腰果過敏研究進展

肖志文，陳紅兵，武 涌

（1.南昌大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室，江西 南昌 330047；2.南昌大學(xué)食品學(xué)院，江西 南昌 330047；3.南昌大學(xué)中德聯(lián)合研究院，江西 南昌 330047；4.南昌大學(xué) 高等研究院微納米科學(xué)與技術(shù)省重點實驗室，江西 南昌 330047）

食物過敏是指特殊人群攝入某種特定的食物后在體內(nèi)產(chǎn)生的一種食物不良反應(yīng)，也是人體攝入過敏原后發(fā)生的一種超敏反應(yīng)。世界衛(wèi)生組織和糧食及農(nóng)業(yè)組織（Food and Agriculture Organization of the United Nations and world health organization，F(xiàn)AO/WHO）將含麩質(zhì)谷物、甲殼類、雞蛋、魚、牛奶、花生、大豆、特定樹堅果（杏仁、腰果、榛子、山核桃、開心果和核桃）歸類為8大食物過敏原。近年來，F(xiàn)AO/WHO將樹堅果歸類為保健食品，導(dǎo)致腰果的消費量逐年增加，腰果過敏發(fā)病率也隨之上升。Bock等研究發(fā)現(xiàn)堅果是導(dǎo)致嚴重過敏及并發(fā)癥的主要原因之一，并有致死案例的報道，且腰果還會通過交叉反應(yīng)對過敏人群構(gòu)成健康風(fēng)險。流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，美國等發(fā)達國家堅果過敏的發(fā)病率為1.4%，而堅果類食物中腰果過敏的發(fā)患病率高達15%～30%。此外，腰果過敏會導(dǎo)致嚴重的臨床癥狀，因此應(yīng)對腰果過敏給予足夠的關(guān)注和認識。本文著重就腰果過敏的交叉反應(yīng)、加工對腰果致敏性的影響、診斷以及治療等方面進行系統(tǒng)綜述，以期為腰果過敏的社會認識及深入研究提供科學(xué)依據(jù)和理論參考。

腰果是一種漆樹科、腰果屬的常綠喬木，原產(chǎn)于巴西東北部，廣泛分布在靠近赤道的熱帶地區(qū)，而我國腰果主要種植區(qū)分布于云南和海南等地，其他地區(qū)如臺灣、廣東也均有引種。腰果營養(yǎng)成分豐富，含有大量的不飽和脂肪酸，豐富的植物甾醇和纖維素，對中風(fēng)、糖尿病等疾病的緩解具有良好功效。腰果也含有大量的生物活性化合物，如-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)、-生育酚、-生育酚、硫胺素、硬脂酸、油酸和亞油酸等。腰果具有能量高、營養(yǎng)價值豐富及風(fēng)味獨特等優(yōu)點，常作為零食被消費，也用于黃油、香蒜醬、面包以及糖果和巧克力等產(chǎn)品的加工。此外，腰果在全球可食型堅果中的消費量排第三，主要集中在中國、印度、泰國等地。

1 腰果過敏流行病學(xué)

腰果過敏是一種較常發(fā)生的堅果過敏，僅次于核桃，且全球腰果過敏發(fā)生率呈逐年上升趨勢。法國一項調(diào)查顯示，141 名受試患者腰果過敏的發(fā)生率為10.3%，腰果過敏病例報道數(shù)量從2003年的3%增加到2007年的9%。Fleischer等報道了核桃和腰果過敏癥具有高發(fā)病率，在美國101 例先前被診斷為堅果過敏人群中，腰果過敏癥的發(fā)生率為30%。Clark等以攝入花生和腰果后發(fā)生嚴重過敏反應(yīng)且皮膚點刺呈陽性的兒童為對象進行研究，發(fā)現(xiàn)腰果過敏比例是花生的兩倍。值得注意的是，腰果過敏在成年女性中更為普遍。Robotham等研究發(fā)現(xiàn)26 例平均年齡為32 歲的腰果過敏患者中有17 人是女性，Li Hong的研究中30 例平均年齡為38 歲的腰果過敏患者有22 人是女性，Hasegawa等的研究中4 名平均年齡為29 歲的腰果過敏患者中有3 人是女性。

腰果過敏在我國也具有一定的流行病學(xué)發(fā)病率，且較為嚴重。陳麗婷等研究發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致海南三亞兒童過敏性疾病的食入性過敏原依次是牛奶、腰果和蛋清。李琪等對就診于復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院的2 413 例過敏性鼻炎患兒進行過敏原篩查分析，發(fā)現(xiàn)其中461 人對腰果過敏，占比為19.10%。吳培東等對4 951 名患者進行食入性過敏原致病對比分析，發(fā)現(xiàn)成人組中首位過敏原為腰果，2 684 名成人中有10.32%的人對腰果過敏；兒童組中腰果為第二過敏原，2 267 人中有20.96%對腰果過敏。高金芳等的研究中253 名食物過敏患者中腰果過敏的占比為18.9%。由此可見腰果過敏在我國還是普遍存在的，但關(guān)于腰果過敏的研究還不夠深入，因此需對此進行持續(xù)關(guān)注和深入研究。

2 腰果過敏原

食物過敏原可以根據(jù)其致敏方式分為I類或II類，其中I類食物過敏原通常被認為對熱變性、酸性環(huán)境和胃腸道蛋白酶具有較高的穩(wěn)定性。由于這些特點，I類食物過敏原更有可能通過胃腸道引起中度至重度過敏反應(yīng)。腰果中主要的腰果過敏原為Ana o 1、Ana o 2和Ana o 3，其相關(guān)信息見表1，蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)如圖1所示，這3種過敏原都被歸類為種子貯藏蛋白，且都屬于I類食物過敏原。

表1 腰果過敏原的相關(guān)信息Table 1 Information about cashew nut allergens

圖1 腰果過敏原Ana o 1、Ana o 2和Ana o 3的三維結(jié)構(gòu)圖Fig. 1 Three-dimensional structures of cashew allergens Ana o 1, Ana o 2 and Ana o 3

Ana o 1是分子質(zhì)量為60 kDa左右的豌豆球蛋白型三聚體蛋白，有Ana o 1.0101（538個氨基酸）和Ana o 1.0102（536個氨基酸）兩個已知的亞型，其區(qū)別在于是否存在兩個N端氨基酸殘基，且Ana o 1單體表現(xiàn)出與-伴大豆球蛋白非常相似的cupin折疊。天然Ana o 2分子質(zhì)量約為55 kDa，由21 kDa的堿性小亞基和33 kDa的酸性大亞基通過二硫鍵組成，前期蛋白通常形成三聚體，在成熟后形成六聚體。Reitsma等通過非還原變性十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和基質(zhì)輔助激光解吸電離串聯(lián)質(zhì)譜（matrix-assisted laser desorption ionization-tandem mass spectrometry，MALDIMS/MS）鑒定出Ana o 2的53、30 kDa和21 kDa條帶分別是蛋白質(zhì)單體、大亞基和小亞基。而作為醇溶蛋白Ana o 3是分子質(zhì)量約為16.3 kDa的2S白蛋白，其由5個-螺旋組成，包含2個由半胱氨酸二硫鍵連接的亞基。Reitsma等通過變性還原電泳鑒定發(fā)現(xiàn)Ana o 3在6、8 kDa和10 kDa處有3個不同的條帶，并發(fā)現(xiàn)10 kDa和8 kDa肽段分別為8.2～8.4 kDa和8.1～8.2 kDa的大亞基，6 kDa肽段為3.7～4.5 kDa的小亞基，但Robotham等認為這3個肽段都是與Ana o 3具有相似N端序列的大亞基的同型構(gòu)象。

3 交叉反應(yīng)

過敏原表位是過敏原結(jié)構(gòu)表面存在的可促使機體產(chǎn)生抗體或與免疫細胞結(jié)構(gòu)中抗原受體發(fā)生結(jié)合的免疫活性區(qū)，其組成、數(shù)目、性質(zhì)和空間構(gòu)型決定了過敏原的特異性。國內(nèi)外關(guān)于腰果過敏原表位的研究較少，Archila等鑒定出了Ana o 1的3個T細胞表位和Ana o 2的6個T細胞表位；Robotham等鑒定了Ana o 2第一個構(gòu)象表位，該表位位于大亞基上，但在結(jié)構(gòu)上依賴于與小亞基的結(jié)合；閆娟娟等通過斑點印記篩選出Ana o 3的5個關(guān)鍵表位，分別為AFAVLLLVANASIYR、VLLLVANASIYRAIV、LVANASIYRAIVEVE、YVKQEVQRGGRYNQR、QMVRQLQQQEQIKGE；Robotham等鑒定出了Ana o 3的3個線性表位，分別為SGREQSCQRQFE、KQEVQRGGRYNQ、SLRECCQELQEV。

不同過敏原之間存在的共同表位或相似表位易導(dǎo)致過敏交叉反應(yīng)。研究表明腰果和開心果、核桃存在較高的交叉反應(yīng)，也可與榛子、粉紅胡椒、檸檬籽等發(fā)生免疫交叉反應(yīng)。腰果同開心果、芒果和粉紅胡椒等屬于腰果科，在序列和結(jié)構(gòu)上具有較高的同源性，易產(chǎn)生交叉反應(yīng)。Willison和Costa等根據(jù)腰果和開心果的序列相似性和患者IgE交叉反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)Ana o 1和Pis v3，Ana o 2和Pis v2，Pis v5、Ana o 3和Pis v1是同源性蛋白，具有相同的高度保守一級和三維結(jié)構(gòu)，這也是腰果與開心果之間存在高度的血清學(xué)交叉反應(yīng)的原因。與開心果提取物相比，Ana o 3甚至在開心果過敏血清IgE診斷過程中表現(xiàn)出更高的特異性。此外，腰果致敏小鼠在腰果免疫治療后可降低血清特異性IgE對開心果過敏原的識別也證實了腰果和開心果存在交叉反應(yīng)。Too等研究發(fā)現(xiàn)76.2%的腰果過敏患者對粉紅胡椒也具有過敏反應(yīng)，腰果與芒果之間存在潛在的交叉反應(yīng)。

核桃、榛子和花生等不屬于腰果科，但腰果中過敏原Ana o 2與核桃過敏原Jug r 4、榛子過敏原Cor a 9、花生過敏原Ara h 3也具有表位同源性，且都屬于11S球蛋白。除了Ana o 2與Jug r 4具有同源性，Ana o 3與核桃過敏原Jug r 1也共享一個序列高度相似的表位。研究發(fā)現(xiàn)對腰果和核桃均過敏的小鼠在接受核桃免疫治療后，小鼠血清中腰果特異性IgE水平顯著降低。相反，當(dāng)核桃被添加至腰果致敏小鼠的飲食中，小鼠的核桃特異性IgE水平升高，并對核桃產(chǎn)生過敏反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)榛子和腰果蛋白提取物之間觀察到強烈的sIgE交叉反應(yīng)，是由特定的11S球蛋白致敏引起的，該結(jié)果在Wallowitz等的研究中也得到證實：Ana o 2和Cor a 9存在強烈的IgE交叉反應(yīng)。雖然多項研究表明20%～30%的花生過敏個體對一種或多種樹堅果過敏，但腰果和花生之間的交叉反應(yīng)還未得到證實。

4 加工對腰果及其過敏原的影響

研究表明多種加工方式可對腰果過敏原Ana o 1、Ana o 2和Ana o 3產(chǎn)生一定的影響。食品工業(yè)中，高溫烘焙或油炸一直是腰果的常用加工方式。Venkatachalam等探究了輻照、烘焙等加工方式對腰果過敏原的影響，發(fā)現(xiàn)輻照對3種過敏原沒有實質(zhì)性的影響，經(jīng)過熱處理后Ana o 3和Ana o 1的IgE反應(yīng)性都有不同程度的降低，但Ana o 2在200 ℃加熱15 min后的二級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和致敏性都有所升高，該現(xiàn)象在花生過敏原中也有同樣結(jié)果，可利用分子動力學(xué)模擬等方法進行解釋。此外，烘焙等熱加工會導(dǎo)致腰果總蛋白溶解度降低，但Ana o 3溶解度會升高。de Leon等評估了180 ℃焙烤對腰果免疫反應(yīng)性的影響，發(fā)現(xiàn)180 ℃焙烤15 min不會影響腰果過敏原的IgE結(jié)合能力，Su Mengna等研究發(fā)現(xiàn)腰果在經(jīng)受25 kGy γ-射線輻照、121 ℃高壓滅菌30 min后，其與IgE反應(yīng)的能力顯著降低。熱加工和輻照對腰果致敏性的影響需要進一步研究。

Mattison等用體外模擬實驗評估胃腸消化對脫脂腰果粉的影響，研究發(fā)現(xiàn)Ana o 2和 Ana o 3對胃腸消化具有抗性并保持免疫原性，其中Ana o 3在胃腸消化后仍具有較為完整的過敏原蛋白結(jié)構(gòu)。Reitsma的研究表明，Ana o 3相比于Ana o 1和Ana o 2更能抵抗胃蛋白酶和胰蛋白酶的水解，并發(fā)現(xiàn)熱處理腰果并不影響Ana o 3對胃腸消化的抗性。雖然天然的腰果過敏原具有胃腸消化穩(wěn)定性，但經(jīng)二硫蘇糖醇（-dithiothreitol，DTT）還原后3種腰果過敏原對胃腸消化的抗性顯著降低，特別是Ana o 1和Ana o 2。DTT等還原劑可破壞Ana o 3二硫鍵和螺旋構(gòu)象，表明二硫鍵和螺旋構(gòu)象在維持Ana o 3胃腸消化穩(wěn)定性中具有重要的作用。此外，在加熱條件下，亞硫酸鈉可有效破壞Ana o 3的結(jié)構(gòu)，還能有效地破壞Ana o 2中的二硫鍵，從而降低過敏原與特異性抗體的結(jié)合，其主要原因在于腰果過敏原經(jīng)亞硫酸鈉處理后二硫鍵被破壞，使巰基帶負電，會使帶負電巰基的線性分子被IgE結(jié)合位點所排斥。因此使用具有還原性的食品級試劑加工處理可為降低腰果致敏性提供新思路。

5 腰果過敏臨床癥狀及其臨床閾值

5.1 腰果過敏臨床癥狀

腰果過敏的嚴重性不僅在于發(fā)病率逐年提高，還在于其嚴重的臨床表現(xiàn)，如表2所示。腰果過敏往往涉及多個器官或系統(tǒng)，根據(jù)國內(nèi)早期的病例報道，腰果過敏患者臨床表現(xiàn)主要為過敏性休克、體溫下降、全身瘙癢、腹部疼痛及呼吸困難等，甚至有因腰果過敏死亡的案例。腰果過敏患者多表現(xiàn)為呼吸和腸胃指標監(jiān)測的皮膚病，但有30%的過敏反應(yīng)病例沒有發(fā)現(xiàn)皮膚反應(yīng)癥狀。大量證據(jù)表明腰果過敏癥狀的性質(zhì)及程度往往與患者的年齡及過敏原的接觸量有關(guān)。2 歲以下的嬰兒最常見的過敏癥狀是皮膚和胃腸道癥狀，學(xué)齡前兒童中皮膚、胃腸道和呼吸道癥狀最為突出，青少年更容易出現(xiàn)喉嚨發(fā)緊等嚴重癥狀，而成人心血管癥狀發(fā)生率較高。另一項研究發(fā)現(xiàn)繼發(fā)性腰果過敏似乎發(fā)生在年齡較大的兒童身上。此外，有研究發(fā)現(xiàn)5%的過敏人群在攝入少于1 mg的腰果蛋白時就會產(chǎn)生過敏反應(yīng)，并且近半的過敏兒童可能在過敏反應(yīng)時涉及到至少兩個器官。在另一項研究案例中，27 名腰果過敏患者中有5 人僅因皮膚或黏膜接觸而表現(xiàn)出嚴重的過敏反應(yīng)。因此，腰果過敏是一類嚴重的食物過敏疾病，需要給予足夠的重視和認識。

表2 腰果過敏臨床癥狀的相關(guān)研究Table 2 Relevant studies on clinical symptoms of cashew nut allergy

5.2 腰果過敏臨床閾值

食物過敏原閾值是引發(fā)機體對某一食物過敏所需的過敏原量，其包括個體閾值和群體閾值，其中個體閾值處于可見有害作用的最低劑量和無明顯損害作用的最高劑量之間，而群體閾值則是指過敏群體中不誘發(fā)個體產(chǎn)生任何嚴重過敏癥狀的最大過敏原劑量。個體之間食用同一過敏原而引發(fā)過敏癥狀的類型及程度是不同的，因此過敏原閾值有可能不是一個數(shù)量級的。因無法對每一過敏患者進行食物激發(fā)實驗，故群體閾值較難獲取。然而個體閾值水平測定所得信息可作為定義群體閾值水平的有效數(shù)據(jù)，從而為監(jiān)管機構(gòu)和公共衛(wèi)生機構(gòu)以及過敏患者和食品行業(yè)提供指導(dǎo)。此外，統(tǒng)計劑量分布模型（對數(shù)正態(tài)分布、對數(shù)邏輯分布和威布爾分布）已應(yīng)用于分析各種致敏食物的個體閾劑量，以確定群體閾值的參考劑量。雖然近年來各種診斷方法蓬勃發(fā)展，然而腰果過敏閾值劑量研究仍處于初步階段。Blom等對31 名腰果過敏少年進行口服食物激發(fā)實驗，發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致50%過敏人群產(chǎn)生嚴重過敏反應(yīng)的蛋白質(zhì)劑量（50% effective dose，ED）為25.4 mg，并根據(jù)過敏癥狀的嚴重程度，將導(dǎo)致5%過敏人群產(chǎn)生嚴重過敏反應(yīng)的蛋白質(zhì)劑量（5% effective dose，ED）降至為0.32 mg。而在另一項針對腰果過敏兒童的臨床研究中，1 mg腰果蛋白被認為是引發(fā)嚴重過敏反應(yīng)的最小誘發(fā)劑量。Crevel等建議將0.1 mg蛋白質(zhì)作為所有堅果的參考劑量，然而根據(jù)目前腰果過敏ED的相關(guān)研究，已經(jīng)初步將2.0 mg腰果蛋白作為腰果過敏參考閾水平。

6 腰果過敏的診斷

目前，食物過敏主要依靠患者的臨床癥狀、病史、特異性IgE體內(nèi)體外檢測及食物排除和激發(fā)實驗進行診斷。腰果過敏的診斷特別困難，主要原因是交叉致敏導(dǎo)致在利用過敏原提取物進行皮膚點刺實驗（skin-prick test，SPT）和特異性IgE檢測（specific IgE test，sIgE）的結(jié)果假陽性比例特別高，且原發(fā)性過敏和繼發(fā)性過敏也難以區(qū)分。

腰果過敏的臨床診斷方式通常是病史問診結(jié)合SPT和sIgE實驗。SPT的基本原理是當(dāng)過敏原進入皮膚后，與肥大細胞表面特異性IgE受體結(jié)合并交聯(lián)，致使肥大細胞脫顆粒，釋放組胺等介質(zhì)，進而產(chǎn)生可以量化的風(fēng)團及潮紅應(yīng)答。SPT可對不同過敏原同時進行檢測，因為單一過敏原導(dǎo)致的過敏反應(yīng)僅局限在該過敏原點刺直接區(qū)域。此外，研究發(fā)現(xiàn)在腰果口服刺激時，SPT和sIgE聯(lián)合應(yīng)用可提高對過敏反應(yīng)的診斷能力。如在Corderoy等的研究中，腰果口服激發(fā)實驗中陽性或陰性患者的腰果sIgE水平?jīng)]有差異，但陽性患者的SPT風(fēng)團反應(yīng)要明顯強于陰性患者。為了提高SPT的準確性，可以將過敏原誘導(dǎo)風(fēng)團的面積與組胺誘導(dǎo)風(fēng)團的面積（作為陽性對照）進行比較，以糾正皮膚對組胺的敏感性，該比值被定義為組胺當(dāng)量點刺指數(shù)。由于SPT具有一定的風(fēng)險，診斷時應(yīng)先進行sIgE的檢測再使用SPT。盡管SPT和sIgE實驗聯(lián)合應(yīng)用表現(xiàn)出很高的靈敏性，但不能考慮將體內(nèi)和體外診斷測試的陰性結(jié)果排除在過敏之外，因為用于SPT或sIgE的商業(yè)提取物不含導(dǎo)致某些過敏反應(yīng)的油質(zhì)蛋白提取物。另一個常用診斷方式是過敏診斷“金標準”：雙盲安慰劑對照食物實驗（double-blind placebo-controlled food challenges，DBPCFC）。DBPCFC是指過敏患者接受遞增劑量的食物過敏原和安慰劑，且食物過敏原和安慰劑分開給藥，由于過敏原和安慰劑形似，醫(yī)生和患者都無法明確區(qū)分，因而稱為“雙盲”。DBPCFC能確定暴露于過敏食物與臨床癥狀的因果關(guān)系，其結(jié)果可以明確診斷IgE介導(dǎo)的食物過敏反應(yīng)及相關(guān)癥狀，但根據(jù)國際準則，如果有明確的腰果過敏史，則不應(yīng)使用DBPCFC，并且其只能在醫(yī)療情況及臨床設(shè)施較好時才能進行，因其耗時、昂貴且具有危險性，促使人們開發(fā)其他高效、安全的診斷過敏的方法。

嗜堿性粒細胞活化實驗（basophil activation test，BAT）是一種很有前景的堅果過敏診斷方法，其原理是機體攝入過敏原后，過敏原會與嗜堿性粒細胞表面的IgE受體結(jié)合并通過交聯(lián)激活細胞，進而導(dǎo)致細胞膜表面IgE高親和力受體（FceRI）聚集，蛋白酶激活，細胞發(fā)生脫顆粒，從而引起過敏反應(yīng)。最近有研究表明BAT與SPT結(jié)合可用于診斷堅果過敏，初步結(jié)果顯示BAT與SPT和交叉過敏臨床經(jīng)驗的結(jié)合能夠區(qū)分核桃、胡桃、腰果和開心果交叉致敏模式，而BAT、SPT和sIgE的組合可提高識別過敏和耐受患者的能力。研究表明sIgE和BAT聯(lián)用可以減少大多數(shù)芝麻過敏患者對口服食物挑戰(zhàn)的需求。但該方法尚未在臨床研究中大量使用，因為它需要適當(dāng)?shù)脑O(shè)備和訓(xùn)練有素的人員。組分解析診斷（component resolved diagnosis，CRD）是一種分子診斷技術(shù)，其特點是使用高純度的過敏原來檢測過敏組分sIgE水平，以避免樣品中非致敏組分的干擾，能極大地提高檢測精度。CRD已用于腰果過敏的診斷，并發(fā)現(xiàn)其對Ana o 3具有優(yōu)良的診斷能力。此外，CRD能夠準確診斷出患者的過敏原種類、過敏程度及過敏原交叉情況，從而為后續(xù)個體化治療提供依據(jù)，如Savvatianos等利用ImmunoCAP發(fā)現(xiàn)IgE與腰果過敏原的結(jié)合可被開心果強烈抑制，且相較于傳統(tǒng)腰果提取物，重組Ana o 3可作為腰果過敏和開心果過敏的一種高效診斷標記物。目前，有2種形式CRD商業(yè)產(chǎn)品供臨床使用，一種包括ImmunoCAP（Thermofisher Scientific/Phadia）和Immulite（Siemens Healthcare Diagnostics），另外一種為ImmunoCAP ISAC（Thermofisher Scientific/Phadia），兩者主要區(qū)別在于后者可同時檢測100多種過敏原特異性IgE。但CRD受地區(qū)差異過敏患者的過敏特征和天然、重組過敏原的差異性的影響，這是未來急需解決的一大問題。

此外，其他診斷方法也在不斷發(fā)展，如基于MeDALL過敏原芯片的平臺可同時檢測多種與特異性IgE臨床相關(guān)的致敏原，Purington等建立了一種離散時間事件模型以優(yōu)化DBPCFC，這些皆可為過敏疾病精準分類和性化的靶向治療開辟新的道路。

7 腰果過敏的預(yù)防治療

鑒于腰果過敏的流行及嚴重性，越來越多的學(xué)者將目光關(guān)注于腰果過敏治療上。目前，針對腰果過敏的治療方法主要有嚴格規(guī)避腰果過敏原及腰果共敏的食物過敏原、臨床緊急治療、耐受治療等，此外腸道菌群也是一種食物過敏預(yù)防及治療的潛在方法。

嚴格規(guī)避腰果過敏原及其交叉的食物過敏原是最簡單有效的預(yù)防方法。大部分腰果過敏患者對其他多種腰果科植物或堅果類植物IgE敏感，尤其是開心果，這可能是因為腰果和開心果中都存在具有高度保守結(jié)構(gòu)的過敏同源蛋白。故腰果過敏的患者應(yīng)避免食用有同源關(guān)系的堅果，若意外食用堅果后應(yīng)及時治療。對規(guī)避腰果過敏原及其交叉的食物過敏原的進一步研究具有重要的意義，如向患者及家屬提供全面的管理計劃，包括回避建議、針對患者的緊急藥物治療、緊急治療計劃和緊急藥物管理方面的培訓(xùn)，同時食品企業(yè)應(yīng)在產(chǎn)品包裝上明確列出所含食物過敏原，以方便患者規(guī)避過敏原。然而，嚴格規(guī)避腰果過敏原在預(yù)防食物過敏的同時，也給患者的飲食和社交活動增加了額外的限制，進而降低其生活質(zhì)量。

隨著腰果在食品中的使用逐年增長，嚴格規(guī)避過敏原在腰果過敏中難以實現(xiàn)，且意外接觸腰果或交叉反應(yīng)性食物的情況時有發(fā)生，此時必須采取臨床緊急治療措施?？菇M胺藥是食物過敏最常用的處方藥物之一，其次是腎上腺素自動注射劑和全身性藥物。臨床環(huán)節(jié)考慮到腰果過敏反應(yīng)的嚴重性和快速性，常使用肌內(nèi)腎上腺素治療，其是過敏性休克急診治療中的一線干預(yù)措施，而有效的二線干預(yù)措施包括患者正確體位、高流量氧氣、靜脈輸液、吸入短效支氣管擴張劑和霧化腎上腺素。過敏反應(yīng)的病理生理機制的深入研究可能會帶來更多有效的治療方法。血小板激活因子（platelet-activating factor，PAF）是一種由肥大細胞等多種類型細胞釋放的磷脂衍生介質(zhì)，有助于過敏反應(yīng)的放大和延長，從而加重過敏反應(yīng)癥狀。Arias等研究發(fā)現(xiàn)在花生致敏小鼠治療實驗中，相較于其他治療藥物（組胺受體拮抗劑、脂氧化酶抑制劑），PAF拮抗劑的治療顯著縮短了過敏反應(yīng)的持續(xù)時間和嚴重程度。此外，PAF受體拮抗劑和組胺受體拮抗劑聯(lián)合使用可以更好地治療食物過敏，甚至能更顯著地減輕過敏反應(yīng)程度和縮短持續(xù)時間。

耐受治療的基本原理是逐漸增加過敏原的暴露量，使機體對抗原產(chǎn)生暫時性低反應(yīng)，最終形成耐受或持續(xù)無應(yīng)答。其中口服免疫治療（oral immunotherapy，OIT）是治療過敏的發(fā)展趨勢，研究表明OIT能誘導(dǎo)大多數(shù)接受耐受治療的患者顯著脫敏。在一項動物實驗中，口服含腰果蛋白的聚酸酐納米顆?？稍鰪姾驼{(diào)節(jié)體液和細胞免疫反應(yīng)。Elizur等通過人群實驗發(fā)現(xiàn)60%的腰果過敏患者經(jīng)口服免疫治療后過敏癥狀有緩解趨勢甚至完全脫敏。研究表明早期引入腰果可能會降低人群中腰果過敏的發(fā)生率，但使用劑量和副作用仍需注意。最近研究表明，在堅果口服免疫治療時，可使用類似腰果/開心果、核桃/山核桃和山核桃/核桃/榛子/澳洲堅果的堅果簇，其是具有較高過敏相關(guān)性的堅果集合。堅果簇的應(yīng)用方式為某堅果過敏的患者可用相應(yīng)堅果簇中的單一堅果或堅果集合進行口服免疫治療，但堅果的比例需按實際需求進行確定以達到較好的脫敏效果。舌下免疫療法（sublingual immunotherapy，SLIT）和皮膚免疫療法（epicutaneous immunotherapy，EPIT）也是治療過敏的有效途徑，其中SLIT通過將液體形式的食物過敏原停留舌下幾分鐘，以此將未消化的過敏原引入口腔內(nèi)壁細胞來促進食物耐受，而EPIT通過含有過敏原的貼片將過敏原傳遞到皮膚后激活皮膚朗格漢斯細胞，隨后系統(tǒng)下調(diào)效應(yīng)細胞反應(yīng)。如研究表明皮外免疫治療可保護腰果致敏小鼠免于過敏反應(yīng)。

腸道菌群的改變可以影響食物過敏的發(fā)生。研究表明當(dāng)機體腸道微生物失調(diào)，Th1/Th2平衡受到破壞，并向Th2型反應(yīng)偏移，從而導(dǎo)致食物過敏。生命早期腸道微生物的改變與食物過敏密切相關(guān)。在一項加拿大嬰兒縱向隊列研究中，Cait等收集105 名兒童3個月和1 歲時的糞便，并在他們1 歲和3 歲時進行SPT，發(fā)現(xiàn)通過早期產(chǎn)丁酸細菌（糞便桿菌和韋永氏球菌屬）豐度的下降可以預(yù)測后期過敏性疾病的發(fā)生。Azad等對166 名嬰兒進行研究發(fā)現(xiàn)，嬰兒3個月大時微生物多樣性的減少（伴隨擬桿菌的減少和腸桿菌的增加）與嬰兒一歲時食物過敏的可能性增加有關(guān)。這些研究均表明腸道微生物的改變早于食物過敏的發(fā)生，早期腸道微生物的差異會長期影響食物過敏的易感性。由此衍生了一個重要問題，那就是早期干預(yù)腸道菌群的建立是否可以幫助預(yù)防和治療食物過敏。而飲食成分的變化可以改變腸道內(nèi)細菌群的組成，使腸道從一種疾病狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N更平衡的狀態(tài)。有研究表明，出生第一年內(nèi)食物多樣性的增加能降低過敏性疾病的發(fā)生，并且在出生后第一年多食用酸奶、蔬菜、水果和家庭自制食物時，過敏性疾病的風(fēng)險大大降低，而嬰兒在早期補充含有益生菌的配方奶粉也能有效緩解食物過敏?？梢?，改變生命早期的腸道菌群為預(yù)防和治療腰果過敏提供新的方向和思路。

除上述方法外，其他的治療策略也在不斷發(fā)展。研究表明DNA疫苗也正研用于治療過敏，其中Shen Wei等研發(fā)的腰果過敏DNA疫苗能夠有效治療小鼠的過敏反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)油酸處理或多酚復(fù)合或黑曲霉蛋白酶處理可以減弱腰果過敏原的致敏性。另一項研究表明乳酸菌發(fā)酵得到的腰果酸奶中Ana o 1和Ana o 2含量明顯減少。單克隆抗體在食物過敏的靶向治療方面也具有巨大潛力，作為首例用于過敏治療的單抗-奧馬珠單抗，已輔用于腰果過敏口服免疫治療，同時其他單抗也在不斷研發(fā)中，如重組人源化單克隆抗體rhuMAb-E25具有治療過敏的能力。這些多元化的方法都為腰果過敏治療提供了新的方向。

8 結(jié) 語

過敏原表位是食物過敏研究的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，表位的定位是探索食物過敏機制和加工過程中開發(fā)新的低致敏性或無致敏性食品的第一步。腰果過敏原的表位研究較少，已鑒定出的表位也較少，因此腰果過敏原的表位預(yù)測及定位是在腰果過敏研究中具有重要的作用，目前可通過生物學(xué)信息軟件預(yù)測并結(jié)合肽掃描技術(shù)、噬菌體展示技術(shù)等手段進行定位。在過敏原表位基礎(chǔ)上研究與其他食物的交叉過敏反應(yīng)，為臨床預(yù)防和治療提供的信息。此外，已有大量文獻報道加工方式對腰果及其過敏原致敏性的影響，但大多數(shù)研究成果僅研究了IgE結(jié)合水平，未對加工導(dǎo)致過敏原結(jié)構(gòu)變化的角度進行剖析及研究。食品加工方式可改變過敏原的二三級結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致構(gòu)象型表位、IgE結(jié)合表位和T細胞反應(yīng)發(fā)生變化，最終影響過敏原的致敏性，因此可從加工對過敏原結(jié)構(gòu)變化的角度進行深入研究，為有效降低腰果致敏性的加工方法的開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。另外，腰果過敏是一個被嚴重低估的社會健康問題，我們需要給予腰果過敏高度重視，并有必要向公眾廣泛宣傳腰果過敏的嚴重性。然而，腰果過敏反應(yīng)的風(fēng)險降低無法精確量化，這需要未來的臨床試驗來評估腰果攝入的頻率、劑量和時機，以預(yù)防腰果過敏；此外，如何將腰果與其他過敏性固體食物安全有效地引入嬰兒飲食中，這可能是緩解食物過敏流行的關(guān)鍵。過敏原風(fēng)險評估的建立是目前食品工業(yè)、政策制定者和監(jiān)管機構(gòu)的一個關(guān)鍵問題，因此作為過敏原風(fēng)險評估的一個重要組成部分，能夠快速、可靠和高靈敏度檢測加工食品中的微量過敏原的方法是至關(guān)重要的。腰果過敏急需深入研究，包括過敏原含量、診斷工具、治療方法和預(yù)防過敏的飲食建議。