復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及免疫功能的影響

何驥遠(yuǎn)，黃友解，郎芯蕊，商煜波，邵強，林繼和，劉文強，董信陽，王友明*

（1.浙江大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310012；2.蒼南縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，浙江溫州 325800；3.嘉興嘉華牧業(yè)有限公司，浙江嘉興 314000；4.泰順縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，浙江溫州 325500）

在標(biāo)準(zhǔn)化、設(shè)施化養(yǎng)殖模式下，動物生活空間狹小，環(huán)境條件受限，易受多種應(yīng)激因素影響，導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降，目前抗生素存在諸多副作用，尋找抗生素替代品格外重要。微生態(tài)制劑是一類利用有益微生物及其代謝產(chǎn)物制成的生物活菌制劑，可用于畜禽健康養(yǎng)殖。微生態(tài)制劑具有促進(jìn)動物生長、降低耗料增重比、提高機體細(xì)胞免疫和體液免疫的能力，以及改善飼養(yǎng)環(huán)境、提高畜產(chǎn)品品質(zhì)等功能。復(fù)合微生態(tài)制劑是將多種有益菌復(fù)合，可協(xié)同發(fā)揮多菌種的生物學(xué)活性。前期研究表明，枯草芽孢桿菌能夠改善產(chǎn)蛋后期蛋雞的腸道健康及生產(chǎn)性能。本試驗研制了由芽孢桿菌（3 株）和乳酸菌（1 株）組成的復(fù)合微生態(tài)制劑，研究其對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及免疫功能的影響，為其今后推廣應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 復(fù)合微生態(tài)制劑由樂清田豐生物科技有限公司生產(chǎn)并提供。該制劑由3 株可耐受酸性環(huán)境的枯草芽孢桿菌和1 株乳酸菌及其發(fā)酵產(chǎn)物組成，主要成分為枯草芽孢桿菌和乳酸菌，為粉狀物。經(jīng)浙江大學(xué)測定，本批次含枯草芽孢桿菌活菌數(shù)6.5×10CFU/g（芽孢形成率88.4%），乳酸菌活菌數(shù)5.3×10CFU/g，木聚糖酶和中性蛋白酶的酶活分別達(dá)1 133.4、118.3 U/g。

1.2 試驗設(shè)計 選擇健康狀況良好、體重、產(chǎn)蛋率基本一致的產(chǎn)蛋中后期（49 周齡）京粉蛋雞336 只，隨機分成4 組，每組4 個重復(fù)，每個重復(fù)21 只。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗組在飼糧中分別添加0.5%、1%、1.5%復(fù)合微生態(tài)制劑（等量基礎(chǔ)飼糧中的麩皮、沸石粉）。預(yù)試期7 d，正試期56 d。

1.3 試驗飼糧組成 參照《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T33-2004）的蛋雞營養(yǎng)需要并結(jié)合生產(chǎn)實踐配制基礎(chǔ)飼糧，飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)試驗在泰順縣西旸鎮(zhèn)金三角養(yǎng)殖專業(yè)合作社進(jìn)行。采用4 層階梯式籠養(yǎng)。試驗前打掃、清理雞籠和消毒。試驗期間，按標(biāo)準(zhǔn)喂食120 g/（d·只），每只雞日喂3 次，每次在原來的基礎(chǔ)上繼續(xù)添料，自由飲水，其他管理按常規(guī)進(jìn)行。

1.5 生長性能測定 以重復(fù)為單位，每天記錄剩料量、產(chǎn)蛋數(shù)、合格蛋重和次品蛋數(shù)（破殼蛋、軟殼蛋等）、死淘、腹瀉次數(shù)情況。計算產(chǎn)蛋率、次品蛋率、平均蛋重、平均采食量、料蛋比、腹瀉率。計算公式：

產(chǎn)蛋率=產(chǎn)蛋數(shù)/試驗雞數(shù)×100%

次品蛋率=次品蛋數(shù)/產(chǎn)蛋數(shù)×100%

平均蛋重=合格蛋總重/合格蛋數(shù)

平均采食量=（投料量–剩料量）/每組蛋雞存欄數(shù)

料蛋比=平均采食量/平均蛋重

腹瀉率=各欄累計腹瀉雞只天數(shù)/各欄累計飼養(yǎng)雞總只天數(shù)×100%

1.6 蛋品質(zhì)測定 試驗最后1 d，每組抽取32 枚新鮮雞蛋（每個重復(fù)8 枚，重量基本一致），檢測蛋品質(zhì)。蛋重、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃顏色、蛋殼厚度、蛋殼強度指標(biāo)采用日產(chǎn)DET-6000 蛋品質(zhì)測定儀測定。

1.7 屠宰及樣品采集 試驗結(jié)束次日，每組隨機選取大小基本一致且健康的12 只蛋雞（每個重復(fù)3 只），空腹稱重后進(jìn)行翅下采血，裝入促凝管中，待血清析出后離心，3 500 r/min 離心10 min，血清分裝于Eppendorf管中，并于-20℃條件下保存待測。血清白細(xì)胞介素-4（IL-4）、腫瘤壞死因子-（TNF-）水平采用ELISA試劑盒測定，試劑盒來源于南京建成生物工程研究所；免疫球蛋白IgG 水平在杭州市第二人民醫(yī)院采用全自動生化分析儀（OLYMPUS AU5421+ISE 型，日本OLYMPUS 公司）測定。

試雞采血后安樂死并屠宰，取肝臟、脾臟稱重。器官指數(shù)計算公式：

器官指數(shù)（g/kg）=器官重/宰前活重

1.8 統(tǒng)計分析 數(shù)據(jù)采用Excel 整理后，用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計，采用單因子方差分析進(jìn)行差異顯著性檢驗，最小顯著差數(shù)法（LSD）進(jìn)行多重比較，結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，以<0.05 作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知，各組產(chǎn)蛋率、平均蛋重、次品蛋率、料蛋比均差異不顯著。1.0% 和1.5% 復(fù)合微生態(tài)制劑組均低于0.5%復(fù)合微生態(tài)制劑組和對照組（<0.05）。

表2 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響（n=21）

2.2 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋品質(zhì)的影響 由表3 可知，蛋殼強度隨著微生態(tài)制劑添加量增加而增加（>0.05）；0.5%、1.0%復(fù)合微生態(tài)制劑組蛋黃顏色較對照組分別提高6.99%、11.40%（<0.05）。

表3 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋品質(zhì)的影響（n=32）

2.3 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞體重及器官指數(shù)的影響 由表4 可知，各組間宰前活重、脾臟指數(shù)差異不顯著；1.5%復(fù)合微生態(tài)制劑組肝臟指數(shù)較對照組提高了11.34%（<0.05），0.5%、1.0% 復(fù)合微生態(tài)制劑組略高于對照組（>0.05）。

表4 復(fù)合微生態(tài)制劑對體重及器官指數(shù)的影響（n=12）

2.4 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響 由表5 可知，1.5%復(fù)合微生態(tài)制劑組IgG、IL-4 水平較對照組分別提高54.75%、51.99%（<0.05），0.5%、1.0%復(fù)合微生態(tài)制劑組略高于對照組（>0.05）；0.5%、1.0%、1.5%復(fù)合微生態(tài)制劑組TNF-水平較對照組分別降低42.45%、56.20%、36.41%（<0.05）。

表5 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響（n=12）

3 討 論

3.1 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由于蛋雞品種、日齡以及菌種和菌種活性不同，復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞生產(chǎn)性能的影響有較大差異。李曉麗等研究表明，復(fù)合微生態(tài)制劑組產(chǎn)蛋率、平均蛋重均高于對照組，但影響不顯著。本試驗中，與對照組相比，復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞全期產(chǎn)蛋率和平均蛋重的提高未達(dá)到顯著水平，只有腹瀉率顯著下降?？赡苁且驗槲⑸鷳B(tài)制劑進(jìn)入腸道后可分泌多種酶類，與體內(nèi)的酶發(fā)生協(xié)同作用，加快飼料中大分子物質(zhì)降解，同時能夠消耗腸道內(nèi)的游離氧，使腸道形成了低氧環(huán)境，抑制大腸桿菌等需氧病原菌的入侵和定植，促進(jìn)腸道健康，使腹瀉率顯著降低。同時益生菌在腸道定植、生長競爭了腸道營養(yǎng)，也可能是其促進(jìn)生產(chǎn)性能效果不明顯的原因。

3.2 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋品質(zhì)的影響 哈氏單位、蛋白高度、蛋殼厚度、蛋殼強度和蛋黃顏色是評價蛋品質(zhì)的重要指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)，試驗組蛋白高度、蛋殼強度和哈氏單位與對照組差異不顯著；0.5%、1.0%復(fù)合微生態(tài)制劑組蛋黃顏色較對照組分別提高6.99%、11.40%。李俊波等研究也發(fā)現(xiàn)，在飼糧中枯草芽孢桿菌制劑能夠提高蛋殼強度，但本試驗中蛋殼強度僅是有所增加。胡昌艷等在飼糧中添加枯草芽孢桿菌+乳酸菌復(fù)合微生態(tài)制劑可提高蛋雞產(chǎn)蛋的蛋殼厚度，改善蛋品質(zhì)。白子金等與呂遠(yuǎn)蓉等研究表明，在飼糧中添加復(fù)合微生態(tài)制劑可有效提高雞蛋的蛋黃顏色。復(fù)合微生態(tài)制劑可促進(jìn)蛋白合成和沉積，提高蛋白高度和哈氏單位；還可以為腸道創(chuàng)造良好的消化環(huán)境，促進(jìn)蛋雞對鈣和磷等礦物質(zhì)的吸收，提高血清鈣、磷水平，為蛋殼生成提供充足的鈣磷供應(yīng)，提高蛋殼強度。另外，復(fù)合微生態(tài)制劑還可以促進(jìn)腸道健康，提高脂肪消化，進(jìn)而促進(jìn)色素的消化、吸收和轉(zhuǎn)運，并在代謝中合成類胡蘿卜素，進(jìn)而加深蛋黃顏色。

3.3 復(fù)合微生態(tài)制劑對蛋雞免疫功能的影響 本試驗結(jié)果表明，復(fù)合微生態(tài)制劑可顯著提高IgG 含量、IL-4水平，顯著降低TNF-水平。馮敏山等研究表明，以乳酸菌為主要成分的微生態(tài)制劑對雞血清中IgG 含量有提高趨勢；祝天龍等研究顯示，枯草芽孢桿菌能有效提高血清中IgG 含量、補體C3 和C4。本研究中肝臟指數(shù)略有增加，可能某種因素刺激作用引起，其增大可能對促進(jìn)代謝、提高免疫有一定幫助，有待于進(jìn)一步的研究。微生態(tài)制劑能夠刺激蛋雞腸道，促進(jìn)腸道T淋巴細(xì)胞和B 淋巴細(xì)胞成熟，從而增強體液免疫；微生態(tài)制劑中的有益菌株還可以作為免疫激活劑，增強動物機體免疫器官能力，從而提高機體的免疫力。

4 結(jié) 論

本試驗結(jié)果表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加1%復(fù)合微生態(tài)制劑可顯著提高蛋黃顏色，改善蛋品質(zhì)，添加1.5%復(fù)合微生態(tài)制劑可顯著提高IgG 含量、IL-4 水平及肝臟指數(shù)，顯著降低TNF-水平，可提高蛋雞免疫力，推薦使用劑量為1%。