一起羊布魯氏菌感染的診斷和處置

廖遠軍，蔣興安，曾新寶，蔣智博

（永州市零陵區(qū)畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心，湖南 零陵 425100）

布魯氏菌病（Brucellosis，簡稱布?。┦怯刹剪斒暇鷮伲˙rucella）的細菌侵入機體，引起傳染性變態(tài)反應(yīng)的人畜共患傳染病。通?；疾游锉憩F(xiàn)為：懷孕母畜發(fā)生流產(chǎn)、死胎，久配不孕，公畜睪丸炎或關(guān)節(jié)炎，患布病的羊、牛等動物是布病的主要傳染源[1]。據(jù)報道[2]，近年來我省動物布病發(fā)病數(shù)迅速增加。世界動物衛(wèi)生組織（WOAH）將其列為必須報告的動物疫病，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部將其列為二類動物疫病，也是《人畜共患傳染病名錄》中26種動物疫病之一。

2021年10月，湖南省永州市零陵區(qū)畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心在對全區(qū)羊場進行布病調(diào)查監(jiān)測中，檢出某養(yǎng)殖場羊群布魯氏菌抗體水平陽性，經(jīng)再次針對性采樣進行復(fù)檢，檢測出布病陽性。為及時查清本次疫情的發(fā)生起因和傳染來源防止疫情傳播擴散，零陵區(qū)獸醫(yī)主管部門立即組織相關(guān)專業(yè)技術(shù)人員趕赴現(xiàn)場進行了深入診斷分析，并根據(jù)調(diào)查結(jié)果及時采取了有效地防控措施。

1 材料與方法

1.1 養(yǎng)殖場基本情況

該羊場始建于2016年，現(xiàn)有羊舍1棟，可飼養(yǎng)羊600頭左右，飼養(yǎng)品種為黑山羊。該場2021年10月存欄黑山羊共有336頭，其中成年母羊105頭、種用公羊11頭、其他羊220頭，全部飼養(yǎng)于一欄中，均為自然配種。

1.2 現(xiàn)場調(diào)查情況

根據(jù)湖南省動物疫病預(yù)防控制中心“反芻動物（牛、羊、駱駝、鹿）__（?。┚o急流行病學(xué)調(diào)查表”中相關(guān)內(nèi)容，并結(jié)合實際，通過現(xiàn)場勘查、詢問和查閱檔案等形式，全面了解羊場的飼養(yǎng)管理、發(fā)病情況、免疫情況、引種情況、銷售情況、人員車輛流動情況等以及養(yǎng)殖場周邊3 km內(nèi)牛羊飼養(yǎng)和放牧情況。

1.3 實驗室檢測

1.3.1 虎紅平板凝集試驗（RBT）

布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原，生產(chǎn)廠家：青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心，批號：10012102。按照國家標準《動物布魯氏菌病診斷技術(shù)》（GB/T 18646—2018）進行實驗操作和結(jié)果判定[3]。

1.3.2 競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（c-ELISA）

布魯氏菌病抗體檢測試劑盒，廠家：深圳真瑞生物科技有限公司，批號：2021082403，規(guī)格：192T/盒。按試劑盒說明書進行實驗操作和結(jié)果判定。

2 結(jié)果

2.1 現(xiàn)場調(diào)查結(jié)果

2.1.1 飼養(yǎng)管理情況

養(yǎng)殖場主要由養(yǎng)殖場主夫婦負責(zé)飼喂、免疫接種和消毒等日常管理，飼養(yǎng)方式為圈養(yǎng)和放牧相結(jié)合，場內(nèi)飲水為自家挖的淺井水（深約40 m）。平時主要在周邊山林放養(yǎng)，2021年有出現(xiàn)種羊流產(chǎn)、久配不孕情況。該場周邊靠近山脈，3 km沒有其他規(guī)模牛羊養(yǎng)殖場。場內(nèi)圈舍每月進行1次全面消毒，糞便采用堆積發(fā)酵處理，消毒劑主要用鎮(zhèn)疫醛（戊二醛癸甲溴銨溶液）、拜特衛(wèi)效（二氯異氰脲酸鈉粉）等交替使用。

2.1.2 免疫接種情況

該場羊只主要免疫了口蹄疫、小反芻、羊痘、三聯(lián)四防等疫苗。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部布魯氏菌病區(qū)域劃分，湖南省屬于二類地區(qū)，屬于非免疫區(qū)，應(yīng)采取以監(jiān)測凈化為主的防控策略，故該場沒有進行布魯氏菌病疫苗免疫。

2.1.3 引種出售情況

該場在2018年至2021年期間，每年進行一次種公羊的淘汰更新，先后從四川、安徽等地引進種公羊，最近一次引種為2021年1月，從四川省某羊場引進過1只黑山羊種公羊，現(xiàn)主要用于配種。2021年8月出現(xiàn)母羊流產(chǎn)及久配不孕現(xiàn)象。該羊場2020年年底出售給羊販子一批羊，數(shù)量約150只，買方開車到場內(nèi)看羊，直接裝走。據(jù)了解，羊只購入前和出欄時均未申報檢疫。

2.1.4 車輛和人員流調(diào)情況

養(yǎng)殖場主夫婦自2021年2月份以來一直在場內(nèi)，未曾外出，也沒有去過牛羊交易市場，只在1月份購買種羊時去過其他養(yǎng)殖場；養(yǎng)殖場地處偏僻基本沒有外來人員和車輛進入飼養(yǎng)區(qū)，賣羊時車輛進入場區(qū)時，進行了噴霧消毒。

2.1.5 野生動物死亡情況

經(jīng)巡查養(yǎng)殖場附近及放牧山林未發(fā)現(xiàn)有野生動物死亡。

2.1.6 養(yǎng)殖戶布病了解情況

經(jīng)詢問，養(yǎng)殖戶（飼養(yǎng)人員）只是聽說過布病，但是對布病的防治知識并不太了解，不清楚布病是一種人畜共患病。

2.2 實驗室檢測結(jié)果

2021年10月，我區(qū)在開展羊布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查工作中采用虎紅平板凝集試驗（RBT）對所有樣品進行了檢測，在該場的30份羊血清樣品中檢出2份陽性（見圖1），陽性率為6.67%。對該場出現(xiàn)陽性樣品的結(jié)果，我們上報了有關(guān)部門，并準備再次檢測和處置預(yù)案，一旦確定是布病陽性，同群羊只必須全部撲殺。根據(jù)現(xiàn)場調(diào)查和摸排情況，我們有針對性采集部分同群母羊和種公羊血清33份進行復(fù)檢。為了確保實驗結(jié)果準確性，減少人為主觀判斷上的誤差，我們采用c-ELISA方法，每個樣品做了一次重復(fù)。結(jié)果檢出19份陽性，陽性率為57.58%（見表1）。

圖1 虎紅平板凝集試驗（RBT）檢測結(jié)果

表1 c-ELISA檢測結(jié)果

3 疫情防控處置

3.1 防控措施

在第一次集中監(jiān)測檢出該養(yǎng)殖場布魯氏菌抗體陽性后，為防止發(fā)生布病疫情擴散和人員感染，當?shù)卣瞳F醫(yī)主管部門立即組織封鎖了所在村，并有效限制了該場飼養(yǎng)人員及羊群的流動，羊群不準進行放牧，不得出售或者自行宰殺食用。通報相關(guān)疫情信息給疾控中心，對飼養(yǎng)人員及其密切接觸者進行了監(jiān)測調(diào)查，做好人間布魯氏菌病防控工作。對周邊村和交界鄉(xiāng)鎮(zhèn)范圍內(nèi)的牛羊養(yǎng)殖場進行疫情排查工作。

經(jīng)排查，該場周邊3km范圍內(nèi)無牛羊養(yǎng)殖場，放牧?xí)r沒有與其他養(yǎng)殖場有交集接觸，對鄰近村和交界鄉(xiāng)鎮(zhèn)的牛羊場進行了全面排查，未發(fā)現(xiàn)異常，且全區(qū)其他規(guī)模羊養(yǎng)殖場布魯氏菌檢測結(jié)果均為陰性，劃定疫點為該場，疫區(qū)為該場向外延伸3km范圍內(nèi)區(qū)域，受威脅區(qū)為該場向外延伸5km范圍內(nèi)。區(qū)疾控中心對飼養(yǎng)員夫婦進行了健康檢查，未發(fā)生人員感染。

3.2 疫情處置

根據(jù)《布魯氏菌病防治技術(shù)規(guī)范》，結(jié)合全群羊只飼養(yǎng)于一欄的實際，由政府組織協(xié)調(diào)，獸醫(yī)主管部門負責(zé)指導(dǎo)對疫點（該場）的山羊全部進行強制撲殺，由病死畜禽無害化處理中心集中收集進行無害化處理。對羊場的排泄物、墊料，通過堆積發(fā)酵方式進行無害化處理，對場內(nèi)及周邊環(huán)境進行嚴格消毒，每天進行消殺，連續(xù)1周，進場人員都必須做好個人防護，穿工作服，戴口罩和手套，以確保工作人員自身安全。

縣級獸醫(yī)主管部門聯(lián)合受威脅區(qū)內(nèi)的2個鄉(xiāng)鎮(zhèn)動物防疫站對疫區(qū)和受威脅區(qū)進行了全面排查，共排查了12個村，7個羊養(yǎng)殖場（無牛場），存欄羊696只，未發(fā)現(xiàn)異常情況（見表2）。同時，還給養(yǎng)殖戶發(fā)放了《布魯氏菌病防控明白卡》，督促養(yǎng)殖戶加強場內(nèi)消毒和規(guī)范引種。

表2 排查情況統(tǒng)計

4 小結(jié)

4.1 疫情來源分析

通過現(xiàn)場調(diào)查和走訪詢問，在2021年前該羊場及周邊3km沒有牛羊群出現(xiàn)流產(chǎn)、久配不孕等疑似布病的臨床癥狀，也無人員及家畜感染。該場飼養(yǎng)黑山羊多年，2021年以前場內(nèi)未發(fā)現(xiàn)異常情況，在2021年1月從四川省某羊場購入1頭種公羊進行配種后，母羊出現(xiàn)久配不孕和不明原因流產(chǎn)，購入的種公羊沒有布病的檢測報告且購入前未申報檢疫，故推測該場布魯氏菌是通過2021年1月從外省引種傳入的可能性較大。因此，綜合分析判斷該起疫情可能是由養(yǎng)殖戶引種不當造成的。此外，飼養(yǎng)人員對布病的防治知識及危害也不太了解，引種后也未引起重視，未進行隔離飼養(yǎng)就混群，導(dǎo)致疫情在場內(nèi)擴散。

4.2 防控策略

4.2.1 加強檢疫監(jiān)管

本次疫情的發(fā)生源于從外省引種未申報檢疫的行為，因此我們要防止出現(xiàn)不申報檢疫違規(guī)調(diào)運的引種行為?？h級動物衛(wèi)生監(jiān)督部門一方面要積極宣傳引導(dǎo)養(yǎng)殖戶按要求落實調(diào)運報檢和落地隔離飼養(yǎng)觀察制度，在出售或運輸之前，應(yīng)當向動物衛(wèi)生監(jiān)督部門申報檢疫。另一方面要織密調(diào)運監(jiān)管網(wǎng)絡(luò)，加大牛羊調(diào)運的檢疫監(jiān)管力度。一是借鑒非洲豬瘟防控調(diào)運監(jiān)管制度，建立臨時檢查站，對過往運輸車輛進行檢查；二是強化販運監(jiān)管，所有運輸牛羊等動物的車輛必須備案登記，未備案的車輛一律不得從事運輸；三是嚴格執(zhí)行落地報告和隔離觀察制度，嚴禁從布病一類地區(qū)引種，對調(diào)運的種用、乳用、役用動物進行實驗室檢測，檢測合格后，方可出具檢疫合格證明；四是強化運輸車輛清洗消毒，車主或承運人應(yīng)在裝載前、卸載后按規(guī)定對車輛進行全面清洗消毒；五是對違法違規(guī)調(diào)運的或不申報檢疫的行為，從嚴從重處罰。

4.2.2 加強日常監(jiān)測排查

一是嚴格執(zhí)行網(wǎng)格化管理，織密包村包場排查網(wǎng)、養(yǎng)殖場戶自查網(wǎng)、異常情況監(jiān)測網(wǎng)、清單管理責(zé)任網(wǎng)“四張網(wǎng)”。縣級政府要壓實鄉(xiāng)鎮(zhèn)人民政府、街道辦事處的屬地管理責(zé)任，明確牛羊養(yǎng)殖場行政、技術(shù)責(zé)任人，并進行掛牌公示，責(zé)任人員不間斷，無死角對養(yǎng)殖場進行排查，發(fā)現(xiàn)發(fā)病、死亡等異常情況及時上報獸醫(yī)主管部門，做到“早發(fā)現(xiàn)、早上報、早處置”，以便減少養(yǎng)殖場經(jīng)濟損失，防止人間布病發(fā)生。

二是強化技術(shù)支撐，及時開展日常監(jiān)測?？h級獸醫(yī)主管部門要把上級監(jiān)測任務(wù)和本級計劃監(jiān)測任務(wù)相結(jié)合，讓轄區(qū)內(nèi)布病監(jiān)測做到分批次全覆蓋，一旦出現(xiàn)監(jiān)測陽性，立即撲殺、無害化處理。本次疫情是由縣級獸醫(yī)主管部門在根據(jù)上級主管部門要求進行日常監(jiān)測時發(fā)現(xiàn)，可見日常監(jiān)測在疫情防控中尤為重要。

三是積極開展消毒滅源，凈化養(yǎng)殖環(huán)境?？h級獸醫(yī)主管部門定期組織、指導(dǎo)、督促養(yǎng)殖場開展清洗消毒工作，對異常死亡羊只、死胎、胎衣、胎盤、墊料等實施無害化處理，從源頭上消滅布魯氏菌，防止疫病發(fā)生。

4.2.3 加強宣傳培訓(xùn)

一是針對目前部分養(yǎng)殖戶對布病及其防控知識不了解，獸醫(yī)主管部門聯(lián)合疾控中心，通過面對面給養(yǎng)殖戶發(fā)放《布魯氏菌病防控明白卡》、在各村和社區(qū)宣傳欄制作布魯氏菌病防控宣傳專欄、微信工作群轉(zhuǎn)發(fā)布病防控知識等“線上+線下”多種形式開展布病防控工作宣傳，增強人民群眾對布病的認識和防控意識。

二是獸醫(yī)主管部門定期組織相關(guān)從業(yè)人員進行培訓(xùn)，宣講《生物安全法》和布病防控知識等，進一步提高養(yǎng)殖戶和基層防疫人員對布病防治的知識水平，強化個人防護意識，促進牛羊養(yǎng)殖業(yè)健康綠色發(fā)展，保障人民群眾健康安全。

4.2.4 加強經(jīng)費保障

政府通過加大財政投入力度，成立布病防控工作領(lǐng)導(dǎo)小組，制定布病監(jiān)測凈化工作計劃，明確職責(zé)分工，壓實工作責(zé)任。并將布病監(jiān)測、預(yù)防、控制和消滅、以及人員生物安全防護、撲殺補貼、無害化處理費用等納入財政預(yù)算，設(shè)立布病專項防控資金，保障養(yǎng)殖戶的根本利益[4]。鼓勵引導(dǎo)養(yǎng)殖戶通過定期監(jiān)測，撲殺淘汰陽性牲畜，可借鑒長沙市動物布魯氏菌病凈化的綜合防控技術(shù)，采取“檢疫（檢測）—撲殺（補償）—監(jiān)測—撲殺”等綜合防控措施，從根源上防治疫情蔓延，從而逐步達到凈化布病的目標[5]。