3種放線菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的防治效果

李許真，楊曉沛，苑 鑫，陳書霞

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 園藝學(xué)院 陜西省蔬菜工程技術(shù)研究中心，陜西 楊凌 712100)

根結(jié)線蟲是一種常見的、世界范圍內(nèi)廣泛分布的植物寄生線蟲，尤其是南方根結(jié)線蟲，其寄主包括蔬菜、糧食作物、果樹、觀賞植物等3 000多種，嚴(yán)重危害世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)[1-2]。根結(jié)線蟲病害可造成作物減產(chǎn)10%～20%，嚴(yán)重時(shí)可達(dá)75%以上，甚至出現(xiàn)絕收的現(xiàn)象[3]。隨著設(shè)施栽培的不斷發(fā)展，保護(hù)地栽培的面積越來越大，復(fù)種指數(shù)增加，重茬現(xiàn)象嚴(yán)重，導(dǎo)致根結(jié)線蟲的危害日趨嚴(yán)重。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全球根結(jié)線蟲病害每年造成的經(jīng)濟(jì)損失在1 000億美元以上，中國(guó)每年損失大約30億美元[4]。

長(zhǎng)期以來，采用化學(xué)農(nóng)藥控制根結(jié)線蟲取得了很好的效果，但隨著化學(xué)農(nóng)藥的濫用，病原物產(chǎn)生抗藥性以及農(nóng)藥殘留造成的環(huán)境污染等問題隨之產(chǎn)生，人類健康日益受到威脅。生物防治“以菌克菌”，對(duì)環(huán)境副作用小，在控制植物病害中顯示出了一定優(yōu)勢(shì)，是一條安全、有效的防治途徑[5]。部分放線菌具有穩(wěn)定、持久和環(huán)境友好的作用，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用[6]。阿維菌素就是一種來自阿維鏈霉菌(Streptomycesavermitilis)的商業(yè)生物防治劑，可將蠶豆中由南方根結(jié)線蟲引起的根結(jié)減少50%以上[7]。1.0和1.5 g/株玫瑰黃鏈霉菌Men-myco-93-63活菌片劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的防效分別為51.85%和55.56%[8]。蚯蚓糞便中存在大量放線菌，且48%的放線菌具有控制根結(jié)線蟲的能力，其中12種鏈霉菌屬分離菌表現(xiàn)出很強(qiáng)的體外殺線蟲活性；與對(duì)照相比，鏈霉菌屬分離菌處理后的植物根系根結(jié)數(shù)顯著降低，其中鏈霉菌屬KPS-E004的抑制效率最高[9]。鏈霉菌菌株A034對(duì)辣椒根結(jié)線蟲病有較好的防治效果，該菌株的施用顯著減少了土壤中的線蟲卵塊數(shù)量[10]。與接種KPS-E004和KPS-A032單株相比，2種鏈霉菌菌株聯(lián)合接種對(duì)根結(jié)線蟲的抑制效率分別提高了104.99%和355.54%，辣椒根系的根結(jié)數(shù)也顯著降低，根結(jié)指數(shù)顯著減小[11]。菌株S.pactum和S.rochei的混合使用也明顯減少了番茄幼苗根部的根癭形成和根結(jié)線蟲種群密度[12]。

作為營(yíng)養(yǎng)增強(qiáng)劑，鏈霉菌劑通過生產(chǎn)側(cè)磷和溶解磷酸鹽，將土壤中的復(fù)雜營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)單的形式，是天然肥料的理想候選物[13]。研究表明，施用鏈霉菌菌株A034可顯著促進(jìn)辣椒芽和根的生長(zhǎng)，增加辣椒總N、P、K、Ca、Mg和Fe含量[10]。使用菌株KPS-E004和KPS-A032的混合物可通過增加辣椒枝條和根的長(zhǎng)度和質(zhì)量，進(jìn)而增加辣椒產(chǎn)量[13-14]。密旋鏈霉菌制劑的使用能減少瓜列當(dāng)?shù)募纳?，促進(jìn)番茄增產(chǎn)[15]。另外，鏈霉菌菌株產(chǎn)生的植物激素還具有促進(jìn)茄子生長(zhǎng)、減少茄子根結(jié)線蟲病的作用[16]?；贒NA的分析表明，在作物栽培期間，鏈霉菌菌株能夠在根結(jié)線蟲侵?jǐn)_的土壤中存活和增殖，并且對(duì)微生物群落也非常友好[10]。鏈霉菌菌株的使用是可持續(xù)農(nóng)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略下蔬菜作物生產(chǎn)的有效措施[11]。但目前關(guān)于鏈霉菌菌株緩解黃瓜根結(jié)線蟲病的效應(yīng)研究尚未見報(bào)道。為此，本研究以黃瓜植株為試驗(yàn)材料，通過預(yù)先接種密旋鏈霉菌(Streptomycespactum)、微白黃鏈霉菌(Streptomycesalbidoflavus)和婁徹氏鏈霉菌(Streptomycesrochei)，然后再人工接種南方根結(jié)線蟲卵的方法，對(duì)黃瓜幼苗及槽式栽培黃瓜成株期根系根結(jié)數(shù)、根結(jié)指數(shù)及植株生長(zhǎng)狀態(tài)進(jìn)行分析，以期探究鏈霉菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的影響程度，為黃瓜根結(jié)線蟲病的環(huán)境友好型防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試黃瓜品種為華北生態(tài)型9930，該種質(zhì)對(duì)南方根結(jié)線蟲表現(xiàn)為感病。

供試放線菌劑密旋鏈霉菌(Streptomycespactum，Act12)、微白黃鏈霉菌(Streptomycesalbidoflavus，T4)和婁徹氏鏈霉菌(Streptomycesrochei，D74)，均由陜西博秦生物工程有限公司提供，有效菌數(shù)≥2×109g-1。

供試南方根結(jié)線蟲從楊凌園藝場(chǎng)發(fā)病嚴(yán)重的日光溫室栽培黃瓜根中收集，參考劉維志[17]的方法提取蟲卵。用蒸餾水將線蟲卵懸浮液調(diào)至1 500 mL-1備用。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 放線菌劑對(duì)黃瓜幼苗根結(jié)線蟲病的防治 分別將密旋鏈霉菌(Act12)、微白黃鏈霉菌(T4)、婁徹氏鏈霉菌(D74)接入高壓滅菌后的基質(zhì)中，菌劑(g)和基質(zhì)(L)按1.5 g/L混合,以不接種放線菌劑的高壓滅菌基質(zhì)為對(duì)照。黃瓜種子進(jìn)行溫湯浸種，28 ℃培養(yǎng)皿中催芽，種子露白后播種于7 cm×7 cm裝有不同處理基質(zhì)的苗缽中，2粒/缽，待子葉出土后留1株壯苗，定期澆水。黃瓜幼苗的培養(yǎng)條件為26 ℃/18 ℃，14 h/10 h光暗交替，相對(duì)濕度為85%～90%。待黃瓜生長(zhǎng)至兩葉一心(播種30 d)時(shí)采用灌根法接種南方根結(jié)線蟲蟲卵，每缽接種1 500 mL-1的線蟲卵懸浮液2 mL，各處理依次用Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi和Mi表示。接種線蟲卵懸浮液30 d后，小心洗凈根系，統(tǒng)計(jì)根結(jié)數(shù)，采用分析天平測(cè)定根鮮質(zhì)量，參考符美英等[18]的方法計(jì)算根結(jié)指數(shù)。每處理10株，3次重復(fù)。

根結(jié)指數(shù)=單株根結(jié)數(shù)/單株根鮮質(zhì)量。

1.2.2 放線菌劑對(duì)黃瓜成株根結(jié)線蟲病的防治 為了進(jìn)一步觀察放線菌對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病害的緩解效應(yīng)，在溫室栽培槽內(nèi)進(jìn)行放線菌預(yù)接試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)置Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi和Mi 4個(gè)處理，其中Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi處理先分別將密旋鏈霉菌(Act12)、微白黃鏈霉菌(T4)、婁徹氏鏈霉菌(D74)接入高壓滅菌后的基質(zhì)中，菌劑(g)和基質(zhì)(L)按1.5 g/L混合，分別倒入溫室栽培槽中；Mi處理將不接種放線菌劑的高壓滅菌基質(zhì)倒入溫室栽培槽中。黃瓜種子催芽直播，每個(gè)栽培槽中9株壯苗作為1個(gè)重復(fù)，重復(fù)3次。待幼苗長(zhǎng)至兩葉一心時(shí)采用灌根法定量接種南方根結(jié)線蟲蟲卵1 500 mL-1懸浮液2 mL。黃瓜植株進(jìn)行常規(guī)管理。接種線蟲后58 d，采用與幼苗相同的方法記錄根結(jié)數(shù)，稱量根鮮質(zhì)量，計(jì)算根結(jié)指數(shù)。

1.2.3 放線菌劑對(duì)感染根結(jié)線蟲黃瓜幼苗根系巨細(xì)胞的影響 在黃瓜幼苗盆栽試驗(yàn)中，接種南方根結(jié)線蟲卵懸浮液30 d后，分別取Mi、Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi 4個(gè)處理中的5株幼苗根系，挑選每個(gè)單株上橫徑最大的2個(gè)根結(jié)，每個(gè)處理共10個(gè)根結(jié)，用FAA固定液進(jìn)行固定，采用蘇木精-伊紅染色法[19]制作石蠟切片，每個(gè)根結(jié)樣品選取2～3張切片，在Olympus光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照記錄。

1.2.4 放線菌劑對(duì)黃瓜生長(zhǎng)的影響 1)苗期盆栽試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)Mi、Act12、T4、D74、Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi、CK 8個(gè)處理，其中Mi處理僅在黃瓜播種后30 d接種南方根結(jié)線蟲；Act12、T4、D74處理僅在黃瓜播種前分別預(yù)先接種密旋鏈霉菌、微白黃鏈霉菌、婁徹氏鏈霉菌；Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi處理先分別預(yù)先接種密旋鏈霉菌、微白黃鏈霉菌、婁徹氏鏈霉菌，再在黃瓜播種后30 d接種南方根結(jié)線蟲；CK處理既不接種放線菌也不接種南方根結(jié)線蟲。待幼苗長(zhǎng)至兩葉一心時(shí)采用灌根法定量接種南方根結(jié)線蟲蟲卵1 500 mL-1懸浮液2 mL。接種線蟲卵懸浮液30 d后，取各處理長(zhǎng)勢(shì)一致的幼苗各10株，3個(gè)重復(fù)，小心清洗根系，吸干表面水分，用游標(biāo)卡尺測(cè)定莖粗，然后用分析天平測(cè)定地上鮮質(zhì)量、地下鮮質(zhì)量和全株鮮質(zhì)量。最后將洗凈的根系放入培養(yǎng)皿中進(jìn)行拍照，觀察根系生長(zhǎng)情況。

2)溫室槽式栽培成株試驗(yàn)。試驗(yàn)設(shè)Mi、Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi 4個(gè)處理，其中Mi處理僅在黃瓜播種后30 d接種南方根結(jié)線蟲；Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi處理先分別預(yù)先接種密旋鏈霉菌、微白黃鏈霉菌、婁徹氏鏈霉菌，再在黃瓜播種后30 d接種南方根結(jié)線蟲。接種線蟲卵懸浮液58 d后，每處理3株植株，3個(gè)重復(fù)，小心清洗根系，吸干表面水分，用游標(biāo)卡尺測(cè)定莖粗，然后用分析天平測(cè)定地上鮮質(zhì)量、地下鮮質(zhì)量和全株鮮質(zhì)量。

1.2.5 放線菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病和黃瓜生長(zhǎng)的綜合評(píng)價(jià) 參考符美英等[18]的方法，計(jì)算盆栽幼苗和槽式栽培成株生長(zhǎng)指標(biāo)和病情指標(biāo)的隸屬函數(shù)值。綜合隸屬函數(shù)值為所有測(cè)定指標(biāo)的隸屬函數(shù)值之和，綜合隸屬函數(shù)值越大，表明該放線菌劑對(duì)南方根結(jié)線蟲病的防治能力和對(duì)黃瓜的促生能力越強(qiáng)。

生長(zhǎng)指標(biāo)：X(μ)=(X-Xmin)/(Xmax-Xmin)；

病情指標(biāo):X(μ)=1-(X-Xmin)/(Xmax-Xmin)。

式中：X為不同放線菌劑預(yù)處理某指標(biāo)的測(cè)定值；Xmax為所有處理該指標(biāo)測(cè)定的最大值，Xmin為所有處理該指標(biāo)測(cè)定的最小值。

1.3 數(shù)據(jù)處理

利用SPSS 22.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 放線菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)數(shù)和根結(jié)指數(shù)的影響

不同放線菌劑對(duì)盆栽苗期及槽式栽培成株期黃瓜根結(jié)數(shù)和根結(jié)指數(shù)的影響如表1所示。由表1可知，黃瓜苗期接種南方根結(jié)線蟲30 d后，與僅接種線蟲(Mi)處理相比，預(yù)先接種放線菌劑后再接種根結(jié)線蟲處理Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi黃瓜的根結(jié)數(shù)顯著降低，分別降低了44.56%，39.26%和41.38%，表明3種放線菌劑能顯著減少黃瓜幼苗的根結(jié)形成；接種婁徹氏鏈霉菌(D74+Mi)和微白黃鏈霉菌(T4+Mi)處理的黃瓜幼苗根結(jié)指數(shù)也顯著降低。

表1 放線菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)數(shù)和根結(jié)指數(shù)的影響

由表1還可知，接種南方根結(jié)線蟲58 d后，與僅接種線蟲(Mi)處理相比，預(yù)先接種密旋鏈霉菌、微白黃鏈霉菌劑后再接種根結(jié)線蟲處理(Act12+Mi、T4+Mi)顯著減少了黃瓜成株期的根結(jié)數(shù)，分別顯著減少23.01%和35.51%，且這2個(gè)處理黃瓜的根結(jié)指數(shù)也顯著降低；預(yù)先接種婁徹氏鏈霉菌劑后再接種南方根結(jié)線蟲處理(D74+Mi)的黃瓜根結(jié)指數(shù)也顯著降低，根結(jié)數(shù)雖降低但差異不顯著；接種微白黃鏈霉菌劑(T4+Mi)處理黃瓜的根結(jié)數(shù)和根結(jié)指數(shù)均最小，表明微白黃鏈霉菌對(duì)黃瓜根結(jié)數(shù)的形成影響最大。

2.2 放線菌劑對(duì)感染根結(jié)線蟲黃瓜幼苗根系巨細(xì)胞的影響

不同放線菌劑對(duì)感染根結(jié)線蟲黃瓜幼苗根系巨細(xì)胞的影響結(jié)果如圖1所示。由圖1可知，接種南方根結(jié)線蟲30 d后，僅接種根結(jié)線蟲(Mi)處理黃瓜幼苗根系巨細(xì)胞中細(xì)胞核增多，細(xì)胞變大，周圍完整的細(xì)胞較少，部分形成空洞(圖1-A)，巨細(xì)胞發(fā)育正常；預(yù)先接種放線菌劑后再接種根結(jié)線蟲處理(Act12+Mi、D74+Mi、T4+Mi)黃瓜幼苗根系也均有巨細(xì)胞形成(圖1-B-D)。與Mi處理相比，預(yù)先分別接種婁徹氏鏈霉菌、微白黃鏈霉菌劑后再接種根結(jié)線蟲處理(D74+Mi、T4+Mi)的黃瓜幼苗根系巨細(xì)胞發(fā)育明顯受到阻礙或延緩，巨細(xì)胞體積顯著減小(圖1-C-D)；預(yù)先接種密旋鏈霉菌劑處理(Act12+Mi)的黃瓜幼苗根系巨細(xì)胞較其他放線菌劑處理大，但較僅接種線蟲處理(Mi)小(圖1-B)。表明3種放線菌劑對(duì)南方根結(jié)線蟲巨細(xì)胞體積的擴(kuò)大均有明顯的抑制作用，但不同放線菌劑抑制效果不同，其中微白黃鏈霉菌和婁徹氏鏈霉菌的抑制效果較為明顯。

A.Mi處理；B～D.依次為Act12+Mi、D74+Mi、T4+Mi處理

2.3 放線菌劑對(duì)黃瓜生長(zhǎng)的影響

2.3.1 苗期盆栽試驗(yàn) 由表2可知，與CK相比，預(yù)先接種密旋鏈霉菌(Act12)、微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)處理苗期黃瓜地下鮮質(zhì)量、全株鮮質(zhì)量顯著增大，接種微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)處理黃瓜地上鮮質(zhì)量也顯著增大；預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)處理的黃瓜莖粗也顯著增大；表明預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)有一定的促進(jìn)作用，尤其是預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)的促生作用更明顯。

表2 放線菌劑對(duì)盆栽黃瓜幼苗生長(zhǎng)的影響

由表2還可以看出，與CK相比，僅接種根結(jié)線蟲的Mi處理苗期黃瓜莖粗、鮮質(zhì)量減小，說明根結(jié)線蟲侵染在一定程度上抑制了黃瓜幼苗的生長(zhǎng)。與僅接種線蟲的Mi處理相比，Act12+Mi、T4+Mi和D74+Mi處理黃瓜地上鮮質(zhì)量和全株鮮質(zhì)量顯著增大，說明微白黃鏈霉菌和婁徹氏鏈霉菌可有效緩解根結(jié)線蟲侵染對(duì)黃瓜幼苗生長(zhǎng)的抑制作用。另外，接種線蟲的處理Mi、Act12+Mi、T4+Mi和D74+Mi的全株鮮質(zhì)量比相應(yīng)的不接種處理CK、Act12、T4、D74分別下降了22.45%，12.17%，1.32%和10.29%。其中，與僅接種微白黃鏈霉菌的處理(T4)相比，T4+Mi處理使黃瓜全株鮮質(zhì)量下降最少。因此預(yù)先接種微白黃鏈霉菌對(duì)根結(jié)線蟲侵染抑制幼苗生長(zhǎng)的緩解作用最大。

放線菌劑對(duì)黃瓜幼苗根系生長(zhǎng)的影響如圖2所示。由圖2可知，與CK處理相比，接種不同放線菌劑對(duì)黃瓜根系的促生效果不同，預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)對(duì)黃瓜幼苗根系的生長(zhǎng)有顯著促進(jìn)作用，處理后須根明顯增多，根系生長(zhǎng)旺盛。僅接種線蟲處理(Mi)的黃瓜根系有明顯根結(jié)形成，而預(yù)先接種不同放線菌劑再接種線蟲處理(Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi)根系的根結(jié)數(shù)明顯減少，其中預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)根系的側(cè)根明顯發(fā)達(dá)，根毛多，根系生長(zhǎng)旺盛，說明微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)的促根作用更明顯。

A.CK；B-H.依次為Act12、T4、D74、Mi、Act12+Mi、T4+Mi、D74+Mi處理

2.3.2 溫室槽式栽培成株試驗(yàn) 溫室槽式基質(zhì)栽培的各處理黃瓜成株期生長(zhǎng)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果如表3所示。由表3可知，與僅接種線蟲處理(Mi)相比，接種微白黃鏈霉菌劑后再接種線蟲處理(T4+Mi)成株期黃瓜植株地上鮮質(zhì)量、地下鮮質(zhì)量和全株鮮質(zhì)量均顯著升高，Act12+Mi和D74+Mi處理黃瓜植株地下鮮質(zhì)量也顯著增大。表明在線蟲侵染條件下，預(yù)先接種微白黃鏈霉菌對(duì)黃瓜成株生長(zhǎng)也具有明顯的促進(jìn)作用。

表3 放線菌劑對(duì)溫室槽式栽培黃瓜生長(zhǎng)的影響

綜上可知，無論在黃瓜幼苗期還是成株期，甚至在線蟲侵染條件下，預(yù)先接種微白黃鏈霉菌劑均對(duì)黃瓜生長(zhǎng)具有較好的促生作用。

2.4 放線菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的防治效果和黃瓜促生作用的綜合評(píng)價(jià)

由表4可以看出，綜合幼苗期和成株期不同處理黃瓜根結(jié)線蟲病病情指標(biāo)和生長(zhǎng)指標(biāo)，T4+Mi處理的綜合隸屬函數(shù)值最大，分別為5.13和6.00，表明微白黃鏈霉菌(Streptomycesalbidoflavus)對(duì)黃瓜南方根結(jié)線蟲病的緩解能力最強(qiáng)；其次是D74+Mi處理，其綜合隸屬函數(shù)值分別為4.71和2.69，表明婁徹氏鏈霉菌(Streptomycesrochei)對(duì)黃瓜南方根結(jié)線蟲病的緩解能力次之；Act12+Mi的綜合隸屬函數(shù)值最小，表明密旋鏈霉菌(Streptomycespactum)對(duì)黃瓜南方根結(jié)線蟲病的緩解能力最弱。

表4 放線菌劑對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的防治效果和黃瓜促生作用的綜合評(píng)價(jià)

3 討 論

根結(jié)線蟲的化學(xué)防治主要是化學(xué)殺線劑的使用，分為熏蒸法和非熏蒸法。常用的熏蒸殺線劑有溴甲烷、氯化苦、二氯丙烯、威百畝、棉隆、敵線酯等，非熏蒸殺線劑有阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、噻唑磷、滅線磷、涕滅威和克百威等，這些化學(xué)殺線劑毒性強(qiáng)、安全性差、對(duì)環(huán)境有破壞作用[20-21]。隨著農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展觀念的不斷深入，生物控制線蟲的方法越來越受重視[3,22-23]，用真菌、細(xì)菌、放線菌、捕食性線蟲等制成生防制劑代替化學(xué)農(nóng)藥防治根結(jié)線蟲病害[24]。本研究中，與Mi處理相比，預(yù)先接種密旋鏈霉菌(Act12)、微白黃鏈霉菌(T4)、婁徹氏鏈霉菌(D74)后再接種根結(jié)線蟲，其根結(jié)數(shù)分別降低了44.56%，39.26%和41.38%，其根結(jié)指數(shù)也明顯降低。本研究所采用的3種放線菌劑均篩選自土壤，是一種環(huán)境友好型微生物菌劑，對(duì)設(shè)施蔬菜產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)性發(fā)展奠定了良好的基礎(chǔ)。

根結(jié)線蟲侵染蔬菜植株的根部，破壞了植株的根系組織，改變土壤pH和微生物群落[3]。線蟲侵染初期，植株葉片凈光合速率下降，根系侵染點(diǎn)呼吸作用增強(qiáng)，生物膜透性增加，內(nèi)源激素代謝失調(diào)，氮磷鉀在根部積累，可溶性蛋白、還原糖等生物大分子含量提高[25]。放線菌作為一類控制植物病原傳播的重要微生物資源，對(duì)病原生物有很高的拮抗作用和寄生性，其作為根結(jié)線蟲的生防菌株具有巨大的潛能[26]。一直以來，對(duì)于控制植物寄生線蟲的研究主要集中在真菌方面，對(duì)放線菌的研究多在其代謝產(chǎn)生的活性物質(zhì)方面，用放線菌來防治植物寄生線蟲的研究相對(duì)較少。本研究系統(tǒng)比較了接種密旋鏈霉菌(Act12)、微白黃鏈霉菌(T4)、婁徹氏鏈霉菌(D74)對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病的緩解作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同放線菌劑對(duì)根結(jié)線蟲的抑制作用不同，都表現(xiàn)出根結(jié)數(shù)減少，根結(jié)指數(shù)變小的表型，其中預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)對(duì)黃瓜根結(jié)線蟲病害的緩解作用最為顯著。

放線菌菌絲生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物具有殺滅其他微生物、促進(jìn)作物生長(zhǎng)發(fā)育、改善土壤生態(tài)環(huán)境、提高作物品質(zhì)和產(chǎn)量以及對(duì)環(huán)境無污染等優(yōu)點(diǎn)。鏈霉菌不僅可促進(jìn)蔬菜作物根結(jié)線蟲病病株生長(zhǎng)，降低發(fā)病率；其對(duì)根系生長(zhǎng)的強(qiáng)烈刺激作用將促進(jìn)根系吸收土壤中的養(yǎng)分和水分，是作物生長(zhǎng)量增加的基礎(chǔ)[10,15-16]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同放線菌劑對(duì)黃瓜生長(zhǎng)的促進(jìn)作用有差別，預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)和婁徹氏鏈霉菌(D74)的黃瓜幼苗生物量高于未接種鏈霉菌處理，且成株期地上生物量明顯高于未接種鏈霉菌處理，而預(yù)先接種密旋鏈霉菌(Act12)的效果相對(duì)較差，綜合評(píng)價(jià)結(jié)果表明，預(yù)先接種微白黃鏈霉菌(T4)對(duì)黃瓜促生、緩解根結(jié)線蟲病效果最為顯著，婁徹氏鏈霉菌(D74)次之。

4 結(jié) 論

與僅接種根結(jié)線蟲處理(Mi)相比，預(yù)先接種密旋鏈霉菌、微白黃鏈霉菌和婁徹氏鏈霉菌后再接種根結(jié)線蟲，黃瓜根系的根結(jié)數(shù)和根結(jié)指數(shù)顯著降低，根內(nèi)巨細(xì)胞發(fā)育受阻或延緩，巨細(xì)胞體積顯著減小，地下和全株鮮質(zhì)量顯著增加。綜合評(píng)價(jià)結(jié)果表明，預(yù)先接種微白黃鏈霉菌對(duì)南方根結(jié)線蟲病的緩解能力和對(duì)黃瓜的促生能力最強(qiáng)，婁徹氏鏈霉菌次之。