血清維生素A、視黃醇結(jié)合蛋白4表達(dá)與子宮內(nèi)膜異位癥的相關(guān)性研究

羅國英，韋勵(lì)，羅小敏，鄒美玲，李仲均

子宮內(nèi)膜異位癥是一種發(fā)病率較高的婦科疾病，臨床表現(xiàn)主要有月經(jīng)紊亂、痛經(jīng)、性交痛等，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致女性不孕，影響婦女的身心健康及生活質(zhì)量［1］。有文獻(xiàn)報(bào)告，子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病因素與炎癥反應(yīng)有關(guān)［2-3］。視黃醇結(jié)合蛋白4（retinol binding protein 4，RBP4）是一種球蛋白，與炎癥反應(yīng)具有密切關(guān)系，可結(jié)合炎性因子受體導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生炎癥反應(yīng)［4］。張洪江等［5］研究發(fā)現(xiàn)RBP4在子宮內(nèi)膜異位癥病人血清中呈高表達(dá)。維生素A是最早被發(fā)現(xiàn)的維生素，其是重要的生理過程所必需的，包括維持視力正常、細(xì)胞增殖和分化、免疫調(diào)節(jié)、維持上皮細(xì)胞功能正常等［6］。研究發(fā)現(xiàn)維生素A活性與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)［7］。綜上推測(cè)維生素A和RBP4可能對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生有一定影響。目前有關(guān)維生素A和RBP4共同與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系鮮有報(bào)道，本研究擬探討維生素A、RBP4在子宮內(nèi)膜異位癥病人血清中表達(dá)情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年6月至2020年1月在東莞市人民醫(yī)院行腹腔鏡手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜異位癥病人68例（子宮內(nèi)膜異位癥組）為研究對(duì)象，術(shù)后均經(jīng)病理檢查確診。病人年齡范圍22～40歲，年齡（34.02±5.94）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《婦產(chǎn)科學(xué)（第9版）》中有子宮內(nèi)膜異位癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)［8］；②病人術(shù)前6個(gè)月未接受激素類藥物治療；③未發(fā)現(xiàn)病人有婦科或其他惡性腫瘤；④病人自述存在痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)等癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有卵巢手術(shù)史病人；②哺乳或妊娠期婦女；③嚴(yán)重肝、腎功能障礙病人；④有精神障礙病人。按照1997年修訂的美國生育協(xié)會(huì)評(píng)分［9］將病人分為Ⅰ～Ⅱ期28例，Ⅲ～Ⅳ期40例。同期選擇在本院體檢健康的女性70例為對(duì)照組，年齡范圍22～45歲，年齡（34.93±5.86）歲。病人及其近親屬同意簽署知情同意書和臨床研究協(xié)議書，本研究經(jīng)過東莞市人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批號(hào)KYKT2019-007）。

1.2 研究方法

1.2.1 樣品采集 子宮內(nèi)膜異位癥病人在入院登記后月經(jīng)結(jié)束第3天，對(duì)照組女性在月經(jīng)結(jié)束第3天清晨空腹時(shí)采取靜脈血5 mL裝于采血管中，4℃，3 000 r/min，離心10 min，留上清，凍存于-80℃冰箱中，待測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)血清中維生素A、RBP4水平 采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)血清中維生素A、RBP4水平，操作步驟嚴(yán)格依據(jù)RBP4 ELISA試劑盒（武漢華美生物工程有限公司，貨號(hào)CSB-E09423h）、維生素A ELISA試劑盒（上海澤葉生物科技有限公司，貨號(hào)abx150383）進(jìn)行。

1.2.3 檢測(cè)血清中性激素水平 用化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)病人黃體生成素（luteinizing hormone，LH）、卵 泡 刺 激 素（follicle stimulating hormone，F(xiàn)SH）、雌二醇（estradiol，E2）、孕酮（progesterone，P）、催乳素（prolactin，PRL）水平，Access 2免疫分析儀及相應(yīng)檢測(cè)試劑盒購自美國內(nèi)克曼庫爾特公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用軟件SPSS 25.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用例（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示，兩組間行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。采用受試者工作曲線（ROC）分析生素A、RBP4及二者聯(lián)合對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥預(yù)測(cè)價(jià)值，并應(yīng)用曲線下面積（AUC）評(píng)價(jià)預(yù)測(cè)價(jià)值。Pearson法分析維生素A、RBP4與性激素的相關(guān)性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組血清維生素A、RBP4水平比較子宮內(nèi)膜異位癥組血清維生素A水平低于對(duì)照組（P＜0.05），血清RBP4水平高于對(duì)照組（P＜0.05），見表1。

表1 子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組血清維生素A、視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）水平比較/

表1 子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組血清維生素A、視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）水平比較/

注：RBP4為視黃醇結(jié)合蛋白4。

組別對(duì)照組子宮內(nèi)膜異位癥組t值P值例數(shù)70 68維生素A/（μg/L）0.57±0.11 0.35±0.09 12.84＜0.001 RBP4/（ng/L）14.06±4.21 30.61±6.58 17.65＜0.001

2.2 子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組血清性激素比較子宮內(nèi)膜異位癥組血清E2、P、FSH、LH、PRL水平高于對(duì)照組（P＜0.05），見表2。

表2 子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組血清性激素比較/

表2 子宮內(nèi)膜異位癥組和對(duì)照組血清性激素比較/

注：LH為黃體生成素，F(xiàn)SH為卵泡刺激素，E2為雌二醇，P為孕酮，PRL為催乳素。

組別對(duì)照組子宮內(nèi)膜異位癥組t值P值例數(shù)70 68 E2/（pmol/L）291.84±97.37 515.86±134.25 11.25＜0.001 P/（nmol/L）1.39±0.47 2.15±0.70 7.66＜0.001 FSH/（mIU/mL）3.28±1.09 4.35±1.62 4.56＜0.001 LH/（mIU/mL）3.30±1.15 4.82±1.86 5.79＜0.001 PRL/（mg/L）0.01±0.00 0.02±0.01 1.36＜0.001

2.3 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清維生素A、RBP4水平比較Ⅲ～Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清維生素A的水平低于Ⅰ～Ⅱ期（P＜0.05），血清RBP4水平高于Ⅰ～Ⅱ期（P＜0.05），見表3。

表3 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清維生素A、視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）水平比較/

表3 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清維生素A、視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）水平比較/

注：RBP4為視黃醇結(jié)合蛋白4。

組別Ⅰ～Ⅱ期Ⅲ～Ⅳ期t值P值例數(shù)28 40維生素A/（μg/L）0.44±0.07 0.24±0.05 13.76＜0.001 RBP4/（ng/L）26.89±5.06 37.64±6.11 7.65＜0.001

2.4 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清性激素水平比較Ⅲ～Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清E2、P、FSH、LH、PRL水平高于Ⅰ～Ⅱ期（P＜0.05），見表4。

表4 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清性激素水平比較/

表4 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清性激素水平比較/

注：E2為雌二醇，P為孕酮，F(xiàn)SH為促卵泡生成激素，LH為黃體生成，PRL為泌乳素。

組別Ⅰ～Ⅱ期Ⅲ～Ⅳ期t值P值例數(shù)28 40 E2/（pmol/L）230.62±74.65 413.39±93.47 8.60＜0.001 P/（nmol/L）1.22±0.37 1.62±0.46 3.81＜0.001 FSH/（mIU/mL）3.94±1.23 4.70±1.60 2.11 0.038 LH/（mIU/mL）4.05±1.22 5.36±1.92 3.18 0.002 PRL/（mg/L）0.01±0.00 0.02±0.01 6.04＜0.001

2.5 維生素A、RBP4及二者聯(lián)合對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥診斷價(jià)值分析維生素A截?cái)嘀禐?.49 μg/L，RBP4截?cái)嘀禐?0.44 ng/L時(shí)，ROC曲線分析，維生素A、RBP4及二者聯(lián)合診斷子宮內(nèi)膜異位癥的AUC分別為0.866、0.901、0.941，其中聯(lián)合診斷價(jià)值更高，見表5。

表5 ROC曲線分析對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥診斷價(jià)值

2.6 病人血清維生素A、RBP4與性激素相關(guān)性分析Pearson法分析顯示，維生素A與E2、P、FSH、LH、PRL呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）；RBP4與E2、P、FSH、LH、PRL呈正相關(guān)（P＜0.05），見表6。

表6 子宮內(nèi)膜異位癥血清維生素A、RBP4與性激素相關(guān)性分析

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥是婦科常見的疾病，研究顯示，該病在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)良好，但是具有侵襲和復(fù)發(fā)的特點(diǎn)，類似惡性腫瘤，嚴(yán)重影響病人及家庭的生活質(zhì)量。子宮內(nèi)膜異位癥的早期診斷和治療對(duì)于減輕病人痛苦有舉足輕重的作用，在臨床上意義重大。自子宮內(nèi)膜異位癥被首次報(bào)道以來，學(xué)者對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制提出過很多假說，但均不能完全解釋子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的原因。也有研究報(bào)道子宮內(nèi)膜異位癥可能與免疫和炎癥反應(yīng)、上皮細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化、免疫平衡等有關(guān)。張金風(fēng)［10］證實(shí)子宮內(nèi)膜異位癥病人體內(nèi)發(fā)生Th1/Th2平衡紊亂，Th1/Th2平衡向Th2細(xì)胞傾斜，Th2細(xì)胞因子顯著增多，導(dǎo)致液體免疫功能發(fā)生過度，細(xì)胞免疫功能降低，最終減弱機(jī)體防御功能。

維生素A又叫視黃醇，具有廣泛的生物作用，有文獻(xiàn)報(bào)告維生素A具有下列作用［11］：（1）有助于免疫系統(tǒng)正常；（2）可調(diào)節(jié)上皮組織的生長，維持上皮組織功能。研究顯示，機(jī)體中維生素A及其代謝產(chǎn)物維甲酸參與機(jī)體免疫應(yīng)答過程、維持免疫平衡中發(fā)揮重要作用［12］。研究顯示維生素A及其代謝產(chǎn)物視黃酸的減少與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生有關(guān)［13］。視黃醇結(jié)合蛋白是一類維生素A的運(yùn)載蛋白，屬于疏水小分子結(jié)合蛋白家族的成員。RBP4是機(jī)體內(nèi)維生素A儲(chǔ)存、吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)必需的蛋白［14］。RBP4在性激素相關(guān)的疾病中發(fā)揮重要作用。維生素A可參與動(dòng)物輸卵管和子宮內(nèi)環(huán)境的維持、卵泡的發(fā)育及卵細(xì)胞的成熟，此過程中RBP4承擔(dān)運(yùn)輸視黃醇的作用，并通過代謝酶的作用調(diào)控視黃醇的代謝平衡［15］。張建云［16］發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療后子宮內(nèi)膜異位癥病人血清RBP4水平顯著降低，同時(shí)病人體內(nèi)炎癥狀態(tài)也得到改善。李天爽等［17］發(fā)現(xiàn)妊娠期糖尿病病人血清中維生素A水平下降，而RBP4水平上升。本研究發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥組病人血清RBP4水平高于對(duì)照組，維生素A水平低于對(duì)照組，Ⅲ～Ⅳ期子宮內(nèi)膜異位癥病人血清RBP4水平顯著高于Ⅰ～Ⅱ期，維生素A水平顯著低于Ⅰ～Ⅱ期，提示維生素A、RBP4可能參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展，猜測(cè)維生素A、RBP4可能通過調(diào)控機(jī)體免疫和炎癥反應(yīng)從而參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生、發(fā)展。本研究顯示維生素A、RBP4對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥診斷的曲線下面積（AUC）分別為0.866、0.901，二者聯(lián)合對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥診斷的AUC為0.941，靈敏度為83.8%，特異度為94.3%，可見二者聯(lián)合時(shí)靈敏度皆高于維生素A、RBP4單獨(dú)診斷，且AUC也相較于單獨(dú)診斷更高，提示二者聯(lián)合對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥診斷可能更好。

子宮內(nèi)膜異位癥是性激素依賴性疾病，性激素可誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜發(fā)生改變［18］。FSH是糖蛋白類促性腺激素，可參與雌性動(dòng)物子宮的排卵及卵泡發(fā)育的過程，另外孕激素與雌激素受體結(jié)合后、雌激素與雌激素受體結(jié)合后會(huì)影響子宮內(nèi)膜功能，已證實(shí)血清RBP4可與性激素協(xié)調(diào)影響神經(jīng)-激素分泌調(diào)節(jié)機(jī)制，從而影響子宮內(nèi)膜功能［19］。孫阿梅等［20］研究顯示子宮內(nèi)膜異位癥病人血清LH、E2、P、FSH水平治療后較治療前顯著降低。本研究發(fā)現(xiàn)血清E2、P、FSH、LH、PRL在子宮內(nèi)膜異位癥組的水平高于對(duì)照組中的水平，提示子宮內(nèi)膜異位癥病人存在性激素水平紊亂現(xiàn)象。本研究發(fā)現(xiàn)維生素A與E2、P、FSH、LH、PRL呈負(fù)相關(guān)；RBP4與E2、P、FSH、LH、PRL呈正相關(guān)，提示維生素A、RBP4可能與病人性激素共同影響子宮內(nèi)膜異位癥。

綜上所述，子宮內(nèi)膜異位癥病人血清中維生素A水平呈低表達(dá)，RBP4呈高表達(dá)，維生素A、RBP4對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥具有一定的診斷價(jià)值，且兩者聯(lián)合診斷價(jià)值更優(yōu)，二者與性激素水平變化密切相關(guān)。但本研究也有不足之處，本研究尚未深入探討維生素A、RBP4如何影響子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生。