宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析聯(lián)合液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸癌早期篩查中的應(yīng)用價(jià)值

周艷，陳曉西

上海市長(zhǎng)寧區(qū)婦幼保健院婦產(chǎn)科，上海 200050

宮頸癌是目前較為常見的婦科惡性腫瘤，對(duì)女性的生命健康造成嚴(yán)重威脅。近年來宮頸癌的發(fā)病率明顯提高，且呈年輕化趨勢(shì)。宮頸癌病情發(fā)展是漸變式的連續(xù)過程，由宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）→浸潤(rùn)癌逐步進(jìn)展，早期宮頸癌無顯著的臨床癥狀，患者確診時(shí)病情已進(jìn)一步發(fā)展。因此，加強(qiáng)早期宮頸癌的篩查是預(yù)防宮頸癌進(jìn)展的有效手段[1-2]。在婦科疾病的臨床篩查中，宮頸液基細(xì)胞學(xué)的應(yīng)用范圍與頻率均有所提升，尤其是在宮頸癌癌前病變篩查中，效果較為顯著。液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查（thin-prep cytology test，TCT）是篩查宮頸癌的主要技術(shù)之一，但對(duì)于不能明確意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞等需在DNA水平上進(jìn)一步分析確定[3-4]。本研究探討TCT聯(lián)合宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析在宮頸癌早期篩查中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2020年1月至2021年11月于上海市長(zhǎng)寧區(qū)婦幼保健院接受早期宮頸癌篩查患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①無癥狀或存在宮頸病變臨床表現(xiàn)；②未合并其他器官嚴(yán)重病變；③意識(shí)清楚；④具備完整的診療資料。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤；②合并急危重癥；③無法耐受相關(guān)檢查；④既往有宮頸手術(shù)史。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入100例患者，年齡25～55歲，平均（32.25±4.25）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢查方法

1.2.1 標(biāo)本收集 按標(biāo)準(zhǔn)要求刷取并收集患者宮頸口以及宮頸管部位脫落上皮細(xì)胞，立即將其放入固定液，重復(fù)采集2次，制作細(xì)胞薄片，共2份，分別進(jìn)行宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析和TCT。

1.2.2 宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析 選取制作完成的細(xì)胞薄片，應(yīng)用全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行定量分析。將DNA指數(shù)＞2.50的細(xì)胞判定為病變細(xì)胞。正常受試者：細(xì)胞薄片內(nèi)以正常細(xì)胞為主，未觀察到病變細(xì)胞，或者疑似病變細(xì)胞及增生細(xì)胞比例＜5%；可疑受試者：觀察到1～2個(gè)病變細(xì)胞，或者疑似病變細(xì)胞及增生細(xì)胞比例為5%～10%；陽性患者：觀察到≥3個(gè)病變細(xì)胞，或者疑似病變細(xì)胞及增生細(xì)胞比例＞10%。正常和可疑受試者均判定為宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析結(jié)果陰性。

1.2.3 TCT 選取制作完成的宮頸細(xì)胞涂片并進(jìn)行閱片，診斷結(jié)果包括無上皮內(nèi)病變或惡性病變（negative for intraepithelial lesion or malignancy，NILM）、意義不明的非典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASCUS）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌以及腺癌。ASC-US及以上病變?yōu)殛栃越Y(jié)果。

1.2.4 陰道鏡活檢及病理檢查 所有患者均接受病理檢查，結(jié)果分為陰性（正常、宮頸炎性病變、CINⅠ級(jí)）、陽性（CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)、宮頸癌）。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析、TCT及病理檢查結(jié)果。分析宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析、TCT單獨(dú)及聯(lián)合檢查對(duì)早期宮頸癌的診斷價(jià)值。宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析聯(lián)合TCT診斷時(shí)，兩項(xiàng)結(jié)果均為陽性則判定為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 早期宮頸癌篩查結(jié)果

宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析的陽性率為30%（30/100），TCT的陽性率為32%（32/100），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析、TCT單獨(dú)及聯(lián)合檢查對(duì)早期宮頸癌的診斷價(jià)值

宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析診斷早期宮頸癌的靈敏度為75.00%（12/16），特異度為78.57%（66/84）；TCT診斷早期宮頸癌的靈敏度為56.25%（9/16），特異度為72.62%（61/84）；兩種方式聯(lián)合診斷早期宮頸癌的靈敏度為93.75%（15/16），特異度為88.10%（74/84）。（表1～表3）

表1 宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析診斷早期宮頸癌與病理結(jié)果的對(duì)照

表2 TCT診斷早期宮頸癌與病理結(jié)果的對(duì)照

表3 宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析聯(lián)合TCT診斷早期宮頸癌與病理結(jié)果的對(duì)照

3 討論

早期宮頸癌缺乏特異性表現(xiàn)，且大眾缺乏準(zhǔn)確認(rèn)知，導(dǎo)致診斷難度較高，確診時(shí)病情發(fā)展迅速，錯(cuò)過了最佳治療時(shí)機(jī)[5-6]。以往宮頸癌早期篩查多數(shù)選擇宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查，此技術(shù)可在基層開展，對(duì)宮頸癌進(jìn)行大規(guī)模防控篩查。但長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用后發(fā)現(xiàn)，宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查中細(xì)胞丟失的可能性較高，且制片技術(shù)要求嚴(yán)格，因此其靈敏度并不理想[7-8]。宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析逐漸應(yīng)用于宮頸癌的篩查，且效果較為理想，此種檢查方式是通過對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的DNA含量或染色體倍數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，評(píng)估細(xì)胞的整體生長(zhǎng)狀態(tài)。細(xì)胞在增殖、生長(zhǎng)的過程中均會(huì)出現(xiàn)DNA含量及結(jié)構(gòu)的變化，因此可通過適合的技術(shù)評(píng)估細(xì)胞變化，若是出現(xiàn)DNA含量異常，則可明確機(jī)體組織出現(xiàn)病變[9]。因此，對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的DNA含量進(jìn)行檢測(cè)有助于了解機(jī)體代謝狀態(tài)，并將其作為判定腫瘤的指標(biāo)。目前宮頸癌早期篩查中，部分患者接受單一DNA含量分析，然而其效果并不顯著，需要聯(lián)合液基細(xì)胞學(xué)檢查，兩種篩查方式優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，必要時(shí)還需進(jìn)行陰道鏡檢查，最終獲得更加準(zhǔn)確的結(jié)果，為患者后續(xù)診療提供依據(jù)[3,10]。

TCT是通過液基薄層細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)采集處理后的宮頸細(xì)胞進(jìn)行診斷、分類，從而掌握患者病情的一種檢查方式，其有效提高了宮頸異常細(xì)胞的檢出率。TCT的操作較為簡(jiǎn)單，不會(huì)造成較大創(chuàng)傷，相比于傳統(tǒng)檢查方式，無論是標(biāo)本采集接受度，還是基層大面積篩查工作，均具備一定優(yōu)勢(shì)，但也存在一定的不足，包括細(xì)胞易丟失、標(biāo)本制片難度高以及工作量大等[11]。研究發(fā)現(xiàn)，TCT診斷高級(jí)別宮頸病變的靈敏度較低，細(xì)胞學(xué)檢查基于細(xì)胞形態(tài)學(xué)，其結(jié)果受臨床醫(yī)師經(jīng)驗(yàn)水平的影響，缺乏客觀判斷標(biāo)準(zhǔn)，存在較大的誤診可能性[12]。宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析需要通過計(jì)算機(jī)輔助進(jìn)行自動(dòng)化閱片，操作更加簡(jiǎn)便、速度，也可避免TCT檢查的大量鑒別工作，在宮頸癌早期篩查中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。研究指出，正常狀態(tài)下人體細(xì)胞為二倍體，其細(xì)胞核內(nèi)DNA倍體含量較為穩(wěn)定，而病變組織增殖和生長(zhǎng)后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞核內(nèi)DNA含量明顯增加，因此對(duì)機(jī)體細(xì)胞核內(nèi)DNA含量進(jìn)行檢測(cè)，可以對(duì)細(xì)胞性質(zhì)進(jìn)行辨別，并確定是否有惡性增殖出現(xiàn)[13-14]。有學(xué)者認(rèn)為，在宮頸癌發(fā)展過程中，病變組織DNA含量增加，異常染色體出現(xiàn)時(shí)間早于TCT細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化時(shí)間，但應(yīng)用單一檢查在宮頸癌的早期診斷中價(jià)值有限[15]。本研究結(jié)果顯示，宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析的陽性率為30%，TCT的陽性率為32%。宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析診斷早期宮頸癌的靈敏度為75.00%，特異度為78.57%；TCT診斷早期宮頸癌的靈敏度為56.25%，特異度為72.62%；兩種方式聯(lián)合診斷早期宮頸癌的靈敏度為93.75%，特異度為88.10%。表明宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析及TCT聯(lián)合可發(fā)揮互補(bǔ)作用，有效提高早期宮頸癌的檢出率。相對(duì)于傳統(tǒng)檢測(cè)，TCT在取材、制作方面均具有一定改進(jìn)，從而加強(qiáng)了宮頸癌、癌前病變的診斷準(zhǔn)確率，但受不同閱片醫(yī)師的專業(yè)和經(jīng)驗(yàn)等因素影響，導(dǎo)致TCT結(jié)果可重復(fù)性較低，且存在假陽性的可能[16]。細(xì)胞DNA倍體定量分析系統(tǒng)可彌補(bǔ)TCT檢查的不足，兩者聯(lián)合篩查早期宮頸癌具有較高的應(yīng)用價(jià)值。關(guān)于早期宮頸癌的篩查，細(xì)胞DNA倍體定量分析的準(zhǔn)確度高于TCT檢查，這是因?yàn)榧?xì)胞核DNA含量能夠反映腫瘤細(xì)胞的增殖能力，可通過檢測(cè)細(xì)胞核DNA含量對(duì)宮頸癌進(jìn)行早期篩查[17-18]。

綜上所述，宮頸細(xì)胞DNA倍體定量分析聯(lián)合TCT診斷宮頸癌具有較高的靈敏度和特異度，可為宮頸癌的診療提供依據(jù)。