《中國藥典》2020年版兩棲綱藥用動物養(yǎng)殖研究進展△

蘭夢，吳淇，劉玲，呂金朋，張輝*

1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；

2.吉林省東北亞生物科技有限公司，吉林 長春 130119

兩棲綱（Amphibian）是一類原始的、初登陸的、具五趾型的變溫四足動物，皮膚裸露，分泌腺眾多，混合型血液循環(huán)，除南極洲和海洋性島嶼外，遍布全球。中國現(xiàn)有兩棲綱動物11 科40 屬270 余種，分布于秦嶺以南、華西和西南山區(qū)屬種最多[1]。依據(jù)《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）2020 年版（一部）共收載成方制劑和單味制劑1607種[2]，其中動物藥材中成藥品種504種，占總數(shù)的31.36%；涉及兩棲綱動物2 種，分別為蟾蜍和林蛙，含有蟾酥的成方制劑和單味制劑數(shù)量為14種，占0.87%。本文主要介紹《中國藥典》2020年版收載的兩棲綱下2 種藥用動物的養(yǎng)殖情況。依據(jù)地理分布與棲息環(huán)境，生活習(xí)性與活動規(guī)律，養(yǎng)殖技術(shù)、疾病防治等方面進行探討。其中，藥用動物蟾蜍養(yǎng)殖程度評估為擴養(yǎng)，林蛙養(yǎng)殖程度評估為成熟。

1 蟾蜍

1.1 地理分布與棲息環(huán)境

蟾蜍體表有許多疙瘩，內(nèi)有毒腺，俗名癩蛤蟆，屬兩棲綱，在我國分為中華大蟾蜍Bufo bufo gargarizansCantor 和黑眶蟾蜍B.melanostictusSchneider 2 種[3]。蟾酥和蟾衣都是我國傳統(tǒng)的中藥。蟾蜍野生資源豐富，在全國各地均有分布，主要分布在山東、河北，江蘇、浙江、四川、湖南、湖北、遼寧、吉林等地。目前，針對蟾蜍種群數(shù)量的研究較少，但從相關(guān)報道中得知，近年來由于環(huán)境污染和生態(tài)環(huán)境惡化，蟾蜍棲息地逐漸減少，食物鏈遭到嚴重破壞，加之人為捕殺，造成蟾蜍野生資源急劇下降。蟾蜍雖屬水陸兩棲動物，但陸棲性強，棲息于河邊、潮濕草叢、泥土等陰暗潮濕的環(huán)境[4]。

1.2 生活習(xí)性與活動規(guī)律

蟾蜍皮膚多具小孔，具有滲透性，由于沒有外殼等結(jié)構(gòu)的保護，導(dǎo)致蟾蜍對環(huán)境的敏感性高。蟾蜍喜潮濕、黑暗、溫度適宜的環(huán)境，晝伏夜出，白天穴居于泥土中或棲于草叢中，夜間和雨后最為活躍，常在河岸田邊或房屋周圍覓食，以捕獲蝸牛、蚊子、金龜子、蛾子等夜間活動的動物為食。當環(huán)境氣溫下降到10 ℃以下時，蟾蜍蟄伏于水底泥中或土穴中進行冬眠；當氣溫回升到10～12 ℃時，開始出穴活動，結(jié)束冬眠。蟾蜍皮膚易失去水分，喜濕怕燥，為保持皮膚潤滑，除自身皮膚分泌黏液外還需外界的水分。其常在夜晚出洞尋覓有水的場地，或跳進水中以保持皮膚濕潤清潔，喜靜，易受驚，受到驚嚇時會表現(xiàn)出跳躍、躲藏等行為。

1.3 養(yǎng)殖技術(shù)

1.3.1養(yǎng)殖方式與設(shè)施 由于野生蟾蜍越來越少，而蟾蜍應(yīng)用范圍日益擴大，蟾酥供不應(yīng)求，故蟾蜍養(yǎng)殖業(yè)得到快速發(fā)展。中國養(yǎng)殖信息網(wǎng)特種統(tǒng)計的數(shù)據(jù)顯示，2016年中國蟾蜍人工養(yǎng)殖面積約有1.1萬畝（1 畝≈666.67 m2），與2015 年相比增長14.51%。目前，蟾蜍養(yǎng)殖依據(jù)地域不同，主要有仿野生養(yǎng)殖和全人工養(yǎng)殖模式2種[5-6]。

仿野生養(yǎng)殖主要在一定適宜環(huán)境內(nèi)通過引種使蟾蜍自然繁殖或輔助進行蝌蚪飼養(yǎng)的方式進行養(yǎng)殖。仿野生養(yǎng)殖面積大，養(yǎng)殖環(huán)境不固定，一般林下、水源周邊等都可進行放養(yǎng)。該養(yǎng)殖模式環(huán)境條件要求高，但具有以下弊端：首先，幼蟾蜍存活率低，變態(tài)上岸后的幼蟾蜍會逐漸擴散。由于餌料、環(huán)境、敵害等因素造成該階段蟾蜍成活率低。其次，由于仿野生養(yǎng)殖面積大，一般無防逃防敵害設(shè)施，使得蟾蜍成活率低。第三，環(huán)境復(fù)雜，捕捉難度大，目前鮮有成功報道。

全人工養(yǎng)殖一般將中華大蟾蜍圈養(yǎng)在一定范圍內(nèi)，通過人工提供餌料等進行養(yǎng)殖。養(yǎng)殖形式多樣，包括池塘養(yǎng)殖、網(wǎng)箱養(yǎng)殖、林下養(yǎng)殖、稻田養(yǎng)殖及庭院養(yǎng)殖等，養(yǎng)殖設(shè)施見表1。全人工養(yǎng)殖在一定程度上提高了蟾蜍養(yǎng)殖成活率，特別是蝌蚪的成活率。但在實際調(diào)研中發(fā)現(xiàn)，人工飼料馴食、幼蟾蜍成活率低、病害、敵害、蟾酥采集中產(chǎn)量及質(zhì)量問題嚴重影響?zhàn)B殖戶的利潤和養(yǎng)殖積極性。

表1 蟾蜍的不同養(yǎng)殖方式及養(yǎng)殖設(shè)施

1.3.2良種來源與繁育 養(yǎng)殖蟾蜍種源可以野外捕捉，也可以撈取卵塊孵化[7]。一年四季均可捕獲蟾蜍，但最佳捕獲時機通常在驚蟄節(jié)氣之后。選擇身強體健、發(fā)育良好的蟾蜍個體，按照3∶1 的雌雄比例將蟾蜍放置于產(chǎn)卵池內(nèi)。其自行交配、產(chǎn)卵、受精，受精率可達到90%。蟾蜍可每平方米飼養(yǎng)1～2對。通常5—8月于大雨后在田間、草地、水池、海灘等地人工收集蟾蜍卵，然后再進行孵化。剛孵出的蝌蚪常吸附在卵的外殼和水生植物上，依靠自身的卵黃囊提供營養(yǎng)生存，幾天后開始食用水中的藻類和其他食物獲得營養(yǎng)物質(zhì)。養(yǎng)殖時要提前1 周施入少量的豬牛糞。蝌蚪進入水池后，不要將糞便或尿液潑灑到水內(nèi)，以免損傷。其所在的水池的水深約為30 cm。隨著蝌蚪逐漸長大，所在的水池要逐漸加深并減小水池內(nèi)蝌蚪的密度，pH 為7～8。可以每天往水池內(nèi)倒入切碎的蔬菜、魚腸、豬血、米水、酵母粉1～2 次[8]。經(jīng)過15 d 的培育，蝌蚪體長達3 cm 時就可撈出，放入幼蟾蜍池養(yǎng)殖，從卵孵出蝌蚪到變態(tài)成幼蟾需40～60 d，然后轉(zhuǎn)入成年池養(yǎng)殖。

1.3.3飼養(yǎng)餌料 最經(jīng)濟實惠的餌料來源為點燈吸引各種昆蟲[9]，讓蟾蜍覓食。這可以有效降低養(yǎng)殖蟾蜍的費用。但是，只有科學(xué)放置和合理使用誘餌燈，才會獲得比較好的效果。一些廚余垃圾及廢物可以被用來培育蒼蠅及幼蟲來喂養(yǎng)蟾蜍。在容器中發(fā)酵豆腐和動物糞便后，蒼蠅便會在上面產(chǎn)卵，3～5 d后，蒼蠅幼蟲可用作飼養(yǎng)餌料。還有一種更有效且成本更低的飼養(yǎng)方式，即使用農(nóng)貿(mào)市場、屠宰場的剩菜、動物血、魚和雞來發(fā)酵產(chǎn)生蠅蛆，并投喂人工配合飼料?？梢赃x用青蛙、牛蛙飼料，也可選用黃鱔、龜鱉、魚蝦飼料，但要求餌料中蛋白質(zhì)含量在40%以上。也可以手工制作蟾蜍飼料，這比在市場上購買飼料要便宜35%。為有效喂養(yǎng)蟾蜍，可選擇上述3 種方法中的1 種或2 種，但最好將3 種方法結(jié)合起來。

1.3.4疾病防治 蟾蜍疾病防治的重要原則為切斷疾病傳播途徑，保持蟾蜍生長環(huán)境的清潔，加強蟾蜍的飼養(yǎng)管理。提前保持水田水質(zhì)相對新鮮，禁止使用有污染的水源，幼蟾進入水田后，定期對其棲息環(huán)境進行消毒管理。在炎熱的夏季，田間經(jīng)常需要灌滿“跑馬水”，用來改善水內(nèi)的溫度和水的質(zhì)量。蟾蜍水田不宜噴施大量化肥。在水稻病害的情況下，禁止使用劇毒農(nóng)藥。如果不得已需要使用農(nóng)藥，應(yīng)選擇高效、毒性較小的農(nóng)藥，并提前將蟾蜍移至無稻谷的地方或池塘（池）。在噴灑的藥劑完全消散后，再將其遷回到原來的水田內(nèi)進行飼養(yǎng)[10]。為避免外界帶進病原引發(fā)疾病，應(yīng)對進入養(yǎng)殖場的車輛、物資等進行嚴格消毒。如若蟾蜍發(fā)生大規(guī)模疫情，要迅速對環(huán)境進行封鎖消毒，快速更換飼養(yǎng)池水，以切斷病情傳播的途徑，防止疾病擴散蔓延。

1.4 養(yǎng)殖成熟度

目前，蟾蜍的養(yǎng)殖還沒有達到完全商品化和工業(yè)化水平，故對其養(yǎng)殖程度評估為擴養(yǎng)。

蟾蜍養(yǎng)殖并未形成規(guī)模，養(yǎng)殖技術(shù)差異大。其養(yǎng)殖主要存在幼蟾蜍成活率低、良種繁育匱乏及養(yǎng)殖場地基礎(chǔ)設(shè)施未形成規(guī)范等問題，應(yīng)加強科學(xué)監(jiān)測、加大科研投入，進行種質(zhì)資源的研究，引進專業(yè)院校養(yǎng)殖技術(shù)，突破瓶頸，解決養(yǎng)殖中病害、種質(zhì)、飼料等問題。引導(dǎo)養(yǎng)殖戶進行高標準規(guī)范化的養(yǎng)殖場地建設(shè)，提高養(yǎng)殖成活率。棲息地破壞、環(huán)境污染等原因造成蟾蜍數(shù)量銳減，人工養(yǎng)殖技術(shù)還未實現(xiàn)實質(zhì)性突破。國家及相關(guān)部門應(yīng)進行科學(xué)規(guī)劃，早日實現(xiàn)蟾蜍養(yǎng)殖的規(guī)范化和產(chǎn)業(yè)化。

2 林蛙

2.1 地理分布與棲息環(huán)境

林蛙Rana amurensisBoulenger 又稱雪蛤，屬兩棲綱無尾目蛙科蛙屬，主要分布于中國黑龍江、吉林、遼寧、內(nèi)蒙古、河北、山東、山西、陜西、甘肅、河南、青海、四川、新疆等地，在江蘇、安徽、湖北、西藏等地也有分布[11]。其中，吉林省長白山自然保護區(qū)是公認的林蛙原產(chǎn)地。東北三省中國林蛙資源調(diào)查研究表明，2007 年，分布在黑龍江、吉林、遼寧的野生中國林蛙種群的總量為8.48 億只，與20 世紀90 年代的普查結(jié)果相比，減少了21.5%～32.7%[12]。近年來，國內(nèi)并沒有再次開展關(guān)于林蛙野生資源的調(diào)查，但通過養(yǎng)殖戶反映的情況來看，野生林蛙量較原來明顯減少。野生林蛙的種群規(guī)模還在進一步衰退中。

在林蛙生長發(fā)育期間，蝌蚪休眠狀態(tài)的生存環(huán)境必須是水下。經(jīng)過變態(tài)發(fā)育后，長成的幼蛙和成年蛙生活在陸地上，每種環(huán)境下的生活時間均為半年。每年春天冬眠和繁殖滯育后，林蛙在溪流和山谷附近的潮濕植被上生長，并開始完全生活在陸地上。林蛙的生存環(huán)境為特定的森林類型，其喜歡生活在茂密、凌亂、潮濕的森林植被環(huán)境中[13-15]。

2.2 生活習(xí)性與活動規(guī)律

林蛙夏季棲息于森林中，秋季開始下山冬眠，冬季潛伏在山林溝谷溪水底的石洞或樹根里越冬，春季上岸繁殖，其生活極有規(guī)律[16]。以分布在吉林省的中國林蛙為例，1 年的生活周期通常分為生殖期、陸地生活期和越冬期。夏季，主要生活在潮濕的山林和草叢中，每年4月下旬至9月下旬，遷徙到距水域較近的陰濕的草叢中生活。秋季溫度降低時，昆蟲大部分難以生存，這時候林蛙便難以覓食。在此時期林蛙便潛入河流池塘深處，藏匿在巖石和樹根下冬眠，度過漫長的冬季。

2.3 養(yǎng)殖技術(shù)

2.3.1養(yǎng)殖方式與設(shè)施 林蛙養(yǎng)殖生產(chǎn)形成自然散放、全人工養(yǎng)殖和增殖3 種主要生產(chǎn)模式，以增殖模式為主[17-20]。

自然散放模式中，選擇符合林蛙棲息環(huán)境需求的河源溝溪封山育蛙，避免人員和畜禽干擾，使林蛙在自然狀態(tài)下完成生活史。然后按照合理規(guī)格采捕成蛙。全人工養(yǎng)殖模式中，建設(shè)模擬林蛙自然棲息地環(huán)境的設(shè)施條件，滿足林蛙生活史各階段的生活條件，所有養(yǎng)殖環(huán)節(jié)均在人工環(huán)境下完成。由于飼料、疾病防控等技術(shù)尚未完全突破，全人工養(yǎng)殖的商品成活率尚不穩(wěn)定，飼養(yǎng)成本也難以控制。增殖模式也稱半人工養(yǎng)殖，是一種養(yǎng)殖-增殖混合模式，即所謂的“人養(yǎng)蝌蚪天養(yǎng)蛙”的人工-自然環(huán)境接力式生產(chǎn)模式。林蛙增殖場通常選擇人跡罕至的林區(qū)腹地。在“兩山夾一溝”的地形，利用現(xiàn)有森林郁閉度高的天然山溪河溝等適宜棲息地建立看護房、孵化池、變態(tài)池（蝌蚪培育池）和越冬池（即“一房三池”）。東北地區(qū)林蛙增殖場規(guī)模非常多元化，小型專業(yè)戶和大型養(yǎng)殖場并存，承包經(jīng)營面積成百上千公頃甚至數(shù)萬公頃皆有。基于森林防火和燃料物資運輸?shù)瓤紤]，林蛙增殖場一般因地制宜設(shè)計節(jié)能溫室或臨時塘舍結(jié)構(gòu)。

2.3.2良種來源與繁育 采集林蛙作種蛙可在春秋兩季進行[21-23]。秋季為中國林蛙捕撈的最好時期，一是捕撈時間長（約1.5 個月），二是秋季是林蛙收獲的季節(jié)，選擇種蛙的余地大。因此，為選擇種蛙的最佳時期。3～4 歲的壯齡蛙可作為中國林蛙種蛙的最優(yōu)選擇，年齡最適，繁殖能力強。也可在2 年生的林蛙群中選擇體大、健壯的林蛙留種。選擇體色為黑褐色、體背有“人”字形黑斑的林蛙作種蛙。為避免近親繁殖導(dǎo)致后代發(fā)育不良，應(yīng)進行異地選種。秋季氣溫適宜，可以到外地購買種蛙，長途運輸也很方便。在春季采集種蛙，但必須在林蛙出河期及產(chǎn)卵前采集，通常只有15 d，如果采集過晚，種蛙已在繁殖場將卵產(chǎn)完，失去了當年的種用價值。

2.3.3飼養(yǎng)餌料 林蛙是雜食性動物，以植物和動物為食[24-26]。林蛙在不同發(fā)育階段具有不同的攝食特性和攝食量，因此飼料不同。建議每次喂林蛙時增加飼料喂養(yǎng)量。小蝌蚪在鰓發(fā)育好、嘴唇和牙齒快長齊時開始進食。蝌蚪出生后1 周內(nèi)主要吃卵膠膜，生長到15 d 時食量增加，30 d 以后進入變態(tài)期。變態(tài)期的蝌蚪不再取食，可停止投喂飼料。幼蛙出池后在陸地活動，并開始覓食，需要足夠的食物，可喂養(yǎng)生長2～3 d 的黃粉蟲、蚯蚓或生長2 d 的蒼蠅幼蟲，在青蛙養(yǎng)殖場安裝黑燈以吸引昆蟲并增加林蛙的活食物。

2.3.4疾病防治 在人工養(yǎng)殖條件下，常因養(yǎng)殖技術(shù)處理不當?shù)仍蛟斐闪滞芑疾∩踔了劳?。林蛙主要病害為氣泡病、游泳病群聚、蝌蚪彎尾病和出血病等[27]。為防治病害要采取綜合措施，本著預(yù)防為主、治療為輔的原則，防病重于治病。在發(fā)生污染較嚴重的飼養(yǎng)池，堅持水池曬底和白灰消毒、低密度飼養(yǎng)和保持水質(zhì)清潔，使林蛙患病的幾率減少。在蝌蚪飼養(yǎng)期，堅持每天巡查水池，注意水質(zhì)和水溫的變化，認真觀察蝌蚪生長中的異常變化，發(fā)現(xiàn)病情后及時治療。蝌蚪養(yǎng)殖密度不宜過高。密度過大可導(dǎo)致水溫提高，飼養(yǎng)池內(nèi)氧氣缺乏，影響蝌蚪生長，引發(fā)疾病。故應(yīng)嚴格控制蝌蚪養(yǎng)殖密度，每平方米水面1000～1500只。

2.4 養(yǎng)殖成熟度

目前，我國林蛙養(yǎng)殖水平已經(jīng)達到了工業(yè)化養(yǎng)殖和商品化生產(chǎn)程度，故評估其養(yǎng)殖程度為成熟。近年來，東北林蛙養(yǎng)殖業(yè)獲得了快速發(fā)展。

2.5 其他

本文中增殖為半人工養(yǎng)殖，是一種養(yǎng)殖-增殖混合模式、人工-自然環(huán)境接力式的生產(chǎn)模式。林蛙養(yǎng)殖以增殖模式為主，故將增殖也歸為本文的養(yǎng)殖。

根據(jù)中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部下屬的漁業(yè)漁政管理局發(fā)布的通知，對于目前存在交叉管理、養(yǎng)殖歷史較長、人工繁育規(guī)模較大的黑斑蛙、棘胸蛙、棘腹蛙、中國林蛙（東北林蛙）、黑龍江林蛙等相關(guān)蛙類，由漁業(yè)主管部門按照水生動物管理[28]。自此林蛙從陸生被劃為水生野生動物。對林蛙管理劃分進行明確，將有利于進一步加強林蛙資源保護。

3 討論

與人參、鹿制品等東北山珍生產(chǎn)和食品加工相比，兩棲類藥用動物加工業(yè)薄弱，初加工產(chǎn)品多，精深加工產(chǎn)品少，各種新技術(shù)、新工藝應(yīng)用程度很低。為此，國家及相關(guān)部門應(yīng)科學(xué)規(guī)劃組織養(yǎng)殖、醫(yī)藥等相關(guān)科研團隊，解決人工養(yǎng)殖的技術(shù)瓶頸問題，提高兩棲類藥用動物加工的科技含量，提高養(yǎng)殖及其制品利用率，實現(xiàn)養(yǎng)殖的規(guī)范化、規(guī)?；彤a(chǎn)業(yè)化。應(yīng)加強野生資源的保護和管理，加強兩棲類藥用動物養(yǎng)殖技術(shù)的研究和推廣工作，對兩棲綱藥用動物進行系列產(chǎn)品的深加工，促進兩棲類經(jīng)濟動物養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。加強行業(yè)自律和市場監(jiān)管，樹立產(chǎn)品地理標志和品牌形象。