馬產(chǎn)乳性狀相關(guān)候選基因研究進(jìn)展

李媛媛，楊濤，趙春江*

（1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 100193；2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)馬研究中心，北京 100193）

馬乳作為一種具有營養(yǎng)和治療功效的飲品而受到人們關(guān)注。馬乳飲品在我國、蒙古國、俄羅斯以及歐洲的一些地區(qū)廣受歡迎。馬乳中含有豐富的多不飽和脂肪酸和維生素，脂肪和膽固醇含量較低。馬乳除具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，還有美容、治療疾病等功效。挖掘和驗(yàn)證馬泌乳相關(guān)功能基因可為乳用馬分子育種技術(shù)的開發(fā)和利用打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，對我國高產(chǎn)乳用馬培育和馬乳產(chǎn)業(yè)發(fā)展發(fā)揮重要的技術(shù)支撐作用，使我國早日育成泌乳性能優(yōu)良的專門化乳用馬品種。此外，隨著生活水平的提高，人們越來越青睞健康、綠色的食品，有效開發(fā)和利用馬乳資源，符合社會發(fā)展的需求，具有廣闊的市場前景。本文介紹了馬乳的營養(yǎng)特點(diǎn)和治療功能，并著重對馬泌乳性能、產(chǎn)乳性狀相關(guān)候選基因和多組學(xué)技術(shù)在本領(lǐng)域研究中的應(yīng)用進(jìn)行了闡述。

1 馬乳的特點(diǎn)和功能

馬乳是由水、蛋白質(zhì)、乳糖、乳脂、礦物質(zhì)、酶等物質(zhì)組成的白色或乳白色的膠狀溶液。與奶牛、奶山羊等家畜相比，馬乳中化學(xué)成分更接近人乳（表1）。馬乳中干物質(zhì)含量為11%，各種干物質(zhì)成分如蛋白質(zhì)、乳糖、乳脂、礦物質(zhì)等的分散方式有所不同，分別以膠體形式、分子形式、濁液形式以及離子形式存在。

表1 牛、山羊、母馬、母乳的主要成分含量[5] %

牛奶是目前最為普遍的乳品，但存在乳蛋白不易消化、部分人群對牛奶過敏等問題。與牛奶相比，馬乳更容易被消化利用。馬乳是乳清蛋白型乳，牛乳屬于酪蛋白型乳，乳清蛋白型乳含有較多的可溶性蛋白，更容易被機(jī)體吸收。馬乳中的酪蛋白遇酸會沉降為細(xì)小絮狀，易溶于水，而牛奶中的酪蛋白遇酸會沉淀，幾乎不溶于水。馬乳中的乳糖屬于易消化的糖類，在乳糖酶作用下可分解成葡萄糖和半乳糖，消化吸收率可達(dá)到98%以上。此外，馬乳中的乳糖含量較高，是牛乳的1.5 倍以上。馬乳中的脂肪含量雖然比牛乳低，但馬乳中易消化吸收的不飽和脂肪酸和低分子脂肪酸含量是牛乳中的4～5 倍。馬乳中含有豐富的甘油三酯酸，有利于人體健康。

除此之外，馬乳還含有大量的生物活性蛋白，具有治療疾病的食療功效。長期有規(guī)律地飲用馬乳能夠緩解克羅恩病、肝炎、胃潰瘍等炎癥癥狀。馬乳中含有嬰幼兒生長發(fā)育所需要的全部營養(yǎng)物質(zhì)，加之易消化吸收和低過敏性，因此適宜作為嬰幼兒、老人和患有牛奶過敏癥等特殊人群的乳品。隨著馬乳產(chǎn)品的不斷研究和開發(fā)，馬乳制品也在乳品市場嶄露頭角，受到歡迎。

2 馬的泌乳性能

2.1 馬的泌乳特點(diǎn) 母馬每次泌乳大致分為2 個(gè)階段：第1 個(gè)階段為擠奶或者幼駒吮吸刺激下的泌乳初始階段，母馬將乳房中的乳液放完代表著這一階段結(jié)束。馬的蓄乳池較小，蓄乳能力差，第1 階段的泌乳量約占總泌乳量的1/10，需15～20 s 乳汁即放完，然后乳汁停止分泌15～50 s，從而激活乳通路周圍的平滑肌。第2 階段開始于乳通路周圍的平滑肌收縮，促使乳汁從乳導(dǎo)管進(jìn)入乳池，迅速充滿乳房，乳汁強(qiáng)烈分泌，每秒可分泌50～60 g，時(shí)間一般不超過1.5 min。此時(shí)擠乳動(dòng)作要迅速靈活，若擠奶較慢，超過1.5 min，平滑肌會停止收縮，放奶停滯，造成大部分乳汁殘留在乳房里。正常放乳情況下，母馬可排出90%以上的乳汁。

由于母馬是晝夜泌乳，泌乳量大，但乳房容積小，蓄乳能力差，只有在一定時(shí)間內(nèi)多次擠，才能保證充分泌乳，因此需要多次擠奶。母馬擠奶的間隔時(shí)間比較短，一般為2～2.5 h，每天可擠奶4～6 次。白天擠奶，夜里讓馬駒自由哺乳，擠乳和哺乳相結(jié)合，這是馬乳生產(chǎn)的主要方式。另外，由于馬泌乳的特點(diǎn)，母馬放乳應(yīng)盡量將乳房排空，否則會導(dǎo)致排乳抑制，影響泌乳量。

2.2 體型結(jié)構(gòu)與泌乳性能的關(guān)系 體型外貌結(jié)構(gòu)是影響馬泌乳性狀的重要指標(biāo)之一。不同用途的馬具有不同的體型外貌結(jié)構(gòu)，但有關(guān)馬體型結(jié)構(gòu)與泌乳性能關(guān)系的研究較少，在奶牛中研究較多。奶牛的性能評估主要從體型外貌結(jié)構(gòu)和產(chǎn)奶性能兩個(gè)方面進(jìn)行評定，其中體型外貌評價(jià)是奶牛育種中重要的選擇指標(biāo)。奶牛的體斜長、胸深、腰角寬、腹部大乳靜脈彎曲程度等體型特征與產(chǎn)奶量有直接關(guān)系。馬與牛都同屬于哺乳類大家畜，體型外貌與泌乳性能之間的關(guān)系可能相似。

2.3 營養(yǎng)和環(huán)境對于馬泌乳性能的影響 根據(jù)母馬泌乳期特點(diǎn)進(jìn)行科學(xué)飼養(yǎng)可提高泌乳量和乳品質(zhì)。Doreau等研究發(fā)現(xiàn)，與飼喂95% 干草+5% 精料補(bǔ)充料的粗料型日糧相比，飼喂50% 干草+50% 精料補(bǔ)充料的精料型日糧組乳和血液中脂肪、蛋白和亞麻酸含量較高，但亞油酸含量較低。馬乳產(chǎn)量與日糧中的精料量密切相關(guān)。母馬的日常管理中要保證馬廄衛(wèi)生，確保母馬有良好的飼養(yǎng)環(huán)境和一定的運(yùn)動(dòng)量，關(guān)注母馬健康情況以保障馬的泌乳量和乳品質(zhì)。

3 馬乳用性狀候選基因研究進(jìn)展

目前關(guān)于奶牛、奶山羊乳用性狀相關(guān)基因的研究較多，而對于馬乳用性狀相關(guān)基因的研究相對較少，且多集中于研究馬的表型數(shù)據(jù)，如馬的泌乳規(guī)律和泌乳特點(diǎn)等。近年來，研究者對于馬屬動(dòng)物的催乳素（Prolactin，）及催乳素受體（Prolactin Receptor，）、二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶（Diacylglycerol Acyltransferase，）、酪蛋白（Whole Casein）、生長激素受體（Growth hormone receptor，）、真核翻譯延伸因子1D（Eukaryotic Translation Elongation Factor 1 Delta，）、甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶（Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase Mitochondrial，）等基因的序列結(jié)構(gòu)、基因多態(tài)性與馬泌乳性狀的相關(guān)性做了研究。

3.1 PRL 與PRLR PRL 是垂體前葉肽類激素，PRLR是與催乳素相結(jié)合，對乳蛋白基因表達(dá)起重要調(diào)控作用的蛋白。研究表明基因的遺傳變異與產(chǎn)奶性能相關(guān)。張佳蘭通過PCR-SSCP 技術(shù)和DNA 測序發(fā)現(xiàn)，奶牛外顯子3 和7 上都有與產(chǎn)奶量和乳脂率顯著相關(guān)的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)（Single nucleotide polymprphism，SNP），其中外顯子3 上AB 基因型的產(chǎn)奶量高，AA 基因型乳脂率高，外顯子7 上BB 基因型具有更高的產(chǎn)奶量和乳脂率。Sirja 等通過PCRRFLP（Cleaved Amplification Polymorphism Sequence-Tagged Sites）和PCR-SSCP（Polymerase Chain Reaction-Single-Strand Conformation Polymorphism）方法在編碼區(qū)和調(diào)控區(qū)挖掘到多個(gè)變異位點(diǎn)均與奶牛產(chǎn)奶性能相關(guān)，如奶牛PRL 基因外顯子3 中的多態(tài)位點(diǎn)與乳脂肪和產(chǎn)奶量有關(guān)，可以作為與產(chǎn)乳性能相關(guān)的分子標(biāo)記。Brym 等研究發(fā)現(xiàn)娟姍牛內(nèi)含子9 的205 pb處存在一個(gè)A→C 的單堿基突變，CC 基因型娟姍牛的乳蛋白含量較高。此外Sirja 等在蘇格蘭奶牛中發(fā)現(xiàn)了蛋白前體第18 處絲氨基酸變?yōu)樘於０返耐蛔?，該突變會影響奶牛乳脂率、蛋白量和產(chǎn)奶量，特別是對乳脂率和蛋白量的影響很大。在奶山羊研究中發(fā)現(xiàn)基因外顯子存在SNP，其中一些突變與山羊的產(chǎn)奶量相關(guān)。姚新奎等在馬的研究中發(fā)現(xiàn)，該基因第4、5 外顯子存在多態(tài)性。此外，高程程等對伊犁馬基因進(jìn)行多態(tài)性檢測，發(fā)現(xiàn)該基因側(cè)翼區(qū)存在多態(tài)性，均與產(chǎn)奶量有關(guān)。根據(jù)基因的研究進(jìn)展，可將其作為研究馬泌乳性能的候選基因。

3.2 DGAT家族在機(jī)體沉積脂肪的部位均有表達(dá)，研究表明其與家畜產(chǎn)乳性狀有關(guān)。根據(jù)細(xì)胞定位和結(jié)構(gòu)差異，將分為和蠟酯合成/ 二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶（）。是甘油三脂合成過程中最后一步反應(yīng)的限制酶，在牛中該基因位于的著絲粒末端，在泌乳性狀相關(guān)的數(shù)量性狀基因位點(diǎn)（Quantitative Trait Locus，）定位區(qū)間內(nèi)。已有研究表明，奶?；虻? 外顯子中存在一個(gè)雙堿基突變，此突變使第232 位的賴氨酸變?yōu)楸彼幔↘232A），從而影響乳脂率。徐秀榮等研究發(fā)現(xiàn)奶?；騅232A 突變型個(gè)體的乳脂率比野生型高。Spelman 等在新西蘭3個(gè)奶牛品種的K232A 位點(diǎn)的研究中發(fā)現(xiàn)等位基因K 和高乳脂率相關(guān)。李聰研究表明，基因第8 外顯子中存在AA→GC 的雙核苷酸突變，該錯(cuò)義突變造成所編碼的賴氨酸變?yōu)楸彼?，并對奶牛的泌乳性能尤其是乳脂率造成影響。在馬屬動(dòng)物驢的研究中，肖海霞等、王顏顏使用RACE 技術(shù)得到基因3'端的部分序列，還對基因第5，6 外顯子和第3，4，5 內(nèi)含子的多態(tài)性進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)一些與驢體高、胸圍、體長、凈肉率等性狀相關(guān)的突變，而基因?qū)︸R產(chǎn)乳性狀相關(guān)性的研究尚未見報(bào)道。

3.3 酪蛋白基因 酪蛋白是由乳腺上皮細(xì)胞合成的一組蛋白，是乳蛋白的主要組成部分，主要包括-酪蛋白（Casein Alpha S1，）、-酪蛋白（Casein Alpha S2，）、-酪蛋白（Casein Beta，）和-酪蛋白（Casein Kappa，）4 種類型。在過去的幾十年里，對反芻動(dòng)物以外家畜的酪蛋白基因研究已積累了一定成果。最近在美洲駝、駱駝和家馬中發(fā)現(xiàn)了許多酪蛋白基因多態(tài)性位點(diǎn)。Jakub 等在馬的研究中篩選了酪蛋白基因5' 側(cè)翼區(qū)多態(tài)性，共檢測到23 個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，其中包括21 個(gè)單核苷酸多態(tài)性（）和2 個(gè)新的插入缺失標(biāo)記（Indels），超過1/3的位點(diǎn)是在基因序列中發(fā)現(xiàn)的。表2 展示了馬酪蛋白基因5'-側(cè)翼區(qū)多態(tài)性檢測的研究結(jié)果，大部分基因變異在各馬種中分布廣泛。在基因的相應(yīng)區(qū)域中發(fā)現(xiàn)了3 個(gè)基因變異?；虻?個(gè)突變（c.-1732A>G 多態(tài)性）僅在胡克爾馬（HUC）和西萊西亞馬（SIL）2 個(gè)品種中檢測到。進(jìn)一步分析顯示，檢測到的22 個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)中有17 個(gè)可以改變轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測的結(jié)合位點(diǎn),這些突變點(diǎn)可能對基因表達(dá)和乳成分產(chǎn)生影響。此外在馬屬動(dòng)物的研究中還發(fā)現(xiàn)，基因多態(tài)性與產(chǎn)奶性能有著密切關(guān)系。Hobor 等研究發(fā)現(xiàn)馬基因的第1 和第4 外顯子區(qū)各有2 個(gè)。但在對疆岳驢基因的研究中沒有在第1外顯子區(qū)域發(fā)現(xiàn)多態(tài)性，這可能是由于馬、驢種屬差異造成的。

表2 馬酪蛋白基因5'-側(cè)翼區(qū)多態(tài)性[28]

在奶山羊研究中，樂祥鵬對奶山羊基因外顯子2、9、12、17 和19 與內(nèi)含子14 進(jìn)行了多態(tài)性檢測，發(fā)現(xiàn)基因第9 外顯子的多態(tài)性與產(chǎn)奶量相關(guān)；基因第14 內(nèi)含子也有一個(gè)與產(chǎn)奶量相關(guān)的突變。藍(lán)賢勇等發(fā)現(xiàn)西農(nóng)薩能奶山羊基因的片段中存在突變，不同基因型對平均產(chǎn)奶量有顯著影響。此外，在付小波等在荷斯坦牛對基因的研究中發(fā)現(xiàn)，荷斯坦奶牛和黃牛改良品種的基因5' 端序列的突變與產(chǎn)奶量有關(guān)；在基因第2 外顯子檢測到一個(gè)突變，形成AA、AB 和BB 等3 種基因型，其中AA 型乳蛋白率較高，同時(shí)黃牛改良品種基因第2 外顯子的AA 基因型個(gè)體的乳脂率和乳蛋白率顯著高于BB 和AB 基因型個(gè)體，AA 基因型個(gè)體產(chǎn)奶量也高于BB 和AB 基因型個(gè)體。

由此可見，酪蛋白基因多態(tài)性與馬、奶山羊、奶牛等家畜的泌乳性能都具有一定相關(guān)性，因此酪蛋白基因可作為影響泌乳性狀的候選基因。

3.4是生長激素（Growth Hormone，）的受體蛋白，是細(xì)胞因子和造血因子受體超家族的成員之一?；虻膲A基序列發(fā)生改變會影響的正常發(fā)揮，從而影響奶牛產(chǎn)奶、產(chǎn)肉等性狀。Rahmatalla等在荷斯坦牛中發(fā)現(xiàn)基因的第836 位T →A突變與產(chǎn)奶量相關(guān)。王凱等、邱崢艷等研究表明荷斯坦奶牛基因多態(tài)性對乳脂率有顯著影響，但對產(chǎn)奶量影響不大。馬彥男等驗(yàn)證了奶?；騀270Y 突變位點(diǎn)的功能，證實(shí)了AA 型奶牛產(chǎn)奶量高于AT 型。馬妍等對荷斯坦奶牛基因與泌乳性能相關(guān)的研究表明，奶牛基因F279Y 位點(diǎn)TT 與AT 基因型個(gè)體在產(chǎn)奶量和乳脂率方面差異顯著。但也有一些研究發(fā)現(xiàn)基因多態(tài)性與產(chǎn)奶量并沒有顯著相關(guān)性。馬的生長激素受體基因位于第21 號染色體上，有10 個(gè)外顯子，但目前關(guān)于馬基因與泌乳性狀相關(guān)性研究的報(bào)道較少。孟拮等對伊犁馬基因的多態(tài)性進(jìn)行檢測，在啟動(dòng)子區(qū)發(fā)現(xiàn)了1 個(gè)SNP 位點(diǎn)，該突變對產(chǎn)奶量有一定的影響，并認(rèn)為該位點(diǎn)有望應(yīng)用于乳用馬的選育。

3.5 EEF1D是翻譯延伸因子復(fù)合物的的亞基。謝巖發(fā)現(xiàn)?；蛴? 種剪切體，對該基因進(jìn)行功能驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)基因上存在一個(gè)與乳脂率顯著相關(guān)的多態(tài)位點(diǎn)。Zhang 等在奶山羊的研究中發(fā)現(xiàn)具有兩種可變剪切體，其研究結(jié)果同樣也表明該基因與乳脂合成有關(guān)。劉軒等在荷斯坦奶牛的研究中通過關(guān)聯(lián)性分析發(fā)現(xiàn)基因啟動(dòng)子和UTR 區(qū)上的SNPs 與產(chǎn)奶量、乳脂率和乳蛋白率相關(guān)。蔣秋斐等發(fā)現(xiàn)?；虻?' 非翻譯區(qū)存在一個(gè)突變位點(diǎn)，該位點(diǎn)能夠影響乳脂的分泌。通過進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測并結(jié)合啟動(dòng)子活性分析，發(fā)現(xiàn)該突變會引起基因的表達(dá)上調(diào)，最終導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子Sp3轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)后移33 bp。突變型的活性大約是野生型的3 倍，但Sp3 轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)變化對乳脂含量的調(diào)控機(jī)制還需深入的研究。目前關(guān)于基因與乳脂率相關(guān)的研究在牛、羊等家畜中開展較多，但該基因在馬屬動(dòng)物上尚缺乏研究。

3.6 GPAT 甘油-3-磷酸?；D(zhuǎn)移酶（）脂肪族?；鶠榈孜铮呋视?3-磷酸脂?；磻?yīng)，產(chǎn)物為溶血磷脂酸。酶活性較低，是脂質(zhì)合成代謝途徑中的限速酶。有兩個(gè)同工酶亞群，分別是微粒體和線粒體。其中線粒體又簡稱為。是合成甘油三酯的第一步反應(yīng)的關(guān)鍵酶，能夠影響乳脂的形成過程。趙堯璐研究發(fā) 現(xiàn)基因3 個(gè)SNP位點(diǎn)E20-3386G>A、I18-652A>G 和I18-726A>G 均與奶牛產(chǎn)奶性狀有關(guān)，其中E20-3386G>A 位點(diǎn)與奶牛乳蛋白率及體細(xì)胞數(shù)有顯著相關(guān)；I18-652A>G 位點(diǎn)與奶牛乳蛋白、干物質(zhì)和體細(xì)胞數(shù)相關(guān)；I18-726A>G 位點(diǎn)與奶牛蛋白率、產(chǎn)奶量、干物質(zhì)、體細(xì)胞數(shù)均顯著相關(guān)。多個(gè)研究均表明基因與奶牛乳脂的合成有關(guān)。此外，基因還能夠影響肉牛的肉質(zhì)性狀，研究表明該基因?qū)χ|(zhì)代謝的調(diào)控起到重要作用，并且對改善肉質(zhì)有明顯的效果。除了在牛上的研究，目前還未有基因與馬及其他家畜泌乳性能相關(guān)性的報(bào)道。

除了上述基因外，等基因也對家畜的泌乳性能有影響，但這些基因在馬屬動(dòng)物中的研究都比較少，大多數(shù)研究集中在奶牛、奶山羊等傳統(tǒng)泌乳家畜上。在今后的研究中關(guān)于馬泌乳性狀相關(guān)候選基因的挖掘還有很多工作尚待完成。

4 多組學(xué)技術(shù)在乳用性狀基因研究中的應(yīng)用

近十幾年來，隨著組學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，利用多層次組學(xué)的信息，從基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白組水平挖掘重要性狀的功能基因，已成為家畜遺傳學(xué)研究的有力手段。通過組學(xué)方法研究馬的泌乳性能調(diào)控基因及其遺傳機(jī)制是將來重要的研究方向。這方面馬屬家畜研究成果尚少，但可以以奶牛的相關(guān)研究作為參照。

目前全基因組關(guān)聯(lián)分析（Gene Association Study，GWAS）已廣泛應(yīng)用于奶牛產(chǎn)乳性狀候選基因的篩選中。如Li采用單標(biāo)記傳遞不平衡檢驗(yàn)（LI-TDT）和單標(biāo)記回歸分析（MMRA）2 種統(tǒng)計(jì)分析方法對荷斯坦奶牛產(chǎn)奶性狀進(jìn)行GWAS 分析，發(fā)現(xiàn)105 個(gè)SNPs 達(dá)到全基因組顯著水平，其中38 個(gè)SNPs 被2 種方法同時(shí)檢測到，其中和兩個(gè)SNPs 分別位于影響產(chǎn)奶量和乳脂率的明星功能基因DGAT1 和GHR 附近，由此判斷奶牛產(chǎn)奶量和乳脂率可能受這2 個(gè)SNPs 的影響。Nayeri 等對加拿大荷斯坦牛乳成分性狀開展GWAS 研究，鑒定出與產(chǎn)奶性狀相關(guān)的候選基因和通路，包括等。Nayeri 等使用777K SNP 芯片進(jìn)行單標(biāo)記回歸全基因組關(guān)聯(lián)分析，鑒定出與產(chǎn)奶性狀顯著關(guān)聯(lián)的基因有和。Chen 等對1 092 頭荷斯坦牛進(jìn)行簡化基因組測序，GWAS 結(jié)果顯示17 個(gè)單倍型與產(chǎn)奶性狀顯著關(guān)聯(lián)，最后篩選到和等基因與產(chǎn)奶量顯著關(guān)聯(lián)。Li 等采用Illumina 牛54K 芯片對784 頭中國荷斯坦奶牛中的22 種乳脂肪酸進(jìn)行了全基因組關(guān)聯(lián)研究，共檢測到83 個(gè)全基因組顯著SNPs 和314 個(gè)與乳脂肪酸性狀相關(guān)的顯著SNPs。

在轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究方面，乳腺組織和乳腺上皮細(xì)胞等不同來源的RNA 已廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)錄組測序研究，并鑒定出與其相關(guān)的新轉(zhuǎn)錄本和非編碼RNA。Yang 等針對干奶期和泌乳初期的血液以及泌乳初期和高峰期的牛奶樣品，分析了6 頭高低產(chǎn)的中國荷斯坦奶牛的轉(zhuǎn)錄組樣本，共鑒定出1 408 和1 459 個(gè)差異表達(dá)的基因，其中有363 個(gè)差異表達(dá)基因位于已知的產(chǎn)奶性狀QTL 區(qū)域。針對奶牛不同的泌乳期，Wickramasinghe 等開展了泌乳初期（D15）、高峰期（D90）和末期（D250）3 個(gè)時(shí)期的乳腺細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序分析，分別挖掘出16 892、19 094 和18 070 個(gè)差異表達(dá)基因，富集分析發(fā)現(xiàn)泌乳初期和高峰期的高表達(dá)基因主要集中在脂類乳合成通路中，而編碼酪蛋白、乳清蛋白和乳糖酶基因表達(dá)則主要集中在泌乳初期。

在蛋白組學(xué)研究方面，Mol 等對印度牛3 個(gè)不同的泌乳期（初期、中期和末期）牛奶的蛋白質(zhì)組特征進(jìn)行比較分析，鑒定出403 個(gè)差異表達(dá)的蛋白，主要富集到乳合成通路中。Janjanam 等用雙向電泳技術(shù)針對3 個(gè)泌乳期（初期、高峰期和末期）的高產(chǎn)奶和低產(chǎn)奶的8 頭奶牛奶中乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行蛋白組比較分析，發(fā)現(xiàn)一些影響產(chǎn)奶量和泌乳持久力的關(guān)鍵蛋白，在產(chǎn)奶量高低組共挖掘到22 個(gè)差異蛋白，且注釋分析顯示大部分差異蛋白與乳合成通路、催化和結(jié)合活性等相關(guān)。

由上述可見，組學(xué)分析技術(shù)是乳用性狀相關(guān)基因挖掘的有力研究手段，對探究家畜乳用性狀發(fā)生的遺傳基礎(chǔ)具有重要意義。目前，尚缺乏與馬產(chǎn)乳性狀相關(guān)的基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白組分析的研究，但在奶牛等乳用家畜上的研究結(jié)果表明，充分利用多組學(xué)技術(shù)的優(yōu)勢，解析與目標(biāo)性狀相關(guān)的基因和因果突變是一種有效的研究策略?；诙嘟M學(xué)數(shù)據(jù)的研究策略可以大幅度提高候選基因篩選的可靠性，提高研究效率，從而揭示馬產(chǎn)奶性狀的分子遺傳機(jī)制。同時(shí)，由于奶牛中相關(guān)研究已積累了大量成果，可通過比較基因組學(xué)的方法，在馬產(chǎn)奶性狀相關(guān)基因組學(xué)分析中充分借鑒和利用奶牛中已有的研究成果。

5 總結(jié)

馬乳由于其特殊的理化性質(zhì)而受到人們的歡迎，馬乳生產(chǎn)和加工具有廣闊的市場前景。盡管馬屬動(dòng)物泌乳相關(guān)基因尚缺乏系統(tǒng)研究，但通過對奶牛及其他家畜的長期遺傳學(xué)研究，人們已經(jīng)篩選并鑒定了許多與泌乳性能相關(guān)的重要功能基因，這些研究成果為馬屬動(dòng)物的同類研究提供了重要研究基礎(chǔ)和參考依據(jù)。