不同品種和生長(zhǎng)期嘉寶果葉片酚類及揮發(fā)性物質(zhì)研究

邱珊蓮 林寶妹 吳妙鴻 洪佳敏 鄭開斌

(福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)研究所，福建 漳州 363005)

嘉寶果(Myrciariaspp.)俗稱樹葡萄，為桃金娘科擬香桃木屬常綠灌木，原產(chǎn)于南美洲巴西、玻利維亞、巴拉圭和阿根廷[1]，目前在我國(guó)福建、廣東、海南、重慶等地均有種植。嘉寶果具有較高的觀賞及食藥用價(jià)值，植株及果實(shí)廣泛應(yīng)用于園林、食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域。嘉寶果植株葉片富含酚類物質(zhì)。酚類是植物中最常見和廣泛分布的次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有較強(qiáng)的抗氧化作用[2-4]，能有效預(yù)防高血脂[5-6]、高血糖[5,7-8]等慢性疾病，在醫(yī)藥領(lǐng)域具有較大的開發(fā)潛力。植物揮發(fā)性成分具有抗氧化[9]、抗抑郁[10]、殺蟲[11]、鎮(zhèn)靜鎮(zhèn)痛[12]、抗腫瘤[13]、抗菌[14]等藥理活性以及凈化空氣[15]等生物活性，能直接或間接地保護(hù)人身體和身心健康。如蒎烯具有抑菌、抗炎、抗氧化等作用[16-17]；β-石竹烯具有抗炎、鎮(zhèn)靜、抗腫瘤作用[18-19]；桉葉油醇具有抗菌、抗炎作用[20]。大多數(shù)桃金娘科植物葉富含揮發(fā)性成分[21-22]。嘉寶果葉片中揮發(fā)性物質(zhì)含量豐富且生物活性多樣，在醫(yī)藥、農(nóng)藥、化妝品、食品領(lǐng)域有較大的應(yīng)用空間。

嘉寶果是南美洲等地常見的藥食同源植物，全世界已知的約有99種[23]，僅極少數(shù)被用于研究葉片活性成分。本研究選擇國(guó)內(nèi)較常見的沙巴、四季早生、福岡等9個(gè)嘉寶果品種的葉片為試材，采用比色法、水蒸氣蒸餾法和頂空-氣相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用(head space-gas chromatography/mass spectrometry，HS-GC/MS)技術(shù)，檢測(cè)老葉及嫩葉中的酚類物質(zhì)、精油含量與揮發(fā)性成分及其相對(duì)含量，旨在篩選出多酚、精油、活性揮發(fā)性成分含量高的品種，明確活性成分富集的生長(zhǎng)期，為嘉寶果葉片的開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試品種為沙巴、四季早生、福岡、阿根廷、大紅鉆、喬尼爾、白艾斯、大巨紅晶和艾斯卡，均從我國(guó)臺(tái)灣引進(jìn)。9個(gè)嘉寶果品種的葉片均采集于福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)研究所國(guó)家閩臺(tái)特色作物種質(zhì)資源圃(24°33′7″ N，117°44′24″ E)，海拔20 m，樹齡12年，氣候、土壤及栽培管理措施一致。每個(gè)品種選3棵樹，每棵樹按東、南、西、北4個(gè)方位選擇生育期一致的健壯枝條各摘取相同質(zhì)量葉片。采集時(shí)間為2021年3月15日上午9時(shí)，嫩葉位于枝條頂部，質(zhì)地柔嫩且葉脈不清晰，葉片紅色或偏紅；老葉質(zhì)地較硬且葉脈清晰，葉片綠色。樣品采集后迅速裝入已經(jīng)編號(hào)的自封袋中，放入干冰中封存，帶回實(shí)驗(yàn)室室溫陰干，磨粉后過40目篩備用。

福林酚試劑，美國(guó)Sigma公司；沒食子酸、蘆丁，純度均>98%，日本東京化成工業(yè)株式會(huì)社；無水乙醇、氯化鈉、碳酸鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等均為分析純，上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；氮?dú)?、氦氣、氬?純度≥99.999%)，漳州市新興氣體有限公司。

1.2 主要儀器與設(shè)備

BS110 S型分析天平，德國(guó)Sartorius集團(tuán)；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；L5S紫外分光光度計(jì)，上海儀電分析儀器有限公司；揮發(fā)油測(cè)定器、DRT-TW/2 000 mL電熱套，廣州市東征化玻儀器有限公司；TriPlus 300 頂空自動(dòng)進(jìn)樣器、Trace1300-TSQ 9000氣質(zhì)聯(lián)用儀，美國(guó)賽默飛公司；KQ-300DE數(shù)控超聲波清洗儀，昆山市超聲儀器有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 總酚和總黃酮測(cè)定 取嘉寶果葉片粉末適量，按照料液比1∶80(g∶mL)的比例加入60%乙醇，于提取功率120 W、溫度40℃條件下提取10 min，6 000 r·min-1離心15 min，取上清液于50℃減壓旋蒸至無醇味，真空干燥得到提取物粉末，測(cè)定前復(fù)溶。

總酚提取和含量測(cè)定參考Lu等[24]的方法。取0.5 mL樣品于試管中，再加入2.5 mL 0.1 mol·L-1Folin-Ciocalteu試劑和2 mL 75 g·L-1碳酸鈉溶液，搖勻，45℃水浴反應(yīng)15 min，于765 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度值。按照上述方法，以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品總酚質(zhì)量濃度。

參考Xu等[25]的方法提取和測(cè)定總黃酮含量。取1 mL樣品液，加入0.3 mL 5%亞硝酸鈉溶液，混勻，靜置6 min后加入0.3 mL 10%硝酸鋁溶液，搖勻靜置6 min，然后加入4 mL 4%氫氧化鈉溶液，最后加入蒸餾水定容至10 mL，靜置15～20 min，于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度值。按照上述方法，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品，根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品總黃酮質(zhì)量濃度。

樣品中總酚、總黃酮含量用每克干燥葉片中所含的相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品的量進(jìn)行計(jì)算：樣品中總酚(總黃酮)含量=[液體樣品總酚(總黃酮)質(zhì)量濃度×復(fù)溶體積]/提取物粉末對(duì)應(yīng)的干葉片質(zhì)量。

1.3.2 精油提取與成分測(cè)定 采用水蒸氣蒸餾法[26]測(cè)定得油率。取200 g粉末，放入2 000 mL的圓底燒瓶，按水葉比為4∶1的體積質(zhì)量比加入水，再加入氯化鈉，使氯化鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為15%。燒瓶上接揮發(fā)油測(cè)定器，揮發(fā)油測(cè)定器的上端口接冷凝管，用電熱套爐對(duì)燒瓶進(jìn)行加熱，水沸騰后蒸餾2 h。從揮發(fā)油測(cè)定器上端放出精油，所得精油用乙醚萃取，取乙醚層，把乙醚揮干即得葉片精油。吸取3 mL嘉寶果葉片精油立即放入20 mL的頂空瓶，用含硅膠墊的鋁蓋密封。每個(gè)品種的精油樣品設(shè)3個(gè)頂空瓶，放入自動(dòng)頂空進(jìn)樣器進(jìn)行HS-GC/MS測(cè)定。頂空條件：爐溫85℃，腔溫95℃，傳輸線溫度135℃，瓶靜態(tài)平衡時(shí)間3 min，壓力平衡時(shí)間0.1 min，進(jìn)樣時(shí)間0.5 min，進(jìn)樣體積1.0 mL。氣相色譜條件：TG-5SILMS，30 m×0.25 mm ×0.25 μm石英毛細(xì)管柱；載氣為He(99.999%)，體積流量1.2 mL·min-1，分流比10∶1，進(jìn)樣口溫度230℃。柱溫箱起始溫度50℃，保持5 min，然后以5℃·min-1升溫到160℃，再以10℃·min-1升溫到250℃，保持5 min。質(zhì)譜條件：電離方式為電子轟擊式離子源(electron impact,EI)，離子源溫度300℃，接口溫度280℃。掃描質(zhì)量范圍為30～550 amu。揮發(fā)性成分分析：各組分質(zhì)譜經(jīng)美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院(National Institute of Standards and Technology,NIST)檢索，再經(jīng)人工譜圖分析以確定各化學(xué)成分，采用峰面積歸一法計(jì)算各成分相對(duì)百分含量。揮發(fā)性成分相似率參照王華夫等[27]的方法計(jì)算。

1.4 數(shù)據(jù)分析

通過SPSS 22.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性和主成分分析；用Excel 2007制作圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同品種嘉寶果老/嫩葉的總酚和總黃酮含量

由表1可知，不同品種嘉寶果老葉與嫩葉之間總酚和總黃酮含量差異顯著。嫩葉中的總酚和總黃酮含量均顯著高于老葉。18個(gè)樣品中，總酚以沙巴嫩葉含量最高，達(dá)到葉片干基的31.87%，適用于提取酚類物質(zhì)；四季早生嫩葉次之，含量為27.15%；大紅鉆老葉含量(8.77%)最低?？傸S酮?jiǎng)t以阿根廷嫩葉含量最高，為24.81%，適用于提取黃酮類物質(zhì)；大巨紅晶嫩葉次之(21.34%)，大紅鉆老葉含量(6.28%)最低。

2.2 不同品種間嘉寶果葉片揮發(fā)性成分差異

由表1可知，嘉寶果不同品種葉片之間精油含量整體差異顯著。沙巴老葉精油含量(2.78%)最高，其次為沙巴嫩葉(2.42%)，故沙巴葉片適于提取精油。由表2可知，從9個(gè)品種老葉精油中檢測(cè)出相對(duì)含量在0.05%以上的化合物有31～44種，其中共有成分13種，各品種間揮發(fā)性成分的組成和相對(duì)含量存在明顯差異。由表2和表3可知，老葉揮發(fā)性成分包含萜類、酯類、醇類、芳烴類以及酮類五大類，其中均以萜類化合物為主體成分，含量在80.85%～96.05%范圍內(nèi)，四季早生老葉萜類化合物含量最高，福岡老葉含量最低。9個(gè)品種樣品中，酯類、醇類和酮類均以福岡老葉含量最高，分別為12.08%、2.40%、1.87%；芳烴類以大紅鉆老葉含量最高，為0.81%。由表4可知，沙巴老葉單萜類(單萜烯+單萜含氧衍生物)含量(68.90%)遠(yuǎn)高于倍半萜類(倍半萜烯+倍半萜含氧衍生物，24.08%)。福岡、阿根廷、大紅鉆單萜類含量略高于倍半萜類。其余5個(gè)品種(四季早生、喬尼爾、白艾斯、大巨紅晶、艾斯卡)萜類物質(zhì)以倍半萜類為優(yōu)勢(shì)成分，其成分個(gè)數(shù)和含量明顯高于單萜，尤其是艾斯卡和喬尼爾，兩者老葉倍半萜的相對(duì)含量達(dá)到87%以上。大巨紅晶的單萜類主要由單萜含氧衍生物組成，喬尼爾的單萜烯和單萜含氧衍生物含量相當(dāng)，其余品種單萜烯含量遠(yuǎn)高于單萜含氧衍生物。所有品種的倍半萜以烯烴類為主，其含氧衍生物含量較低。

表1 嘉寶果葉片總酚、總黃酮與精油含量Table 1 The contents of total polyphenols,flavonoids and essential oil of leaves of Jaboticaba

從9個(gè)品種嫩葉中檢測(cè)出相對(duì)含量在0.05%以上的化合物有28～40種，其中共有成分11種，各品種嫩葉間揮發(fā)性成分的組成和相對(duì)含量存在明顯差異。由表2和表3可知，嫩葉揮發(fā)性成分包含萜類、酯類、醇類、芳烴類以及醛類五大類。同樣均以萜類化合物為主體成分，含量范圍在92.91%～97.67%之間，并且以沙巴嫩葉含量最高，喬尼爾嫩葉含量最低。9個(gè)品種樣品中，酯類以沙巴、白艾斯嫩葉含量最高，為0.25%；醇類以白艾斯嫩葉含量最高，為1.12%；芳烴類以大紅鉆嫩葉含量最高，為0.39%；醛類僅在大巨紅晶和艾斯卡嫩葉中檢測(cè)到少量。

由表4可知，沙巴、阿根廷、大紅鉆嫩葉單萜類含量明顯高于倍半萜類，其余品種萜類物質(zhì)以倍半萜類為優(yōu)勢(shì)成分，其成分個(gè)數(shù)和含量明顯高于單萜。尤其是大巨紅晶和艾斯卡，兩者嫩葉倍半萜的相對(duì)含量達(dá)到94%以上。9個(gè)品種嫩葉中單萜類和倍半萜類的主體成分均為烯烴類，單萜含氧衍生物相對(duì)含量最高的為福岡，僅為5.93%，倍半萜含氧衍生物相對(duì)含量最高的為大巨紅晶，僅為5.00%。

2.3 嘉寶果老葉與嫩葉間揮發(fā)性成分組成差異

除福岡和白艾斯外，其余品種老葉與嫩葉之間精油含量差異顯著(表1)。由表2～4可知，沙巴、大紅鉆、大巨紅晶3個(gè)品種老葉和嫩葉間的揮發(fā)性成分差異較大，老葉與嫩葉的揮發(fā)性成分相似率分別為73.82%、81.93%、85.68%；阿根廷、四季早生、白艾斯、艾斯卡、喬尼爾、福岡6個(gè)品種老葉和嫩葉間的揮發(fā)性成分差異較小，相似率分別為99.14%、96.50%、96.09%、95.32%、94.72%、94.03%。沙巴老葉與嫩葉之間相對(duì)含量差距最大的主香成分是桉葉油醇、β-蒎烯、β-石竹烯和β-胡椒烯。大紅鉆老葉與嫩葉之間含量差距最大的主香成分是β-蒎烯、桉葉油醇、β-胡椒烯和α-蒎烯。大巨紅晶老葉與嫩葉之間含量差距最大的主香成分是桉葉油醇和β-石竹烯。其余品種老葉與嫩葉主香成分含量雖不同，但差距相對(duì)較小。

表2 不同品種嘉寶果葉揮發(fā)性成分相對(duì)含量Table 2 Relative content of volatile components in leaves of different varieties of jaboticaba /%

表2(續(xù))

表2(續(xù))

表3 嘉寶果葉揮發(fā)性成分組成和相對(duì)含量Table 3 Volatile composition and relative contents of jaboticaba leaves

表4 嘉寶果葉萜類物質(zhì)組成和相對(duì)含量Table 4 Composition and relative contents of terpenoids in jaboticaba leave

2.4 不同品種嘉寶果葉片主香成分組成

由表2可知，9個(gè)品種葉片的主要成分組成及含量差異較大。如圖1所示，各樣品的優(yōu)勢(shì)成分組成差異較大，α-蒎烯、β-蒎烯、桉葉油醇、β-石竹烯和β-胡椒烯5種成分的相對(duì)含量以沙巴最大。沙巴老葉以α-蒎烯(24.55%)和桉葉油醇(23.91%)為最主要的2種成分，沙巴嫩葉以α-蒎烯(29.48%)和β-蒎烯(32.93%)為最主要的2種成分。β-胡椒烯是四季早生老葉(41.10%)與嫩葉(30.30%)、大巨紅晶老葉(24.75%)與嫩葉(23.82%)、艾斯卡老葉(41.37%)與嫩葉(30.15%)的最主要成分。福岡老葉(25.30%)和嫩葉(31.81%)以β-石竹烯為最主要成分。β-蒎烯是阿根廷老葉(26.31%)和嫩葉(26.09%)、大紅鉆嫩葉(29.81%)和白艾斯老葉(15.82%)的最主要成分。大紅鉆老葉和白艾斯嫩葉不存在優(yōu)勢(shì)特別明顯的1～2種主要成分。大紅鉆老葉中α-蒎烯、β-蒎烯、桉葉油醇、β-胡椒烯相對(duì)含量較高，在11.85%～15.77%之間；白艾斯嫩葉中β-蒎烯、β-石竹烯、β-胡椒烯相對(duì)含量較高，在10.61%～12.88%之間。喬尼爾老葉和嫩葉以β-石竹烯、β-胡椒烯為最主要的2種成分，老葉相對(duì)含量分別為17.54%、19.00%，嫩葉相對(duì)含量分別為25.08%、17.40%。

2.5 不同品種嘉寶果葉片揮發(fā)性物質(zhì)主成分分析

分別對(duì)老葉、嫩葉相對(duì)含量大于10%的香氣物質(zhì)進(jìn)行主成分分析，提取特征值大于1的主成分，得到主成分的特征值和貢獻(xiàn)率(表5)。結(jié)果表明，老葉PCA1、PCA2、PCA3和PCA4的特征值分別為5.781、2.357、2.185和1.537，方差貢獻(xiàn)率分別為44.470%、18.133%、16.804%和11.821%。前4個(gè)主成分的累計(jì)方差貢獻(xiàn)率達(dá)到91.229%，說明這4個(gè)主成分基本上反映了原始變量的絕大部分信息，符合分析要求。

不同品種嘉寶果老葉和嫩葉Old leaf and tender leaf of different varieties of jaboticaba圖1 9個(gè)嘉寶果品種葉片主要揮發(fā)性成分對(duì)比分析Fig.1 Comparative analysis of main volatile components in leaves of nine varieties of jaboticaba

表5 老葉香氣主成分的特征值及貢獻(xiàn)率Table 5 Eigenvalues,contribution,and cumulative contribution of principal components in old leaves

主成分載荷矩陣反映各變量指標(biāo)與各主成分之間的關(guān)系，載荷系數(shù)絕對(duì)值越大，表明該變量與對(duì)應(yīng)主成分的關(guān)聯(lián)程度越大。由表6可知，對(duì)老葉PCA1貢獻(xiàn)較大的指標(biāo)有單萜含氧衍生物、α-蒎烯、單萜烯、β-蒎烯，載荷值分別為-0.983、0.962、0.891、0.754；對(duì)PCA2貢獻(xiàn)較大的為α-芹子烯，載荷值為-0.625；對(duì)PCA3貢獻(xiàn)較大的為β-石竹烯，載荷值為0.820，對(duì)PCA4貢獻(xiàn)較大的為β-芹子烯，載荷值為0.593。PCA1和PCA2的累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)62.604%，超過了總共貢獻(xiàn)率的一半。說明單萜含氧衍生物、α-蒎烯、單萜烯、β-蒎烯、α-芹子烯是導(dǎo)致不同品種間嘉寶果老葉香氣差異的主要成分。依據(jù)主成分分析得出的因子得分和特征值計(jì)算出主成分得分，以PCA1得分為橫坐標(biāo)，PCA2得分為縱坐標(biāo)作主成分樣品分布圖(圖2)。結(jié)果表明，9個(gè)品種樣品老葉歸為四大類，沙巴、福岡歸為一類，在第1象限；喬尼爾、大巨紅晶、艾斯卡歸為一類，在第2象限；四季早生單獨(dú)一類，在第3象限；大紅鉆、阿根廷、白艾斯歸為一類，在第4象限。

表6 老葉香氣主成分載荷矩陣Table 6 Loading matrix of first four principal components in old leaves

圖2 老葉主成分樣品分布圖Fig.2 Sample distribution diagram based on principal component scores in old leaves

由表7可知，嫩葉PCA1、PCA2和PCA3的特征值分別為6.453、2.281和1.404，方差貢獻(xiàn)率分別為53.771%、19.005%和11.699%。前3個(gè)主成分的累計(jì)方差貢獻(xiàn)率達(dá)到84.475%，基本反映了原始變量的絕大部分信息，符合分析要求。

由表8可知，對(duì)嫩葉PCA1貢獻(xiàn)較大的指標(biāo)有倍半萜烯、單萜烯、β-蒎烯、α-蒎烯，載荷值分別為0.990、-0.982、-0.968、-0.944；對(duì)PCA2貢獻(xiàn)較大的為β-石竹烯，載荷值為0.956；對(duì)PCA3貢獻(xiàn)較大的為β-芹子烯，載荷值為0.751。PCA1和PCA2的累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)72.776%，超過了總貢獻(xiàn)率的一半。說明倍半萜烯、單萜烯、β-蒎烯、α-蒎烯、β-石竹烯是不同品種間嘉寶果嫩葉香氣產(chǎn)生差異的主要成分。主成分樣品分布圖(圖3)顯示，9個(gè)品種樣品嫩葉歸為四大類，喬尼爾單獨(dú)一類，在第1象限；福岡單獨(dú)一類，在第2象限；沙巴、大紅鉆、阿根廷歸為一類，在第3象限；白艾斯、艾斯卡、大巨紅晶、四季早生歸為一類，在第4象限，其中艾斯卡與大巨紅晶距離最近，表明這兩者間香氣較為相似。

圖3 嫩葉主成分樣品分布圖Fig.3 Sample distribution diagram based on principal component scores in tender leaves

表7 嫩葉香氣主成分的特征值及其貢獻(xiàn)率Table 7 Eigenvalues,contribution,and cumulative contribution of principal components in tender leaves

表8 嫩葉香氣主成分載荷矩陣Table 8 Loading matrix of first four principal components in tender leaves

3 討論

植物酚類物質(zhì)具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗腫瘤、防治心腦血管疾病等多種功能，具有較高的開發(fā)和利用價(jià)值。近年來，關(guān)于天然來源植物多酚的生物活性及其在食品、醫(yī)藥中的開發(fā)應(yīng)用已成為研究熱點(diǎn)。前人研究發(fā)現(xiàn)沙巴嫩葉具有較強(qiáng)的抗氧化和體內(nèi)外降糖活性[7-8]，其酚類物質(zhì)含量高于四季早生、福岡和阿根廷3個(gè)品種[28]。這與本研究結(jié)果結(jié)果一致，即9個(gè)品種老/嫩葉中酚類物質(zhì)含量以沙巴嫩葉最高(31.87%)，高于高海榮等[29]報(bào)道的12種茶葉茶多酚含量。因此，沙巴嫩葉在醫(yī)藥領(lǐng)域有極大的研究?jī)r(jià)值和開發(fā)潛力。

植物揮發(fā)性成分具有綠色天然、健康安全、成分復(fù)雜、生物活性多樣等特性，已成為當(dāng)前關(guān)注的熱點(diǎn)，具有巨大的開發(fā)潛力。本研究中，9個(gè)嘉寶果品種的老/嫩葉揮發(fā)性物質(zhì)均以萜類為主體成分，該特征與已報(bào)道的結(jié)果[30-34]一致。萜類包括萜烯及其含氧衍生物，萜烯包括單萜烯和倍半萜烯，萜烯含氧衍生物包括單萜含氧衍生物和倍半萜含氧衍生物。本研究中，18個(gè)葉片樣品萜類主要成分為萜烯，含量在68.58%～96.89%之間。其中，沙巴及阿根廷老/嫩葉和大紅鉆嫩葉單萜烯含量高于倍半萜烯，其余13個(gè)樣品反之。所有樣品萜烯含氧衍生物含量均明顯低于萜烯含量。Henriques等[30]發(fā)現(xiàn)Myrciariafallax、M.acuminatissima和M.bombycina葉片主要揮發(fā)性物質(zhì)分別為倍半萜含氧衍生物(86.5%)、單萜含氧衍生物(35.1%)、單萜烯(53.0%)，M.glabra和M.multiflora主要揮發(fā)性物質(zhì)為倍半萜烯；Apel等[31]報(bào)道的4個(gè)嘉寶果品種葉片中，均以倍半萜含氧衍生物為主要成分；Pino等[32]報(bào)道的M.dubia單萜烯含量>85%；Schneider等[33]報(bào)道的M.tenella單萜烯含量>60%；Tietbohl等[34]報(bào)道的M.floribunda以單萜含氧衍生物含量最高(48.6%)。由此可見，不同品種間葉片中揮發(fā)性物質(zhì)存在共性，如主體成分均為萜類成分，但萜類的組成類別存在明顯差異。

植物揮發(fā)性成分組成與品種、發(fā)育階段、土壤、氣候等因素息息相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，不同嘉寶果品種老葉與嫩葉間揮發(fā)性成分組成存在明顯差異。沙巴老葉中主要成分為單萜類化合物，含量達(dá)到68.90%，主要由α-蒎烯(24.55%)、桉葉油醇(23.91%)、β-蒎烯(13.95%)等組成，與其他8個(gè)品種老葉的主要成分組成及含量相差較大。沙巴嫩葉主要由α-蒎烯(29.48%)和β-蒎烯(32.93%)組成，桉葉油醇含量為1.67%，與老葉主要成分差異明顯。已報(bào)道文獻(xiàn)中尚未發(fā)現(xiàn)主要揮發(fā)性物質(zhì)組成及其含量與沙巴相類似的品種。Schneider等[33]報(bào)道M.tenella葉片精油中的主要成分有α-蒎烯(31.5%)、β-蒎烯(19.5%)、桉葉油醇(6.6%)等；Henriques等[30]報(bào)道M.bombycina葉片精油中α-蒎烯、β-蒎烯、桉葉油醇的含量分別為23.9%、12.4%、2.5%，這2個(gè)品種與沙巴主要成分類型較為接近，但含量相差較大。福岡老葉和嫩葉均以β-石竹烯含量最高，其次為β-蒎烯，再次為α-蒎烯。Apel等[31]報(bào)道M.edulis葉片的主要成分為β-石竹烯(21.2%)和石竹烯氧化物(18.1%)，但未檢測(cè)到α-蒎烯和β-蒎烯，以β-石竹烯、β-蒎烯、α-蒎烯為主要成分的品種鮮見報(bào)道。不同品種葉片主香成分差異較大，M.acuminatissima和M.fallax的主要成分分別為芳樟醇(22.3%)和α-沒藥醇(83.8%)[30]，M.cordifolia的主要成分為沒藥醇氧化物A(28.0%)和β-石竹烯(15.9%)[31]，M.dubia的主要成分為α-蒎烯(74.3%)[32]，M.floribunda的主要成分為桉葉油醇(38.4%)[34]。本研究的9個(gè)品種香氣成分組成均不同于以上報(bào)道，這種差異可能是由品種間遺傳物質(zhì)差異引起的，也有可能是種植地域不同造成的。例如，巴西最南部南大河州的M.tenella葉片主香成分為α-蒎烯和β-蒎烯[33]，而東南部圣保羅州的M.tenella葉片主香成分為β-石竹烯和桉油烯醇[35]。巴西戈亞斯州伊德羅蘭迪亞6個(gè)不同地點(diǎn)的M.cauliflora植株葉片主香成分組成相同，但含量差異顯著[36]。本研究中β-胡椒烯是四季早生、大巨紅晶、艾斯卡葉片的最主要揮發(fā)性成分，但在已有研究報(bào)道中鮮見葉片以β-胡椒烯為主香成分的品種，僅Duarte等[36]發(fā)現(xiàn)M.cauliflora含有少量的β-胡椒烯(0.18%～0.41%)。目前已研究的植物中發(fā)現(xiàn)吉林長(zhǎng)白山和黑龍江尚志的食用龍牙楤木芽(Araliaelata)均以β-胡椒烯為主香成分，且含量均大于23%[37]。表明同一物種不同品種間主香成分可能千差萬別，而不同物種間卻可能存在共同的主香成分。

本研究主成分分析結(jié)果表明，無論是老葉還是嫩葉，大紅鉆與阿根廷均歸在同一類，說明兩品種間香氣成分組成較類似，如兩者含有相同的最主要成分β-蒎烯；大巨紅晶與艾斯卡也均歸在同一類，同樣說明兩品種間香氣成分組成較類似，如兩者含有相同的最主要成分β-胡椒烯。

4 結(jié)論

本研究的9個(gè)嘉寶果品種18個(gè)老/嫩葉樣品中，酚類和揮發(fā)性優(yōu)勢(shì)成分組成差異較大。沙巴嫩葉總酚含量(31.87%)最高，可用于多功能藥物開發(fā)。沙巴老葉精油含量(2.78%)最高，可用于提取富含蒎烯和桉葉油醇的精油，開發(fā)抑菌消炎藥物。沙巴老葉主要成分為α-蒎烯、桉葉油醇；沙巴嫩葉為β-蒎烯和α-蒎烯；阿根廷葉片、大紅鉆嫩葉和白艾斯老葉為β-蒎烯。福岡葉片富含β-石竹烯，精油含量較高，可用于提取富含β-石竹烯精油，開發(fā)抗炎、鎮(zhèn)靜、抗腫瘤藥物。四季早生、大巨紅晶、艾斯卡葉片主香成分為β-胡椒烯；喬尼爾葉片為β-石竹烯、β-胡椒烯；大紅鉆老葉和白艾斯嫩葉無優(yōu)勢(shì)特別明顯的主要成分。綜上，沙巴嫩葉總酚含量最高，精油含量較高，蒎烯(β-蒎烯+α-蒎烯)相對(duì)含量高達(dá)62.41%，因而沙巴嫩葉是一種研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用價(jià)值較高的材料。