聚氨酯泡沫固定化生物體系對活性藍4的吸附脫色

楊文博，張傲潔，劉幽燕，李青云

(廣西大學 化學化工學院，廣西 南寧 530004)

蒽醌染料是分子中含有蒽醌結(jié)構(gòu)的各類染料的總稱，現(xiàn)已有400多個品種，約占合成染料總量的20%[1-2]。由于其染色性能佳、易得性好、價格低廉而成為工業(yè)生產(chǎn)的首選染料，在合成染料中具有很重要的地位[3]。蒽醌染料具有3個融合苯環(huán)以及中心環(huán)上有2個羰基的復雜結(jié)構(gòu)，使得該類染料不僅能夠在環(huán)境中穩(wěn)定存在，而且對人體以及其他生物體的毒性高于偶氮染料[4]?；钚运{4(RB4)是蒽醌類染料中的一種，研究表明，100 mg/L的RB4能顯著降低小麥種子的發(fā)芽率(27%)，并且使得根和枝的生長分別減少48%和29%,對人體淋巴細胞和角朊細胞的脫氧核糖核酸(DNA)均有顯著的損傷作用[5]，因此消減蒽醌染料污染對保護生態(tài)環(huán)境安全和人類身體健康非常必要。目前，國內(nèi)外主要采用物理法和化學法去除蒽醌染料，但是這些方法存在成本高、易產(chǎn)生二次污染等弊端[6-7]。生物吸附法被認為是綠色、價廉的可選策略之一[8-9]，許多真菌物種，如平菇Pleurotusostreatus[10]、煙管菌Bjerkanderaadusta[11]、尖孢鐮刀菌Fusariumoxysporum[12]等已被證實能有效脫色蒽醌染料。然而，生物體系在脫色染料的過程中普遍存在吸附劑流失的問題，因此，如何維持體系的生物量對生物法去除染料尤為關(guān)鍵。

基于微生物依附生長的特性，將菌株限定生長于載體材料上的固定化技術(shù)是有效解決細胞流失的可行方法。盡管現(xiàn)有文獻報道的固定化載體有很多，如活性碳纖維[13]、海泡石[14]、絲瓜絡[15]等，但是只有選用適宜菌株生長的載體材料，才有可能構(gòu)建獲得生物固載量高且穩(wěn)定性好的生物體系。聚氨酯泡沫(PUF)是一種成本低、力學強度高以及生物相容性好的多孔材料[16-17]。許多研究表明，采用PUF材料對不同種類真菌進行固定化可有效提高生物體系的處理效率[18]。例如：Wang等[19]采用PUF材料固定熱帶念珠菌Candidatropicalis發(fā)酵生產(chǎn)木糖醇，使得木糖醇的產(chǎn)率和體積產(chǎn)量分別達到71.2%和2.10 g/(L·h)。Hama等[20]研究發(fā)現(xiàn)：游離的米曲霉菌Aspergillusoryzae因聚集成菌絲球，導致細胞內(nèi)部的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的可用性受到限制；當采用PUF材料對菌株進行固定化之后，由于菌絲不再聚集成球，促進了氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的傳質(zhì)，從而使得固定化細胞分泌的磷脂酶A1是游離細胞的 2倍，因此，大孔結(jié)構(gòu)的聚氨酯泡沫是固定化絲狀真菌的理想載體之一。

本文課題組在前期研究工作中已篩選獲得1株能有效脫色蒽醌染料的黃曲霉菌AspergillusflavusA5p1[21]，并采用PUF材料進行固定化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)菌株能完全固定生長在PUF材料上，說明PUF材料可作為黃曲霉菌AspergillusflavusA5p1固定生長的良好載體。基于此，本文以染料RB4為模型底物，進一步研究PUF-固定化生物體系的脫色特性，包括RB4吸附動力學研究、不同RB4質(zhì)量濃度和鹽度條件(主要以NaCl質(zhì)量濃度計)對脫色的影響。通過對比黃曲霉菌AspergillusflavusA5p1固定化前后對蒽醌染料RB4的脫色效果以及固定化體系的重復利用批次脫色效果，初步評估PUF-固定化細胞生物體系的可靠性，以期為未來新型染料污染處理工藝的發(fā)展提供參考。

1 實驗部分

1.1 實驗材料與儀器

材料：活性藍4(RB4，分析純，上海源葉生物科技有限公司)；聚氨酯泡沫(PUF，凱達新材料有限公司)，密度為(21±1)kg/m3，硬度為55±5(邵氏硬度)，孔徑為60 孔/(25.4 mm)，開孔率為96%；馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA，分析純，海博生物技術(shù)有限公司)；無水乙醇(分析純，西隴化工股份有限公司)；吐溫80(分析純，北京索萊寶科技有限公司)；氯化鈉(分析純，天津市光復科技發(fā)展有限公司)；黃曲霉菌AspergillusflavusA5p1(CGMCC 4292)，由實驗室自行篩選并保存在-80 ℃冰箱中。

儀器：ME204E型電子分析天平(梅特勒-托利多儀器(上海) 有限公司)；G1100T型立式壓力蒸汽滅菌鍋(美國ZEALWAY公司)；IQ7000型超純水機(德國Merck Milli-Q公司)；ZHWY-2102型恒溫振蕩培養(yǎng)箱(上海智誠分析制造有限公司)；SW-CJ-1BV型超凈工作臺(蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司)；902型超低溫冰箱(美國Thermo Scientific有限公司)；TS-606-G/4-i型培養(yǎng)箱(上海躍進醫(yī)療器械廠)；Allegra 25R型臺式高速冷凍離心機(美國BECKMAN COULTER有限公司)；EPOCH2T Microplate Reader酶標儀(美國BioTek有限公司)；50i型正置顯微鏡(日本尼康株式會社)；ALPHA 2-4LSC型冷凍干燥機(德國Christ有限公司)。

1.2 聚氨酯泡沫的預處理

將聚氨酯泡沫用電熱絲切割成1 cm3塊狀，然后用70%乙醇浸洗2次，每次30 min，以去除其他有機物雜質(zhì)。再用去離子水浸洗2次，每次30 min。最后放置于烘箱，80 ℃烘至恒態(tài)質(zhì)量。

1.3 生物吸附劑的制備

取出-80 ℃保藏的實驗菌株AspergillusflavusA5p1，接種至滅菌后的PDA培養(yǎng)基(質(zhì)量濃度為4.6 g/L) 中，于30 ℃條件下培養(yǎng)5～7 d，然后用無菌的0.5%吐溫80溶液洗脫孢子，過濾收集孢子懸液，再次傳代培養(yǎng)至第3代，放置于冰箱，4 ℃保藏備用。

稱取(0.50±0.005 0)g預處理的PUF載體材料進行高壓蒸汽滅菌20 min，取出將其加到滅菌后的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中[21]，隨后接入一定量的孢子懸浮液，接種量為8.6×104孢子/mL，30 ℃、150 r/min搖床培養(yǎng)2 d。用鑷子夾出固定化細胞，用去離子水清洗2次后放入高壓蒸汽滅菌鍋121 ℃滅菌20 min，于-45 ℃ 冷凍干燥，待用。

除不放置載體PUF之外，游離細胞的培養(yǎng)條件與固定化細胞的培養(yǎng)條件相同。將培養(yǎng)2 d的游離細胞取出，8 000 r/min條件下離心5 min，去除上層清液，用去離子水清洗細胞2次后在相同條件下滅活，于-45 ℃冷凍干燥，待用。

1.4 染料的吸附動力學

將滅活的PUF-固定化細胞和游離細胞分別投加到100 mL、染料RB4質(zhì)量濃度為50～700 mg/L的溶液中，在30 ℃、150 r/min的條件下進行吸附實驗。同時，將0.5 g PUF放入錐形瓶中作為對照組，考察載體PUF對RB4的吸附。染料RB4的質(zhì)量濃度采用分光光度計法測定并計算而得[22]，經(jīng)過全波段波長掃描，染料RB4的最大吸收波長為599 nm。根據(jù)染料RB4的質(zhì)量濃度標準曲線以及體系的體積可以計算出染料RB4的質(zhì)量，再由式(1)計算得到載體PUF對染料RB4的實際吸附量：

(1)

式中：Q為PUF對RB4的實際吸附量，mg/g；m0和me分別為體系中RB4的初始質(zhì)量和吸附平衡時的質(zhì)量，mg；m1為載體的質(zhì)量，g。

Langmuir方程、Freundlich方程是研究材料吸附特性常用的經(jīng)驗式方程。Langmuir方程基于吸附劑表面性質(zhì)均一、材料為單層吸附的假設；Freundlich方程用于描述均勻表面能量系統(tǒng)的非理想吸附。將載體PUF對不同濃度RB4染料的吸附平衡質(zhì)量濃度和吸附量等基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，采用Origin Pro.2019軟件對Langmuir方程(見式(2))、Freundlich方程(見式(3)) 進行擬合，建立吸附量和染料吸附平衡時的質(zhì)量濃度之間的數(shù)學關(guān)系。

(2)

(3)

式中：Qe為吸附平衡時載體PUF的吸附量，mg/g；Ce為染料吸附平衡時的質(zhì)量濃度，mg/L；KL為Langmuir常數(shù)，L/mg；Qm為PUF的最大理論吸附量，mg/g；KF為Freundlich常數(shù)，L/g；n為吸附強度常數(shù)。

分別測定PUF-固定化細胞和游離細胞體系對質(zhì)量濃度為200 mg/L的染料RB4的脫色進程曲線，按照式(4)計算脫色率。同時采用Weber等[23]提出的顆粒內(nèi)擴散動力學模型進行擬合，顆粒內(nèi)擴散方程如式(5)所示。

(4)

Qt=Kit1/2+Ci

(5)

式中：D為脫色率，%；A0和At分別為RB4的初始吸光度和脫色t時后的吸光度；Qt為t時的染料吸附量，mg/g；t為吸附時間，min；Ki為顆粒擴散速率常數(shù)，mg/(g·min1/2)；Ci是與反應邊界層厚度相關(guān)的常數(shù)。通常，Ci值越大，邊界層效應越大。

1.5 脫色率測試

分別考察PUF-固定化細胞體系、游離細胞體系對不同質(zhì)量濃度(100、300、500、700、1 000、1 500、2 000 mg/L)RB4的脫色率以及在不同NaCl質(zhì)量濃度(1、5、10、20、30、40、50 g/L)條件下脫色的情況。每個樣品做3個平行試樣，在設定的脫色時間點取樣測定體系中染料RB4的吸光度，根據(jù)式(4)計算脫色率。游離細胞體系的樣品需先在 8 000 r/min 下離心5 min，然后取上層清液測定吸光度，由式(4)計算得到游離細胞體系的脫色率。

1.6 生物吸附劑重復使用性能測試

以搖瓶實驗模擬染料廢水的批次脫色，將菌株AspergillusflavusA5p1接種至100 mL添加有染料RB4的培養(yǎng)基(染料RB4最終質(zhì)量濃度為300 mg/L)中，使其固定化生長的同時即實現(xiàn)對染料的吸附。每批次設定時間取出樣品采用分光度計測定染料RB4的吸光度，按照式(4)計算脫色率。脫色結(jié)束后取出PUF-固定化細胞再次投入到新鮮配制的RB4溶液中進行下一個批次脫色實驗。批次反應以12 h為1個脫色周期，考察重復使用7個批次的脫色情況。

游離細胞體系的重復使用條件同固定化細胞體系，但是游離細胞在脫色結(jié)束后需先在8 000 r/min下離心5 min，然后取出細胞重新投加到下一個批次的脫色實驗。

2 結(jié)果與討論

2.1 生物吸附劑對RB4的吸附動力學

首先考察載體PUF對染料RB4的吸附情況。圖1示出載體PUF對RB4的吸附等溫線?？梢钥闯觯琇angmuir方程和Freundlich方程都能較好地描述載體PUF吸附RB4的過程，Langmuir方程具有更高的擬合度，由此認為載體PUF材料對質(zhì)量濃度為50～700 mg/L的染料RB4的吸附為單分子層吸附，PUF表面吸附位點的性質(zhì)較為均一。

圖1 載體PUF對RB4的吸附等溫線Fig.1 Adsorption isotherm of RB4 by PUF

表1示出吸附等溫模型的參數(shù)擬合結(jié)果?？梢钥闯觯d體PUF對RB4的最大理論吸附量Qm為3.96 mg/g，與實驗測定的實際吸附量3.35 mg/g較為接近。由Freundlich方程吸附強度常數(shù)n大于1可知，載體PUF對染料RB4的吸附較易進行?，F(xiàn)有研究表明，載體PUF對染料的吸附能力與材料的物理化學性質(zhì)以及染料的特性有關(guān)。Silveira等[24]在酸性條件下采用PUF吸附染料直接紅80和活性藍21的最大吸附量分別為4.50、8.31 mg/g，分析認為，載體PUF在酸性介質(zhì)下帶正電荷，增強了其與陰離子染料之間的靜電作用，使得吸附更易進行。

表1 染料RB4吸附等溫模型的擬合參數(shù)Tab.1 Fitting parameters of adsorption isotherm model

分別考察PUF-固定化細胞和游離細胞對200 mg/L染料 RB4的脫色效率，結(jié)果如圖2所示?？梢钥闯觯篜UF-固定化細胞的平衡吸附率為90.5%，20 min內(nèi)吸附率可達到77.8%；而游離細胞的吸附過程較緩慢，90 min的吸附率僅為62.8%。

圖2 染料RB4的吸附進程曲線Fig.2 Adsorption time curve of RB4

采用顆粒內(nèi)擴散模型對RB4的吸附過程進行擬合，結(jié)果如圖3所示。吸附過程分為3個階段：1)吸附質(zhì)從主體溶液輸送到吸附劑的外表面；2)吸附質(zhì)擴散到吸附劑的內(nèi)表面；3)吸附質(zhì)擴散到孔的內(nèi)表面。圖3的直線不通過原點(Ci=0)，說明邊界層的厚度參與了對吸附過程的控制，顆粒內(nèi)擴散不是吸附過程的唯一限速步驟。

圖3 染料RB4的顆粒內(nèi)擴散模型Fig.3 Intraparticle diffusion model of RB4

表2示出染料RB4顆粒內(nèi)擴散模型的擬合參數(shù)。在染料向吸附劑外表面擴散的第1階段，PUF-固定化細胞和游離細胞的擴散速率常數(shù)Ki1分別為60.7和15.3 mg/(g·min1/2)，反應邊界層厚度相關(guān)常數(shù)Ci1分別為-132.1和-30.7。Ci1值不為零而為負值，說明此階段的吸附快速發(fā)生在吸附劑的表面，吸附速率主要受界面擴散的影響[25]。從圖3可看出，PUF-固定化細胞可在10 min內(nèi)快速吸附RB4，這是因為菌株AspergillusflavusA5p1圍繞載體PUF固定生長后，菌絲呈現(xiàn)交織纏繞的形態(tài)，相比于游離細胞的菌絲球形態(tài)，其活性位點增加，從而加快了對RB4的吸附，且載體PUF對染料RB4也有吸附作用，因此，PUF-固定化細胞的宏觀吸附速率明顯快于游離細胞。第2階段為染料逐漸向吸附劑內(nèi)表面擴散階段，PUF-固定化細胞和游離細胞的擴散速率常數(shù)Ki2分別為0.901、5.094 mg/(g·min1/2)。由于PUF-固定化細胞在第1階段達到較高的吸附量，因此隨著RB4濃度的降低和可用吸附位點的減少，PUF-固定化細胞的吸附速率顯著變小，此時的吸附主要受到顆粒內(nèi)擴散的限制。第3階段為孔內(nèi)擴散階段，此時達到吸附平衡，PUF-固定化細胞和游離細胞的擴散速率常數(shù)Ki3分別為0.041、0.070 mg/(g·min1/2)，二者的擴散速率常數(shù)差別不顯著,分析認為載體PUF為大孔結(jié)構(gòu)，染料在載體孔內(nèi)的擴散可能與其在游離細胞間的孔道擴散相似。Saeed等[26]采用仿絲瓜絡海綿固定綠色木霉Trichodermaviride去除100 mg/L甲基藍，固定化細胞的最大吸附率為84.3%，遠高于游離細胞61.4%的吸附率。研究者認為，仿絲瓜絡海綿能為細胞提供開放的生物結(jié)構(gòu)，增加有效接觸面積，使得固定化細胞的吸附量增加。本文研究也獲得類似的結(jié)果，生物吸附劑AspergillusflavusA5p1經(jīng)過PUF固定化之后對染料RB4的吸附率顯著提高，載體PUF本身對染料RB4的吸附進一步增強了體系的脫色能力，使得該固定化體系的脫色率顯著高于游離細胞體系。

表2 染料RB4顆粒內(nèi)擴散模型的擬合參數(shù)Tab.2 Fitting parameters of intraparticle diffusion model for RB4 adsorption

2.2 生物體系對不同濃度RB4的脫色

染料對生命有機體的毒害作用是限制生物法脫色的關(guān)鍵因素之一，因此考察了生物體系對不同濃度RB4的吸附脫色效果，結(jié)果如圖4所示?？梢钥闯觯玖腺|(zhì)量濃度為100 mg/L時，PUF-固定化細胞對RB4的吸附量與游離細胞無明顯差異，但隨著RB4質(zhì)量濃度的增加，PUF-固定化細胞的吸附量明顯高于游離細胞。當RB4質(zhì)量濃度為2 000 mg/L時，固定化細胞對RB4的吸附量約為游離細胞的2.5倍，表明PUF-固定化細胞體系可耐受高濃度的RB4染料。Gan等[27]采用桉葉固定洋蔥伯克霍爾德菌Burkholderiacepacia脫色孔雀石綠(MG)發(fā)現(xiàn)，固定化載體表面的負電荷可促進染料從溶液轉(zhuǎn)移到細胞活性位點區(qū)域，因此，固定化體系對MG的吸附增強。更多的研究認為載體對微生物具有保護作用，從而可有效減少不良環(huán)境對菌株的毒害。例如：1株斯氏普羅威登斯菌ProvidenciastuartiiPL4經(jīng)過PUF固定化之后可在120 h內(nèi)降解2 500 mg/L的苯酚，而游離細胞僅能降解質(zhì)量濃度為150 mg/L的苯酚[28]，展示出PUF-固定化細胞體系在處理高濃度污染物方面的優(yōu)勢。本文研究中的PUF-固定化細胞體系對高濃度RB4也具有良好的吸附能力，菌體吸附與載體吸附的協(xié)同作用強化了PUF-固定化細胞體系對染料RB4的吸附脫色。

圖4 生物體系對不同質(zhì)量濃度RB4的脫色Fig.4 Decolorization of RB4 at different concentrations by biological systems

2.3 NaCl質(zhì)量濃度對生物體系的脫色影響

典型的活性染料染色工藝常添加60～100 g/L的無機鹽[29]，產(chǎn)生的染料廢水所含無機鹽的質(zhì)量分數(shù)高達15%～25%，組分主要是NaCl，少量Na2SO4、KCl以及其他金屬鹽[30]。高鹽條件(以NaCl 質(zhì)量分數(shù)大于3.5%計)會嚴重抑制微生物的活性或者導致細胞質(zhì)壁分離、活性完全喪失，對生物處理過程非常不利[31]，因此脫色染料廢水的微生物需要有一定的耐鹽性。圖5示出生物體系在不同NaCl質(zhì)量濃度條件下的脫色效果。

圖5 生物體系在不同NaCl質(zhì)量濃度條件下的脫色Fig.5 Decolorization of RB4 by biological systems at different concentrations of NaCl

從圖5可以看出，NaCl質(zhì)量濃度為1～10 g/L時對 PUF-固定化細胞體系的脫色影響不顯著，游離細胞體系的脫色率則隨NaCl質(zhì)量濃度的增加而顯著下降。當NaCl質(zhì)量濃度為10、50 g/L時，PUF-固定化細胞仍然保持較高的活性，RB4的脫色率分別為94.5%、75.2%，而游離細胞的脫色率僅為66.1%、49.6%。NaCl質(zhì)量濃度為10 g/L是游離細胞體系的分界點，此質(zhì)量濃度下的脫色率減少程度最大，繼續(xù)提高NaCl的質(zhì)量濃度，脫色率的減小程度趨于平緩，說明細胞表面的活性官能團在10 g/L的NaCl質(zhì)量濃度下可能被破壞而完全失活，體系脫色率的降低受細胞結(jié)構(gòu)破壞和活性降低的共同影響。與游離細胞體系相比，PUF-固定化細胞體系對高鹽條件表現(xiàn)出良好的耐受性，這可能與固定化載體的保護作用有關(guān)[28,32]。Yuan等[33]報道陶粒固定化厭氧微生物可以在5%的NaCl用量下使3種偶氮染料脫色，固定化細胞體系的平均脫色率比游離細胞體系高2.5倍。本文研究中的PUF-固定化細胞體系在NaCl質(zhì)量濃度為50 g/L條件下的脫色率約是游離細胞體系的1.5倍，表明PUF-固定化AspergillusflavusA5p1在處理含鹽染料廢水方面具有巨大潛力。

2.4 生物體系重復批次脫色效果

重復利用性是固定化技術(shù)的顯著優(yōu)勢之一，由于生物吸附劑經(jīng)過固定化之后細胞不易流失，因此它可以反映生物體系的穩(wěn)定性。圖6示出PUF-固定化細胞體系和游離細胞體系對300 mg/L 染料RB4脫色的重復批次情況。以菌株AspergillusflavusA5p1的固定化生長和脫色作為第Ⅰ個批次，結(jié)果表明，菌株AspergillusflavusA5p1完成固定化生長和染料RB4的吸附脫色過程需要36 h，菌株固定化生長時間的長短與接種量、培養(yǎng)基組成等條件有關(guān)[34-35]。與PUF-固定化細胞體系相比，36 h時游離細胞體系的RB4剩余質(zhì)量濃度為49.9 mg/L，脫色率只達到83.3%，這可能是因為培養(yǎng)基中添加染料RB4之后對細胞生長有抑制作用，使得菌株生長較緩慢而導致脫色不完全。通常而言，吸附劑吸附飽和之后需要進行解吸再生才能再次吸附，但是在第Ⅱ個批次實驗中，PUF-固定化細胞和游離細胞體系仍然具有脫色能力，PUF-固定化細胞體系12 h時的RB4剩余質(zhì)量濃度為1.42 mg/L，脫色率高達99.5%。初步研究發(fā)現(xiàn)，菌株AspergillusflavusA5p1能夠降解RB4，生物降解作用使得吸附劑得以再生，從而有利于吸附脫色過程的持續(xù)進行。隨著重復使用批次的增加，生物吸附劑的流失會導致脫色率降低。從圖6可見，游離細胞體系重復使用至第Ⅶ批次時，RB4的剩余質(zhì)量濃度為76.6 mg/L，脫色率下降至74.3%，而PUF-固定化細胞體系中的RB4剩余質(zhì)量濃度為33.1 mg/L，脫色率仍然能達到89%，反映了固定化體系在生物處理穩(wěn)定性方面的優(yōu)勢。Mulla等[36]采用PUF、藻酸鈉、藻酸鈉-聚乙烯醇、瓊脂以及聚丙烯酰胺固定微球菌Micrococcussp.strain SMN-1降解15 mmol/L的2-硝基苯，PUF-固定化細胞可重復使用24個周期，其他固定化細胞分別重復使用15、20、12和18個周期。由此可見，PUF材料良好的力學強度和生物固載能力，為生物固定化體系的長效、穩(wěn)定運行提供了有利條件。

圖6 生物體系重復批次脫色結(jié)果Fig.6 Repeated batches decolorization of RB4 by biological systems

3 結(jié) 論

1)采用聚氨酯泡沫(PUF)載體材料成功構(gòu)建了黃曲霉菌AspergillusflavusA5p1的固定化生物體系，該體系在20 min時對200 mg/L蒽醌染料RB4的吸附率達到77.8%；與之相比，游離細胞體系在90 min時的吸附率僅為62.8%。生物體系對RB4的吸附脫色過程可以用顆粒擴散模型來描述，PUF-固定化細胞體系主要受界面擴散限制，游離細胞體系同時受界面和顆粒內(nèi)擴散限制，而載體PUF對RB4的吸附符合Langmuir方程。

2)PUF-固定化細胞體系在RB4質(zhì)量濃度為100～2 000 mg/L、NaCl質(zhì)量濃度為1～50 g/L的范圍內(nèi)均能獲得較高的脫色率，其具有處理高濃度染料廢水、含鹽染料廢水的潛力。

3)PUF-固定化細胞體系重復使用7個批次的脫色率仍然能達到89%，而游離細胞體系的脫色率下降為74.3%，說明PUF載體能有效固定生物吸附劑，從而獲得穩(wěn)定的脫色效果。

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