液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合高危型人乳頭瘤病毒基因檢測(cè)在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價(jià)值

王小波

江西省泰和縣中醫(yī)院 （江西 泰和 343700）

宮頸癌（cervical cancer，CC）屬于婦科常見惡性腫瘤，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，近年來日益上升，且呈年輕化發(fā)展趨勢(shì)。CC 的發(fā)病與HPV 持續(xù)感染具有密切聯(lián)系，但感染HPV 至發(fā)展為浸潤癌需要數(shù)年或數(shù)十年時(shí)間，故該病的病理發(fā)展過程具有可逆性，早期診斷并進(jìn)行科學(xué)、合理的干預(yù)治療，有利于抑制癌變的發(fā)生[1-2]。近年來，液基薄層細(xì)胞學(xué)（thinprep cytologic test，TCT）檢查、高危型人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）基因檢測(cè)技術(shù)不斷成熟，美國國立綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）在2012年公布的《宮頸癌篩查臨床試驗(yàn)指南》中指出，針對(duì)30～65歲女性進(jìn)行的CC 篩查應(yīng)以HPV 聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢查為主，以早期篩查CC，并為CC 的治療提供確切指導(dǎo)[3]。鑒于此，本研究探討TCT 檢查聯(lián)合高危型HPV 基因檢測(cè)在CC 篩查中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年6月至2021年6月于江西省泰和縣中醫(yī)院治療的96例疑似CC 患者作為研究對(duì)象?；颊吣挲g23～67歲，平均（41.39±3.24）歲；受教育年限3～17年，平均（10.68±2.40）年。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬均自愿簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：性生活史＞3年；檢查前24 h 無性行為；檢查前3 d 未進(jìn)行陰道沖洗或使用陰道內(nèi)藥物；行為無異常，精神狀態(tài)良好；有病理學(xué)檢查結(jié)果。排除標(biāo)準(zhǔn)：有盆腔放射史；既往接受過陰道鏡、TCT 檢查或HPV 檢查；患有急性生殖道炎癥；處于經(jīng)期；妊娠、哺乳期女性；有宮頸錐切及子宮切除史。

1.2 方法

1.2.1 TCT 檢查

囑患者取膀胱截石位，暴露宮頸，采樣前擦拭宮頸口過多分泌物，采集宮頸管及宮頸口上皮細(xì)胞，保存于細(xì)胞保存液瓶中，密閉送檢；采用Thinprep液基薄層制片機(jī)（美國賽迪公司品）檢測(cè)、制片，采用子宮頸細(xì)胞學(xué)Bethesda報(bào)告系統(tǒng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級(jí)，其中非典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells，ASC）、鱗狀上皮內(nèi)低度病變（low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL）、鱗狀上皮內(nèi)高度病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）及鱗狀細(xì)胞癌（squamous cell carcinoma，SCC）判斷為陽性高危型。

1.2.2 高危型HPV 基因檢測(cè)

TCT 檢查采樣結(jié)束后，采用專用HPV 采樣刷采集宮頸管樣本，采集時(shí)圍繞宮頸按同一方向旋轉(zhuǎn)3～5圈，并停留10 s，然后緩慢取出取樣器，置入HPV 專用的保存液小瓶中，待檢；采用HPV-DNA第2代雜交捕獲實(shí)驗(yàn)（hybrid capture Ⅱ，HC-2）檢測(cè)高危型HPV 基因，由深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供HPV 基因分型檢測(cè)試劑盒，其中HPV-DNA 病毒載量≥103copies/ml 判斷為陽性，＜103copies/ml 判斷為陰性。

1.3 臨床評(píng)價(jià)

（1）統(tǒng)計(jì)96例疑似患者的病理學(xué)檢查結(jié)果。（2）以病理學(xué)檢查結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，比較TCT 檢查、高危型HPV 基因檢測(cè)單項(xiàng)及聯(lián)合診斷的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理結(jié)果

96例疑似患者經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)，炎癥53例，宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）41例，SCC 2例。

2.2 TCT 檢查結(jié)果

TCT 檢查的診斷靈敏度為65.12%（28/43），特 異 度 為66.04%（35/53）， 準(zhǔn) 確 度 為65.63%（63/96），見表1。

表1 TCT 檢查結(jié)果（例）

2.3 高危型HPV 基因檢測(cè)結(jié)果

高危型HPV 基因檢測(cè)的診斷靈敏度為72.09%（31/43），特異度為75.47%（40/53），準(zhǔn)確度為73.96%（71/96），見表2。

表2 高危型HPV 診斷結(jié)果（例）

2.4 單項(xiàng)及聯(lián)合診斷結(jié)果比較

TCT 檢查聯(lián)合高危型HPV 基因檢測(cè)的診斷靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均高于單項(xiàng)診斷，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表3～4。

表3 聯(lián)合診斷結(jié)果（例）

表4 單項(xiàng)及聯(lián)合診斷結(jié)果比較（%）

3 討論

CC 為女性常見的惡性生殖道腫瘤，發(fā)病過程較為緩慢，從CIN 發(fā)展為早期浸潤癌至浸潤癌屬于連續(xù)發(fā)展過程，對(duì)女性生命安全及日常生活影響較大。有研究指出，在CIN 期及時(shí)采取有效的干預(yù)治療，有利于阻止向CC 轉(zhuǎn)變，降低CC 發(fā)病率[4]。目前，CC 的初步篩查以細(xì)胞學(xué)、HPV 基因檢測(cè)等檢查為主，宮頸脫落細(xì)胞學(xué)為篩查宮頸病變應(yīng)用最為廣泛的方法，既往以宮頸刮片為主，近年來細(xì)胞學(xué)診斷技術(shù)快速發(fā)展，TCT 檢查提高了宮頸細(xì)胞樣本的檢測(cè)質(zhì)量，促使細(xì)胞在玻片上均勻分布，提高了CC的診斷準(zhǔn)確度，具有逐漸取代宮頸刮片的趨勢(shì)[5]。

TCT 檢查中取材、制片過程簡(jiǎn)單，采用系統(tǒng)程序化流程，可對(duì)細(xì)胞的形態(tài)進(jìn)行良好顯示，有利于進(jìn)行細(xì)胞學(xué)的分類處理，已憑借操作方便且篩查結(jié)果可靠性高而被廣泛應(yīng)用[6]。但TCT 檢查屬于形態(tài)學(xué)范疇，制片方法、染色水平及檢測(cè)醫(yī)師閱片水平均會(huì)對(duì)TCT 檢查結(jié)果造成一定影響，即使檢測(cè)醫(yī)師通過嚴(yán)格培訓(xùn)，但細(xì)胞重疊、細(xì)胞數(shù)目過少及炎癥背景雜亂等均會(huì)對(duì)TCT 檢查的診斷準(zhǔn)確度造成影響[7]。研究發(fā)現(xiàn)，高危型HPV 感染為誘發(fā)CC的重要致病因子，是已知范圍內(nèi)的CC 發(fā)病的主要因素，故對(duì)高危型HPV 進(jìn)行檢測(cè)，有利于為CC的篩查及防治提供指導(dǎo)[8]。1974年德國的Harald Zur Hausen 首次在CC 患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)HPV，且提出HPV 感染與CC 發(fā)病存在密切聯(lián)系。20世紀(jì)80年代，隨著HPV 感染致病學(xué)說的提出，病毒學(xué)檢查已成為篩查CC 的重要方法。HPV 是一種雙鏈DNA 病毒，臨床分型為低危型、高危型，其中高危型HPV 容易侵犯患者宮頸組織中的基底層細(xì)胞及轉(zhuǎn)化區(qū)，導(dǎo)致增生甚至癌變[9]。HPV 感染非常普遍，常見于性生活活躍人群，多數(shù)HPV 感染患者可在2年內(nèi)自然消退，具有一過性消除的特點(diǎn)，故單獨(dú)采用高危型HPV 篩查CC 存在不足，過度檢測(cè)可能造成過度治療，給女性帶來身體及精神上的傷害[10]。本研究結(jié)果顯示，96例疑似患者經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)為炎癥53例，CIN 41例，SCC 2例；聯(lián)合診斷的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度均高于單項(xiàng)診斷，提示聯(lián)合診斷有利于提高CC 及癌前病變的診斷靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度，有利于降低誤診及漏診率，篩查出高危人群，從而指導(dǎo)臨床早期介入治療，降低CC 發(fā)病率。

CC 是病因明確的疾病，但CC 的診斷和預(yù)防也需要因地制宜，因人而異，臨床在診治CC 中，既要遵循國際準(zhǔn)則，也要根據(jù)我國國情，制定相應(yīng)的CC篩查策略，以提高CC 診斷準(zhǔn)確度，減少過度治療，降低患者的心理負(fù)擔(dān)，減輕患者家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

綜上所述，TCT 檢查聯(lián)合高危型HPV 基因檢測(cè)有利于提高CC 及癌前病變的篩查準(zhǔn)確度，降低誤診及漏診率，對(duì)防治CC 具有重要意義。