邁瑞CAL8000血液分析流水線復(fù)檢規(guī)則建立和驗證

周艷艷，高菊興

(臨沂市人民醫(yī)院，山東 臨沂 276000)

近年來，醫(yī)院越來越多的實驗室安裝了血液分析流水線，提高了工作效率。但血液分析儀終究只是一種過篩手段，對于檢驗結(jié)果異常報警和異常血細(xì)胞形態(tài)，即使先進(jìn)的智能設(shè)備尚無法完全替代人工確認(rèn)和顯微鏡檢查[1]。《全國臨床檢驗操作規(guī)程》和CNAS-CL02-A001《血液學(xué)檢驗領(lǐng)域應(yīng)用說明》作為行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，均要求每個實驗室應(yīng)制定自己的血細(xì)胞分析復(fù)檢程序并進(jìn)行驗證，且復(fù)檢后假陰性率應(yīng)≤5%。因此，參照國際血液學(xué)專家組41條及國內(nèi)血液復(fù)檢組27條復(fù)檢規(guī)則[2]，參考其他醫(yī)院同型號儀器組復(fù)檢規(guī)則[3-4]，結(jié)合本室CAL80000報警信息及實際情況，制定其血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則并進(jìn)行驗證。

1 資料與方法

1.1標(biāo)本來源 隨機選取2020年11月25日連續(xù)檢測的300例EDTA-K2抗凝新鮮血液標(biāo)本，其中住院患者133例，門診患者137例，體檢者30例。

1.2方法

1.2.1儀器與試劑 邁瑞CAL8000血液流水線，由兩臺BC-6800、一臺BC-6900、兩臺CRP-M100、一臺SC-120推片機和一臺DM1200形態(tài)分析儀組成。使用配套邁瑞公司生產(chǎn)試劑、質(zhì)控品和校準(zhǔn)品，Olympus雙目顯微鏡。血液分析儀至少每6個月校準(zhǔn)一次，并進(jìn)行儀器性能驗證(正確度、精密度、攜帶污染、線性及可報告范圍)。每季度進(jìn)行一次室內(nèi)比對，以參加衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)評合格儀器為基準(zhǔn)。每日使用兩個水平室內(nèi)質(zhì)控品，于檢驗前和檢驗中至少進(jìn)行兩次檢測。驗證當(dāng)日檢測室內(nèi)質(zhì)控均在控。

1.2.2方法 將采集的新鮮血液標(biāo)本于采血后30 min-1 h內(nèi)在CAL8000全自動血液流水線進(jìn)行檢測，每份樣本推制兩張血涂片，由兩位老師分別在顯微鏡油鏡下分類計數(shù)200個白細(xì)胞，結(jié)果取均值。鏡檢內(nèi)容包括血細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量，評估白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板與儀器結(jié)果的相關(guān)性，觀察血細(xì)胞形態(tài)、大小、成熟度和異常結(jié)構(gòu)等。參考國內(nèi)血液學(xué)復(fù)檢組對國際血液學(xué)復(fù)檢組陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)的修改版，制定鏡檢陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)[2，5]。

2 結(jié)果

將驗證的300例標(biāo)本以人工鏡檢為基準(zhǔn)與儀器檢測結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果表明：本室邁瑞CAL8000血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則，真陽性13.7%，假陽性5.0%，真陰性79.3%，假陰性率2.0%，復(fù)檢率18.7%，無血液病細(xì)胞漏檢，符合中國血細(xì)胞復(fù)檢協(xié)作組和國際血液學(xué)復(fù)審組專家組假陰性<5%的規(guī)定，本室CAL8000血細(xì)胞復(fù)檢規(guī)則驗證有效，見表1。

表1 復(fù)檢規(guī)則驗證結(jié)果統(tǒng)計表

最終本室制訂的CAL8000血液流水線復(fù)檢規(guī)則見表2。

表2 CAL8000血液流水線復(fù)檢規(guī)則

(續(xù)表)

3 討論

血液常規(guī)分析應(yīng)制定血細(xì)胞分析的顯微鏡復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，并對復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行驗證，且假陰性必須小于5%[6]。通過合適的復(fù)檢規(guī)則方可保證血液細(xì)胞分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和時效性，才能為臨床提供有價值的診斷依據(jù)。本次通過300例標(biāo)本推片鏡檢對復(fù)檢規(guī)則驗證結(jié)果顯示，56例復(fù)檢樣本中，包括計數(shù)復(fù)檢6例。經(jīng)人工鏡檢確認(rèn)，真陽性41例(13.7%)，假陽性15例(5.0%)。假陽性主要為儀器報警提示存在“有核紅細(xì)胞”、“原始細(xì)胞”、“異型淋巴細(xì)胞”、“未成熟粒細(xì)胞”等，經(jīng)人工鏡檢未發(fā)現(xiàn)核紅細(xì)胞和原始細(xì)胞，無異型淋巴細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞或達(dá)不到陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)，即為陰性；假陰性標(biāo)本6例(2.0%)，主要為鏡檢發(fā)現(xiàn)幼稚粒細(xì)胞，如1%中幼粒細(xì)胞或2%晚幼粒細(xì)胞，但儀器無報警提示，對該部分病例進(jìn)行分析后，發(fā)現(xiàn)主要為腫瘤術(shù)后化療患者，多數(shù)為應(yīng)用升白細(xì)胞藥物引起骨髓增生旺盛所致。另外，儀器檢測結(jié)果判斷為陽性且推片的樣本中，發(fā)現(xiàn)存在其他陽性結(jié)果，如存在中毒顆粒(2例)、漿細(xì)胞(1例)和血小板聚集(2例)等情況，儀器有其他陽性報警提示但無該部分內(nèi)容報警提示，值得在以后的工作中關(guān)注和不斷修正復(fù)檢規(guī)則。

邁瑞系列儀器與希森美康XN系列相比較，雖然沒有PLT-F法檢測血小板通道，但其RET通道的光學(xué)法血小板PLT-O因有溫浴室和解聚劑，對于血小板聚集、紅細(xì)胞冷凝集等標(biāo)本能有效的進(jìn)行解棸；加之其血小板的浮動界標(biāo)技術(shù)，能有效降低小紅細(xì)胞及細(xì)胞碎片對血小板計數(shù)的干擾作用，其PLT-O檢測結(jié)果與人工鏡檢有非常好的符合性。于是設(shè)置血小板低于125×109/L且報警“血小板聚集”或“血小板異常直方圖”的標(biāo)本，以及存在紅細(xì)胞碎片的標(biāo)本，均設(shè)置自動增加PLT-O然后進(jìn)行復(fù)檢，獲得較好檢測結(jié)果。

綜上所述，在保證假陰性率小于5%的條件下，特別是白血病不漏檢的情況下，本實驗室設(shè)置的血液流水線復(fù)檢規(guī)則為血液分析提供了的非常好的篩查手段，減少了手工操作數(shù)量，有效縮短了TAT，極大地提高了檢驗效率，使血液分析結(jié)果更準(zhǔn)確、更及時，更好地滿足了臨床和患者的需求。