乙肝肝硬化患者腸道菌群的特征及微生態(tài)制劑的療效

符仲標 唐明亮 劉昌江 王勇 阮海蘭

(海南醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院 1消化內(nèi)科，海南 ?？?570031；2介入診療科)

肝硬化是一種臨床常見的慢性肝病，乙型肝炎病毒感染是導致肝硬化發(fā)生的主要致病因素之一。肝硬化后期階段的常見并發(fā)癥為肝性腦病、腹水及消化道出血等。研究顯示，乙肝肝硬化患者的腸道菌群會發(fā)生顯著變化，通過腸-肝軸使得肝臟細胞吞噬功能受損，導致肝臟結(jié)構(gòu)被破壞，繼而加重疾病進展〔1〕。有關(guān)資料顯示，飲食結(jié)構(gòu)會導致肝硬化患者的腸道菌群發(fā)生顯著變化〔2〕。腸道菌群與肝臟腸-肝軸互為聯(lián)系，腸道菌群種類及腸道菌群比例與腸道炎癥密切相關(guān)，在肝硬化發(fā)生和發(fā)展過程中具有重要作用。本文擬分析乙肝肝硬化患者腸道菌群的特征及微生態(tài)制劑的療效。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取海南醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院2018年1月至2020年12月確診并接受治療的100例乙肝肝硬化患者為觀察組，再選取同期醫(yī)院100例健康體檢者為對照組。納入標準：①觀察組參照《慢性乙型肝炎防治指南(2015 版) 》〔3〕確診為乙肝肝硬化; ②對照組檢查合格且與觀察組無血緣關(guān)系; ③年齡>48歲;④患者及志愿者均在入組后接受腸道菌群指標檢查; ⑤患者及志愿者入組后由研究人員講解研究過程與目的，均自愿參與，并簽署知情同意書。排除標準：①近3個月內(nèi)有益生菌類藥物使用史；②患有肝臟惡性腫瘤疾病;③1個月內(nèi)應(yīng)用抗生素、免疫抑制劑、細胞毒制劑及激素類等藥物；④特殊人群無法配合本研究者，如認知、聽力障礙，精神異常者。觀察組與對照組性別(男/女：59/55例 vs 41/45例)、年齡〔(55.7±15.3)歲、(54.3±14.8)歲〕差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2腸道菌群檢測方法 兩組均檢測腸道菌群，留取糞便標本(研究對象入組3 d內(nèi)早晨6～11點取樣，所有樣本使用醫(yī)院專門的無菌大便收集管收集，用大便鏟鏟取大便中心未與外界環(huán)境明顯接觸的標本，每份標本至少10 g，放至標本收集專用冰箱，-20℃保存，并在4 h內(nèi)由實驗室人員快速轉(zhuǎn)移至-80℃保存)，采用高通量測序方法檢測腸道菌群序列，再提取高質(zhì)量序列，分析腸道菌群結(jié)構(gòu)。

1.3治療方法 對肝硬化患者采取雙歧桿菌四聯(lián)活菌片(產(chǎn)品規(guī)格：0.5 g×24 s；生產(chǎn)企業(yè)：杭州遠大生物制藥有限公司；批準文號：國藥準字S20060010；用藥方法：飯后半小時溫水服用，1日3次，1次3粒)連續(xù)治療14 d。

1.4觀察指標 分析兩組腸道菌群情況(厭氧菌數(shù)量、腸球菌數(shù)量、梭菌數(shù)量)、厭氧菌中雙歧桿菌檢出率、真桿菌檢出率和擬桿菌檢出率、血內(nèi)毒素水平、大腸桿菌水平及接受相關(guān)治療后的肝硬化患者糞氨水平、血氨水平、糞便pH值。

1.5統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗、χ2檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組腸道菌群、血內(nèi)毒素水平、大腸桿菌水平比較 觀察組厭氧菌數(shù)量明顯低于對照組，而腸球菌數(shù)量、梭菌數(shù)量、血內(nèi)毒素水平、大腸桿菌水平明顯高于對照組(P<0.05，P<0.001)，見表1。

表1 兩組腸道菌群情況、血內(nèi)毒素水平、大腸桿菌水平比較

2.2兩組雙歧桿菌、真桿菌和擬桿菌檢出率比較 觀察組厭氧菌中雙歧桿菌、真桿菌和擬桿菌檢出率明顯低于對照組(P<0.05，P<0.01)，見表2。

2.3治療前后肝硬化患者糞氨水平、血氨水平、糞便pH值比較 治療后肝硬化患者糞氨水平、血氨水平、糞便pH值明顯低于治療前(均P<0.001)，見表3。

表2 兩組厭氧菌中雙歧桿菌、真桿菌和擬桿菌檢出率比較〔n(%),n=100〕

表3 治療前后肝硬化患者糞氨水平、血氨水平、糞便pH值等指標比較

3 討 論

人體腸道中存在微生物群落，繼而對人體的代謝產(chǎn)生重要作用。腸道微生物菌群與肝臟之間有密切相關(guān)性，一旦出現(xiàn)腸道菌群紊亂情況，極易加速肝硬化發(fā)展進程，繼而降低肝硬化患者的預(yù)后效果。腸道菌群紊亂雖然未有顯著形態(tài)學改變，一旦發(fā)生腸道菌群紊亂將導致腸道出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥或繼發(fā)感染，與此同時加重肝臟炎癥程度和肝性腦病，因此對腸道菌群紊亂的有關(guān)研究成為肝硬化患者的研究熱點〔4〕。正常腸道菌群分為有害菌、益生菌、中性菌。一旦菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生異常改變，部分內(nèi)毒素或炎癥介質(zhì)的釋放將導致腸道屏障被破壞，引發(fā)相關(guān)疾病，而有害代謝物質(zhì)通過腸-肝軸傳送到肝臟之中，破壞肝臟功能〔5〕。因此，需有效調(diào)節(jié)腸道菌群，繼而有效治療肝臟疾病患者。

有學者報道，腸道微生態(tài)與各種肝臟疾病之間存在密切相關(guān)性，機體在正常情況下腸道菌群會維持一種比較理想的平衡狀態(tài)，但出現(xiàn)肝臟疾病后會導致腸道菌群屏障保護作用出現(xiàn)異?！?〕。肝硬化患者的肝臟功能出現(xiàn)不同程度的功能障礙，繼而導致腸道菌群發(fā)生失調(diào)狀況〔7〕。有害的陰性桿菌在肝硬化患者腸道內(nèi)釋放出多種內(nèi)毒素，導致細菌感染。腸道菌群失衡也會對肝硬化患者的肝臟功能造成一定程度損害，繼而出現(xiàn)惡性循環(huán)，降低肝硬化患者的預(yù)后效果。研究顯示，肝硬化患者腸道菌群結(jié)構(gòu)發(fā)生一定變化，與此同時隨著病情的發(fā)展而不斷變化〔8〕。本研究結(jié)果顯示肝硬化患者腸道菌群出現(xiàn)明顯失調(diào)狀況。為了調(diào)節(jié)肝硬化患者的腸道菌群失調(diào)情況，可進行針對性治療(微生態(tài)制劑治療)。微生態(tài)制劑治療通過調(diào)節(jié)肝硬化患者的微生態(tài)失調(diào)情況，最終達到良好調(diào)節(jié)人體微生態(tài)的平衡效果〔9〕。通過使用微生態(tài)制劑能夠顯著抑制有害菌群的生長和有害還原酶活性，進一步減少腸道內(nèi)的毒素積累。除此之外，微生物制劑能夠積極調(diào)節(jié)肝硬化患者腸道內(nèi)的糞便pH值。微生物制劑進入肝硬化患者體內(nèi)能夠及時補充腸道有益細菌，很好調(diào)節(jié)受損微生態(tài)，進而達到降低腸道內(nèi)pH水平目的。

調(diào)查研究顯示，肝硬化患者的內(nèi)毒素水平出現(xiàn)明顯上升發(fā)展趨勢，而內(nèi)毒素水平的上升與肝功能損害程度密切相關(guān)，因此也表示肝硬化患者體內(nèi)的大腸桿菌呈現(xiàn)明顯增加趨勢，不僅與內(nèi)毒素水平的顯著上升相關(guān)，也間接說明大腸桿菌過度繁殖，影響到肝硬化內(nèi)毒素血癥的發(fā)生和發(fā)展〔10～12〕。也有資料顯示，飲食習慣也會調(diào)節(jié)腸道微生物組成〔13〕。國內(nèi)外有關(guān)學者提出，脂肪攝取數(shù)量和攝取類型會影響腸道菌群的組成，其中厚壁菌門細菌所含有的多糖代謝有關(guān)基因難以消化，因此此類菌群與肥胖密切相關(guān)；擬桿菌門作用則與厚壁菌門相反，因此在高脂肪飲食人群中發(fā)生厚壁菌/擬桿菌比值上升狀況〔14～16〕。

綜上，肝硬化患者出現(xiàn)腸道菌群失調(diào)現(xiàn)象較為常見，隨著病情進展腸道菌群的多樣性出現(xiàn)逐漸減少現(xiàn)象，采取針對性治療能夠顯著降低肝硬化患者糞氨水平、血氨水平、糞便pH值。