xiàn)血次數(shù)，有多地獻(xiàn)血記錄的獻(xiàn)血者，其真實(shí)獻(xiàn)血次數(shù)可能會多于文中所統(tǒng)計(jì)次數(shù)；本研究也未能獲取單采血小板獻(xiàn)血者歷次捐獻(xiàn)單采血小板的采集量及所使用的血細(xì)胞分離機(jī)機(jī)型，但不同的血液采集量及使用不同的血細(xì)胞分離機(jī)捐獻(xiàn)單采血小板均可能會對研究結(jié)論造成重大影響；文章中個別分組的研究對象樣本量較少，也可能導(dǎo)致研究結(jié)論產(chǎn)生偏倚。未來，我們希冀以本課題方向?yàn)橹敢龈钊氲那罢靶匝芯?，以期獲得更科學(xué)的研究結(jié)論。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突