2019—2021年邵陽市H5和H7亞型高致病性禽流感免疫效果評估統(tǒng)計與分析

劉桂喜，胡輝燦，方 瓊，文銀容，鄧 輝，唐杰華，張金梁，孫 瑜※

（1.邵陽縣動物疾病預(yù)防控制中心，湖南 邵陽 422000；2.邵陽市動物疾病預(yù)防控制中心，湖南 邵陽 422000）

禽流感（Avian influenza,AI）是由禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）引起的一種以感染禽類為主的急性、熱性、高度接觸性傳染病，禽流感病毒屬正黏病毒科，A型流感病毒屬。根據(jù)病毒對禽類的致病性不同，可分為高致病性禽流感和中、低致病性禽流感。迄今為止，高致病性禽流感（HPAI）都是由H5和H7血清亞型引起的，我國H5亞型HPAI病毒中有H5N1和H5N6兩種流行亞型；H7N9亞型HPAI感染病例仍有散發(fā),但總體發(fā)病率顯著下降[1-2]。除此以外，禽流感還具有公共衛(wèi)生學(xué)意義，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將HPAI列為A類疫病，我國將其列為一類動物疫病，進行強制免疫。自1997年香港暴發(fā)禽流感起，陸續(xù)有HPAI直接從禽類傳染人并引起死亡的報道，自此以后該病引起了世界各國的高度重視。隨著現(xiàn)代養(yǎng)禽業(yè)的迅速發(fā)展及食品安全意識的不斷提升，如何科學(xué)有效地防控禽流感成為了目前區(qū)域性官方獸醫(yī)機構(gòu)的工作重點。本次研究收集了邵陽市各縣市區(qū)2019年至2021年的雞、鴨血清樣本進行檢測并分析，以系統(tǒng)評估邵陽市H5和H7亞型高致病性禽流感的強制免疫工作，現(xiàn)將結(jié)果分析如下。

1 材料與方法

1.1 樣品來源及免疫背景介紹

分別于2019年、2020年和2021年春季三個時間段采集春季集中防疫且免疫注射20d以上的家禽血清，監(jiān)測樣本覆蓋邵陽市各地區(qū)共計127個規(guī)模養(yǎng)禽場的1230份禽血清樣本，見表1。2019年和2020年邵陽地區(qū)免疫的禽流感疫苗毒株為重組禽流感病毒三價滅活苗（H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re2株），2021年邵陽地區(qū)免疫的禽流感疫苗毒株為重組禽流感病毒三價滅活苗（H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re3株）。

表1 2019—2021年春季集中檢測家禽采樣匯總

1.2 主要試劑

禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗抗原與陰、陽性血清（Re-12株）；H7亞型血凝抑制試驗抗原與陰、陽性血清（Re-2株），用于檢測2019年和2020年H7禽流感亞型血清抗體；H7亞型血凝抑制試驗抗原與陰、陽性血清（Re-3株），用于檢測2021年H7禽流感亞型血清抗體；均購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司；自制1%雞紅細胞懸液：采集健康并未免疫的成年公雞血液，加入十分之一的抗凝劑，用0.1MPBS液反復(fù)洗滌3次，1000r/min離心5min，洗滌后用PBS配成1%的紅細胞懸液，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 檢測方法及結(jié)果判定

依照國家《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T18936—2020）標準中血凝試驗（HA試驗）和血凝抑制試驗（HI試驗）方法進行血清抗體檢測。HI效價＜51og2判定為陰性，HI效價≥5log2判為陽性。群體免疫抗體陽性率到達70%以上為免疫合格。

2 結(jié)果

2.1 2019—2021年邵陽市各年度禽流感抗體檢測結(jié)果

經(jīng)統(tǒng)計，2019—2021年邵陽市各年度的H5和H7亞型禽流感抗體群體陽性率均高于國家規(guī)定的最低標準。其中，H5亞型禽流感抗體合格率從2019年逐年呈下降趨勢，到2021年已接近國家最低標準，為70.09%；H7亞型禽流感抗體合格率良好，穩(wěn)定在90%左右，具體結(jié)果見圖1。

圖1 2019—2021年邵陽市各年度H5和H7亞型禽流感抗體統(tǒng)計結(jié)果

2.2 2019—2021年邵陽市各地區(qū)禽流感抗體檢測結(jié)果

對2019至2021年內(nèi)邵陽市各縣市區(qū)送檢結(jié)果進行綜合統(tǒng)計分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：各縣市區(qū)的H5和H7亞型禽流感抗體群體陽性率均高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的最低標準，其中，H5亞型禽流感抗體最高為新邵縣，合格率為100%，最低為新寧縣，合格率為70.26%；H7亞型禽流感抗體最高為雙清區(qū)，合格率為95.80%，最低為新寧縣，合格率為70.91%。按照H5和H7抗體合格率進行綜合排名，從高到低依次為新邵縣、隆回縣、武岡市、邵陽縣、邵東縣、雙清區(qū)、北塔區(qū)、洞口縣、大祥區(qū)、城步縣、綏寧縣、新寧縣。具體結(jié)果可見圖2。

圖2 2019—2021年邵陽市各地區(qū)H5和H7亞型禽流感抗體統(tǒng)計結(jié)果

2.3 2019—2021年邵陽市雞、鴨禽流感抗體檢測結(jié)果

對2019—2021年內(nèi)邵陽市雞、鴨血清樣本檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：雞的禽流感抗體水平普遍高于鴨的禽流感抗體水平，雞的H5亞型禽流感抗體陽性率為82.33%、鴨的H5亞型禽流感抗體陽性率為75.50%；雞的H7亞型禽流感抗體陽性率為92.92%、鴨的H7亞型禽流感抗體陽性率為85.75%。具體結(jié)果可見圖3。

圖3 2019—2021年邵陽市雞、鴨H5和H7亞型禽流感抗體統(tǒng)計結(jié)果

3 討論

禽流感不僅給家禽養(yǎng)殖業(yè)造成了重大的損失，也對公共安全產(chǎn)生了巨大的威脅，我國獸醫(yī)部門在防控禽流感方面做了大量的工作，包括對家禽的強制免疫、對養(yǎng)殖場和野生禽類全覆蓋的監(jiān)測、每年定期督查等關(guān)鍵性舉措。邵陽市是一個養(yǎng)禽大市，也是湘西南地區(qū)重要的活禽交易中心。從本次實驗結(jié)果來看，邵陽市2019年到2021年這三年H5和H7亞型禽流感的整體免疫合格率均達到了農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的免疫抗體合格率不低于70%的標準，說明邵陽市實施禽流感強制免疫措施效果達標。但值得注意的是，2019年—2021年，H5亞型禽流感的整體免疫合格率呈現(xiàn)下降趨勢，免疫接種存在缺口，加之外部受病毒感染的威脅，就易發(fā)生動物疫情，2020年1月，邵陽市雙清區(qū)就發(fā)生了家禽感染H5N1亞型高致病性禽流感疫情[3-4]。從雞、鴨的H5和H7亞型禽流感的檢測結(jié)果來看，雞的禽流感整體抗體水平均高于鴨，鴨作為水禽類動物更易與候鳥等AIV攜帶者接觸感染風(fēng)險更大，提示我們要加強鴨的禽流感免疫接種和定期監(jiān)測的工作。

2017年中國推出了家禽H5+H7二價滅活苗并在家禽中施行強制免疫使中國不僅及時地控制住高致病性禽流感在家禽中的流行引發(fā)的疫情，也切斷了病毒從家禽到人的傳播過程，基本消除了人感染H7N9病毒的可能，成為中國傳染病防控史上的標志性成功案例。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局最新發(fā)布的公告通知，目前我國禽流感使用的疫苗為重組禽流感病毒三價滅活苗（H5N1Re-11株+Re-12株，H7N9 H7-Re3株），實驗室的結(jié)果顯示該疫苗具有良好的免疫原性，能夠完全抵御H7N9亞型AIV及H5N1和H5N6亞型AIV的攻擊[5-6]。當前，高致病性禽流感屬于禽類強制免疫和撲殺病種，接種H5和H7亞型高致病性禽流感疫苗仍是有效預(yù)防和控制禽流感的重要舉措。在開展禽流感強制免疫過程中，應(yīng)持續(xù)定期對家禽禽流感免疫抗體實施主動監(jiān)測，及時發(fā)現(xiàn)和補救漏洞，建立有效的生物安全屏障。本次研究對邵陽市近三年的禽類血清樣本進行檢測分析，了解了H5和H7亞型高致病性禽流感的免疫情況，為科學(xué)防控該地區(qū)的禽流感提供了實驗數(shù)據(jù)。