• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    部分河南地方豬與藏豬選擇信號(hào)分析

    2022-08-13 02:57:02崔晟頔張力戈張松源詹鳳婷李秀領(lǐng)喬瑞敏韓雪蕾李新建王克君
    中國畜牧雜志 2022年8期
    關(guān)鍵詞:確山豬種黑豬

    崔晟頔,張力戈,張松源,詹鳳婷,李秀領(lǐng),喬瑞敏,韓雪蕾,李新建,王克君

    (河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,河南鄭州 450046)

    河南地方豬是我國寶貴的種質(zhì)資源。河南地方豬種具有許多優(yōu)良的種質(zhì)特征,如繁殖力高、耐粗飼、肉質(zhì)好等,是河南省養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要資源。藏豬是我國唯一的高原型豬種,也是我國寶貴的地方品種資源。藏豬長期生活于高寒地區(qū),具有適應(yīng)高寒惡劣條件、耐粗飼、瘦肉率高等特點(diǎn),但繁殖力較低。由于社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展迅速和人民生活質(zhì)量提高,市場對(duì)瘦肉型豬的需求增加,因此在養(yǎng)豬生產(chǎn)中追求高產(chǎn)出和高收益,這使得國外豬種被大面積引進(jìn)與河南地方豬種進(jìn)行雜交,雖然提高了本地豬種的生產(chǎn)性能,但卻導(dǎo)致純種豬的數(shù)量急劇減少。而藏豬因?yàn)閲庳i種的引進(jìn),更是面臨種群滅絕的危險(xiǎn)。在我國豬肉產(chǎn)量已成為世界第一的今天,我國養(yǎng)豬生產(chǎn)也應(yīng)向優(yōu)質(zhì)化和可持續(xù)化發(fā)展。

    隨著測序技術(shù)的發(fā)展,基于測序數(shù)據(jù)進(jìn)行選擇信號(hào)分析可以快速準(zhǔn)確地篩選出受選擇區(qū)域并定位到相關(guān)候選基因。通過對(duì)候選基因的功能注釋,利用基因敲除、敲低或過表達(dá)等方式驗(yàn)證基因的功能,能夠篩選確定關(guān)鍵功能基因,以應(yīng)用于遺傳改良或新品種培育的實(shí)踐中。目前對(duì)多個(gè)群體進(jìn)行選擇信號(hào)檢測常用的方法是群體分化指數(shù)(Fixation indices,F(xiàn)st)方法。群體遺傳分化是指物種群體間存在明顯的等位基因頻率差異,通常遺傳漂變和選擇過程均可造成群體間的遺傳分化。Fst 是檢測群體間遺傳分化的重要指標(biāo)之一,而對(duì)全基因組范圍內(nèi)的單個(gè)位點(diǎn)估算Fst 值,就能對(duì)每個(gè)位點(diǎn)分析其分化程度,最終實(shí)現(xiàn)選擇信號(hào)檢測。通過選擇信號(hào)分析鑒定豬重要經(jīng)濟(jì)性狀候選基因已有諸多報(bào)道,陶偉等鑒定出5 個(gè)影響豬肉滴水損失的候選基因。馮雪燕等挖掘出91 個(gè)與海南豬重要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的候選基因。李景研究過藏豬高原適應(yīng)性選擇信號(hào),而河南地方豬這方面的研究較少。

    本研究利用全基因組重測序數(shù)據(jù)從基因組范圍內(nèi)對(duì)河南地方豬、藏豬和野豬進(jìn)行群體遺傳結(jié)構(gòu)分析和選擇信號(hào)分析,并對(duì)河南地方豬和藏豬進(jìn)行基因流分析,旨在探究河南地方豬和藏豬的遺傳分化和基因交流情況,發(fā)掘與重要經(jīng)濟(jì)性狀相關(guān)的候選基因,為河南地方豬和藏豬的種質(zhì)資源保護(hù)和開發(fā)利用提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 本研究從NCBI 的Sequnence Read Archive(SRA)數(shù)據(jù)庫(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra)中下載了66 頭豬的全基因組重測序數(shù)據(jù)。其中,河南地方豬包括淮南豬(HN)9 頭、確山黑豬(QS)10 頭和南陽黑豬(NY)10 頭,共29 頭豬,藏豬(ZZ)共28 頭,野豬包括河南野豬(WHN)6 頭和中國野豬(WB)3 頭,共9 頭豬。

    1.2 數(shù)據(jù)質(zhì)量控制 對(duì)全基因組重測序數(shù)據(jù)按照移除性染色體、保留常染色體、次要等位基因頻率<0.01 且檢出率>0.99 的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行過濾后,共獲得6 884 804 個(gè)常染色體雙等位基因SNP 用于后續(xù)分析。

    1.3 群體遺傳結(jié)構(gòu)分析 使用PLINK(https://www.cog-genomics.org/plink2/)進(jìn)行主成分分析(Principal Component Analysis,PCA)。并使用R(https://www.rproject.org/)繪制每個(gè)個(gè)體的散點(diǎn)分布圖。使用Admix ture(http://dalexander.github.io/admixture/)進(jìn)行群體結(jié)構(gòu)分析,最佳聚類數(shù)(K)由交叉驗(yàn)證誤差率的方法確定。使用IQ-TREE(http://www.iqtree.org/)生成系統(tǒng)進(jìn)化樹;并使用R 的ggtree(https://guangchuangyu.github.io/software/ggtree/)繪制系統(tǒng)進(jìn)化樹。

    1.4 選擇信號(hào)分析 使用Vcftools(http://vcftools.sourc eforge.net/index.html)分別對(duì)河南地方豬、藏豬和野豬進(jìn)行Fst 分析(窗口大小為20 000,步長為5 000),計(jì)算公式如下:

    其中,MSG 是未檢測的群體內(nèi)部位點(diǎn)的誤差均方,MSP 是檢測的群體之間位點(diǎn)的均方差,n指校正后群體間的平均樣本大小。

    1.5 候選基因的檢測和注釋 以Fst 分析得到的前1%窗口作為各品種受選擇區(qū)域,將受選擇區(qū)域內(nèi)的基因使用Enesmbl 數(shù)據(jù)庫(https://asia.ensembl.org/index.html)的BioMart 功能進(jìn)行基因功能注釋,并利用GeneCards 網(wǎng)站(https://www.genecards.org/)和閱讀文獻(xiàn)查詢?nèi)炕虻墓δ堋?/p>

    1.6 候選基因的富集分析 利用DAVID 數(shù)據(jù)庫(http://david.abcc.ncifcrf.gov/summary.jsp)對(duì)基因進(jìn)行GO(Gene Ontology)富集分析和KEGG(Kyoto Encyclo pedia of Genes and Genomes)富集分析,并分別生成富集分析圖。

    1.7 基因流分析 使用TreeMix 軟件推斷分化和混合情況。使用R 的OptM(https://www.rdocumentation.org/packages/OptM/versions/0.1.6)判斷最優(yōu)m 值,使用最優(yōu)m 值進(jìn)行TreeMix 分析,并繪制最大似然樹。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 群體遺傳結(jié)構(gòu)分析 對(duì)6 個(gè)豬種進(jìn)行PCA 分析、系統(tǒng)進(jìn)化樹分析和群體遺傳結(jié)構(gòu)分析。PCA 結(jié)果顯示,野豬在右下角,與其他豬種距離較遠(yuǎn);淮南豬、確山黑豬和南陽黑豬聚在一起,藏豬的分布比較分散,主要聚集成了3 個(gè)部分(圖1)。系統(tǒng)進(jìn)化樹分析結(jié)果顯示,3 個(gè)河南地方豬種在同一個(gè)大分支上,確山黑豬和南陽黑豬在一個(gè)分支上,南陽黑豬在另一個(gè)分支上;藏豬在一個(gè)大分支上,并分出3 個(gè)分支;中國野豬和河南野豬在一個(gè)大分支上,有2 個(gè)河南野豬個(gè)體并未和其他個(gè)體劃分在同一個(gè)分支上(圖2)。群體遺傳結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示,當(dāng)K 為2 時(shí),交叉驗(yàn)證誤差最?。▓D3A),所以K 的最佳估計(jì)數(shù)為2。當(dāng)K=2 時(shí),淮南豬、南陽黑豬、確山黑豬和藏豬、野豬、河南野豬很明顯的分離出來;當(dāng)K=3 時(shí),淮南豬被分離出來,藏豬被分成2 個(gè)亞群;當(dāng)K=4 時(shí),確山黑豬、藏豬和野豬被分離出來;當(dāng)K=5 時(shí),南陽黑豬和淮南豬,野豬和河南野豬仍然混在一起;當(dāng)K=6 時(shí),南陽黑豬被分離出來(圖3B)。

    圖1 PCA 分析結(jié)果

    圖2 系統(tǒng)進(jìn)化樹

    圖3 群體遺傳結(jié)構(gòu)分析

    2.2 Fst 分析結(jié)果 使用Vcftools 對(duì)河南本地豬、藏豬和野豬進(jìn)行Fst 分析。結(jié)果顯示:河南地方豬和藏豬之間的前1% 窗口有446 個(gè)受選擇區(qū)域(圖4A),其中注釋出的基因有134 個(gè);河南地方豬和野豬之間前1%窗口有446 個(gè)受選擇區(qū)域(圖4B),注釋出的基因有179 個(gè);藏豬和野豬前1%窗口有446 個(gè)受選擇區(qū)域(圖4C),注釋出的基因有148 個(gè)。3 次比對(duì)獲得的全部基因共有369 個(gè)。

    圖4 Fst 曼哈頓圖

    2.3 功能富集分析 將3 次比對(duì)獲得的全部369 個(gè)基因進(jìn)行GO 富集分析和KEGG 富集分析。GO 富集分析顯示:基因顯著富集于細(xì)胞核(Nucleus)、胞質(zhì)溶膠(Cytosol)、RNA 聚合酶II 對(duì)轉(zhuǎn)錄的負(fù)調(diào)控(Negative Regulation of Transcription by RNA Polymerase II)和凋亡過程的正向調(diào)控(Positive Regulation of Apoptotic Process)等通路(圖5);KEGG 富集分析顯示:基因顯著富集于磷酸肌醇代謝(Inositol Phosphate Metabolism)、磷脂酰肌醇信號(hào)系統(tǒng)(Phosphatidylinositol Signaling System)、內(nèi)分泌和其他因子調(diào)節(jié)的鈣重吸收(Endocrine and Other Factor-Regulated Calcium Reabsorption)、代謝途徑(Metabolic Pathways)和內(nèi)吞作用(Endocyt osis)等通路(圖6)。

    圖5 GO 富集分析圖

    圖6 KEGG 富集分析圖

    2.4 基因流分析 基因流指一個(gè)物種的一個(gè)種群向另一個(gè)種群的基因轉(zhuǎn)移,利用OptM 判斷最優(yōu)m 值為2,以m=2繪制最大似然樹(圖7)?;蛄鞣治鼋Y(jié)果顯示:藏豬和確山黑豬有少量的基因轉(zhuǎn)移,即發(fā)生了基因交流情況。

    圖7 基因滲入圖

    3 討 論

    3.1 群體遺傳結(jié)構(gòu)分析與基因流分析 遺傳結(jié)構(gòu)分析顯示,3 個(gè)河南地方豬的親緣關(guān)系很近,2 個(gè)主成分并不能將3 個(gè)豬群體分離,3 個(gè)群體在進(jìn)化樹上的距離也很近,在同一個(gè)分支上。藏豬在PCA 分析中群體分布比較散亂,主要形成了3 個(gè)聚集;藏豬群體內(nèi)親緣關(guān)系較低,在進(jìn)化樹上也分成了3 個(gè)分支,可能是由于取材的藏豬來自不同的地區(qū),分布區(qū)域較為廣泛;遺傳結(jié)構(gòu)分析顯示藏豬內(nèi)部存在外源滲入和結(jié)構(gòu)分化現(xiàn)象,基因流分析也顯示藏豬與確山黑豬存在基因交流情況,這可能是藏豬與確山黑豬進(jìn)行過雜交改良所導(dǎo)致的。

    3.2 選擇信號(hào)分析 基于Fst 方法對(duì)6 個(gè)豬種進(jìn)行選擇信號(hào)分析,并對(duì)前1%的窗口進(jìn)行基因功能注釋,共注釋出369 個(gè)基因,這些基因富集在GO 的1 401 個(gè)條目上和KEGG 的225 個(gè)條目上。

    本研究發(fā)現(xiàn)和在細(xì)胞的生長和存活過程中發(fā)揮作用;和在細(xì)胞的增殖和分化中發(fā)揮作用。這些基因作用于細(xì)胞的生長、增殖和分化過程,可能會(huì)影響豬的生長發(fā)育。能介導(dǎo)音猬因子(SHH)信號(hào),通過其在SHH 信號(hào)傳導(dǎo)中的作用在細(xì)胞增殖和分化中發(fā)揮作用。則是胞質(zhì)分裂的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子??梢酝ㄟ^TRIP4 去甲基化調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)核受體的反式激活,從而調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和分化。能通過調(diào)節(jié)G1/S 期轉(zhuǎn)換在細(xì)胞增殖中發(fā)揮作用。

    、、、和在精子生成中發(fā)揮作用。和在胚胎發(fā)育過程中發(fā)揮作用,和在精卵結(jié)合中發(fā)揮作用??赡軈⑴c卵子和早期胚胎中的細(xì)胞骨架重組。是卵裂溝的正常形成和雌性生殖細(xì)胞減數(shù)分裂過程中極體擠出所必需的??赡茉诰雍吐涯讣?xì)胞的分化中起作用。以上基因可能會(huì)影響豬的繁殖性能。

    、和在心臟發(fā)育和血管生成中發(fā)揮作用,而、和可以調(diào)控缺氧中的基因表達(dá)。這些基因可能與藏豬心血管器官發(fā)達(dá)、能適應(yīng)高原環(huán)境有關(guān)。可作為轉(zhuǎn)錄因子,調(diào)節(jié)參與炎癥反應(yīng)、血管生成、脂肪生成和細(xì)胞凋亡的多個(gè)基因的表達(dá)。是抑制缺氧中的基因表達(dá)的關(guān)鍵因子,通過直接結(jié)合其啟動(dòng)子區(qū)域上的RE1/NRSE 位點(diǎn)來抑制缺氧中的基因表達(dá)。是參與誘導(dǎo)氧調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄因子。在對(duì)低氧張力的適應(yīng)性反應(yīng)中充當(dāng)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑,作為缺氧誘導(dǎo)基因表達(dá)的調(diào)節(jié)劑。

    本研究發(fā)現(xiàn)3 個(gè)基因與脂肪的合成與代謝有關(guān),可能與豬的低瘦肉率有關(guān)??梢源碳ぐ咨窘M織(WAT)中的脂肪生成。能通過結(jié)合長鏈脂肪酸并促進(jìn)其轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞中從而參與肌肉脂質(zhì)利用、脂肪能量儲(chǔ)存和腸道脂肪吸收。而在長鏈脂肪酸及其?;o酶A 酯的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)中起作用。

    共6 個(gè)基因與免疫功能相關(guān),可能與河南地方豬和藏豬的高抗病性有關(guān)。是適應(yīng)性免疫的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑,對(duì)于維持調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞功能和B 細(xì)胞成熟至關(guān)重要。是配體激活的轉(zhuǎn)錄因子,在免疫過程中起重要作用。與kappa 免疫球蛋白基因增強(qiáng)子中的kappa-E2 位點(diǎn)結(jié)合。能激活免疫球蛋白基因表達(dá)。

    4 結(jié) 論

    本研究通過群體遺傳結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示,3 個(gè)河南地方豬品種的親緣關(guān)系近,河南野豬因?yàn)榈乩砦恢玫脑蚺c河南地方豬的親緣關(guān)系相較中國野豬更近。利用6個(gè)豬品種的全基因組重測序數(shù)據(jù),應(yīng)用Fst 方法檢測豬基因組的選擇信號(hào),共篩選出47 個(gè)候選基因,其中14個(gè)基因與細(xì)胞生長、增殖和分化有關(guān),3 個(gè)基因與心血管發(fā)育有關(guān),3 個(gè)基因與氧調(diào)節(jié)有關(guān),18 個(gè)基因與繁殖性能有關(guān),3 個(gè)基因與脂肪的合成與代謝有關(guān)。此外基因流分析顯示,藏豬與確山黑豬之間有基因交流。這些研究結(jié)果為河南地方豬和藏豬的種質(zhì)資源保護(hù)與利用提供了參考。

    猜你喜歡
    確山豬種黑豬
    貴州地方特色豬種培育
    可視化中國地方豬種地理分布圖
    確山黑豬遺傳資源保護(hù)與產(chǎn)業(yè)發(fā)展情況
    挖掘確山黑豬文化 為老區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展服務(wù)
    河南精旺豬種改良有限公司
    國外豬種大量引進(jìn)導(dǎo)致本土豬種瀕臨滅絕的原因分析及應(yīng)對(duì)建議(以玉山黑豬為例)
    黑豬
    確山黑豬種質(zhì)資源的親緣關(guān)系研究
    確山黑豬發(fā)展現(xiàn)狀、存在問題及建議
    小黑豬
    亚洲性夜色夜夜综合| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 午夜老司机福利片| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 免费在线观看黄色视频的| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美国产精品一级二级三级| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美黑人欧美精品刺激| 视频区欧美日本亚洲| 久久久久精品人妻al黑| 久久精品国产清高在天天线| 欧美在线黄色| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 丰满的人妻完整版| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲中文字幕日韩| 色老头精品视频在线观看| 久久久久视频综合| 日本wwww免费看| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲专区字幕在线| 日韩免费av在线播放| 亚洲片人在线观看| 99精国产麻豆久久婷婷| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 老司机福利观看| 黄片播放在线免费| 欧美精品亚洲一区二区| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 18禁美女被吸乳视频| 亚洲精华国产精华精| 很黄的视频免费| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产99白浆流出| 99re在线观看精品视频| 久久久久久久午夜电影 | 午夜精品久久久久久毛片777| 精品午夜福利视频在线观看一区| 男男h啪啪无遮挡| av免费在线观看网站| ponron亚洲| 国产av一区二区精品久久| 精品久久久久久久毛片微露脸| 18在线观看网站| 亚洲精品乱久久久久久| 国产成人免费无遮挡视频| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲精品在线美女| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 国产欧美日韩精品亚洲av| 午夜亚洲福利在线播放| 国产欧美日韩一区二区精品| av天堂久久9| 午夜福利影视在线免费观看| 国产精品综合久久久久久久免费 | 青草久久国产| 校园春色视频在线观看| 亚洲成人手机| 国产精品综合久久久久久久免费 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 人妻久久中文字幕网| 日日爽夜夜爽网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产免费男女视频| 91精品国产国语对白视频| 老司机福利观看| svipshipincom国产片| 脱女人内裤的视频| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 国产日韩一区二区三区精品不卡| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 大片电影免费在线观看免费| 欧美乱码精品一区二区三区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久人人97超碰香蕉20202| 免费看a级黄色片| 欧美黄色片欧美黄色片| 男女下面插进去视频免费观看| 视频区图区小说| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 精品一品国产午夜福利视频| 国产成人精品无人区| 视频区图区小说| 国产高清国产精品国产三级| 下体分泌物呈黄色| 国产一区有黄有色的免费视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 视频区图区小说| 高清av免费在线| 无限看片的www在线观看| 18禁观看日本| 国产一区二区三区综合在线观看| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | 91av网站免费观看| 悠悠久久av| 村上凉子中文字幕在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 久久人妻av系列| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产精品欧美亚洲77777| 婷婷丁香在线五月| 校园春色视频在线观看| 亚洲综合色网址| 高清av免费在线| 人妻久久中文字幕网| 高清av免费在线| 欧美中文综合在线视频| 国产精品免费大片| 99精品在免费线老司机午夜| 国产精品免费视频内射| 黄色女人牲交| 18在线观看网站| 视频区图区小说| 亚洲精品久久午夜乱码| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲欧美色中文字幕在线| videosex国产| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 久久精品国产综合久久久| 欧美日韩亚洲高清精品| 91精品三级在线观看| 桃红色精品国产亚洲av| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久久久久久久免费视频了| 丰满饥渴人妻一区二区三| 国产主播在线观看一区二区| 国产精品av久久久久免费| 在线观看日韩欧美| 亚洲精品av麻豆狂野| 动漫黄色视频在线观看| 一区福利在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 校园春色视频在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 精品久久久久久久毛片微露脸| 99久久综合精品五月天人人| 动漫黄色视频在线观看| 午夜亚洲福利在线播放| 国产高清国产精品国产三级| 久久久国产欧美日韩av| 国产成人影院久久av| 脱女人内裤的视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 99国产精品免费福利视频| 日韩大码丰满熟妇| 亚洲avbb在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 母亲3免费完整高清在线观看| 欧美乱妇无乱码| 久久人妻av系列| 中文亚洲av片在线观看爽 | 亚洲熟女精品中文字幕| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 欧美另类亚洲清纯唯美| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 好男人电影高清在线观看| 一二三四社区在线视频社区8| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久国产精品人妻蜜桃| 999精品在线视频| 午夜福利,免费看| 青草久久国产| 黄色毛片三级朝国网站| 国产精品影院久久| 国产精品av久久久久免费| e午夜精品久久久久久久| 色播在线永久视频| 国产一区在线观看成人免费| 久久久久久久精品吃奶| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久久精品区二区三区| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 涩涩av久久男人的天堂| 免费观看人在逋| 女人被狂操c到高潮| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产精品99久久99久久久不卡| 欧美黑人精品巨大| 久久性视频一级片| 男男h啪啪无遮挡| 日韩欧美国产一区二区入口| 久久国产精品大桥未久av| 99久久国产精品久久久| 黑人操中国人逼视频| 丝瓜视频免费看黄片| 午夜福利免费观看在线| 69精品国产乱码久久久| 亚洲精品久久午夜乱码| 一进一出抽搐gif免费好疼 | 久久久久精品国产欧美久久久| 欧美不卡视频在线免费观看 | 男女高潮啪啪啪动态图| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲熟女精品中文字幕| 脱女人内裤的视频| 国产精品综合久久久久久久免费 | 久久青草综合色| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲中文av在线| 精品久久久久久电影网| 国产精品乱码一区二三区的特点 | 成人国语在线视频| 又黄又粗又硬又大视频| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| tube8黄色片| 啦啦啦免费观看视频1| 欧美日本中文国产一区发布| 成年动漫av网址| 免费黄频网站在线观看国产| 成人av一区二区三区在线看| 国产av一区二区精品久久| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久久国产欧美日韩av| 丰满的人妻完整版| 久久精品人人爽人人爽视色| 天天添夜夜摸| 1024视频免费在线观看| 久久这里只有精品19| 黄色丝袜av网址大全| 国产成人av激情在线播放| av电影中文网址| 九色亚洲精品在线播放| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 国产伦人伦偷精品视频| 黑人猛操日本美女一级片| 国产亚洲一区二区精品| 国产成人精品在线电影| 国产男女内射视频| 午夜精品国产一区二区电影| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产激情久久老熟女| 女同久久另类99精品国产91| 女人久久www免费人成看片| 99久久精品国产亚洲精品| 在线十欧美十亚洲十日本专区| avwww免费| 日韩大码丰满熟妇| 真人做人爱边吃奶动态| 午夜福利视频在线观看免费| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲精品久久午夜乱码| 欧美av亚洲av综合av国产av| 99国产精品一区二区蜜桃av | 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 无遮挡黄片免费观看| 中亚洲国语对白在线视频| 午夜91福利影院| 欧美黑人欧美精品刺激| 久久影院123| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 国产精品99久久99久久久不卡| 99国产综合亚洲精品| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 一区福利在线观看| 成熟少妇高潮喷水视频| 一级a爱片免费观看的视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 一个人免费在线观看的高清视频| 黄色毛片三级朝国网站| 成年人免费黄色播放视频| 正在播放国产对白刺激| 国产高清激情床上av| 色婷婷av一区二区三区视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 男女免费视频国产| 不卡av一区二区三区| 午夜福利在线免费观看网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲第一青青草原| 美女扒开内裤让男人捅视频| 日本五十路高清| 男人操女人黄网站| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 夜夜爽天天搞| 免费av中文字幕在线| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产主播在线观看一区二区| 亚洲一区高清亚洲精品| 精品电影一区二区在线| 超色免费av| 女性被躁到高潮视频| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久午夜综合久久蜜桃| 1024香蕉在线观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲第一av免费看| 精品欧美一区二区三区在线| 国产在线观看jvid| 大码成人一级视频| 国产高清视频在线播放一区| 香蕉国产在线看| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 大型黄色视频在线免费观看| 狂野欧美激情性xxxx| 精品国产国语对白av| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 狠狠狠狠99中文字幕| www.熟女人妻精品国产| 老汉色∧v一级毛片| 国产男女超爽视频在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 国产亚洲欧美精品永久| 国产精品亚洲一级av第二区| 五月开心婷婷网| 大片电影免费在线观看免费| 好男人电影高清在线观看| 黄频高清免费视频| xxxhd国产人妻xxx| 精品电影一区二区在线| 夜夜爽天天搞| 久久热在线av| av天堂在线播放| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 操美女的视频在线观看| 国产精品亚洲一级av第二区| 国产三级黄色录像| 99热国产这里只有精品6| 9热在线视频观看99| 国产欧美亚洲国产| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 国产亚洲一区二区精品| 一个人免费在线观看的高清视频| 一区在线观看完整版| 老司机亚洲免费影院| 在线免费观看的www视频| 三级毛片av免费| 黄色怎么调成土黄色| 久久久久久久国产电影| 国产伦人伦偷精品视频| 看片在线看免费视频| 亚洲国产看品久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 午夜91福利影院| 精品一区二区三卡| 久久久久久久精品吃奶| 一级毛片女人18水好多| 丰满的人妻完整版| 午夜精品久久久久久毛片777| 成年人午夜在线观看视频| 男女床上黄色一级片免费看| 三级毛片av免费| 一二三四在线观看免费中文在| 国产男女超爽视频在线观看| 免费不卡黄色视频| 一区二区三区激情视频| 香蕉丝袜av| 国精品久久久久久国模美| 国产精品国产av在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 黄片播放在线免费| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 成人黄色视频免费在线看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 日韩有码中文字幕| 日韩中文字幕欧美一区二区| 免费观看人在逋| 制服人妻中文乱码| 日韩成人在线观看一区二区三区| 免费观看人在逋| 国产精品久久电影中文字幕 | 亚洲伊人色综图| 视频在线观看一区二区三区| 免费在线观看日本一区| 纯流量卡能插随身wifi吗| 天天操日日干夜夜撸| 国产在线精品亚洲第一网站| 老熟女久久久| 后天国语完整版免费观看| 热99国产精品久久久久久7| 欧美日本中文国产一区发布| 色综合欧美亚洲国产小说| 无遮挡黄片免费观看| 成年人黄色毛片网站| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 天堂√8在线中文| 99久久综合精品五月天人人| 身体一侧抽搐| cao死你这个sao货| 亚洲午夜理论影院| 啦啦啦免费观看视频1| 中国美女看黄片| 国产激情欧美一区二区| 搡老岳熟女国产| 女警被强在线播放| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产精品久久电影中文字幕 | 19禁男女啪啪无遮挡网站| 黑人猛操日本美女一级片| 国产男靠女视频免费网站| 久9热在线精品视频| 国产视频一区二区在线看| 狠狠狠狠99中文字幕| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 黄色视频不卡| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 亚洲片人在线观看| 午夜老司机福利片| 激情视频va一区二区三区| 久久99一区二区三区| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 在线免费观看的www视频| 国产精品免费大片| 午夜免费成人在线视频| 欧美精品一区二区免费开放| 下体分泌物呈黄色| 日韩欧美免费精品| 99精品在免费线老司机午夜| 一a级毛片在线观看| 99久久国产精品久久久| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 在线观看午夜福利视频| 又黄又爽又免费观看的视频| 岛国毛片在线播放| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 久久精品国产清高在天天线| 婷婷丁香在线五月| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲五月婷婷丁香| 男男h啪啪无遮挡| 国产在线观看jvid| 99久久国产精品久久久| 好男人电影高清在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 国产又爽黄色视频| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 成人免费观看视频高清| 欧美性长视频在线观看| 中国美女看黄片| 老汉色∧v一级毛片| 精品久久久久久电影网| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 国产视频一区二区在线看| 波多野结衣一区麻豆| 亚洲全国av大片| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 国产精品一区二区在线不卡| 久久香蕉国产精品| 热99国产精品久久久久久7| 一边摸一边抽搐一进一小说 | aaaaa片日本免费| 精品一区二区三卡| 成熟少妇高潮喷水视频| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲午夜理论影院| 亚洲五月天丁香| 在线观看www视频免费| bbb黄色大片| 一级a爱片免费观看的视频| 国产人伦9x9x在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 欧美日韩av久久| 久久午夜亚洲精品久久| 村上凉子中文字幕在线| 午夜久久久在线观看| 亚洲久久久国产精品| 色播在线永久视频| 亚洲五月天丁香| 国产高清视频在线播放一区| 久久久久国产一级毛片高清牌| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 欧美另类亚洲清纯唯美| 日本黄色日本黄色录像| 99国产精品一区二区三区| 欧美日韩成人在线一区二区| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产激情久久老熟女| 亚洲av成人av| 欧美性长视频在线观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲熟妇熟女久久| 又黄又爽又免费观看的视频| 后天国语完整版免费观看| 午夜影院日韩av| 正在播放国产对白刺激| 精品久久久久久久毛片微露脸| 9热在线视频观看99| 69精品国产乱码久久久| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 国产有黄有色有爽视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 老司机午夜十八禁免费视频| 在线永久观看黄色视频| 午夜日韩欧美国产| 视频在线观看一区二区三区| 老熟女久久久| www.熟女人妻精品国产| 91成年电影在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 99久久国产精品久久久| 两个人免费观看高清视频| 国产1区2区3区精品| 99国产精品一区二区蜜桃av | 中出人妻视频一区二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 又黄又粗又硬又大视频| 成年人黄色毛片网站| tube8黄色片| 黄片播放在线免费| 久久人妻熟女aⅴ| 999久久久精品免费观看国产| 免费不卡黄色视频| a级片在线免费高清观看视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 大型黄色视频在线免费观看| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 日本一区二区免费在线视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 | 老鸭窝网址在线观看| 亚洲精品国产区一区二| 亚洲成国产人片在线观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲一区二区三区不卡视频| 国产成人精品无人区| 国产精品免费视频内射| 男人操女人黄网站| 精品视频人人做人人爽| 亚洲 欧美一区二区三区| 91成年电影在线观看| 亚洲专区字幕在线| 高清毛片免费观看视频网站 | 热99久久久久精品小说推荐| 欧美乱码精品一区二区三区| 男人的好看免费观看在线视频 | 久久亚洲真实| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美大码av| 91av网站免费观看| 免费在线观看影片大全网站| 国产精品久久电影中文字幕 | 精品国产乱子伦一区二区三区| 满18在线观看网站| 男人舔女人的私密视频| 正在播放国产对白刺激| 中文字幕人妻丝袜制服| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美中文综合在线视频| 老司机影院毛片| 天堂俺去俺来也www色官网| 老司机午夜福利在线观看视频| 在线天堂中文资源库| 国产精品一区二区精品视频观看| x7x7x7水蜜桃| 人妻一区二区av| 757午夜福利合集在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | av免费在线观看网站| 日本vs欧美在线观看视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 又黄又爽又免费观看的视频| 三级毛片av免费| 亚洲第一青青草原| www日本在线高清视频| 国产国语露脸激情在线看| 一进一出好大好爽视频| 国产精品久久久久成人av| 大香蕉久久成人网| 精品一区二区三卡| 色综合婷婷激情| 久久性视频一级片| 一a级毛片在线观看| 在线国产一区二区在线| 久久九九热精品免费| 国产一区在线观看成人免费| 中文字幕高清在线视频| 国产精华一区二区三区| 一a级毛片在线观看| 精品国产国语对白av| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 日韩精品免费视频一区二区三区| 黑人操中国人逼视频| 男人操女人黄网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国产高清国产精品国产三级| 久久香蕉国产精品| 欧美性长视频在线观看| 丝袜人妻中文字幕| 午夜视频精品福利| 十分钟在线观看高清视频www| 搡老岳熟女国产| 高清在线国产一区| 久久香蕉国产精品| 欧美国产精品va在线观看不卡| 最新的欧美精品一区二区| 超碰97精品在线观看| 麻豆国产av国片精品| 亚洲成人免费av在线播放| 亚洲精品国产色婷婷电影| 视频区欧美日本亚洲| 午夜福利影视在线免费观看|