不同化學(xué)形態(tài)硒的毒理學(xué)研究

王雪兒，王 玲，楊欣宇，萬(wàn) 丹，盧夢(mèng)琪，袁 林，汪興平*

(1.湖北民族大學(xué) 生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，湖北 恩施 445000；2.風(fēng)濕性疾病發(fā)生與干預(yù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 恩施 445000)

1817年瑞典科學(xué)家Berzelius對(duì)使用黃鐵礦的礦井鉛儲(chǔ)罐出現(xiàn)的紅色淤泥進(jìn)行化學(xué)分析時(shí)，發(fā)現(xiàn)了一種與硫的性質(zhì)相似，且具有金屬性質(zhì)的新元素，將其命名為硒[1].在此后的100多年里，硒一直被認(rèn)為是有毒物質(zhì).1934年美國(guó)農(nóng)業(yè)部的報(bào)告中指出，高硒植物飼養(yǎng)后的動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)明顯的中毒現(xiàn)象.直至1957年，Schwarz等[2]在對(duì)肝壞死小鼠進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)與維生素E和胱氨酸相比，硒在預(yù)防肝壞死方面效果更加顯著，證實(shí)了硒具有營(yíng)養(yǎng)作用.1973年，Rotruck等[3]發(fā)現(xiàn)了硒區(qū)別于維生素E的作用，是谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的必要組成部分.同年，世界衛(wèi)生組織將硒列為人體和動(dòng)物所必需微量元素.1979年，中國(guó)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)克山病的產(chǎn)生與硒的缺乏密切相關(guān)[4]，這也是第一次關(guān)于硒與疾病的相關(guān)研究和報(bào)道.1986年，Chambers等[5]對(duì)小鼠GSH-Px基因重組體進(jìn)行鑒定時(shí)，發(fā)現(xiàn)了酶活性部位的硒半胱氨酸——人類第21種氨基酸，是由TGA所編碼的.1988年，我國(guó)營(yíng)養(yǎng)協(xié)會(huì)將硒元素列為每日必需攝入15種膳食營(yíng)養(yǎng)素之一，并公布了補(bǔ)硒的參考標(biāo)準(zhǔn)[6].

硒作為人體必需微量元素之一，缺乏時(shí)將會(huì)導(dǎo)致克山病、大骨節(jié)病、肝臟病等40多種疾病.1982年，Salonen等[7]對(duì)心血管疾病死亡率極高的地區(qū)進(jìn)行調(diào)查時(shí)發(fā)現(xiàn)，低水平硒會(huì)增加冠心病患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)，冠心病患者(平均為51.8 μg/L)比正常人(55.3 μg/L)的血硒含量低很多，當(dāng)血硒低于45 μg/L時(shí)，22%的冠心病患者死亡原因來(lái)自硒.硒作為谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的輔助因子參與必需硒蛋白的生物合成，從而在抗氧化保護(hù)和氧化還原調(diào)節(jié)方面發(fā)揮顯著作用[8]，能夠預(yù)防心血管疾病、提高自身免疫力、抗腫瘤等.Alehagen[9]對(duì)低硒老年人進(jìn)行為期4 a的硒補(bǔ)充，結(jié)果顯示，當(dāng)每日攝入200 μg的硒酵母和輔酶Q10時(shí)，心血管死亡率顯著降低，心臟功能得到改善.硒的適當(dāng)攝入可以調(diào)節(jié)抗氧化基因的表達(dá)，如GSH、GPX等，并參與抗氧化防御機(jī)制，從而降低氧化損傷[10-11].在對(duì)動(dòng)物進(jìn)行高硒飼料喂養(yǎng)試驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)不論是大鼠還是蛋雞，其GSH-Px活性與對(duì)照組相比均有明顯的增強(qiáng)[12-13].不僅如此，硒可以通過(guò)調(diào)節(jié)活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)的產(chǎn)生來(lái)發(fā)揮其抗氧化能力.Zhang等[14]發(fā)現(xiàn)適當(dāng)?shù)奈梢酝ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)ROS的產(chǎn)生，進(jìn)而影響小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟和抗原呈遞，調(diào)節(jié)樹(shù)突狀細(xì)胞的免疫功能.Kaur等[15]對(duì)小鼠使用硒后，SOD的活性得到調(diào)節(jié)，增強(qiáng)了清除自由基的能力，減緩了小鼠因雙酚A引起的睪丸損傷.

在補(bǔ)硒的相關(guān)用量標(biāo)準(zhǔn)中[16]，膳食中硒的最高安全攝入量為400 μg/d，而人體硒中毒限量是800 μg/d，其營(yíng)養(yǎng)需求量與毒性劑量非常接近，超過(guò)安全劑量就會(huì)引發(fā)實(shí)質(zhì)性的傷害[17].當(dāng)血硒濃度高于122 μg/L時(shí)，人群繼續(xù)進(jìn)行硒的攝入和補(bǔ)充，將會(huì)干擾胰島素信號(hào)的傳導(dǎo)，從而增加2型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)[18]；以劑量300 μg/d對(duì)人體進(jìn)行為期5 a的硒補(bǔ)充，將會(huì)增加10 a后11.7%的死亡率[19].因此，科學(xué)補(bǔ)硒顯得十分重要.

1 硒的毒性機(jī)制

Seko等[20]早期的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)驗(yàn)證了氧化應(yīng)激機(jī)制可能是硒毒性的一種機(jī)制.該機(jī)制主要闡述了亞硒酸鹽、硒酸鹽、硒蛋氨酸等含硒化合物與谷胱甘肽(GSH)反應(yīng)易于形成Se2-或SeH-，這些硒化物具有很高的氧化還原特性，與氧氣反應(yīng)生成超氧化物或活性氧，導(dǎo)致生物體內(nèi)的氧化還原循環(huán)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)和DNA鏈斷裂從而使細(xì)胞死亡，如圖1所示[21-22].體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[23]，單獨(dú)的亞硒酸鹽不能產(chǎn)生DNA鏈斷裂，僅在加入GSH或在HSe-存在下發(fā)生斷裂.

圖1 硒毒性的氧化應(yīng)激機(jī)制[20]Fig.1 Oxidative stress mechanism of selenium toxicity[20]

正常情況下，硒通過(guò)消化道、呼吸、注射等進(jìn)入體內(nèi)，然后在十二指腸和盲腸被吸收進(jìn)入血液，并運(yùn)輸?shù)礁鞣N組織和器官被加以利用[24].肝臟是硒代謝和儲(chǔ)存的主要器官，大部分含硒蛋白質(zhì)在此合成，不僅如此硒在肝臟中通過(guò)甲基轉(zhuǎn)移酶進(jìn)行甲基化，經(jīng)過(guò)呼吸和尿液排出體外.而當(dāng)人體攝入高濃度硒后，硒的甲基化途徑受到抑制，機(jī)體硒平衡出現(xiàn)破壞，從而引發(fā)毒性[25].

此外，一些研究表明，動(dòng)物硒中毒的原因是由于硒和硫之間的相似性，當(dāng)人體攝入大量硒后，參與硫代謝的酶會(huì)將硒錯(cuò)認(rèn)，形成硒化物，如硒代蛋氨酸和硒代半胱氨酸，干擾蛋白質(zhì)表達(dá)，對(duì)機(jī)體造成一定的損害[26].

2 硒的急性毒性

急性毒性是了解新物質(zhì)安全性的第一步，通過(guò)動(dòng)物的死亡情況，測(cè)定半數(shù)致死量(LD50)，初步估測(cè)毒性作用的靶器官，預(yù)測(cè)毒性機(jī)理，為后續(xù)新物質(zhì)的安全性評(píng)價(jià)提供相應(yīng)的理論依據(jù)[27].

硒有兩種存在形式，無(wú)機(jī)硒和有機(jī)硒.無(wú)機(jī)硒一般指亞硒酸鹽和硒酸鹽，最先被作為硒補(bǔ)充劑使用.但無(wú)機(jī)硒對(duì)人體會(huì)產(chǎn)生更強(qiáng)毒性，導(dǎo)致其生物活性閾值更低，如表1所示，無(wú)機(jī)硒屬于劇毒物質(zhì)，其LD50小于50 mg/kg.有機(jī)硒主要為硒代蛋氨酸、硒代半胱氨酸、硒氰基乙酸鉀等，具有較高的生物活性和生物利用率且毒性較低.與無(wú)機(jī)硒相比，毒性大小一般為亞硒酸鈉>硒酸鈉>硒代蛋氨酸[28].現(xiàn)有研究涉及的有機(jī)硒LD50最低的是51.91 mg/kg，最高的達(dá)到525.21 mg/kg，數(shù)值比無(wú)機(jī)硒大幾倍至幾十倍，均屬于中等毒性，比無(wú)機(jī)硒毒性降低一級(jí).因此為進(jìn)一步提高可選擇性，降低硒的毒性作用，尋求高效的富硒有機(jī)產(chǎn)品成為熱點(diǎn).如利用微生物發(fā)酵的特性，將無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)硒，衍生出新的富硒有機(jī)產(chǎn)品[29]，如謝玉韜[30]利用嗜熱鏈球菌、酵母菌及混合菌種發(fā)酵6個(gè)月，獲得毒性較低的生物硒.近年來(lái)，有研究發(fā)現(xiàn)將硒與納米技術(shù)結(jié)合起來(lái)獲得的5～200 nm的納米硒單質(zhì)，表現(xiàn)出高效的生物活性[31-32]和較低的毒性[33]，如含量高于97%的100 nm單分散納米硒[34]的LD50為303.94 mg/kg，是亞硒酸鈉的14倍[35]，被認(rèn)為是一種潛在的優(yōu)質(zhì)硒補(bǔ)充劑.但制備手段的不同，也賦予了納米硒不同的毒性，生物納米硒與化學(xué)納米硒相比，毒性較小.Mal等[36]以斑馬魚為試驗(yàn)對(duì)象，發(fā)現(xiàn)牛血清白蛋白穩(wěn)定的納米硒(Nano-Sec)半致死濃度(LC50)為0.16 mg/L、而由厭氧顆粒污泥為培養(yǎng)基的生物納米硒(Nano-Seb)LC50為1.77 mg/L.

表1 不同種類硒的急性毒性Tab.1 Acute toxicity of Selenium of different kinds

3 硒的遺傳毒性

遺傳性毒性試驗(yàn)主要包括致突變?cè)囼?yàn)、代謝試驗(yàn)，主要目的是更進(jìn)一步了解被測(cè)物的安全性，明確被測(cè)物在體內(nèi)的致畸、致癌可能性，從而對(duì)被測(cè)物進(jìn)行篩選.

Kobayashi等[46]讓TA98、TA100、TA1535菌株分別在0.05、0.5、5、10、20、50和100 μg/mL的硒酸鹽、亞硒酸鈉條件下培養(yǎng)48 h，結(jié)果顯示無(wú)論有或沒(méi)有S9混合物(由大鼠肝臟勻漿制備，用于模擬體內(nèi)代謝活化系統(tǒng))，硒酸鹽對(duì)TA1535菌株顯示出低突變性，而亞硒酸鈉則無(wú)突變性.然而，在其他研究中，亞硒酸鹽被證明在鼠傷寒沙門氏菌菌株TA104中具有致突變性[47].Wang等[35]對(duì)昆明小鼠連續(xù)灌胃5 d亞硒酸鈉，劑量分別為10.59、5.29和2.65 mg/kg，結(jié)果顯示所有劑量均會(huì)導(dǎo)致骨髓細(xì)胞微核率的增加和精子畸變率的上升.李元新等[48]對(duì)亞硒酸鈉進(jìn)行骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核(PCE)試驗(yàn)，劑量分別為0.90、0.45、0.23 mg/kg，結(jié)果顯示當(dāng)受試物終濃度為0.90、0.45 mg/kg劑量組的微核率與對(duì)照組相比具有顯著性差異，結(jié)果呈陽(yáng)性.細(xì)胞遺傳毒性檢測(cè)中，亞硒酸鈉的細(xì)胞遺傳毒效應(yīng)的閾值濃度為6.48×10-7mol/L[49]；0.1 mol/L的亞硒酸鈉會(huì)使得釀酒酵母菌株SJR751在復(fù)制細(xì)胞中雙鏈斷裂，誘導(dǎo)DNA損傷，在酵母中表現(xiàn)出毒性作用[50].

與無(wú)機(jī)硒誘導(dǎo)細(xì)胞微核率、精子畸變、Ames結(jié)果陽(yáng)性相比，有機(jī)硒和納米硒的結(jié)果就大相徑庭.Yang等[51]對(duì)硒甲基硒代半胱氨酸的Ames試驗(yàn)，在有或沒(méi)有S9的處理?xiàng)l件下，濃度為0、1.6、8.0、40、200、1 000 μg/板的硒甲基硒代半胱氨酸，對(duì)4種菌株TA97、TA98、TA100和TA102均未表現(xiàn)出突變性；在小鼠骨髓微核和精子致畸實(shí)驗(yàn)中，劑量為0、1.15、2.31和4.63 mg/kg，結(jié)果顯示細(xì)胞染色無(wú)致突變性，精子也未產(chǎn)生誘變.Qin等[52]以昆明小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以硒計(jì)劑量為22.446、44.574、89.148 μg/kg硒蛋白粉進(jìn)行的骨髓微核試驗(yàn)，87.21、193.80、387.60 μg/kg劑量進(jìn)行精子致畸試驗(yàn)，結(jié)果顯示并沒(méi)有引起體內(nèi)微核率的增加及對(duì)精子產(chǎn)生明顯的誘變.Griffiths等[53]對(duì)酵母硒(含硒量為2000 mg/kg)進(jìn)行Ames試驗(yàn)，結(jié)果顯示在最高濃度1 000 μg/皿的情況下，也未顯示出毒性作用；體外人淋巴細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)中，不加S9處理時(shí)終濃度為9.77、19.53、39.06、78.13、156.30、312.50 μg/mL，加S9處理時(shí)終濃度為9.77、19.53、39.06、78.13、156.30、312.50、625.00、937.50、1 250.00 μg/mL均未引起畸變.謝玉韜等[30]對(duì)兩種毒性較小的生物硒(LD50分別為525.21、392.55 mg/kg)在小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)中，分別取用LD50的1/2、1/4、1/8進(jìn)行灌胃，所有結(jié)果均顯示陰性.Bhattacharjee[54]對(duì)不同形態(tài)硒進(jìn)行小鼠骨髓細(xì)胞染色體畸變?cè)囼?yàn)，劑量為2 mg/kg，結(jié)果顯示，對(duì)照組染色體畸變的程度為14.17%，與之相比，無(wú)機(jī)硒(26.06%)有顯著性差異，而有機(jī)硒(17.08%)和納米硒(13.34%)無(wú)差異.

硒的遺傳毒性已在多種體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行了測(cè)試，這些結(jié)果都表明了化學(xué)形式和劑量的重要性.無(wú)機(jī)硒遺傳毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)出陽(yáng)性或誘變性，引起細(xì)胞毒性及DNA損傷.同濃度下的亞硒酸鈉、1,4-亞苯基-雙(亞甲基)硒氰酸酯、納米硒，僅亞硒酸鈉對(duì)小鼠表現(xiàn)出遺傳毒性[54].此外納米硒的毒性研究深度欠缺，在遺傳毒性上，其數(shù)據(jù)更少，但從現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)看，與無(wú)機(jī)硒相比，有機(jī)硒和納米硒則顯示無(wú)毒.

4 硒的亞急性、亞慢性毒性

亞急性(14～30 d)、亞慢性毒性(90 d)試驗(yàn)的開(kāi)展是在遺傳毒性試驗(yàn)呈陰性后，將不同劑量的被測(cè)物經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間喂養(yǎng)后，了解被測(cè)物的毒性作用性質(zhì)、靶器官及對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的影響，并初步確定最大未觀察到有害作用的劑量和致癌的可能性，為慢性毒性和致癌試驗(yàn)提供數(shù)據(jù)支撐.

人體對(duì)硒的最低需求量為17 μg/d，主要是預(yù)防缺硒癥，即克山??；200 μg/d被證明是預(yù)防癌癥的有效劑量[55].一項(xiàng)報(bào)告稱乙型肝炎表面抗原(HBsAg)男性攜帶者服用亞硒酸鈉(0.5 mg/a)2 a后患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)大大降低[56]，另一項(xiàng)研究報(bào)告的有機(jī)硒[57](含200 μg硒酵母)對(duì)HBsAg攜帶者補(bǔ)充4 a后，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)硒組肝癌發(fā)病率明顯低于對(duì)照組.硒補(bǔ)充劑作為預(yù)防肝癌的藥物得到了強(qiáng)有力的支持.

硒對(duì)人體的最高安全限量為400 μg/d，以人70 kg計(jì)相當(dāng)于5.7 μg/kg，根據(jù)體表面積等效劑量比值，大鼠和小鼠與人的比例為6.3和9.1倍，即35.91、51.87 μg/kg.如表2所示，在此劑量?jī)?nèi)的實(shí)驗(yàn)大、小鼠均未表現(xiàn)出明顯的中毒跡象.而高于此安全劑量的復(fù)方富硒酵母破壁靈芝孢子粉[58]對(duì)大鼠30 d喂養(yǎng)結(jié)果顯示并未表現(xiàn)出中毒跡象，與對(duì)照組相比實(shí)驗(yàn)組大鼠體重、血生化指標(biāo)、臟器指數(shù)無(wú)顯著性差異；硒甲基硒代半胱氨酸[59]的90 d經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果顯示最大未觀察到的有害劑量(NOAEL)為450 μg/kg；硒甲基硒代半胱氨酸(217、303.8、390.6 μg/kg)[51]中各劑量組的攝食量、血生化與對(duì)照組相比不具有毒理學(xué)意義，但其肝臟重量呈劑量依賴性的增加.肝臟是硒中毒的主要靶器官.一項(xiàng)亞急性毒性研究發(fā)現(xiàn)，硒甲基硒代半胱氨酸對(duì)大鼠和狗進(jìn)行28 d喂養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)肝臟腫大和肝細(xì)胞變性，肝臟重量與劑量呈現(xiàn)正相關(guān)[60].因此，在亞慢性毒性試驗(yàn)中這幾種新型營(yíng)養(yǎng)硒補(bǔ)充劑具有更高的安全性，但當(dāng)此劑量被應(yīng)用于實(shí)現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值時(shí)，則還需要對(duì)其進(jìn)行評(píng)估，以確定是否對(duì)人體健康產(chǎn)生危害.

表2 不同種類硒的亞急性、亞慢性毒性Tab.2 Subacute and subchronic toxicity of Selenium of different kinds

如表2所示，過(guò)量攝取硒的動(dòng)物表現(xiàn)出明顯的中毒現(xiàn)象，首當(dāng)其沖的是生長(zhǎng)發(fā)育情況出現(xiàn)異常.尹小平[61]令黑雞每日硒攝入量達(dá)到12 mg/kg，28 d后，所有黑雞出現(xiàn)不同程度的食欲降低、精神萎靡、生長(zhǎng)緩慢等異?，F(xiàn)象；齲齒類動(dòng)物在攝入高劑量硒后也會(huì)出現(xiàn)食欲不振、體重下降的情況[62].其次表現(xiàn)在血液參數(shù)的異常，鄢鵬飛等[63]發(fā)現(xiàn)富硒油菜粉(LD50為11.75 g/kg)對(duì)大鼠血生化有影響，結(jié)果顯示雄性大鼠的ALT參數(shù)有顯著性差異；Shakibaie[38]對(duì)雄性NMRI小鼠進(jìn)行14 d經(jīng)口毒試驗(yàn)，結(jié)果顯示20 mg/kg組與對(duì)照組相比體重出現(xiàn)下降，ALT、AST和ALP等肝酶活性，血紅蛋白、甘油三酯、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等血液參數(shù)有顯著性差異.再次，從臟器指數(shù)和病理切片中更易觀察到硒中毒的靶器官，胡濱等[37]對(duì)Wistar大鼠連續(xù)30 d經(jīng)口灌胃亞硒酸鈉，結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，所有劑量組大鼠的心臟、肝臟、腎臟、肺臟系數(shù)增加，心肌細(xì)胞和肝細(xì)胞增大且伴有顆粒性病變.最后，過(guò)高劑量的硒會(huì)引起死亡，張帆[64]對(duì)小鼠灌胃124.03 mg/kg的酵母硒，出現(xiàn)明顯的中毒特征，且2只小鼠死亡；王光等[62]探究的納米硒在260 mg/kg時(shí)，小鼠死亡率高達(dá)16.7%.

5 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，硒的毒性研究取得了顯著成果.急性毒性試驗(yàn)得出，硒的毒性取決于其化學(xué)形態(tài)，通常無(wú)機(jī)硒比有機(jī)硒毒性更強(qiáng)，有機(jī)硒比納米硒毒性更強(qiáng)[54].張帆[64]研究的5種酵母硒毒性，即使是毒性最強(qiáng)的一號(hào)酵母硒(LD50為33.33 mg/kg)也低于同組測(cè)得的亞硒酸鈉(LD50為17.86 mg/kg)；Zhang等[40]測(cè)得的納米硒(LD50為113 mg/kg)對(duì)小鼠的急性毒性比亞硒酸鈉(LD50為15.7 mg/kg)低7倍；Wang等[44]測(cè)得的納米硒(LD50為92.1 mg/kg)對(duì)小鼠中的急性毒性比硒代蛋氨酸(LD50為25.6 mg/kg)低3.5倍.但也有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)[67]，由釀酒酵母生產(chǎn)的硒氨基酸(硒代半胱氨酸、硒代甲硫氨酸)毒性要弱于100～200 nm的元素納米硒.

現(xiàn)有研究中無(wú)機(jī)硒具有遺傳毒性，無(wú)論是體內(nèi)還是體外實(shí)驗(yàn)，均發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果，但因其體內(nèi)給藥最低有毒劑量是人體最高安全劑量的51倍，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有限.有機(jī)硒未發(fā)現(xiàn)遺傳毒性.由于有機(jī)硒的來(lái)源和種類多樣，每種類型的研究數(shù)據(jù)更顯不足.

在硒的亞急性及90 d毒性研究中所見(jiàn)到的毒性，均可歸因于所給劑量過(guò)大，其中最低給藥劑量268 μg/kg的亞硒酸鈉[37]，最高260 mg/kg的納米硒[62]，分別是人體最高安全限量(400 μg/d)的7.46和5 012倍.因此現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)結(jié)果均間接說(shuō)明人體推薦補(bǔ)充劑量(50～250 μg/d)是合理安全的.

此外有機(jī)硒的分子形態(tài)尚不清晰，如鄢鵬飛等[63]研究的富硒油菜粉為硒蛋白，盧昊等[42]研究的有機(jī)硒，其主要成分為硒氰基乙酸鉀，張帆[64]認(rèn)為酵母硒是含有硒氨基酸、硒多糖、硒蛋白的一種混合物，Lu等[68]認(rèn)為富硒酵母和食品中主要的化學(xué)形式是硒代蛋氨酸，Griffiths等[53]研究的酵母硒中98%為硒代蛋氨酸.但這類人工轉(zhuǎn)化富硒品中是否還存在其他形態(tài)的硒，其含硒量、不同形態(tài)硒之間的相互影響還未可知.

納米硒來(lái)源于硒氧陰離子通過(guò)還原劑、生物發(fā)酵、物理輻射等手段制備而成，其毒性要比無(wú)機(jī)硒低得多，且硒的納米顆粒具有很多特性，如高度吸收性和高生物活性[69-70]，因此被認(rèn)為是一種新型的硒補(bǔ)充劑.但納米硒因其不穩(wěn)定的形態(tài)，需要借助合適的納米載體保證其穩(wěn)定性或通過(guò)生物合成穩(wěn)定的納米硒[71]，且要考慮其廣泛適用性，須使用非病原微生物，因此開(kāi)發(fā)合成和控制釋放硒納米顆粒技術(shù)仍在不斷探索.

未來(lái)的研究中需要進(jìn)一步優(yōu)化補(bǔ)硒的種類，加大不同有機(jī)硒和納米硒的研究深度，進(jìn)一步明確硒在生物體中的分子形態(tài)、硒的營(yíng)養(yǎng)機(jī)制，為硒補(bǔ)充劑的開(kāi)發(fā)提供強(qiáng)力的理論基礎(chǔ)，為科學(xué)補(bǔ)硒提供理論保障，減少潛在的風(fēng)險(xiǎn).