電噴霧-離子遷移譜法快速篩查降壓類中成藥及保健食品中29種非法添加的化學(xué)藥

薛高旭， 曹 玲， 孫 晶， 馮有龍，李佳晨， 柳雨影， 姜 瑋

(1.南京中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，江蘇南京 210023；2.江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院，江蘇南京 210019；3.泰州市藥品檢驗院，江蘇泰州 225300)

高血壓已成為我國目前最常見的心血管疾病之一[1]。由于擔(dān)心長期服用降壓類化學(xué)藥不良反應(yīng)較多，很多高血壓患者服用降壓類中成藥及保健食品。而一些商家為了追求商業(yè)利益，向這些降壓類中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥，如果患者在不知情的情況下長期服用，或與其它降壓藥同服,可能造成血壓驟然下降，并發(fā)嚴重的不良反應(yīng)，甚至危及生命[2]。因此，有必要對降壓類中成藥及保健食品中非法添加的化學(xué)藥進行監(jiān)測。

降壓類中成藥及保健食品中非法添加化學(xué)藥的檢測方法主要有高效液相色譜法[3]、薄層色譜-顯微拉曼光譜聯(lián)用技術(shù)[4]、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)[5]等。離子遷移譜(IMS)具有操作簡便、分析時間短、靈敏度高等優(yōu)點。目前，電噴霧-離子遷移譜(ESI-IMS)技術(shù)已應(yīng)用于抗風(fēng)濕[6]、改善睡眠[7]、減肥[8]、降糖[9]、止咳平喘[10]等各類中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥的檢測。本文利用ESI-IMS技術(shù)，建立了降壓類中成藥及保健食品中29種化學(xué)藥的快速篩查方法。該方法簡便、快速、靈敏度高，為行政監(jiān)管提供了可靠的技術(shù)支撐。

1 實驗部分

1.1 儀器及試劑

GA2100型高效離子遷移譜儀(美國，Excellims公司)；AG -1620型空氣發(fā)生器(北京科普生分析科技有限公司)；XP6型電子天平(瑞士，Mettler Toledo公司)；UA22MFD超聲清洗儀(德國，Wiggens公司)。

20批降壓類中成藥及保健食品均為市售。

1.2 實驗方法

1.2.1 對照品溶液的配制稱取各對照品5.0 mg，分別置于25 mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并定容，配制成各含200 μg·mL-1的對照品儲備液。分別精密吸取0.1、0.5、1 mL對照品儲備液于10 mL容量瓶中，用含0.5%乙酸(V/V)的80%甲醇稀釋至刻度，作為正離子對照品溶液；用含0.5%氨水(V/V)的80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為負離子對照品溶液。

1.2.2 校正溶液的配制稱取色氨酸和檸檬酸各5.0 mg，分別置于25 mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并稀釋至刻度，配制成各含200 μg·mL-1的校正溶液。

1.2.3 樣品前處理稱取樣品(茶劑、片劑、顆粒劑研磨混勻后取其粉末，膠囊取內(nèi)容物)約0.25 g，分別置于25 mL容量瓶中，加80%甲醇約20 mL，超聲提取10 min，冷后稀釋至刻度，用0.45 μm微孔濾膜濾過，續(xù)濾液作為供試品儲備溶液。用含0.5%乙酸的80%甲醇以1∶10、1∶25、1∶50的比例進行稀釋，所得的溶液作為正離子供試品溶液；用含0.5%氨水的80%甲醇以1∶10、1∶25、1∶50的比例進行稀釋，所得的溶液作為負離子供試品溶液。

1.3 離子遷移譜工作條件

電噴霧離子源：正離子模式(ESI+)源電壓為2.2 kV，負離子模式(ESI-)源電壓為1.8 kV；遷移管電壓為8 kV，進氣口溫度為180 ℃，遷移管溫度為180 ℃；離子?xùn)砰T電壓為50 V，門電壓脈沖寬度為85 μs。遷移氣流速為1.2 L·min-1，排出氣流速為0.8 L·min-1，進樣速度為1.2 μL·min-1。

2 結(jié)果與討論

2.1 實驗條件的優(yōu)化

2.1.1 提取溶劑的選擇實驗比較了各目標物在不同比例甲醇溶液(60%、70%、80%、90%)中的響應(yīng)情況。結(jié)果顯示，80%甲醇溶液中各目標物質(zhì)的響應(yīng)較好，基線較平整，因此選擇80%甲醇溶液作為提取溶劑；同時pH亦會影響目標化合物的響應(yīng)，最終優(yōu)化時向正離子和負離子樣品溶液中分別加入了0.5%乙酸和0.5%氨水。

2.1.2 ESI-IMS檢測模式的選擇考察了29種對照品在正、負離子工作模式下的響應(yīng)信號，發(fā)現(xiàn)氫氯噻嗪等7種化學(xué)藥在負離子模式下有較高響應(yīng)，而普萘洛爾等22種化學(xué)藥適合在正離子模式下檢測。

2.1.3 ESI-IMS檢測條件的選擇在1.6～2.6 kV范圍內(nèi)，考察源電壓對測定結(jié)果的影響。源電壓的改變通常會影響目標物的響應(yīng)強度，但對遷移時間基本沒有影響。正離子模式下，普萘洛爾等22種化學(xué)藥源電壓為2.2 kV 時的響應(yīng)均較好；負離子模式下，氫氯噻嗪等7種化學(xué)藥在源電壓為1.8 kV時的響應(yīng)較好。實驗還發(fā)現(xiàn)，遷移管電壓改變時不僅影響目標物遷移時間，同時影響響應(yīng)強度。綜合考慮，選擇遷移管電壓為8.0 kV。

2.1.4 遷移時間與約化遷移率為了消除溫度、氣壓等外界因素的影響，采用遷移時間和約化遷移率K0對各對照品進行定性。

(1)

其中，L為遷移管的長度(cm)；td為遷移時間(s)；U為遷移管電壓(V)；P為氣壓(inHg)；T為遷移管溫度(K)。

在上述條件下，儀器校正后分別取正離子和負離子對照品溶液，注入離子遷移譜儀中進行分析，各物質(zhì)IMS譜圖見圖1。29種目標物的遷移時間為8.3～19.2 ms，K0在0.76～1.58 cm2·V-1·s-1范圍。

圖1 29種對照品溶液的IMS圖譜(A～C:正離子模式;D:負離子模式)Fig.1 IMS spectrograms of 29 standard solutions(A-C:Positive mode;D:Negative mode)

2.2 專屬性考察

溶劑空白測定結(jié)果如圖2所示，在各目標物出峰的位置均無干擾峰出現(xiàn)，表明方法專屬性良好。

圖2 溶劑空白的IMS圖譜(A:正離子模式;B:負離子模式)Fig.2 IMS spectrograms of blank solvent(A:Positive mode;B:Negative mode)

2.3 基質(zhì)效應(yīng)與檢測限考察

2.4 方法重現(xiàn)性的考察

3個月內(nèi)，每個月隨機選取5 d，對各物質(zhì)的對照品溶液進行離子遷移譜分析。結(jié)果表明，29種化學(xué)藥在3個月內(nèi)任意5 d的遷移時間的相對標準偏差(RSD)均在0.5%以內(nèi)，重現(xiàn)性良好。

2.5 樣品的測定與譜庫的建立

對市場中抽查的20批降壓類中成藥及保健食品進行ESI-IMS分析，在負離子模式下有2批樣品檢測到非法添加化學(xué)藥，其中一批(膠囊2)除了溶劑峰外，在12.384 ms檢測到非法添加化學(xué)藥，與氫氯噻嗪遷移時間相比，相對誤差為0.01%；一批(軟膠囊1)除了溶劑峰外，在8.432 ms檢測到非法添加化學(xué)藥，與苯磺酸氨氯地平遷移時間相比，相對誤差為0.03%。離子遷移譜圖見圖3。采用實驗室已建立的液-質(zhì)聯(lián)用方法測定上述樣品，測定結(jié)果與ESI-IMS一致。

圖3 膠囊2和軟膠囊1的IMS圖譜(A:膠囊2;B:軟膠囊1)Fig.3 IMS spectrograms of capsule 2 and soft capsule 1(A:capsule 2;B:soft capsule 1)

3 結(jié)論

本文建立了降壓類中成藥及保健食品中29種非法添加化學(xué)藥的ESI-IMS檢測方法，該方法簡單快速、靈敏度高，與化學(xué)試劑盒快篩結(jié)果相比，測定更具通用性，結(jié)果更具穩(wěn)定性。利用所建立的方法對20批市售樣品進行篩查，其中一批檢出氨氯地平，1批檢出氫氯噻嗪。因此，ESI-IMS可用于現(xiàn)場的快速篩查，可大大降低檢測成本，提高篩查效率，為進一步規(guī)范市場環(huán)境提供技術(shù)保障。